5-Aza-CdR联合EBNA1-DC疫苗诱导的淋巴细胞对鼻咽癌C666-1细胞的杀伤作用

目的:探讨EB病毒核抗原1(EBNA1)mRNA修饰的DC(EBNA1-DC)诱导的淋巴细胞联合甲基化抑制剂5-Aza-CdR对鼻咽癌C666-1细胞的杀伤作用。方法:以构建的EBNA1-pCDNA3.1质粒为模板,体外转录获得EBNA1 mRNA,通过脂质体转染至健康人外周血来源DC,构建EBNA1-DC疫苗。流式细胞术检测转染后DC表型及5-Aza-CdR处理后的C666-1细胞凋亡情况。实时无标记动态细胞分析技术检测EBNA1-DC疫苗诱导的淋巴细胞联合5-Aza-CdR的特异性抗肿瘤活性。结果:转染EBNA1 mRNA后EBNA1-DC表面EBNA1阳性率为(59.3±5.85)%,HLA-DR的表达与未转染DC相比显著升高[(84.9±5.5)%vs(68.0±5.8)%,P=0.026],CD80的表达也显著升高([88.2±3.9)%vs(61.1±4.4)%,P=0.015]。低剂量5-Aza-CdR处理后的C666-1细胞凋亡情况与未处理的细胞相比无显著差异。经低浓度5-Aza-CdR预处理的C666-1细胞中IRF7基因表达与未处理的细胞相比显著升高(P=0.0001)。与空载的DC相比,EBNA1-DC诱导的淋巴细胞对EBV阳性表达的C666-1细胞具有更强的特异性杀伤活性(P=0.049);经低浓度5-Aza-CdR预处理的C666-1细胞对EBNA1-DC诱导的特异性免疫杀伤更敏感(P=0.019)。结论:5-Aza-CdR与EBNA1-DC疫苗联合可显著增强对C666-1细胞的特异性免疫杀伤,本研究为开拓以mRNA为基础的DC疫苗及其在临床综合治疗中的应用转化提供前期研究基础。

齐大山混磁精矿新药剂体系下的浮选试验研究

齐大山选矿厂的混合磁选精矿铁品位为49.21%,为提高选矿厂的精矿品位进行了新型药剂体系下的浮选试验。结果表明,条件试验确定的矿浆pH=9,粗选抑制剂DC用量250 g/t、捕收剂DLTB+航空煤油(质量配合比为100∶0.2)用量225 g/t,精选DLTB+航空煤油用量60 g/t,对应的精矿铁品位为67.37%、回收率为66.85%;试样采用1粗1精3扫、中矿顺序返回浮选闭路流程处理,可获得铁品位为66.54%、回收率为78.37%的铁精矿,铁品位为25.32%、回收率为21.63%的尾矿后续将进行细磨深选,以提高铁回收率。

距离比较法(DISCO)构建原卟啉原氧化酶抑制剂药效团模型

在原卟啉原氧化酶(Protox)三维结构未知情况下,利用距离比较法(DISCO),将8个具有代表性结构特征的Protox抑制剂,与其作用底物(基质)原卟啉原IX(Protogen IX)的分子构象进行迭合,建立了可能的药效团模型;并据此确定了Protogen IX与Protox相互作用时,可能采取的活性构象.这些信息将有助于设计、开发新型Protox抑制剂.

优化丁二烯装置提高装置经济效益

本文从4个方面分析了扬子石化烯烃厂丁二烯装置的优化改造。优化改造后,延长了运行周期,提高了生产负荷及自动化水平,降低了生产成本,进而增强了装置的盈利能力。

苍术提取物对血管紧张素转化酶的抑制活性

通过苍术提取物对血管紧张素转化酶抑制活性的有效成分或有效部位的分析研究,发现苍术残渣的抑制活性最强,其抑制率为95.91%;表明苍术残渣是苍术提取物对ACE的抑制活性部位,而指纹图谱是控制其品质的重要依据。

铝箔电化学侵蚀中缓蚀剂作用研究

中高压用铝电解电容器阳极材料常采用高纯铝箔进行直流电化学侵蚀进行扩面,达到提高比容效果,但侵蚀时铝箔表面在酸性电解质作用下表面溶解,一方面影响扩面效果,另一方面降低铝箔强度,影响腐蚀铝箔后续加工与利用。本文利用铝箔直流侵蚀过程中加入缓蚀剂,比较聚丙烯酸、聚乙二醇及苯胺在侵蚀过程中的缓蚀性能,研究缓蚀效果及缓蚀机理,实验表明苯胺缓蚀效果更为明显,通过表面电镜及能谱分析,苯胺在电蚀过程中在腐蚀铝箔表面形成覆盖层,阻碍了铝箔表面腐蚀,对缓蚀起到重要作用。

几种野木瓜SOD抗氧化衰减抑制剂的效果分析

以野木瓜为试材,提取其超氧化物岐化酶(SOD),通过添加柠檬酸、葡萄糖、硫酸锌、硫酸铜、亚硫酸钠到邻苯三酚自氧化反应体系中,设置空白对照、阳性对照、阴性对照来检测样品的SOD活性衰减抑制率。结果表明,柠檬酸、葡萄糖、硫酸锌、硫酸铜、亚硫酸钠与SOD共同添加到反应体系中均能增强SOD自由基的清除能力,硫酸锌、亚硫酸、葡萄糖、硫酸铜与SOD混合能立即显现出保护作用,而柠檬酸在添加48 h后才显现对SOD的保护作用。由此可见,这几种物质可作为SOD活性衰减抑制剂添加。

5-氮脱氧胞苷及曲古抑菌素A影响供核细胞H19基因表达的时间依赖性及浓度依赖性

目的:探讨甲基转移酶抑制剂——5-氮脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-aza-dC)和组蛋白去乙酰基酶抑制剂——曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)影响供核细胞H19基因表达的时间依赖性和浓度依赖性。方法:用不同浓度5-aza-dC及TSA按不同作用时间处理供核细胞(鼠尾尖成纤维样细胞),利用实时定量PCR法检测处理后H19基因的表达。结果:不同浓度的5-aza-dC处理组之间H19的表达无明显差异,但延长作用时间可使H19表达增强;TSA使H19的表达下降,但无时间依赖性。结论:长时间低浓度的5-aza-dC能增强供核细胞中H19基因的表达,而TSA则使H19的表达减弱,为体细胞克隆中表观遗传修饰抑制剂的选择及后续基因印迹研究提供了依据。

碱性介质中表面活性剂对超细锌粉分散性能的影响

首先,用直流电弧等离子体法制备超细锌粉,并通过测定其表面Zeta值,选取了三种表面活性剂。利用硝酸镧作缓蚀剂,借分光光度法,研究了超声分散时间、硝酸镧加入量以及表面活性剂浓度对碱性介质中超细锌粉分散性能的影响。结果表明,最佳分散工艺为:超声功率560W,超声分散时间20min,硝酸镧与十六烷基三甲基溴化铵加入的质量分数分别为10%和6%,从而解决了超细锌粉在碱性电池中的应用问题。

AmpC酶抑制剂筛选方法的建立及136种中药材活性评价

目的建立一种AmpC酶抑制剂的快速筛选方法,为治疗由耐药菌传播引起的感染提供筛选依据。方法以阿维巴坦钠为阳性对照,采用紫外分光光度法检测反应体系的吸光度变化,通过6种不同底物的筛选比较及反应条件的优化,并对136种中药提取物进行筛选评价。结果最佳体系为波长489 nm、底物质量浓度0.1 mg/mL、酶浓度400 U/mL、温度30℃、反应时间300 s。136种中药水提物中有12种中药水提物对AmpC酶的抑制率大于70%,其中桑寄生、赤芍、红景天、千斤拔、石见穿5种中药水提物的抑制率大于80%;添加桑寄生可明显提高青霉素的协同抗菌效应,最低抑菌浓度(minimal inhibit concentration,MIC)由2 mg/mL降低至0.8 mg/mL。结论建立的AmpC酶抑制剂筛选方法快速、高效、可信度高,中药是抗耐药菌感染治疗的重要资源。

5- 氮杂胞苷抑制血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大的作用研究

目的 探讨甲基化抑制剂5-氮杂胞苷（5-AZA-2’-dC）在血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）诱导的心肌肥大细胞的对肌浆网Ca2＋-ATP泵（SERCA2a）表达等的影响。方法 培养SD大鼠乳鼠原代心肌细胞，根据处理方法，分为5组，分别为对照组、血管紧张素Ⅱ组、5-氮杂胞苷组、血管紧张素Ⅱ与5-氮杂胞苷同时处理组和5-氮杂胞苷预处理组；按照分组处理48 h后分别测定心肌细胞A型利钠肽（ANP）mRNA及蛋白表达、细胞面积等心肌细胞肥大的指标；Western blot检测心肌细胞肌浆网Ca2＋-APT泵（SERCA2a）、钙调蛋白激酶Ⅱ（CaMK Ⅱ）、磷酸化钙调蛋白激酶Ⅱ（p-CaMK Ⅱ）的蛋白质表达的水平；激光共聚焦检测胞内钙变化情况。结果 血管紧张素Ⅱ（10-6 mol/L）处理心肌细胞48 h，可使ANP mRNA及蛋白表达增加（P〈0.05）。与对照组相比，血管紧张素Ⅱ组心肌细胞ANP、p-CaMK Ⅱ蛋白表达明显增加（P〈0.01）；而5-氮杂胞苷（10-6 mol/L）同时加药组及预处理组较之血管紧张素Ⅱ组则下降（P〈0.01）；与对照组相比，血管紧张素Ⅱ组心肌细胞的SERCA2a蛋白质表达下降（P〈0.01），而5-氮杂胞苷同时加药组及预处理组较血管紧张素Ⅱ组的上升（P〈0.01）。钙离子变化情况，与对照组相比，血管紧张素Ⅱ组胞内钙离子峰值上升时间和下降时间均延长（P〈0.05），而5-氮杂胞苷同时加药组及预处理组较之血管紧张素Ⅱ组则稍缩短（P〈0.05）。结论 5-氮杂胞苷可抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大，其机制可能通过促进SERCA2a表达有关；SERCA2a表达的增加，缩短胞浆钙再摄取入肌浆网的时间，有利于维持胞内钙稳态。

5－氮杂－2’－脱氧胞苷对胰腺癌细胞PANC1的组织因子途径抑制物－2表达及CpG岛甲基化的影响

目的探讨甲基化酶抑制剂5－氮杂-2’－脱氧胞苷（5-Aza—dC）对胰腺癌细胞系PANC1的抑癌基因组织因子途径抑制物2（tissuefactorpathwayinhibitor2，TFPI-2）甲基化水平及基因表达的影响。方法应用1×10^-7、5×10^-7、1×10μmol／L的5-Aza—dC处理胰腺癌细胞系PANC1。用甲基化特异性PCR（MSP）、RT—PCR及蛋白质印迹法检测细胞TFPI-2基因的甲基化状态、mRNA及蛋白的表达。结果未经5-Aza-dC处理的PANC1细胞的TFPI-2基因CpG岛为完全甲基化，无TFPI-2mRNA及蛋白的表达。1×10^-7、5×10^-7、1×10^-6mol／L的5-Aza-dC处理后，PANC1细胞的TFPI-2基因CpG岛甲基化逆转，从不完全甲基化到完全非甲基化；TFPI-2mRNA相对表达量分别为0．211±0．087、0．327±0．068、0．609±0．017；TFP1-2蛋白相对表达量为0．429±0．121、0．675±0．044、1．132±0．124，呈剂量依赖性增加（P〈0．05）。结论胰腺癌细胞系PANC1的TFPI-2启动子高甲基化可能是导致该基因表达下调甚至失活的主要原因。5-Aza—dC能够逆转其高甲基化状态，并诱导TFPI-2mRNA及蛋白重新表达。