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黄连素抑制GRP78表达促进三阴乳腺癌细胞凋亡的研究 被引量:6
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作者 赵虹 沃立科 +2 位作者 胡袁媛 王安妮 卢德赵 《浙江中医药大学学报》 CAS 2019年第5期407-412,共6页
[目的]通过检测黄连素对三阴乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)细胞株MDA-MB-231细胞凋亡及葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)表达的影响,探讨黄连素抗TNBC的机制。[方法]以MTT法检测不同浓度黄连素对MDA... [目的]通过检测黄连素对三阴乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)细胞株MDA-MB-231细胞凋亡及葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)表达的影响,探讨黄连素抗TNBC的机制。[方法]以MTT法检测不同浓度黄连素对MDA-MB-231细胞增殖的影响,筛选黄连素的处理浓度。将MDA-MB-231细胞分为对照组、40μmol·L^(-1)黄连素组、60μmol·L^(-1)黄连素组、免疫球蛋白重链结合蛋白诱导剂X(immunoglobulin heavy chain binding protein inducer X,BiX)组,以及BiX联合40μmol·L^(-1)黄连素组、BiX联合60μmol·L^(-1)黄连素组。相应药物处理24h后,应用流式细胞术检测细胞凋亡情况,并以Western blot检测细胞GRP78和凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达。[结果]40μmol·L^(-1)以上浓度的黄连素可剂量依赖性抑制MDA-MB-231细胞增殖。与对照组比较,BiX组细胞凋亡率降低(P<0.05)、GRP78和Bcl-2表达增高(P<0.01,P<0.001)、Bax表达减低(P<0.05)。与BiX组比较,BiX联合40、60μmol·L^(-1)黄连素组细胞凋亡率增加(P<0.01),GRP78和Bcl-2表达减低(P<0.01,P<0.01),Bax表达增加(P<0.01)。[结论]黄连素可以促进MDA-MB-231细胞凋亡,其机制可能是通过下调GRP78的表达,从而降低Bcl-2表达,并促进Bax的表达。 展开更多
关键词 三阴乳腺癌 黄连素 葡萄糖调节蛋白78 细胞凋亡 细胞增殖 免疫球蛋白重链结合蛋白诱导剂x
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丹蒌片对同型半胱氨酸诱导的兔主动脉内皮细胞CHOP、BIP蛋白表达和凋亡的影响 被引量:5
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作者 张妍 史占江 +1 位作者 牛春玲 沈晓君 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第4期463-466,共4页
目的:观察丹蒌片对同型半胱氨酸(HCY)诱导的兔主动脉内皮细胞凋亡及内质网应激相关蛋白C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)表达的影响。方法:以HCY诱导建立兔主动脉内皮细胞损伤模型,分... 目的:观察丹蒌片对同型半胱氨酸(HCY)诱导的兔主动脉内皮细胞凋亡及内质网应激相关蛋白C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)表达的影响。方法:以HCY诱导建立兔主动脉内皮细胞损伤模型,分别用瑞舒伐他汀(他汀)、丹蒌片含药血清或二者联合共同培养48 h后,Annexin V-PI法检测细胞凋亡率,Western blot法检测CHOP、BIP蛋白表达情况。以未诱导细胞作空白对照。结果:模型细胞凋亡率及BIP、CHOP蛋白表达水平均高于空白对照(P<0.05)。丹蒌片和他汀可明显降低模型细胞的凋亡率,二者具有协同作用(F丹蒌片=475.288,F他汀=235.248,F交互=121.377,P<0.05);丹蒌片可显著下调模型细胞BIP、CHOP蛋白的表达水平,与他汀无协同作用(F丹蒌片=7.017,8.147,P均<0.05;F交互=0.590,1.406,P均>0.05)。结论:丹蒌片可通过下调CHOP、BIP的表达抑制血管内皮细胞凋亡。 展开更多
关键词 丹蒌片 C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白 免疫球蛋白重链结合蛋白 血管内皮细胞 凋亡
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电针对帕金森病模型大鼠黑质内Bip、CHOP蛋白表达的影响 被引量:4
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作者 马骏 王中明 +3 位作者 王述菊 余沛豪 王彬 王琪 《上海针灸杂志》 2018年第1期86-91,共6页
目的观察电针对鱼藤酮诱导的帕金森病(PD)模型大鼠黑质内质网应激相关蛋白表达的影响。方法将120只健康雄性SD大鼠随机分正常组、假手术组、模型组、电针预治疗组、电针治疗7 d组、电针治疗14 d组、电针治疗21 d组、电针治疗28 d组,每... 目的观察电针对鱼藤酮诱导的帕金森病(PD)模型大鼠黑质内质网应激相关蛋白表达的影响。方法将120只健康雄性SD大鼠随机分正常组、假手术组、模型组、电针预治疗组、电针治疗7 d组、电针治疗14 d组、电针治疗21 d组、电针治疗28 d组,每组15只,采用颈背部皮下注射鱼藤酮法制备PD模型,假手术组只注射不含鱼藤酮的等量葵花油乳化液。正常组、假手术组、模型组不做任何治疗;电针治疗组在造模完成后选取风府、太冲穴给予电针治疗;电针预治疗组电针治疗7 d后再造模。运用免疫组化法检测大鼠黑质内TH、?-syn的阳性表达,并用Western blot法检测大鼠中脑黑质区内Bip、CHOP蛋白表达的变化。结果模型组大鼠表现出明显的PD症候群特征,电针干预后大鼠行为学评分明显降低(P<0.01);与正常组和假手术组相比,模型组大鼠黑质区?-syn的阳性表达与Bip、CHOP蛋白的表达均显著提高,大鼠黑质区TH的阳性表达均显著降低(P<0.01);与模型组相比,电针治疗各组大鼠黑质区?-syn的阳性表达以及Bip、CHOP蛋白的表达均显著降低(P<0.01),大鼠黑质区TH的阳性表达显著提高(P<0.01)。结论电针防治PD的机制可能与电针能明显抑制内质网应激相关蛋白的表达,保护多巴胺能神经元有关。 展开更多
关键词 针刺疗法 帕金森病 电针 内质网应激 免疫球蛋白重链结合蛋白 CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白 大鼠
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BiP表达下调改善双载体转断裂FⅧ基因的功效
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作者 朱甫祥 刘泽隆 +2 位作者 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1161-1166,共6页
双载体转凝血Ⅷ因子(FⅧ)基因可作为一种转基因策略克服腺相关病毒(AAV)载体容量限制,但重链分泌的低效性影响转基因功效.为提高重链分泌,本文用RNA干扰技术下调内质网内蛋白伴侣分子免疫球蛋白重链结合蛋白(BiP)的表达,观察对HEK293细... 双载体转凝血Ⅷ因子(FⅧ)基因可作为一种转基因策略克服腺相关病毒(AAV)载体容量限制,但重链分泌的低效性影响转基因功效.为提高重链分泌,本文用RNA干扰技术下调内质网内蛋白伴侣分子免疫球蛋白重链结合蛋白(BiP)的表达,观察对HEK293细胞双载体共转FⅧ基因分泌重链和生物活性的影响.结果显示,RNA干扰可明显下调BiP表达,但不影响细胞生长;ELISA检测BiP下调细胞单独转重链基因时的重链分泌量为98±38 ng/mL,与轻链共转基因时显著升高到157±32 ng/mL,明显高于对照细胞单独转重链基因和共转重链和轻链基因的重链分泌量(分别为29±8 ng/mL和79±19 ng/mL);Cotest法检测显示,BiP下调细胞共转重链和轻链基因细胞分泌的凝血生物活性为0.73±0.23 IU/mL,明显高于对照细胞共转重链和轻链基因(0.39±0.07 IU/mL).结果表明,BiP表达下调通过促进重链分泌,可提高双载体共转FⅧ基因的功效,为进一步动物体内双AAV载体转FⅧ基因的甲型血友病基因治疗研究提供了实验依据. 展开更多
关键词 凝血Ⅷ因子 双载体转基因 免疫球蛋白重链结合蛋白 重链分泌
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人内质网分子伴侣BiP抗原表位筛选及其在RA血清学诊断中的作用研究
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作者 邹新乐 李想 +1 位作者 陈巧林 曾令文 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期544-547,共4页
目的:筛选鉴定人内质网分子伴侣BiP抗原表位多肽,探讨其在类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)血清学诊断中的价值。方法:运用计算机软件分析BiP蛋白的结构特点及抗原决定簇分布,根据结果设计合成系列多肽。比较合成多肽与RA患者血... 目的:筛选鉴定人内质网分子伴侣BiP抗原表位多肽,探讨其在类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)血清学诊断中的价值。方法:运用计算机软件分析BiP蛋白的结构特点及抗原决定簇分布,根据结果设计合成系列多肽。比较合成多肽与RA患者血清(BiP抗体阳性)IgG的反应强弱,鉴定抗原抗体反应最强的抗原表位多肽。进一步以获得的BiP抗原表位多肽作为包被抗原,检测79例RA患者、34例系统性红斑狼疮(SLE)患者、66例干燥综合征(SS)患者和173例正常人血清中抗BiP抗原表位多肽IgG抗体水平。结果:筛选到一条与RA患者血清反应最强的多肽(N403),抗N403多肽IgG抗体在RA患者中的阳性率(67%),明显高于SS患者(29%)、SLE患者(0%)、和正常人(0%)(P<0.01)。抗N403多肽IgG抗体在RA血清学诊断中的敏感性为67%,特异性为93%。而且该抗体的检测对于RF、CCP、HRF、RA33、AKA、APF等抗体阴性的RA患者的诊断具有重要意义。结论:筛选获得的BiP抗原表位多肽N403,其检测抗体在RA临床血清诊断中具有很好的应用价值。 展开更多
关键词 人内质网分子伴侣BiP蛋白 抗原表位 类风湿性关节炎 多肽抗体
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脾虚型功能性消化不良大鼠胃组织GRP78/BiP蛋白表达及脾虚1号方干预研究 被引量:12
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作者 吕林 王凤云 +5 位作者 唐旭东 黄穗平 王静 马祥雪 尹晓岚 石啸双 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期54-59,共6页
目的探讨脾虚型功能性消化不良(FD)大鼠胃组织GRP78/BiP蛋白表达及脾虚1号方的干预作用。方法 70只10日龄雄性SD大鼠随机分为正常组(10只)、FD模型组(10只)、脾虚型FD模型组(50只)。正常组给予2%蔗糖溶液灌胃,0.2 mL/d,连续6天;FD模型... 目的探讨脾虚型功能性消化不良(FD)大鼠胃组织GRP78/BiP蛋白表达及脾虚1号方的干预作用。方法 70只10日龄雄性SD大鼠随机分为正常组(10只)、FD模型组(10只)、脾虚型FD模型组(50只)。正常组给予2%蔗糖溶液灌胃,0.2 mL/d,连续6天;FD模型组、脾虚型FD模型组给予0.1%蔗糖碘乙酰胺溶液灌胃,0.2 mL/d,连续6天。脾虚型FD模型组正常饲料喂养至6周龄后叠加改良小平台法,连续14天。造模结束后随机分为脾虚型FD模型组,西药组,中药低、中、高剂量组,每组各10只,连同正常组、FD模型组,每天分别给予蒸馏水1 mL/100 g、多潘立酮0.3125 mg/100 g、脾虚1号方0.1275、0.255、0.51 g/100g,灌胃14天。采用Western blot和免疫组化方法检测胃窦组织GRP78/BiP蛋白表达量。结果与正常组比较,脾虚型FD模型组大鼠胃窦黏膜GRP78/BiP蛋白光密度值和蛋白灰度值均升高(P<0.05,P<0.01);与脾虚型FD模型组比较,中药低剂量组大鼠胃窦黏膜GRP78/BiP蛋白表达量降低,而中药中剂量组大鼠胃窦组织GRP78/BiP蛋白灰度值降低(P<0.05,P<0.01)。结论脾虚型FD大鼠胃窦GRP78/BiP蛋白表达升高,存在内质网应激现象,脾虚1号方能够减少GRP78/BiP蛋白的表达,减轻内质网应激现象的发生。 展开更多
关键词 内质网应激 葡萄糖调节蛋白78 免疫球蛋白重链结合蛋白 功能性消化不良 脾虚证 脾虚1号方
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丹参酮Ⅱ_A对血管平滑肌细胞内质网应激相关基因表达的影响 被引量:11
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作者 付强 张妍 +1 位作者 沈晓君 赵君玫 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第14期280-283,共4页
目的:研究丹参酮ⅡA对同型半胱氨酸(HCY)诱导增殖血管平滑肌细胞(VSMC)内质网应激(ERS)相关基因免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)表达的影响,探讨丹参酮ⅡA抗动脉粥样硬化的机制。方法:建立HCY诱导的兔VSMC增殖模型,与不同浓度的丹参酮ⅡA... 目的:研究丹参酮ⅡA对同型半胱氨酸(HCY)诱导增殖血管平滑肌细胞(VSMC)内质网应激(ERS)相关基因免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)表达的影响,探讨丹参酮ⅡA抗动脉粥样硬化的机制。方法:建立HCY诱导的兔VSMC增殖模型,与不同浓度的丹参酮ⅡA共同培养,Annexin/PI双染法、原位缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡率,观察凋亡细胞形态;实时荧光定量PCR检测Bip基因表达。结果:丹参酮ⅡA可显著促进兔VSMC凋亡,细胞凋亡率与HCY组相比差异显著(P<0.01),且存在剂量依赖性;丹参酮ⅡA组Bip mRNA表达水平显著升高,与HCY组相比差异显著(P<0.05,P<0.01)。结论:丹参酮ⅡA上调Bip基因表达,放大ERS信号,诱导兔VSMC凋亡,可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 血管平滑肌细胞 同型半胱氨酸 免疫球蛋白重链结合蛋白 细胞凋亡
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内质网应激在Ⅰ型糖尿病小鼠骨质疏松发生中的作用及其机制 被引量:2
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作者 侯志强 梁潇潇 +4 位作者 邓洲铭 谢远龙 刘智博 蔡林 朱晓彬 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期512-515,共4页
目的探讨内质网应激(ERS)在Ⅰ型糖尿病小鼠骨质疏松发病中的作用和意义方法选取8周龄雄性BALB/c小鼠20只随机分为瓯组,造模组(14只)毎大腹腔注射链豚佐菌素(STZ)60 mg/kg,正常对照组(6只)注射等体积的柠檬酸盐缓冲液,连续注射5 d,诱导... 目的探讨内质网应激(ERS)在Ⅰ型糖尿病小鼠骨质疏松发病中的作用和意义方法选取8周龄雄性BALB/c小鼠20只随机分为瓯组,造模组(14只)毎大腹腔注射链豚佐菌素(STZ)60 mg/kg,正常对照组(6只)注射等体积的柠檬酸盐缓冲液,连续注射5 d,诱导建立Ⅰ型糖尿病小鼠模型。糖尿病造模成功2个月后处死动物.取新鲜股骨测量骨重骨长度,甲醛固定右侧股骨行micro-CT扫描和免疫组织化学(IHC)染色,左侧股骨及仅侧胫骨行蛋白印记Western blot或实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测内质网应激相关指标,如葡萄糖调节蛋白-78(GRP78)或免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)、C/EBP同源蛋白(CHOP)结果与对照组[(5. 9 ±1.6)、(6.3 ±1.2) mmol/L、( 1. 664 ± 0. 051)、( 1.692 ± 0. 042) cm、(4.8 ±0.5)个/mm、( 33 ± 1 )μm ]比较,实验组[(7 ±2. 9)、( 26. 7 ± 3. 2) mmol/L、( 1. 393 ± 0. 049)、( 1.416 ± 0. 038) cm .( 3. 1 ± 0. 7 )个/mm、(21 ±4)μm]的血糖、骨长度及micro-CT结果证实成功制备Ⅰ型糖尿病骨质疏松小鼠模型(P <0. 05)。免疫组织化学结果证实:糖尿病骨质疏松组的GRP78/Bip、CHOP阳性区域面积比值[(6.4±0.8)%、(7.1 ±0.6)%]相对于对照组[(4.1 ±0.7)%、(3.2 ±0.6)%]显著升高(P<0.05)。Western blot结果证实,GRP78/Bip、CHOP的表达量在糖尿病小鼠[0.73 ±0.11、0. 80±0.21]中相对于对照组[0.14 ±0.06、0.22 ±0.04]显著升高(P<0.05) Real-time PCR 结果证实,GRP78/Bip、CHOP的rnRNA相对表达量在糖尿病小鼠(2.17 ± 0.76,3.07 ± 0.45 )中显著高丁对照组(均设为1,P<0.05)。结论糖尿病骨质疏松组小鼠的骨组织及骨髓中内质网应激及由具介导的凋亡途径被激活,可能导致骨形成及骨破坏平衡被打破,在骨质疏松的发病过程中起了重要作用。 展开更多
关键词 骨质疏松 糖尿病 内质网应激 葡萄糖调节蛋白-78/免疫球蛋白重链结合蛋白 C/EBP同源蛋白
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成对同源异型结构域蛋白转录因子1和免疫球蛋白重链结合蛋白在皮肤恶性黑色素瘤组织的表达及临床意义 被引量:4
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作者 王伟 刘林嶓 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期298-300,共3页
目的 探讨皮肤恶性黑色素瘤(CMM)组织中同源异型结构域蛋白转录因子1(PITX1)和免疫球蛋白重链结合蛋白(BiP/GRP78)的表达及其意义。方法 应用免疫组织化学法检测40例CMM、23例皮肤交界痣及20例正常皮肤组织中PITX1及BiP/GRP78蛋白的表达... 目的 探讨皮肤恶性黑色素瘤(CMM)组织中同源异型结构域蛋白转录因子1(PITX1)和免疫球蛋白重链结合蛋白(BiP/GRP78)的表达及其意义。方法 应用免疫组织化学法检测40例CMM、23例皮肤交界痣及20例正常皮肤组织中PITX1及BiP/GRP78蛋白的表达,探讨其与CMM发生及浸润的关系。结果 3种组织中PITX1及BiP/GRP78蛋白阳性表达率比较差异有统计学意义(χ2=8.940、10.023,P<0.05);CMM组织中PITX1的表达低于交界痣及正常皮肤组织,而BiP/GRP78的表达高于交界痣及正常皮肤组织(P<0.05)。CMM、交界痣及正常皮肤组织中PITX1阳性率分别为30.0%、47.8%和70.0%,BiP/GRP78阳性率分别为60.0%、34.8%和20.0%。CMM组织中PITX1的表达与肿瘤的浸润深度明显相关(P<0.05)。CMM组织中PITX1和BiP/GRP78的表达呈负相关(r=-0.198,P>0.05)。结论 PITX1和BiP/GRP78在CMM的发生发展中起重要作用。 展开更多
关键词 恶性黑色素瘤 同源异型结构域蛋白转录因子1 免疫球蛋白重链结合蛋白
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α-细辛醚对食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响
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作者 李珲 黄向东 +1 位作者 冯天钹 王晓玲 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1195-1198,共4页
目的探讨α-细辛醚调控内质网应激对食管癌Eca-109细胞增殖及凋亡的影响。方法实验分为空白组和低、中、高剂量实验组。空白组给予不含药物的RPMI-1640培养基进行培养;低、中、高剂量实验组分别给予含25,50和100 mg·L^(-1)α-细辛... 目的探讨α-细辛醚调控内质网应激对食管癌Eca-109细胞增殖及凋亡的影响。方法实验分为空白组和低、中、高剂量实验组。空白组给予不含药物的RPMI-1640培养基进行培养;低、中、高剂量实验组分别给予含25,50和100 mg·L^(-1)α-细辛醚溶液的RPMI-1640培养基进行培养。用噻唑蓝法检测细胞增殖率,用实时荧光定量聚合酶链反应法检测细胞中免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)、C/BEP环腺苷酸反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)mRNA的表达水平。结果低、高剂量实验组和空白组的细胞增殖能力(OD值)分别为0.78±0.14,0.50±0.09和0.92±0.12,BIP mRNA相对表达量分别为7.68±2.08,3.27±0.94和13.07±2.35,CHOP mRNA相对表达量分别为1.22±0.33,2.39±0.63和0.91±0.30,GRP78 mRNA相对表达量分别为2.11±0.59,5.86±1.47和0.84±0.31。低、高剂量实验组的上述指标与空白组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论α-细辛醚能通过调节内质网应激相关蛋白BIP、CHOP及GRP78表达,达到促进食管癌细胞凋亡、抑制增殖的作用。 展开更多
关键词 Α-细辛醚 食管癌ECA-109细胞 免疫球蛋白重链结合蛋白 C/BEP环腺苷酸反应元件结合转录因子同源蛋白 葡萄糖调节蛋白78 增殖 凋亡
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