INTS10对HCC细胞周期、凋亡、生长和迁移能力的影响

为了探究整合因子复合物亚基10(integrator complex subunits 10,INTS10)对人肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞周期、凋亡、生长和迁移能力的影响及其潜在的分子作用机制,利用慢病毒感染法获得稳定过表达或敲低INTS10的HCC细胞系,采用qRT-PCR和Western blotting检测INTS10 mRNA和蛋白表达水平,接着采用CCK-8法、克隆形成和BrdU实验检测细胞生长情况,采用Transwell小室实验检测细胞迁移能力,采用流式分析术检测细胞的周期和凋亡.结果显示:过表达INTS10可显著抑制HCC细胞的凋亡、生长和迁移能力,促进G1期细胞数量的增加,而敲低INTS10则呈现相反的表型.通过通路富集分析发现,周期相关通路被显著富集,过表达INTS10后,CDC25A和CDK4的mRNA和蛋白质水平显著减少,而CDKN1A的水平显著增加,敲低INTS10则呈现相反趋势.综上,本研究初步揭示了INTS10在HCC细胞中可能通过影响G1/S期相关蛋白质的表达而发挥抑癌基因的功能,为下一步更为深入的功能和机制研究提供了基础.

荧光定量PCR法检测不同状态下铜绿假单胞菌intⅠ1基因的表达

目的检测铜绿假单胞菌Ⅰ类整合酶基因(intⅠ1基因)在生物膜状态和浮游状态表达水平的差异,探讨整合子的作用机制。方法对3株Ⅰ类整合酶阳性的铜绿假单胞菌分别进行液相培养和生物膜细菌培养,常规方法提取3株细菌两种生长状态的总RNA。采用荧光定量PCR(FQ-PCR)法,以细菌的16srRNA为内参照,分别测定菌株SW07、R07和TH12的浮游细菌和生物膜细菌intⅠ1mRNA的相对表达量,比较3株菌在两种状态下intⅠ1mRNA的表达水平。结果3株铜绿假单菌的生物膜细菌和浮游细菌都检测到intⅠ1基因的表达。3株菌在两种状态下intⅠ1mRNA的表达量不同,生物膜细菌intⅠ1基因的表达水平较高,其中菌株R07、SW07和TH12的生物膜细菌intⅠ1mRNA的表达量分别较浮游细菌高1.4、5.7和128倍。结论在生物膜状态下,铜绿假单胞菌intⅠ1基因的表达上调,本实验结果提示整合子在生物膜细菌中可进行更加活跃的基因盒捕获和积累,整合子和细菌生物膜的形成是导致细菌对抗生素耐药的重要机制。

基因捕获元件int1和ISCR1在临床菌株中的分布及与细菌耐药性的关系研究

目的研究临床多种细菌中的Ⅰ型整合酶编码基因int1和ISCR1的分布情况,探究其与细菌多药耐药表型的关系。方法收集2011-2012年河北省某医院临床菌株,应用VITEK2COMPACT全自动微生物生化鉴定系统和16SrDNA序列分析进行种属鉴定,利用PCR方法进行int1基因和ISCR1筛查;两种可移动元件的携带情况和菌株的多药耐药表型之间的关系采用卡方检验进行统计计算。结果共收集临床菌株372株,包括325株革兰氏阴性菌和47株革兰氏阳性菌;int1基因和ISCR1在22种(属)175株和18种(属)90株革兰氏阴性细菌中检出,同时在17种(属)71株革兰氏阴性细菌中检出,革兰氏阳性细菌int1基因和ISCR1检测均为阴性;通过对数据分层对比,统计分析发现,在int1基因不存在时,ISCR1的存在与否与菌株是否为多药耐药的关系明显,差异有统计学意义(P<0.01),其存在亦能介导更广泛种类药物耐受,差异亦有统计学意义(P<0.01)。在int1基因存在时,ISCR1的存在能介导更广泛种类药物耐受,差异有统计学意义(P=0.02);在ISCR1不存在时,int1基因的存在与否与菌株是否多药耐药的关系明显,差异有统计学意义(P<0.01),其存在亦能介导更广泛种类药物耐受,差异亦具有统计学意义(P<0.01)。而在ISCR1存在的情况下,上述两种关系不明显。结论基因捕获元件int1基因及ISCR1在革兰氏阴性临床菌株中分布广泛,并与细菌的多重耐药、泛耐药明显相关,特别是ISCR1;应加强可移动元件int1基因或ISCR1流行状况的监测,为其在耐药基因捕获中的作用机制研究和控制多药耐药细菌在临床散播提供可靠的基础数据。

经皮冠状动脉介入对急性心肌梗死患者CXCL13、INTβ1表达的影响

目的分析静脉溶栓手术、经皮冠状动脉介入(PCI)两种方案治疗前后急性心肌梗死(AMI)患者血清中整合素(INT)β1、趋化因子(CXCL)13的变化及临床价值。方法 84例符合手术及溶栓标准的AMI患者中44例为手术组(PCI),余40例采取静脉内溶栓术为溶栓组,对照组选择30例具有非典型胸痛症状,其冠脉造影结果提示左右冠状动脉均未见异常,排除恶性肿瘤和肝肾功能异常者。观察3组超声心动检查、临床基本资料和一般情况及心功能情况、血清CXCL13与INTβ1变化。并在同时间对手术组与对照组进行Gensini评分评估。结果 3组基本病史、性别、年龄没有统计学差异(P>0.05);溶栓和手术组N末端B型利钠肽前体(NT-proBNP)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平与对照组有统计学差异(P<0.01);Gensini评分手术组与对照组差异显著(P<0.001),手术组和溶栓组NT-proBNP、LDL-C水平没有显著差异(P>0.05)。其他临床指标3组间无明显差异。入院时血清INTβ1在手术组和溶栓组较对照组显著增加,而入院后24 h表达较入院时显著减低,以手术组降低更明显;血清CXCL13在手术组和溶栓组入院时表达均明显低于对照组,而入院后24 h表达较入院时明显升高,尤以手术组增加显著(均P<0.05)。结论血清CXCL13、INTβ1表达可能共同作用于AMI发生与发展,且和心肌梗死范围大小有关。二者联合检测对心功能的结局预测有理论依据作用。

电力线OFDM通信处理器INT51X1及其应用开发

INT51X1是美国Intellon公司专为电力线OFDM通信推出的处理器,论述了它的功能结构及技术特点,并以该处理器为核心研究开发了中压配电网的OFDM电力通信系统。

IntⅠ1基因突变致鲍曼不动杆菌耐药性丢失

目的探究鲍曼不动杆菌耐药性丢失与基因组序列的相关性。方法临床分离78株鲍曼不动杆菌,按CLSI进行药敏性实验,以PCR方法对IntⅠ1、ADC基因进行检测,并选择部分菌株进行测序分析。结果 78株鲍曼不动杆菌中,有1株完全不耐药,而相关基因PCR检测的阳性率均为100%。基因测序分析表明,在这株耐药性丢失的鲍曼不动杆菌中,IntⅠ1基因均发生3处DNA突变。结论 IntⅠ1基因对于鲍曼不动杆菌耐药性起着重要作用,相关位点突变将导致耐药性丢失。

不同分期恶性肿瘤患者合并严重冠状动脉狭窄PCI术后CXCL13、INTβ1变化及远期预后

目的探讨不同分期恶性肿瘤患者合并严重冠状动脉狭窄经皮冠状动脉介入(PCI)术后趋化因子(CXCL)13、整合素(INT)β1变化及远期预后。方法收集186例恶性肿瘤合并严重冠状动脉狭窄行PCI手术患者的临床资料,患者手术前后均行血清CXCL13、INTβ1检测,出院后长期随访,专人对资料进行回顾性的整理分析。结果早中期与晚期恶性肿瘤患者在PCI术前时血清CXCL13、INTβ1水平比较差异无统计学意义(P>0.05),PCI术后3d CXCL13、INTβ1较术前下降,晚期患者高于早中期患者,比较差异有统计学意义(P<0.05);早中期与晚期恶性肿瘤患者主要终点事件发生率分别为33.68%、69.23%,次要终点事件发生率分别为55.79%、89.01%,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性显示:恶性肿瘤患者PCI术后CXCL13、INTβ1水平与患者终点事件发生率间呈正相关(P<0.05)。结论不同分期恶性肿瘤患者合并严重冠状动脉狭窄PCI术后CXCL13、INTβ1变化及远期预后存在差异,晚期恶性肿瘤患者在PCI术后预后更差,术后CXCL13、INTβ1变化在一定程度上能反应患者预后情况。

基于INT51X1内核的电力调制解调制器的设计与实现

介绍了一种基于INT51×1芯片的电力线通信系统设计。系统利用电力线网传输以太网数据,速率达到14Mbps。系统是以INT51×1为核心芯片,同时外围芯片采用93C46,AT89C51,AT8989UP/ADM8511。电力线通信系统具有较高的可靠性,为家庭网络的实现提供了新的方法。

基于INT51 X1芯片的调制技术在10kV配电网自动化通信系统中的应用

在10kV电力线上实现高速数据传输有着广阔的应用前景和经济价值,但是由于电力线信道存在着不可预期的高噪声、多径效应和信道衰落,严重制约了高速数据的传输。而近几年兴起的无线信道上实现高速数据传输的新技术,即OFDM(多载波正交频分复用)技术,是解决这些电力线通信问题的有效方法,文中提出了一种基于美国Intellon公司的INT51X1电力通信专用芯片并结合台湾Winbond公司32位ARM7TDMI内核的RISC微处理器W90N740的PLC通信系统的设计。

以INT51X1为核心的低压电力网载波调制解调器及其实现技术

根据中国接入网的现状,提出了一个以电力线通信(PLC)作为接入方式的拓扑结构。在对电力线信道模型分析的基础上,介绍了基于低压电力网数字通信的几种常见方式。最后以正交频分复用的原理与应用为例,具体阐述了以INT51X1芯片为核心的高速电力线接入设备的设计方案。

电力线MAC/PHY集成收发器INT51X1及其应用

介绍了美国Intellon公司的电力线MAC/PHY集成收发器INT51X1的功能结构和主要特点 ,介绍了它的引脚功能 ,同时以中压配电网OFDM通信系统的研究开发为例 ,给出了INT51XI的应用实例。

定时中断INT1CH的应用

通过在ＰＣ机上开发的定时监控、显示系统，部析了ＲＯＭＢＩＯＳ中ＩＮＴ１ＣＨ的定时原理；

新生儿缺氧缺血性脑病血清半胱氨酸蛋白酶-1、白细胞介素-1β、-18测定的意义

目的 探讨新生儿缺氧缺血性脑病 (HIE)血清半胱氨酸蛋白酶 1(caspase 1)、IL 1β、IL 18的变化及其与脑组织损伤程度的关系。方法 采用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测HIE患儿 70例 (分轻、中、重 3组 )及正常对照组 2 2例新生儿d3血清cas pase 1、IL 1β和IL 18的水平。结果 1.与对照组比较 ,HIE各组血清caspase 1水平均显著增高 (P分别 <0 .0 5 ,<0 .0 1,<0 .0 1) ;HIE组间两两比较 ,中度与轻度组比较有显著差异 (P <0 .0 1) ;重度组与其他两组比较血清caspase 1水平均显著升高 (P <0 .0 1)。2 .HIE组血清IL 1β、IL 18与对照组比较 ,中、重度HIE组均显著增高 (P <0 .0 1) ;轻度HIE组与对照组无显著差异 (P >0 .0 5 )。HIE组间血清IL 1β、IL 18两两比较 ,中度与轻度组比较有显著差异 (P <0 .0 5 ) ;重度组与其他两组比较均显著升高 (P均 <0 .0 1)。 3 .血清caspase 1与IL 1β及IL 18均呈显著正相关 (γ =0 .793 4 P <0 .0 0 0 1;γ =0 .6677,P <0 .0 1)。结论 血清caspase 1、IL 1β和IL 18测定有助于HIE的早期诊断及临床分度。

半胱氨酰白三烯受体-1在大鼠肠缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨半胱氨酰白三烯受体1(cysteinyl leukotrienes receptor,CysLTsR1)在肠缺血再灌注(intestinal ischemia-reperfusion,I/R)损伤中的可能作用.方法:以I/R大鼠肠I/R损伤模型为研究对象,并运用不同剂量CysLTsR1拮抗剂孟鲁司特(0.2、2和20 mg/kg)加以干预,通过免疫组织化学染色方法和RT-PCR法检测大鼠肠组织CysLTsR1蛋白和mRNA表达水平,并应用光学显微镜观察小肠病理改变、检测小肠质量变化、确定CysLTsR1拮抗剂孟鲁司特对小肠的炎症程度的影响.结果:肠I/R可造成肠组织损伤,小肠含水量增加(模型组78.13 g±1.35 g vs正常组78.13 g±1.35 g,P<0.05),肠I/R时肠组织CysLTsR1蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05);应用孟鲁司特后,小肠含水量降低(低、中、高剂量组分别为76.47 g±1.48 g、72.67 g±5.35 g及75.39 g±3.66 g),肠组织损伤减轻,肠组织CysLTsR1蛋白表达和mRNA表达水平均减低(P<0.05).结论:CysLTsR1参与了肠I/R损伤的形成,孟鲁司特可以减轻肠I/R对肠组织的损伤,CysLTsR1是保护肠I/R损伤的新的作用靶点.

“1+X”证书制度下数控技术书证融通路径探究

“1+X”证书制度在数控技术专业的试点实施,是推动新时期复合型技术技能人才高质量培养的重要路径.数控技术专业试行“1+X”证书制度时应始终遵循新时代职业教育的四个坚持原则,突出成果导向和问题导向原则,坚持书证融通和育训并重,以“X”证书等级标准为核心,重构数控技术课程体系,将模块化的核心职业技能映射融入到学历课程教学内容中,完善书证融通的综合评价体系,提升书证融通课程教学质量,完善和强化“X”证书考评过程中的要素保障,打造复合型技术技能人才高质量培养新高地.

羟基异吲哚酮类衍生物与HIV-1整合酶的分子模拟研究

为了研究羟基异吲哚酮类衍生物与HIV-1整合酶识别的机制以及构象变化,采用Auto Dock对58个羟基异吲哚酮类衍生物与整合酶进行了分子对接,并对抑制HIV-1整合酶活性较好的两个化合物所形成的复合物模型分别进行了16 ns的分子动力学模拟。基于对接复合物模型分析给出了化合物与整合酶结合的主要作用力,通过分析氢键以及构象的变化,发现氨基酸残基N155与D64之间的氢键是维持整合酶催化活性所必需的DDE基序结构稳定的关键。另外,氨基酸残基Y143所在的loop区与羟基异吲哚酮类衍生物之间的疏水作用力在受体-配体识别的过程中具有重要的作用。

鲍曼不动杆菌中耐消毒剂基因qacEΔ1-sul1和Ⅰ类整合酶的携带情况调查

目的调查分析我院临床分离的鲍曼不动杆菌菌株中耐药基因的分布情况及部分多重耐药株的流行病学特点。方法收集2016年1~6月我院院内分离的150株鲍曼不动杆菌,MIC法测定其对抗生素的敏感性;将对三类以上抗生素耐药的菌株定义为多重耐药菌,运用PCR法检测qac EΔ1-sul1和int I 1基因在所分离菌株中的分布,并用PFGE法对其中多重耐药鲍曼不动杆菌进行分子分型。结果鲍曼不动杆菌敏感率排行前三的药物为妥布霉素(50.0%)、庆大霉素(44.2%)和亚胺培南(42.4%);84株多重耐药鲍曼不动杆菌中排行前三的药物为美罗培南(33.3%)、头孢哌酮(33.3%)和左氧氟沙星(13.1%);qac EΔ1-sul1和int I 1在鲍曼不动杆菌中的携带率为46.2%(85/150)和58.0%(88/150);在多重耐药鲍曼不动杆菌中的携带率为59.5%(49/84)和83.4%(70/84)。多重耐药鲍曼不动杆菌经PFGE分型可分为14个克隆,其中A克隆最多见,在ICU、呼吸科和急诊病房均存在集中流行,神经内科和老年科以C克隆多见,其余均为散在流行。结论 qac EΔ1-sul1和int I 1在鲍曼不动杆菌中的携带率很高,在多重耐药株中更高,说明I类整合子是鲍曼不动杆菌产生耐药的原因之一,研发新的消毒剂以消除鲍曼不动杆菌在院内的流行迫在眉睫,此外同一克隆株在同一病区的集中流行和在病区间的交叉流行提示应采取进一步的感染控制和隔离措施。

PPARγ/PGC-1的抗氧化作用与支气管哮喘

氧化/抗氧化失衡是支气管哮喘的重要发病机制之一。过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)是核激素受体超家族成员之一,PPARγ协同刺激因子-1(PGC-1)是一种近年来发现的PPARγ的转录协同刺激因子,活化的PPARγ/PGC-1通过诱导抗氧化酶表达,去除氧化剂,在哮喘中起重要的抗氧化作用。

撒坝猪源E.coli高致病性毒力岛通过NLRP3/ASC/Caspase-1途径诱导IPEC-J2细胞焦亡

旨在研究撒坝猪源E.coli高致病性毒力岛(highly pathogenic virulence island,HPI)诱导IPEC-J2细胞焦亡的机制,本研究以LPS+ATP为阳性对照,将实验室前期筛选的E.coli HPI及通过CRISPR/Cas9基因敲除技术构建完成的E.coliΔHPI感染IPEC-J2细胞,观察细胞损伤情况;RT-qPCR测定各组作用0.5、3、6、9、12 h后细胞内焦亡通路中关键因子NOD样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、胱天蛋白酶-1(caspase-1)、消皮素D(gasderminD,GSDMD)及炎性因子白介素-18(IL-18)、白介素-1β(IL-1β)的mRNA转录水平;激光共聚焦观察NLRP3/Caspase-1炎性复合体组装及表达情况;Western blot测定GSDMD及其活化形式GSDMD-N蛋白表达水平,PI染色检测胞膜完整性。结果表明:LPS+ATP处理显著促进细胞焦亡的发生,阴性对照组细胞正常生长、轮廓清晰,E.coli感染组及LPS+ATP组细胞出现变形、脱落、边界模糊等明显细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),且HE染色显示,E.coliHPI感染相较于E.coliΔHPI感染对细胞的损伤更严重;E.coli HPI组中的焦亡通路关键因子及炎性因子mRNA水平在3~9 h均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于E.coliΔHPI组;NLRP3/Caspase-1炎性复合体在细胞质中发生组装,且E.coli HPI组NLRP3/Caspase-1蛋白荧光强度、GSDMD、GSDMD-N蛋白表达水平及PI染色阳性率均极显著(P<0.01)高于E.coliΔHPI组;E.coli HPI组的CPE、HE染色、焦亡通路关键因子及炎性因子mRNA水平、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达量、NLRP3/Caspase-1共定位情况均与LPS+ATP组相似。结果提示,撒坝猪源E.coliHPI通过上调NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路中关键因子mRNA水平,诱导NLRP3/Caspase-1炎性复合体的组装,促进焦亡标志蛋白GSDMD及GSDMD-N的表达,并对IPEC-J2细胞膜进行打孔,从而诱导细胞发生焦亡。