党参组方饲料添加剂对保育期恩施黑猪生产性能、养分消化率和血液免疫指标的影响

文章旨在研究不同党参组方作为饲料添加剂对保育期恩施黑猪生产性能、养分消化率和免疫指标的影响。试验将120只30日龄恩施黑猪随机分成4组。对照组(试验Ⅳ组)饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别在基础日粮中添加不同党参组方,试验为期45 d。结果表明,试验组平均日增重、平均日采食量均显著高于对照组(P<0.05);试验组干物质、粗蛋白质、粗脂肪含量均不同程度高于对照组;试验组IgG、IgM、IFN-γ、TNF-α含量均显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,党参组方饲料添加剂能显著提升恩施黑猪保育期生产性能、饲料养分消化率和血液免疫指标。

发酵型扶正解毒口服液对保育猪生长性能 抗氧化和免疫球蛋白含量的影响

本试验旨在探索发酵型扶正解毒口服液对保育猪生产性能、抗氧化和免疫球蛋白含量的影响。采用单因子试验方法,选取180头断奶仔猪,随机分为4组,分别为对照组(基础日粮)、试验Ⅰ组(基础日粮+扶正解毒口服液)、试验Ⅱ组(基础日粮+发酵型扶正解毒口服液)、试验Ⅲ组(基础日粮+乳酸菌),每组3个重复,每个重复15头仔猪,试验期25 d。结果显示,试验Ⅱ组的平均日增重和平均末重最高,分别比对照组、试验Ⅰ、Ⅲ组提高了19.44%(P<0.05)、7.5%(P>0.05)、13.16%(P>0.05)和11.35%(P<0.05)、5.00%(P>0.05)、8.41%(P<0.05);试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的料肉比与对照组相比分别降低了5.61%(P>0.05)、14.95%(P<0.05)和3.88%(P>0.05)。与对照组相比,Ⅱ组血清总抗氧化能力(T-AOC)以及血清过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力显著升高(P<0.05)、丙二醛(MDA)的含量显著降低(P<0.05),且明显优于试验Ⅰ和Ⅲ组(P<0.05)。试验Ⅰ、Ⅱ组IgM和IgG含量均明显高于对照组,分别提高了122.13%、143.51%和35.10%、41.43%(P<0.05)。结果表明,在保育猪基础日粮中添加发酵型扶正解毒口服液能显著提高保育猪的生长性能、血清抗氧化和免疫球蛋白含量,且作用效果优于普通扶正解毒口服液和乳酸菌。

鹅源H5N1亚型禽流感病毒对SPF雏鸡血液免疫功能的影响

以21日龄SPF雏鸡为实验动物,应用细胞培养和免疫酶技术,通过外周血液免疫球蛋白(Igs)含量、T和B淋巴细胞数量及其增殖功能的检测,较全面系统的研究了鹅源H5N1亚型中强毒禽流感病毒(AIV)感染SPF雏鸡后,其外周血液上述被检指标的动态变化。结果表明,鹅源H5N1亚型中强毒AIV感染SPF雏鸡后,其血清IgG和IgA含量在1～4 d显著或极显著低于对照雏鸡(P<0.05或P<0.01),并分别于8～21 d和5～8 d显著高于对照雏鸡(P<0.05或P<0.01);而IgM在病毒感染后4 d开始升高,5～8 d明显高于对照雏鸡。血液T淋巴细胞数量于病毒感染后1～14 d显著低于对照雏鸡(P<0.05或P<0.01),B淋巴细胞在3～14 d明显降低(P<0.05或P<0.01);T、B淋巴细胞对ConA或PMA的增殖反应分别于3～14 d、3～8 d明显低于对照雏鸡(P<0.05或P<0.01)。表明AIV感染21日龄SPF雏鸡后的早期,其外周血液无论是细胞免疫还是体液免疫功能均降低。

牛初乳制品功能性成分的分析

利用牛初乳中的免疫球蛋白活性因子,开发具有独特生理功能的乳制品成为牛初乳利用的热点。本研究利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳法和酶联免疫吸附法对市售的牛初乳制品的质量进行了分析与评价。结果表明,目前牛初乳制品的蛋白含量与组成有很大的差异,并且活性免疫球蛋白含量较低。目前牛初乳制品存在的问题亟待解决,市场亟待规范。

牛免疫球蛋白G的应用及检测研究进展

牛免疫球蛋白G(IgG)是一类具有多种生物活性的免疫因子,主要来源于牛初乳中,已成为功能性食品的重要营养添加成分,牛IgG的含量直接决定了此类产品的质量。本文对牛免疫球蛋白的生物活性及功能进行了概述,并对牛IgG含量分析检测技术进行了阐述。

免疫球蛋白含量的检测与分离技术探讨

目的探讨免疫球蛋白含量的检测与分离技术。方法选取武警北京总队医院2013-10至2016-10收集的90份免疫球蛋白异常血清,运用单扩法对血清IgG含量进行检测,将90份血清分为3组,每组30份,分别运用单扩法、免疫散射比浊法、免疫透射比浊法对血清IgG、IgA、IgM含量进行检测,然后对3种检测方法测定IgG、IgA、IgM的异常情况、免疫球蛋白含量进行统计分析。结果单扩法测定IgG、IgA、IgM的异常率分别为22.6%、12.4%、7.9%;免疫散射比浊法测定IgG、IgA、IgM的异常率分别为20.3%、14.0%、9.2%;免疫透射比浊法测定IgG、IgA、IgM的异常率分别为8.0%、1.5%、6.2%。单扩法、免疫透射比浊法测定IgG、IgA、IgM的异常率均显著高于免疫透射比浊法(P<0.05),但单扩法、免疫散射比浊法测定IgG、IgA、IgM的异常率之间的差异均无统计学意义;单扩法、免疫散射比浊法测定IgA、IgM含量均显著高于免疫透射比浊法(P<0.05),而免疫散射比浊法测定IgA、IgM含量又均显著高于单扩法(P<0.05),但3种检测方法测定IgG含量之间的差异均无统计学意义。结论单扩法、免疫透射比浊法测定免疫球蛋白含量效果较免疫透射比浊法好。

高压静电场照射雏鸡外周血液免疫功能的变化及机理

应用免疫SPA菌体花环、间接ELISA、细胞培养技术和四甲基偶氮唑盐(MTT)测定法对高压静电场照射雏鸡血液的T、B细胞数量及其对ConA或PMA的增殖功能和IgG、IgM、IgA含量的动态变化进行了较全面系统的研究。结果发现,高压正静电场照射雏鸡血液的T、B细胞数量及其增殖功能、血清3种免疫球蛋白含量均明显高于高压负静电场照射雏鸡和相应对照雏鸡;而高压负静电场照射雏鸡血液的上述各项检测指标均不同程度的低于相应对照雏鸡。表明高压正静电场照射对雏鸡血液的免疫功能有促进作用,而高压负静电场照射可使雏鸡血液的免疫功能降低或减弱。

H5N1亚型禽流感病毒感染SPF雏鸡的外周血液免疫病理变化

以7日龄SPF雏鸡为试验动物,应用细胞培养和免疫酶技术,通过对外周血液免疫球蛋白含量、T和B淋巴细胞数量及其功能的检测,较全面系统地研究了鹅源H5N1亚型中强毒禽流感病毒（AIV）感染SPF雏鸡后,其外周血液上述指标的动态变化。结果发现,SPF雏鸡感染鹅源H5N1亚型AIV后,血清IgG和IgA含量在1~4d显著或极显著低于对照雏鸡（P〈0.05或P〈0.01）,而IgM在病毒感染早期未见显著性差异,随后3种免疫球蛋白含量逐渐回升;血液T淋巴细胞数量显著低于对照雏鸡（P〈0.05或P〈0.01）,而B淋巴细胞在1~5d明显降低（P〈0.05或P〈0.01）;T、B淋巴细胞对ConA或PMA的增殖反应分别于1~8d、1~4d明显低于对照雏鸡（P〈0.05或P〈0.01）。上述结果表明,AIV感染SPF雏鸡外周血液无论是细胞免疫还是体液免疫功能均呈现一定抑制。

中老年人体液免疫水平调查

目的了解中老年人人群体液免疫水平.方法选择130位健康中老年人,采用免疫比浊法测定其血清IgA、IgG、IgM及补体C3.结果不同性别体液免疫水平接近,差别无显著性(P＞0.05),61～65年龄组IgA、IgG含量低于50～55年龄组,差别有显著性(P＜0.05).结论中老年人体液免疫水平有下降的趋势.

参芪扶正对肝癌化疗血浆免疫蛋白表达的影响及疗效观察

研究参芪扶正注射液对肝癌化疗患者免疫功能的影响及疗效观察。方法：132例原发性肝癌患者随机分为对照组和观察组，对照组患者给予动脉栓塞化疗，观察组患者在动脉栓塞化疗基础上静脉注射液参芪扶正注射液。分别于治疗前和疗程结束后，采用免疫散射比浊法测定患者外周血免疫球蛋白A（immunoglobulin，IgA）、G和M蛋白含量，流式细胞仪测定CD3、CD4＋、CDs细胞亚群数量，”CT释放法测定自然杀伤细胞（naturekill，NK）的活性；疗程结束后，采用RECIST1．1标准评价患者近期疗效，统计总有效率（RR）；治疗结束后每3个月进行随访1次，统计患者的2年无病生存率。于治疗前和治疗后，采用Karnofsky评分为标准评定患者生活质量改善情况，统计总改善率。结果：观察组患者淋巴细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD4＋／cD8＋水平及NK细胞活性较治疗前和对照组显著升高（P〈0．05），CDs细胞水平显著降低（P〈0．05）；而对照组治疗后含量与治疗前差异无统计学意义（P〉0．05）。观察组总有效率显著高于对照组（80．65％VS56．45％，X2=4．308，P=0．038〈0．05）。观察组中位生存期为19．10个月（95％CI：15．418—22．782），对照组中位生存期为11．20个月（95％CI：9．71～12．294），差异有统计学意义（P〈0．05）。观察组患者生活质量总改善率显著高于对照组（85．48％VS51．6l％，）（X2=4．308，P=〈0．001）。且观察组白细胞减少、血红蛋白减少和血小板减少III—IV级不良反应发生率显著低于对照组（P〈0．05）。结论：参芪扶正注射液可以显著改善肝癌化疗患者免疫功能，提高患者预后，降低不良反应发生率。

人免疫球蛋白中甘氨酸含量控制研究

目的:人免疫球蛋白中甘氨酸含量的检测和控制方法。方法:本次实验研究采用紫外分光法与RF-HPLC方法对人免疫球蛋白中的甘氨酸含量进行了对比研究,检测波长338 mm,通过外标法对甘氨酸水平进行了计算。结果:人免疫球蛋白中甘氨酸衍生化范围在0.05至0.15 g/L之间,甘氨酸回收率在96%至101%之间,其直线相关系数为0.9996至1.0000,不同操作者检测结果对比无明显差异。结论:紫外分光法与RF-HPLC法检测结果对比无明显的统计学差异(P<0.05),通过RF-HPLC方法对人免疫球蛋白中甘氨酸含量进行检测和控制,具有较高的准确性和稳定性,因而应用价值较高。

高效液相色谱法测定狂犬病人免疫球蛋白制品中甘氨酸含量

目的建立测定狂犬病人免疫球蛋白制品中甘氨酸含量的高效液相色谱法。方法采用Shim-Pack CLC-ODS色谱柱(150 mm×6.0 mm,5μm),以50%乙腈溶液-0.05 mol/L醋酸钠缓冲液(35∶65)为流动相,检测波长为360 nm。结果甘氨酸质量浓度在0.025～0.20 g/L范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 9),平均回收率为99.58%,RSD为1.18%(n=6)。结论所用方法简便灵敏,结果准确可靠,可用于狂犬病人免疫球蛋白制品中甘氨酸含量的测定。

某型滤板对静注人免疫球蛋白IgA去除效果的研究

目的通过对比血浆低温乙醇沉淀压滤制作组分Ⅲ沉淀过程中,采用不同滤材对于制品IgA去除效果的研究,以期在不改变现有工艺参数条件下,筛选一种能够降低IgA的滤材。方法在多批次的规模化生产中,采用伊顿公司生产的BECO PX50和BECO PR Steril40滤板,考察了静注人免疫球蛋白纯度、蛋白回收率、分子量大小分布、抗补体活性(Anticomplement activity, ACA)、抗-HBs效价、白喉抗体效价、IgA含量等。结果采用低温乙醇工艺制备静注人免疫球蛋白时,在组分Ⅲ压滤阶段采用BECO PR Steril40滤板替换PX50滤板进行压滤,能有效降低制品中IgA含量约80%以上,压滤速度略有降低,蛋白回收率提高5.22%,其他产品质量指标未发生明显变化。结论使用BECO PR Steril40滤板进行组分Ⅲ压滤能够有效降低IgA含量,对于血液制品生产企业提升静注人免疫球蛋白产品质量具有积极意义。

低pH孵放病毒灭活处理对马破伤风免疫球蛋白F(ab')_2质量的影响

目的考察低pH孵放病毒灭活处理对马破伤风免疫球蛋白F(ab')_2质量的影响。方法取马破伤风免疫球蛋白F(ab')_24份,分别调整pH至3.8、4.1、4.4及6.5,于(25±1)℃条件下放置21 d后取样测定抗体效价、聚合物(二聚体、多聚体)及F(ab')_2含量,评估低pH孵放病毒灭活法对上述质量指标的影响;以1 mL/瓶的规格分装经低pH孵放病毒灭活处理的马破伤风免疫球蛋白F(ab')_2,于(25±1)℃条件下存放6个月,定期取样并进行抗体效价、聚合物(二聚体、多聚体)及F(ab')_2含量检测,评估其稳定性。结果马破伤风免疫球蛋白F(ab')_2经低pH孵放病毒灭活后,其抗体效价、聚合物(二聚体、多聚体)及F(ab')_2含量未发生明显变化;样品于(25±1)℃条件下存放6个月后,抗体效价和F(ab')_2含量均符合《中华人民共和国药典》2015版(三部)的要求。结论低pH孵放病毒灭活法适用于马破伤风免疫球蛋白F(ab')_2病毒的灭活。

气相色谱法测定静注人免疫球蛋白(10%)辛酸钠残留量

目的:建立静注人免疫球蛋白(10%)中辛酸钠残留量毛细管气相色谱测定法。方法:采用ZB-FFAP毛细管柱(15 m×0.53 mm×1.0μm),柱温160℃,气化室温度230℃,载气为氮气,以氢火焰检测器(FID检测器)测定,检测器温度230℃,流速8 mL·min^(-1),分流比为23∶1,进样体积1μL,内标法定量,庚酸为内标物。结果:供试3批样品中均未检出辛酸钠残留;辛酸峰和庚酸峰的分离度>1.5,辛酸峰的拖尾因子在0.95~1.20;辛酸对照品溶液连续进样5次,所得辛酸峰与庚酸峰面积之比的RSD<5%;配制的空白基质经检测对辛酸峰和庚酸峰均无影响;辛酸量在100~300μg范围内线性良好,相关系数(r)大于0.99;方法检测限为0.010 mg·mL^(-1),定量限为0.033 mg·mL^(-1);高、中、低3种不同浓度样品加标平均回收率为100.1%;温度的高低只影响主峰和内标峰的保留时间,不影响实验结果。结论:本实验建立的分析方法分离度好,操作过程简便,方法灵敏,环境友好,结果准确,重现性好,可用于静注人免疫球蛋白(10%)辛酸钠残留的测定。

人免疫球蛋白类制品中IgA残留量ELISA检测方法的验证及应用

目的验证人免疫球蛋白类制品中IgA残留量的ELISA检测方法,并进行应用。方法用IgA国际标准品建立与ELISA检测试剂盒相匹配的标准曲线,并验证方法的准确性、专属性、精密度及线性范围。分别采用ELISA法、紫外法和免疫比浊法检测4批静注人免疫球蛋白(pH 4)成品。同时用经验证的ELISA法检测35批静注人免疫球蛋白(pH 4)成品中的IgA含量。结果加入0.5、1、2 IU/L标准品的样品平均回收率分别为90.33%、94.43%、93.37%,CV分别为4.5%、1.8%、3.1%;标准品加入100、50、25 mg/L麦芽糖的回收率分别为99.44%、99.38%、99.67%,CV分别为0.16%、0.13%、0.11%;两个时间点6次重复测定结果的CV均<10%,且两个时间点的测定结果差异无统计学意义(P>0.05);IgA浓度在0.5~8 IU/L范围内与A450呈良好的线性关系,回归方程为y=0.0887 x^2-0.1115 x+0.188,R^2=0.9999。与紫外法和免疫比浊法比较,ELISA法检测结果偏低,紫外法最高,3种方法间差异有统计学意义(P<0.05)。35批静注人免疫球蛋白(pH 4)成品中IgA含量均值为(22.4±2.24)IU/mL,CV<10%。结论ELISA检测方法具有良好的准确性、专属性及精密度,且快速、灵敏,操作简便,可用于人免疫球蛋白类制品中IgA含量的质量监测。

不同实验条件对静注人免疫球蛋白(pH 4)多聚体含量的影响

目的考察不同实验条件对静注人免疫球蛋白(pH 4)多聚体含量的影响及多聚体含量增加对家兔存活状态的影响。方法取静注人免疫球蛋白(pH 4),经干热破坏试验、湿热加速试验、紫外线照射试验、X射线照射试验及冰冻破坏试验,观察不同实验条件对其多聚体含量的影响;并取湿热加速试验和冰冻处理的样品注射家兔,观察多聚体含量增加对家兔存活状态的影响。结果静注人免疫球蛋白(pH 4)的多聚体含量随贮存温度的升高、时间的延长而增加,紫外线、X射线照射及冰冻处理均不影响多聚体含量;多聚体含量愈高,家兔存活状态愈差,多聚体含量达80%以上时,可致家兔死亡。结论高温可显著影响多聚体含量,多聚体含量增加与家兔存活状态呈负相关。

纳米滤芯过滤静注人免疫球蛋白去病毒工艺的蛋白耗损分析

目的分析使用纳米滤芯过滤静注人免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)去除病毒时的蛋白损耗。方法通过分析蓉生静注人免疫球蛋白(pH 4)使用纳米滤芯除病毒过滤前后的蛋白含量,探讨纳米过滤总量、纳米滤芯批号、纳米滤芯数量对纳米滤芯除病毒过程中蛋白损耗量及损耗率的影响。结果纳米过滤蛋白损耗并未随批量增加而增加,使用不同批号滤芯和使用不同数量滤芯进行生产,蛋白损耗变化均较小。结论使用纳米滤芯进行IVIG纳米过滤生产,制品量、滤芯批号及数量对纳米过滤蛋白损耗影响均较小。

两种高浓度静注人免疫球蛋白中IgA残留量检测方法的验证及比较

目的对酶联免疫法与散射比浊法检测高浓度静注人免疫球蛋白(human immunoglobulin for intravenous injection,IVIG)中IgA残留量进行验证及比较。方法分别验证两种方法的线性范围、准确度、重复性、中间精密性、专属性,并对两种方法进行比对分析。用两种方法检测7批次高浓度IVIG中的IgA残留量,并与中国食品药品检定研究院检测结果进行比对。结果酶联免疫法IgA浓度在12.5~800 ng/mL范围内与A450呈良好的线性关系(r=0.99996),散射比浊法IgA浓度在0.261~8.35 mg/L范围内标准曲线均值偏差为0.56%;两种方法的加样回收率分别为103.32%和89.82%;重复性和中间精密性的RSD均小于8%;甘氨酸辅料对两种方法测定IgA残留量干扰较小。两种方法测定3批IVIG中IgA残留量结果差异无统计学意义(P>0.05);委外检测的7批次高浓度IVIG中IgA残留量略低于企业自检结果。结论酶联免疫法与散射比浊法均可快速、简便、准确地测定高浓度IVIG中IgA残留量,可用于产品质量控制。