高效液相色谱法同时测定婴幼儿配方乳粉中5种糖

建立一种婴幼儿乳粉样品的简便快速处理方法,以高效液相色谱法定量检测样品中5种糖含量。样品经水充分溶解,沉淀蛋白质后,注入高效液相色谱仪进行检测。果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖的质量浓度在1~10 mg/mL范围内线性良好,线性相关系数均大于0.999,方法检出限均为0.15%,定量限均为0.45%。在1%、2%、10%的加标水平下,果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖测定结果的相对标准偏差为0.9%~2.6%(n=6),回收率分别为96.5%~99.4%、97.0%~101.0%、98.2%~100.8%、99.6%~101.5%、95.5%~99.6%。该方法可用于婴幼儿乳粉中5种糖含量的日常检测。

浅析我国婴幼儿配方液态奶政策法规和监管要求

婴幼儿配方液态奶在我国刚兴起,相比婴幼儿配方乳粉尚处在萌芽阶段,婴幼儿配方液态奶市场总体发展基本空白。《中华人民共和国食品安全法(修正草案征求意见稿)》和《婴幼儿配方液态奶生产许可审查细则(征求意见稿)》使婴幼儿配方液态奶迎来新进展,推动婴幼儿配方液态奶开发并逐渐成为高端产品,同时婴幼儿配方液态奶也为国内奶粉领域发展迎来利好。本文梳理了婴幼儿配方液态奶现阶段的监管要求和标准,分析拟加强婴幼儿配方液态奶注册及生产许可监管,为监管部门对婴幼儿配方液态奶开展监督管理提供借鉴。

基于超高效液相色谱-串联质谱同时测定婴幼儿配方乳粉中2′-岩藻糖基乳糖和乳糖-N-新四糖

建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)同时测定婴幼儿配方乳粉中2′-岩藻糖基乳糖(2′-fucosyllactose,2′-FL)和乳糖-N-新四糖(lacto-N-neotetraose,LNnT)。样品经水提取,沉淀法除蛋白、针式水系滤膜净化,以乙腈和10 mmol/L甲酸铵水溶液(含0.1%甲酸,体积分数)为流动相,采用酰胺柱进行梯度洗脱,采用选择反应检测扫描模式(selective reaction monitoring,SRM)测定,外标法定量,稀释法评估溶剂效应、提取后添加法评估基质效应。结果表明,正离子模式下2′-FL和LNnT分别采用加合离子峰[M+NH^(+)_(4)]和[M+H^(+)]较好,梯度条件、流速优化后使得2′-FL和LNnT均能在8 min内完成洗脱,溶剂效应考察发现2′-FL和LNnT存在严重的溶剂效应,但在消除试验中发现在稀释20倍的情形下,50%乙腈甲酸铵水溶液作为净化样液的稀释溶剂可消除影响,线性范围考察发现2′-FL和LNnT线性范围分别为5.0~150.0 ng/mL和2.5~75.0 ng/mL,基质效应考察发现2′-FL和LNnT均不存在基质效应。方法验证表明,2′-FL和LNnT各项精密度正确度参数均满足国标要求,该方法适用于婴幼儿配方乳粉中2′-FL和LNnT的同时测定。

液相色谱-串联质谱法测定婴儿配方乳粉中苯扎氯铵残留量的不确定度评定

为提高检测结果的准确性,确定影响检测方法的关键因素,对液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定婴儿配方乳粉中苯扎氯铵残留量的不确定度进行评定。依据方法BJS 202007对测定过程中可能产生的不确定度进行分析,构建数学模型并计算该方法的各不确定度分量值,进而得出相对不确定度及扩展不确定度。结果表明,标准溶液配制和标准曲线拟合是LC-MS/MS法测定婴儿配方乳粉中苯扎氯铵残留量不确定度的主要来源,样品处理过程是不确定度的次要来源。在LC-MS/MS法测定婴儿配方乳粉中苯扎氯铵残留量时,应规范基质标准工作液的配制,选取拟合线性高的标准曲线进行校正。

超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法测定婴幼儿配方乳粉中磺胺类和喹诺酮类药物残留

基于超高效液相色谱串联三重四极杆质谱技术建立婴幼儿配方乳粉中11种磺胺类和5种喹诺酮类兽药残留的检测分析方法。样品提取剂为酸化乙腈,使用PRiME HLB固相萃取柱对提取液进行净化浓缩,经过XBridge BEH C_(18)色谱柱分离后,采用电喷雾离子源,在正离子模式下选择多反应监测模式进行分析,用基质匹配标准曲线定量。结果表明:16种兽药残留含量在质量浓度2~100 ng/mL具有良好的线性关系,线性相关系数(R~2)大于0.995 0;检出限为0.1~0.2μg/kg,定量限为0.3~0.5μg/kg;样品加标回收率为84.8%~108.0%,相对标准偏差为0.36%~5.41%。本研究建立的检测婴幼儿配方乳粉中磺胺类等兽药残留的方法简便高效、稳定可靠,具有较高的灵敏度。

固相萃取-二维液相色谱法同时测定婴儿配方乳粉中V_(A)、V_(D)和V_(E)

建立了同时测定婴儿配方乳粉中V_(A)、V_(D)和V_(E)含量的固相萃取-二维液相色谱法。通过正交试验优化皂化条件,样品皂化液经TUP-E76-2060固相萃取柱净化后,以赛默飞FOODKIT1 ADE-C18色谱柱(150 mm×3.0 mm,3μm)作为一维分析柱,完成V_(A)和V_(E)的定量及V_(D)的净化,以赛默飞FOCDKIT1&2ADE-C18色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.6μm)作为二维分析柱,完成对V_(D)的定量分析。结果显示,V_(A)、V_(D)和V_(E)分别在质量浓度为0.005~5、0.01~10和0.5~500μg/mL范围内与色谱峰面积具有良好的线性,相关系数分别为0.9996、0.9998和0.9999。与国标法比较,该方法在灵敏度、准确度及精密度等方面均有不同程度的提升,尤其是V_(A)的定量限提高了30倍,V_(D)的回收率提升了1.6倍。该方法样品处理过程简便快捷,准确稳健,可满足实验室大批量样品快速分析的需求。

稳定同位素稀释-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定牛奶及牛源性婴幼儿配方乳粉中A1型和A2型β-酪蛋白含量

目的建立基于纯化蛋白和稳定同位素稀释-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法(ultra performance liquid chromatography coupled triple quadrupole mass spectrometry,UPLC-MS/MS)定性及定量测定牛奶及牛源性婴幼儿配方乳粉中A1和A2β-酪蛋白变异体的分析方法。方法首先将β-酪蛋白标准品中A1和A2β-酪蛋白变异体在高效液相色谱仪上分离,通过各自的纯化蛋白确定两种变异体在标准品中的含量,再将试样中的β-酪蛋白经胰蛋白酶酶解成肽,经UPLC-MS/MS检测。通过筛选的特异肽段,经β-酪蛋白标准品及稳定同位素稀释内标法计算,获得试样中β-酪蛋白A1变异体和A2变异体的含量。结果本研究采用的β-酪蛋白标准对照品中A1和A2β-酪蛋白变异体含量分别为20.8%和55.1%,且在检测中标准曲线的线性相关系数均大于0.99,方法重现性中相对标准偏差为2.290%~4.720%。结论本方法溯源性及精密度好,适用于牛奶及牛源性婴幼儿配方乳粉中两种β-酪蛋白变异体的测定。

超高效液相色谱-串联质谱法检测婴幼儿低致敏配方乳粉中过敏原蛋白

建立了低致敏配方乳粉中过敏蛋白的超高效液相色谱-串联质谱筛查方法。乳粉蛋白经500 mmol·L^(-1)碳酸氢铵溶液提取、除脂、酶解后进行液相色谱-飞行时间质谱(LC/Q–TOF)分析,数据通过Peaks 10.6软件结合UniProt数据库比对分析,并运用BLAST验证特征肽段特异性,最终得到表征6种过敏蛋白(αS1-酪蛋白、αS2-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白)的18条特征多肽。随后利用超高效液相色谱-串联质谱法对这些肽段进行验证。结果表明,筛选出的特征肽段特异性强、灵敏度高,符合日常检测要求。该方法可鉴别低致敏配方乳粉中的过敏原,为低致敏配方乳粉研究提供技术支持。

高效液相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中3种醛类

建立高效液相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中3种醛类(丙二醛、丙烯醛、4-羟基己烯醛)含量的分析方法,研究贮藏温度对婴幼儿配方乳粉中3种醛类含量的影响。考察线性关系、精密度、回收率、检出限及定量限等指标,外标法定量。结果表明:该方法在0~40μg线性良好(R2>0.999),3种醛类检出限分别为0.3、0.4、0.3 mg/kg,定量限分别为0.8、1.0、0.8 mg/kg,平均加标回收率为88.29%~96.87%,相对标准偏差均小于10%;当乳粉贮藏环境温度高于40℃,随着温度升高,3种醛类含量均呈上升趋势,以丙二醛与丙烯醛上升显著。该研究方法具有快速、准确、重复性好等特点,能满足婴幼儿配方乳粉中3种醛类的测定。

UPLC法测定婴幼儿配方奶粉中黄曲霉毒素M_(1)

目的:研究婴幼儿配方奶粉中黄曲霉毒素M_(1)的超高效液相色谱测定方法。方法:样品经甲醇-水溶液提取,上清液稀释,经免疫亲和柱净化和富集,再氮吹复溶后,用超高效液相色谱仪(荧光检测器)分析测定。结果:黄曲霉毒素M_(1)在0.0515~5.1500 ng·mL^(-1)线性良好,回归方程为Y=4.00×10^(5)X-8.74×10^(3),相关系数为0.999867,检出限为0.02μg·kg^(-1),定量限为0.05μg·kg^(-1);加标回收率在81.0%~90.3%,变异系数为0.72%~3.18%,且正确度较好。结论:该方法灵敏度高、准确性好,适用于测定婴幼儿配方奶粉中黄曲霉毒素M_(1)的测定。

高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿配方乳粉中A1 β-酪蛋白、A2 β-酪蛋白含量

建立婴幼儿配方乳粉中A1、A2 β-酪蛋白的高效液相色谱-串联质谱测定方法。乳粉经尿素溶液溶解稀释,胰蛋白酶酶解,过膜后利用ACQUITY UPLC Peptide BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱分离,0.1%甲酸水、0.1%甲酸乙腈为流动相梯度洗脱,高效液相色谱-串联质谱仪测定。结果表明,A1、A2 β-酪蛋白在0.02~2.00 mg·mL^(-1)线性范围内,相关系数(R^(2))均≤0.99,检出限为0.05~0.10 g·kg^(-1);定量限为0.2~0.5 g·kg^(-1);平均回收率在92.08%~105.29%;平均相对标准偏差为1.5%~7.9%。随机选取了10个品牌的婴幼儿配方乳粉进行测定,得到A1 β-酪蛋白、A2 β-酪蛋白的含量在0~30.3 g·kg^(-1)。

高效液相色谱法测定婴幼儿乳粉中烟酰胺的不确定度评定

建立高效液相色谱法测定婴幼儿乳粉中烟酰胺不确定度的数学模型,并根据JJF 1135—2005《化学分析测量不确定度评定》和JJF 1059—1999《测量不确定度评定与表示》中的有关规定,逐层对乳粉中烟酰胺测量不确定度来源进行评估,最后给出合成标准不确定度和扩展不确定度;婴幼儿乳粉中烟酰胺测定结果为(63.01±3.50)mg/kg,k=2,p=95%。通过评定,提出影响检测结果的主要因素为样品前处理过程、标准溶液、标准曲线拟合等。

超高效液相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中的VD_3含量的不确定度评定

根据JJF 1059—1999《测量不确定度评定与表示》的原理与方法,建立了超高效液相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中VD3含量的测量不确定度评定的数学模型。对数学模型中各不确定度分量的来源进行分析、量化和合成。当取样量为10.0g,其测定的VD3含量为(7.45 0.2091)μg/100g。最终结果的不确定度主要由标准溶液、标准曲线的建立及测量随机性因素的不确定度引起。整体评定方法清晰合理,简便准确,适合超高效液相色谱法、高效液相色谱法的不确定度评定。

高效液相色谱法测定婴儿奶粉中维生素B_(12)

建立了奶粉中维生素B12的反相高效液相色谱的测定方法,奶粉经去蛋白质-糖分-超声提取-富集浓缩超滤后进高效液相色谱仪,采用C18色谱柱,水-乙腈流动相体系,梯度洗脱能够快速有效地分离奶粉中的维生素B12。线性范围为0.010μg/mL^10μg/mL,相关系数为0.9998,检出限为0.1μg/100g,加标回收率为78.8%~84.0%。该方法适用于实际样品的测定,速度快、成本低,结果令人满意。

超高压液相色谱-串联质谱法同时测定婴幼儿配方乳粉中11种B族维生素

目的：建立一种能够同时测定婴幼儿配方乳粉中11种B族维生素的超高压液相色谱-串联质谱法。方法：样品用0.1%甲酸溶液溶解,乙酸锌沉淀蛋白,滤液经ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱分离,流动相为0.1%甲酸溶液和乙腈,梯度洗脱,采用电喷雾离子源正离子模式,多反应监测进行检测,分析时间12 min。结果：11种B族维生素在各自质量浓度范围内线性良好,R^2均大于0.99,加标回收率在85%-110%之间,相对标准偏差在1.03%-6.75%之间,VB1、VB2、烟酸、烟酰胺、泛酸（VB5）、吡哆醛、吡哆醇、吡哆胺、叶酸、游离生物素和VB12的定量下限分别为40.0、40.0、30.0、30.0、50.0、0.9、1.2、1.2、2.0、2.0、0.2μg/100 g,与国家标准比较,部分维生素定量限提高了7.7%-60%。结论：该法具有灵敏度高、前处理操作简单快速、分析时间短的特点,而且具有良好的精密度和准确性,可以应用于婴幼儿配方乳粉中11种B族维生素的同时测定。

稳定同位素稀释/液相色谱-串联质谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中5种脂溶性维生素

目的建立稳定同位素稀释/液相色谱-串联质谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中5种脂溶性维生素(VA、VD2、VD3、VE和VK1)的分析方法。方法样品经皂化,正己烷提取,甲醇定容,经ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.7μm)分离,以0.2%甲酸水溶液和甲醇-乙腈(4:6, V:V)为流动相,梯度洗脱,采用正离子源电喷雾电离,多反应监测模式测定,同位素内标法定量。结果 VA、VD2、VD3、VE和VK1在一定浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数(r2)大于0.99,检出限为0.2～5μg/100 g,定量限为0.6～15μg/100 g。5种维生素的加标回收率为89.3%～109.2%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为3.82%～8.72%(n=6)。结论本研究建立的方法在很大程度上简化了婴幼儿配方奶粉中脂溶性维生素的检测流程,提高了实验效率和检测结果的准确性。

高效液相色谱法测定乳制品中维生素A的研究进展

从样品处理、色谱分离和检测方面对近年来高效液相色谱色谱法测定牛奶及乳制品中维生素A的研究进行了综述。另外,对研究中存在的问题进行了简单的讨论。

食品中乳蛋白的重要作用

乳蛋白具有许多令人关注的特性,包括营养、理化、功能、工艺、生理保健等特性.被广泛地应用于乳制品、乳饮料和保健食品等.作者首先介绍了乳蛋白的一些特性,然后描述了富含蛋白质的主要乳制品,包括产量较大的干酪、乳粉和产量较小的特殊制品如酪蛋白和乳清蛋白制品.

反相高效液相色谱法快速测定婴儿配方乳粉中的维生素A酯类化合物

目的:开发一种快速测定婴儿配方乳粉中维生素A酯类含量的反相高效液相色谱法。方法:直接使用二氯甲烷和甲醇体积比为2.5:1的混合溶剂对样品进行提取,在30℃的条件下采用等度洗脱,流动相采用体积比为80:20的甲醇-三氯甲烷溶剂,流动相流速1.0mL/min;色谱柱温度30℃,检测波长325nm。结果:维生素A醋酸酯和维生素A棕榈酸酯的回收率分别为100.1%和102.8%,多次测定结果的相对偏差分别为1.18%和0.96%,检出限分别为3.1ng和4.3ng。结论:本方法操作简单、精密度、回收率和灵敏度高,适用于婴幼儿配方乳粉中的维生素A酯类的检测。

高效液相色谱法检测婴幼儿配方乳粉中α-乳白蛋白

目的:建立高效液相色谱(HPLC)方法检测婴幼儿配方乳粉中变性和非变性的α-乳白蛋白。方法:使用盐酸胍缓冲液作为样品溶解液和HPLC流动相,用巯基乙醇作为还原试剂对样品进行前处理,以母乳样品为内标,使用TSK-GEL G3000SWXL柱,用紫外检测法在280nm波长处对洗脱物进行分析。结果:此方法可以准确测定喷雾干燥工艺加工后婴幼儿配方乳粉中的α-乳白蛋白含量,且分离效果好,分析所用的时间约为20min。结论:该方法快速、准确,适用于婴幼儿配方乳粉中α-乳白蛋白的检测。