颗粒细胞或卵丘细胞提高小鼠未成熟卵母细胞恢复减数分裂能力的研究

本研究通过12～13d小鼠颗粒细胞或21d小鼠卵丘细胞与14d小鼠直径55～65μm的卵母细胞共培养7d,发现单独培养、与颗粒细胞共培养、与卵丘细胞共培养的直径分别为54.2±1.6μm、65.2±2.3μm和63.4±3.4μm。而且,共培养提高了卵母细胞GSH的表达量(p<0.05)。在与颗粒细胞共培养7d后,11.1%(27/254)的卵母细胞能完成第一次减数分裂达到MII期。说明了小鼠颗粒细胞或卵丘细胞能够促进未成熟卵母细胞的发育及减数分裂的恢复,为研究哺育动物卵母细胞的发育调控提供了依据。

人卵丘细胞与卵母细胞发育及成熟的关系

卵丘细胞与卵母细胞共处于同一个卵泡液微环境中,卵丘细胞与卵母细胞之间复杂的"对话机制"调控着卵母细胞的成熟和卵丘细胞的增殖延伸。在窦卵泡阶段,卵丘细胞由颗粒细胞分化而来,通过缝隙连接与卵母细胞共同形成一个结构和功能上的合胞体。卵泡发育不同时期,卵丘细胞对卵母细胞的代谢调控主要表现为:在窦卵泡期,卵丘细胞为卵母细胞发育提供必需的营养,而卵母细胞分泌的信号因子亦调控着卵丘细胞的增殖和延伸;在排卵前卵泡中,卵丘细胞主要通过调控卵母细胞中cAMP水平,促使卵母细胞恢复减数分裂;在排卵后卵泡中,卵丘细胞亦影响着精-卵结合及胚胎发育的过程。另外,伴随卵泡内微环境的变化,卵丘细胞与卵母细胞间发生着复杂的信号传递,从而对卵母细胞的发育实现分子水平的调控,其中部分基因可能作为卵母细胞发育成熟、胚胎发育及妊娠结局的分子标志物。

卵丘细胞分泌的趋化因子5水平与卵母细胞发育潜能的关系

目的:探讨受精液中趋化因子5(CCL5)与卵母细胞发育潜能的关系。方法:收集25个体外受精周期中获得的180枚卵母细胞的受精液,按卵母细胞的发育命运分为4组:A组为35枚未受精卵母细胞的受精液;B组为72枚发育为非优质胚胎卵母细胞的受精液;C组为70枚发育为优质胚胎卵母细胞的受精液;D组为11枚发育为妊娠胚胎卵母细胞的受精液。ELISA方法测定4组中CCL5的含量,并将结果进行比较。结果:A组CCL5的含量最低,与其余3组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。C组与B组比较差异有统计学意义(P<0.05),但与D组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:卵丘细胞分泌的CCL5水平与卵母细胞的受精及发育潜能相关,可作为选择移植胚胎的新的参考标准。

卵丘细胞分泌的趋化因子5与辅助生育结局的相关性

目的探讨卵丘细胞分泌的趋化因子5能否预测卵母细胞质量和辅助生育妊娠结局。方法收集75个体外受精周期中获得的562枚卵母细胞的卵泡液、受精液和其后的胚胎培养液,根据卵母细胞的发育命运进行分组:A组为未受精卵母细胞;B组受精后发育为非优质胚胎;C组受精后发育为优质胚胎;D组受精后发育为妊娠胚胎。ELISA方法测定4组卵泡液、受精液和胚胎培养液中CCL5的含量,并将结果进行比较。并分析卵母细胞成熟与CCL5水平的关系。结果 A组卵泡液和受精液中CCL5的含量最低。C组与B组卵泡液和受精液中CCL5的含量比较有显著差异,但与D组比较无明显差别。B、C、D 3组胚胎培养液中CCL5含量比较无明显差异。MII期卵子卵泡液中CCL5含量明显高于MI期和GV期卵子。结论卵丘细胞分泌的CCL5水平与卵母细胞的成熟和妊娠结局相关,可为选择移植胚胎和预测妊娠结局提供新的参考标准。

卵丘颗粒细胞中卵母细胞分泌因子表达水平对卵母细胞成熟度的影响

目的评估单卵丘颗粒细胞(CCs)中GDF9、BMP15和TGF-β1的mRNA表达水平对卵母细胞成熟度的影响及在不同促排卵方案中的表达水平差异。方法收集直接行ICSI治疗的患者64例679份CCs,其中拮抗剂方案组CCs 272份,微刺激方案组CCs 245份,PPOS方案组CCs 162份,卵母细胞与单卵丘颗粒细胞一一对应。提取的mRNA表达水平采用real-time PCR方法进行检测,分析卵母细胞发育不同阶段卵母细胞分泌因子的含量,并比较不同促排卵方案中GDF-9、BMP-15和TGF-β1表达水平的差异。结果卵母细胞分泌因子GDF-9、BMP-15和TGF-β1的表达水平,MⅡ组均显著高于MⅠ组,MⅠ组显著高于GV组,正常受精组显著高于异常受精组,优质胚胎组显著高于非优质胚胎组。微刺激方案的Gn量较拮抗剂方案及PPOS方案更低有明显统计学差异。GDF-9、BMP-15和TGF-β1在三种促排卵方案中的表达量无明显统计学差异。结论GDF-9、BMP-15和TGF-β1可作为评价卵母细胞成熟度及其发育潜能的客观指标,其表达量与卵母细胞成熟度相关。在这三种促排卵方案中,微刺激方案的Gn量最低。CCs中的卵母细胞分泌因子的表达水平在这三种促排卵方案无明显差异,对卵母细胞成熟度的治疗效果相似。