环介导等温扩增核酸技术及其应用

环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,简称LAMP)是利用4个特殊设计的引物和具有链置换活性的DNA聚合酶,在恒温条件下特异、高效、快速地扩增DNA的新技术。该技术在1h内能扩增出109靶序列拷贝,扩增产物是一系列反向重复的靶序列构成的茎环结构和多环花椰菜样结构的DNA片段的混合物,电泳后在凝胶上显现出由不同大小的区带组成的阶梯式图谱。LAMP技术以其特异性强、灵敏度高、快速、准确和操作简便等优点在核酸的科学研究、疾病的诊断和转基因食品检测等领域得到了日益广泛的应用。

底-6乙底火药剂的燃烧温度测定与计算

设计了一种用于底火燃烧温度测定的密闭爆发器，在距底火15mm处测定了底16乙底火的燃烧温度，6发底火药剂燃烧最高温度范围为405．87—563．28℃。以底火药剂燃烧放出的热量作为内热源，利用有限元法模拟计算了底火在密闭爆发器内燃烧温度，范围为423．45～552．95℃。结果表明，计算与试验结果比较吻合。

丙型肝炎病毒1b型NS3基因扩增方案的改进

目的优化扩增武汉地区HCV1b型患者HCV非结构蛋白3(NS3)的cDNA,并进行测序。方法从患者血清中提取HCVRNA,采用型特异性引物扩增分型法检测HCV患者基因分型。设计3对外侧引物和3对内侧引物,采用套式PCR技术(方案一)分别扩增HCV1b型患者的HCVNS33个区段,然后用3对内侧引物进行测序。为了优化NS3扩增和测序效果和减少操作繁琐,对引物进行改进,设计1对外侧引物和1对内侧引物,采用改进的套式PCR技术(方案二)直接扩增HCV1b型患者的HCVNS3区,然后用3个正向引物和1个逆向引物进行测序。结果改进的套式PCR技术(方案二)与套式PCR技术(方案一)相比,操作较为简单,而且扩增效率增高,扩增效果较好。结论采用改进的套式PCR技术(方案二)扩增和测序HCVNS3区更迅速、有效、实用。

内引物在环媒恒温基因扩增技术中的作用研究

目的研究内引物在环媒恒温基因扩增(LAMP)中的作用,确定利用LAMP的同一套特异性引物区别具有单核苷酸差异的不同株型或同一株型的病原菌基因的可行性。方法采用PCR介导定点突变法对沙门氏菌invA基因定点突变,使其T669→A669、T725→A725,用原LAMP特异性引物扩增含单核苷酸差异序列,观察扩增结果。结果制备的点突变模板C大小与预期值(1 371 bp)一致。LAMP扩增的伤寒沙门氏菌CMCC50098标准株DNA产物的电泳条带呈梯状,而扩增模板C未扩出反应产物。结论LAMP不能利用同一套引物扩增具有单核苷酸差异的不同株型或同一株型的病原菌,即可利用同一套引物区分这些病原菌。

中空玻璃内密封剂及成型工艺的研究

介绍了中空玻璃内密封剂的选择和成型工艺研究。通过性能试验表明 ,该项研究成果达到国外同类产品技术水平。

中药升降浮沉理论浅析

中药的升降浮沉理论,还难以彻底揭示升降浮沉药性的本质。因此还应该继续从深层次进行文献研究与挖掘,渗入多种学科,借助现代药理学的研究方法,机能学的研究思路,分析特征指标的作用趋势,通过数理统计方法,进行统计学的相关研究,对中药升降浮沉理论的研究提供行之有效的思路和方法。