上海地区植物新品种DUS测试技术体系的初步构建

通过对植物新品种测试新技术的研究,建立了室内测试技术标准及特异性、一致性和稳定性测试(DUS测试)的特异性照片拍摄技术规程;编制了植物新品种DUS测试技术标准的模板,研究并制订了莴苣等4种植物新品种DUS测试技术标准。承担了辣椒、番茄等8个植物种(或属)的新品种DUS测试工作,并建立了上述植物种(或属)的已知品种数据库,初步构建了植物新品种DUS测试技术平台,具备了作为蔬菜、花卉、食用菌等园艺植物的主测单位的技术能力。

肝脏粘膜相关淋巴瘤──附3例报道及文献复习

报道３例肝脏粘膜相关淋巴瘤，起源于汇管区淋巴细胞。具有诊断性淋巴上皮病变，分别为中心细胞样细胞型（２例）及淋巴浆细胞型（１例），经免疫组化证实为单克隆Ｂ细胞性。其临床特点为：生长缓慢，局部受累，很少转移，低度恶性。以手术切除为主，预后较好。本文对其发病机理进行了探讨。

孕血清中早孕因子单克隆抗体的制备

用纯化的早孕因子(EPF)免疫BALB/C小鼠,取其脾脏与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法筛选,以有限稀释法进行克隆化。杂交瘤细胞经过2～3次克隆后。阳检率达lOO%,建立了1B_6、2F_(10)二株分泌EPF单克隆抗体(EPF—McAb)的杂交瘤细胞系。用ELISA检测其诱生腹水效价均达1:1.28×10~5,初步鉴定该McAb具有敏感性高、特异性强的特点。应用EPF—McAb—ELISA对孕血清中的早孕因子进行检测,结果表明阳性率达92.9%。

鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤CEA及AgNOR表达的临床意义

为探索预测鼻内翻性乳头状瘤（NIP）癌变的可能性，采用免疫组化ABC法及胶银染色技术分别对20例NIP共24份标本进行CEA及AgNOR检测，以16例鼻息肉及18例界窦鳞癌为对照组。结果在20例NIP中有4例NIP术后切除大标本局部癌变，而术前标本示不典型增生。在此8价标本中（术前4份，术后4份），CEA全部呈浆膜型阳性，与鼻窦鳞癌CEA表达类型一致。AgNOR计数，术前标本与术后癌变标本其AgNOR颗粒分别为5．83个与8．86个，两者有显著差异，且术前标本AgNOR计数与其它3例不典型增生NIP均属同一组。结论，CEA在NIP中表达的类型在预测NIP癌变的临床应用上比AgNOR计数更有价值。

软肝冲剂对肝炎肝硬化门脉高压患者血清一氧化氮、内皮素的影响

目的:观察软肝冲剂对肝炎肝硬化门脉高压患者门静脉主干内径及血流量、血流速度和血清一氧化氮(NO)、内皮素(ET)的影响。方法:选择肝炎肝硬化门脉高压患者97例,随机分为两组,治疗组口服软肝冲剂,对照组以西药常规治疗,观察治疗后的总有效率、肝功能、门静脉主干内径及血流量、血流速度和血清NO、ET的变化。结果:经治疗后治疗组总有效率优于对照组(P<0.05),患者ALT、TBil明显降低,Alb和A/G均明显升高,门静脉内径变窄、血流量增多、血流速度变快,同时NO及ET亦显著降低,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05或0.01)。结论:软肝冲剂治疗肝炎肝硬化门脉高压疗效显著,能明显改善肝功能,降低门静脉压力,其作用机制之一是降低血清NO、ET水平。

一种测定CuZn-SOD总量的新方法——化学发光免疫分析法

通过探索,用ABEI发光剂标记人CuZn-SOD,液相竞争结合测定样品中CuZn-SOD含量。本方法试剂稳定,结果重复性好,批内CV=2.6～6.0％,批间CV=6.9～7.9％,回收率97.7～106.1％,可测范围为1～500ng,适合测定血清及体液中微量CuZn-SOD。本化学发光免疫分析为国内外尚未报道的方法。

全自动酶免分析仪检测HIV拖带阳性解决方法的探讨

目的探讨全自动酶免分析仪检测人体免疫缺陷病毒(HIV)拖带阳性的解决办法。方法收集常规筛查中的HIV抗体强阳性标本4份,分别在不使用外部清洗液和使用外部清洗液的情况下,用TECAN150型4针全自动酶联免疫分析仪做阳性拖带模拟试验,观察增加外部清洗液在消除加样针拖带阳性中的作用及其对酶免试验的影响。结果拖带模拟试验中,以CDS-C清洗液作为系统清洗液时,在不使用外部清洗液的情况下,HIV抗体强阳性标本4例都出现了阳性拖带现象。以CLEANER2000清洗液作为外部清洗液的情况下,HIV抗体均无阳性拖带孔出现,并且在使用CLEANER2000清洗液作为外部清洗液的情况下与无外部清洗液比较,HIV的质控品和对照品的实验结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CLEANER2000清洗液作为外部冲洗液能够避免全自动酶免分析仪加样中HIV拖带阳性现象的发生,并且对酶免试验结果无显著影响。

肿瘤相关抗原CA 19－9免疫放射分析（IRMA）与免疫酶标分析（IEMA）

以抗ＣＡ１９－９单克隆抗体Ｃ２４１为捕捉抗体，以Ｃ１９２为标记抗体建立了ＣＡ１９－９免疫放射分析（ＩＲＭＡ）和ＣＡ１９－９免疫酶标分析（ＩＥＭＡ），ＣＡ１９－９ＩＲＭＡ的标准曲线斜率Ｂ３００ｕ／Ｂ０为３７．１倍，可测定下限在４Ｕ／ｍｌ以下，批内ＣＶ５．１％，批间ＣＶ９．４％，平均回收率９８．６％。ＣＡ１９－９ＩＥＭＡ的标准曲线斜率Ｂ１５０ｕ／Ｂ０为８８．２倍，批内ＣＶ为２．４７％，批间ＣＶ为５．４％，回收率９９．５％。以ＩＲＭＡ方法检测正常血清９９例，ＣＡ１９．９为１２．９±８．５Ｕ／ｍｌ；胰腺癌患者３０例，血清ＣＡ１９－９为１６５．３±１１７．２Ｕ／ｍｌ。以３０Ｕ／ｍｌ为正常上限，则对胰腺癌检测的灵敏度为８６．６％，特异性９６．９７％，说明该方法在胰腺癌诊断中有重要应用价值。本文中的ＣＡ１９－９ＩＲＭＡ已成为第一个国产ＣＡ１９－９试剂盒，开始在全国推广应用。

子宫内膜癌组织学类型与CEA、c-erbB-2表达

目的 :观察子宫内膜癌的组织学类型与CEA、c erbB 2表达 ,探讨其组织学发生。方法 :光镜观察组织学形态并进行分型 ,应用免疫组化S P法 ,对 94例子宫内膜癌进行单克隆抗体CEA和c erbB 2检测。结果 :子宫内膜样癌 6 1例 (6 4.8% ) ,腺棘癌 6例 (6 .3% ) ,腺鳞癌 8例 (8.4% ) ,浆液性乳头状腺癌 7例 (7.4% ) ,粘液性癌 5例 (5 .3% ) ,小细胞癌 4例 (4.2 % ) ,透明细胞癌和鳞癌各 1例 (1.6 % )。内膜癌各亚型中以粘液性癌、腺棘癌和腺鳞癌CEA表达较高 ,而内膜样癌阳性表达少 ,仅见腔缘阳性 ;c erbB 2在各型内膜癌中均有表达 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :各型内膜癌均有不同程度的CEA和c erbB 2的表达 ,与组织学类型无关 ;子宫内膜癌的多种组织学类型来源是苗勒氏管上皮多向分化的结果。

PVC薄膜SPA－ELISA诊断包虫病的应用研究

本文以纯化的人肝棘球蚴囊液致敏ＰＶＣ薄膜板，液体的ＨＲＰ－ＳＰＡ为第二抗体，敏感无毒的ＴＭＢ做底物，建立了ＰＶＣ薄膜ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ法，检测７２例手术证实的包虫病患者血清抗体，阳性符合率为９１．１７％（６６／７２），４５例临床确诊的非包虫病人２例呈阳性，６０例健康人均阴性，假阳性率为１．８３％（２／１０５）。结果表明该法即保持了经典ＥＬＩＳＡ敏感性高、特异性强的优点，而且操作简单、快速、无毒、省材、使用方便，还可目测结果，是适合临床及广大基层推广使用的好方法。

囊尾蚴循环免疫复合物检测在脑囊尾蚴病诊断中的价值

目的:探讨囊尾蚴循环免疫复合物检测在脑囊尾蚴病诊断中的价值。方法:用ELISA法检测109例脑囊尾蚴病患者血清抗原、抗体及循环免疫复合物。结果:在109例标本中,检出囊尾蚴抗原阳性率33.03%,抗体阳性率68.81%,循环免疫复合物阳性率47.71%。在52例循环免疫复合物阳性标本中,12例囊尾蚴抗原和抗体均为阴性。结论:检测循环免疫复合物有助于提高脑囊尾蚴病的诊断率。

性乱个体血清抗-HCV的调查

用第二代酶免疫试剂对208位性乱个体进行血清丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的检测,107位献血员作对照,并结合部分乙肝病毒血清标志(HBVM)进行分析和比较。结果抗-HCV总阳性率为8.65％(18/208),伴有性病者阳性率12.73%(14/110),不伴性病者4.1％(4/98),对照组抗-HCV阳性率1.87％(2/107)。18例抗-HCV阳性血清中检出乙肝病毒表面抗原(HBsAg)及核心抗体(抗-HBc)13例(72.2％),未发现抗-HCV阳性与年龄、性别相关。结果提示,性乱个体中有着不可忽视的HCV感染率,感染的危险因子似与性病及HBV感染有关。

乳腺癌肿瘤相关抗原表达异质性的研究

用3种抗乳腺癌单抗对52例乳腺癌免疫组化染色结果表明,其相应抗原的表达均呈现出明显的异质性,按表达肿瘤相关抗原(TAA)的种类及数目不同可将乳腺癌分为8个亚型;碱性磷酸酶与免疫金银(IGSS)双重标记结果表明。单一肿瘤组织是由表达不同TAA的癌细胞亚群所构成;用显微密度计定量测试的结果表明,TAA相对含量的估计值在不同病例及同一切片的不同区域其数值不同,提示TAA的表达呈现出量的差异,变异系数可用来描述这种差异程度大小的量的估计值。

绒毛膜促性腺激素单克隆抗体酶标妊娠诊断药盒及其临床应用

介绍了绒毛膜促性腺激素(human chrorionic gonadotropin,HCG)检验药盒的组成以及使用方法。采用10分针定性测定法对1550份尿液进行检查,结果表明:阳性诊断率为99.63%,阴性诊断率为100%。本法与血放免及尿乳胶凝集抑制法比较,该法检测较为简便、可靠、灵敏,且无需特殊设备,可成为临床诊断早孕的常规方法。HCG不仅可作为判断妊娠的依据,而且可作为测定胎盘功能的指标,也可用于预测先兆流产,帮助宫外孕的诊断,以及对葡萄胎及绒毛膜上皮癌的诊断及随访。

喉癌前病变恶变机理的探讨

选自北京同仁医院耳鼻咽喉科1992年5月～1994年6月收集的标本61例，其中喉癌前病变标本34例，利用免疫组化（P(53)、PCNA）及原位杂交技术，重点对不同病变阶段的10例慢性肥厚性喉炎、13例喉角化症和11例喉乳头状瘤（成人）进行检测，并与16例喉单纯息肉和11例喉原位癌标本进行了比较。分析了各种检测的阳性表达率在病变发展过程中的变化规律，对喉癌前病变的转归进行评估和预测。喉单纯息肉、喉癌前病变和原位癌三种病变中，P(53)蛋白的表达率分别是0％，35．29％和63.64％；PCNA指数分别是6．32％、26．16％和62．02％。在喉癌前病变和原位癌中，HPV(16.18)的阳性表达率分别是32．40％和63．63％。在癌前病变中重度非典型增生与轻、中度非典型增生P(53)和PCNA的阳性表达率有明显的差异（P＜0.05）。

抗HRP单克隆抗体及PAP复合物活性影响因素的研究

作者制备了大鼠抗辣根过氧化物酶单克隆抗体及其与辣根过氧化物酶的复合物,观察了温度(室温、4℃、-20℃、-70℃)、pH值(pH=3,pH=11),蛋白稳定剂(1％BSA,50％中性甘油)及保存时间对抗体活性的影响。以ELISA法及微孔免疫细胞化学法检测抗体活性。结果表明;含此抗体的腹水及培养上清在室温中放置2周,4℃、-20℃、-70℃中放置10个月,抗体活性未见明显改变,加与不加蛋白稳定剂无明显差异。此培养上清在酸性环境(pH=3)中24h,活性严重受损,而其中含1％BSA及腹水者可耐受24h,活性无明显变化。此抗体与酶的复合物在4℃、-20℃、-70℃保存1年,仍保持良好的染色效果,与开始相比无显著性差异。

肝内胆管癌角蛋白的免疫组化观察

用免疫过氧化物酶技术对44例肝内胆管癌作单克隆与多克隆角蛋白抗体免疫组化观察,发现角蛋白在癌细胞内分布与癌组织分化程度有关。高分化乳头状腺癌以膜型为主,癌细胞顶端胞浆淡染;管状腺癌则多集中于癌细胞腔面顶端,在腔缘形成连续的深染带;低分化腺癌阳性部位则以浆型及核周浆型为主;细胆管上皮癌呈膜型分布。

活性生物瓣膜和血管冻贮技术的初步研究

用改良的方法建立了活性同种瓣膜和血管库,观察了用三抗培养液37℃消毒24h和低温保护剂(CPM)在室温条件下对组织的影响。结果表明,冻存复温的组织培养24h后,糖利用率和谷-草转氨酶(AST)明显降低,72h后乳酸脱氢酶(LDH)则明显升高,此后与新鲜组织趋于一致;三抗培养液消毒和CPM对组织均无明显影响;组织学观察发现冻存复温组织生长较新鲜组织稍晚。用该技术低温保存的活性同种瓣膜和血管进行10例临床移植,获得满意的效果。提示改良法低温冻贮活性生物瓣膜和血管技术已初步成功。

喉鳞状细胞癌中VEGF、bFGF的表达与颈淋巴结转移关系的研究

目的探讨喉鳞状细胞癌中血管生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达与颈淋巴结转移的关系。方法应用细胞免疫荧光染色技术和流式细胞技术,对60例喉鳞状细胞癌组织细胞VEGF、bFGF的表达进行了定性和定量研究。结果颈淋巴结转移组VEGF的表达(FI=2.35±0.49)较非转移组(FI=1.86±0.57)呈高表达(P<O.01),VEGF与bFGF二者在喉鳞状细胞癌的表达呈正相关(r=0.346,P<0.01)。结论 VEGF在喉鳞状细胞癌的颈淋巴结转移中可能起一定作用,可作为判断颈淋巴结是否转移的参考指标。

用Hep-2细胞作抗原检测抗核抗体——FANA试验和FLISA

本文提出在酶标板小孔内培养Hep-2细胞的方法制作抗原,用于免疫酶联吸附检测法(ELISA)测定血清抗核抗体(ANA),并用同一抗原作FANA试验对两种方法检测ANA的敏感性进行比较,共检测血清22份(SLE8份、其他疾病9份,正常对照5份)。检测结果表明二种试验方法的特异性一致,ELISA检测血清ANA的敏感性比FANA试验显著提高,该方法特异性强、敏感性高、简便、更适用于微量法。