神经胶质瘤患者术前血清NLRP3、ILs表达水平对预后的影响研究

目的研究术前NLR家族Pyrin域蛋白3(NLR family pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)、白细胞介素(Interleukin,ILs)表达谱特征对神经胶质瘤患者手术预后的影响。方法以2019年1月-2022年12月新疆医科大学第二附属医院神经外科收治的86例神经胶质瘤患者为研究对象,根据患者术后1年内随访情况将患者划分为手术预后良好组(n=52)和手术预后不良组(n=34)。对比两组患者一般临床资料及术前NLRP3、ILs(IL-1β、IL-4、IL-12、IL-17、IL-33)表达谱的表达水平差异。采用Spearman相关性分析,经单因素及多因素Logistic回归分析筛选神经胶质瘤患者手术预后不良的危险因素,通过受试者工作特征(Receiver operating characteristic,ROC)曲线评价各危险因素对患者手术预后的影响。结果与手术预后良好组比较,手术预后不良组患者肿瘤大小、肿瘤周围水肿患者比例、合并癫痫发作史患者比例、血清NLRP3、IL-1β、IL-4、IL-33水平均升高,术前卡氏功能状态评分、血清IL-12水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析结果表明,肿瘤大小、肿瘤周围水肿、有癫痫发作史、血清中NLRP3、IL-1β、IL-4、IL-33水平均与手术预后不良呈正相关性,卡氏功能状态评分、IL-12与手术预后不良呈负相关性(P<0.05);单因素及多因素Logistic回归分析表明血清中NLRP3、IL-1β、IL-4水平均是神经胶质瘤患者手术预后不良的重要危险因素,IL-12是神经胶质瘤患者手术预后不良的重要保护因素(P<0.05);ROC曲线分析表明NLRP3、IL-1β、IL-4、IL-12独立及联合对于神经胶质瘤患者手术预后不良均具有较高预测效能(P<0.05)。结论神经胶质瘤患者NLRP3、ILs水平较高均是手术预后不良的重要危险因素,通过早期干预减轻神经胶质瘤患者炎症水平可能有利于改善手术治疗效果。

肿瘤坏死因子受体相关因子3水平与急性胰腺炎病人病情严重程度及预后的相关性研究

目的分析肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)水平与急性胰腺炎病人病情严重程度及预后的相关性。方法前瞻性选取2021年9月至2022年10月在河北省沧州中西医结合医院诊治的165例急性胰腺炎病人为观察组,及同期该院160例健康体检志愿者为对照组。根据临床病重程度将病人分为轻症急性胰腺炎组60例、中重症急性胰腺炎组40例、重症急性胰腺炎组65例。根据急性胰腺炎病人入院28 d的生存情况分为生存组125例和死亡组40例。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清TRAF3、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;Spearman法分析急性胰腺炎病人血清TRAF3水平与急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ(APACHEⅡ)的相关性;对血清TRAF3水平与IL-6、TNF-α、肠道气体容积积分(GVS)的相关性进行Pearson法分析;对影响急性胰腺炎病人预后的因素进行logistic回归分析;受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清TRAF3水平对急性胰腺炎病人预后的预测价值。结果与对照组(31.42±6.78)ng/L相比,轻症(56.18±9.34)ng/L、中重症(74.45±10.87)ng/L、重症急性胰腺炎组(86.42±11.05)ng/L病人血清TRAF3水平随着危重程度的增加依次显著升高(P<0.05),病情越严重,身体质量指数(BMI)、IL-6、TNF-α、肠道GVS、APACHEⅡ评分越高(P<0.05);急性胰腺炎病人血清TRAF3水平与IL-6、TNF-α、肠道GVS、APACHEⅡ评分均呈正相关(r=0.65、0.64、0.41、0.69,均P<0.05)。与生存组相比,死亡组BMI、IL-6、TNF-α、肠道 GVS、APACHEⅡ评分、TRAF3水平[(87.25±10.52)ng/L比(67.81±10.34)ng/L]明显升高(P<0.05)。BMI、IL-6、TNF-α、 肠道 GVS、APACHEⅡ评分、TRAF3是影响急性胰腺炎病人预后的危险因素(P<0.05)。血清 TRAF3预测急性胰腺炎病人预后 的曲线下面积(AUC)为 0.91,截断值为 75.30 ng/L。结论 急性胰腺炎病人血清 TRAF3水平升高,与病人病情严重程度及预后 密切相关。

纤维介素2在卵巢癌中的表达及其对SKOV3细胞生物学特性的影响

目的 探讨纤维介素2(FGL2)在上皮性卵巢癌中的表达情况及其对人卵巢癌SKOV3细胞生物学特性的影响及相关机制。方法 (1)取2018年7月—2020年5月在河北省人民医院行手术治疗的40例浆液性卵巢癌以及16例卵巢浆液性囊腺瘤患者的切除组织标本,免疫组化法检测组织标本中FGL2蛋白表达情况。(2)取SKOV3细胞,实验设空白组、FGL2 siRNA转染组和阴性对照siRNA组,采用Western blot法检测细胞中FGL2蛋白表达情况,以确定FGL2 siRNA转染效率;后续通过CCK-8法以及Transwell实验检测FGL2 siRNA转染组和阴性对照siRNA组SKOV3细胞增殖、侵袭及迁移能力,Western blot法检测细胞中白细胞介素-6(IL-6)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)蛋白表达情况,观察沉默FGL2对SKOV3细胞增殖、侵袭及迁移能力和IL-6/STAT3信号通路的影响。结果 浆液性卵巢癌患者组织标本中FGL2蛋白高表达率明显高于卵巢浆液性囊腺瘤患者[80.0%(32/40)比37.5%(6/16),P<0.05]。FGL2 siRNA转染组FGL2蛋白相对表达量明显低于阴性对照siRNA组(P<0.05);FGL2 siRNA转染组转染后48 h、72 h、96 h、120 h的SKOV3细胞增殖活性均明显低于同期阴性对照siRNA组(P均<0.05);Transwell加基质胶侵袭实验和不加基质胶迁移实验显示FGL2 siRNA转染组穿膜细胞数均明显少于阴性对照siRNA组(P均<0.05);FGL2 siRNA组IL-6和p-STAT3蛋白相对表达量均明显低于阴性对照siRNA组(P均<0.05)。结论 卵巢癌组织中存在FGL2高表达,沉默FGL2抑制IL-6/STAT3信号通路的活性可影响卵巢癌细胞的生物学特性,推测FGL2可作为卵巢癌诊治的靶点之一。

NOS3、IL-1β基因多态性与不明原因复发性流产相关性的研究进展

不明原因复发性流产(URSA)是妇产科中最常见的妊娠并发症之一,给患者身心和家庭造成严重的负面影响,是育龄期女性生殖健康的一大威胁。其病因及发病机制不清,尚无有效的防治措施,是当前生殖健康领域的一大难点。有研究表明一氧化氮合酶3(NOS3)、白介素-1β(IL-1β)基因的相关功能区单核苷酸多态性(SNP)与URSA疾病相关,但文献结果并不一致。本文就NOS3、IL-1β基因多态性与URSA相关性的研究进展进行综述。

化瘀止痛贴膏调节IL-6/STAT3信号通路对急性软组织损伤大鼠炎症反应的影响

目的探讨化瘀止痛贴膏调节白细胞介素-6(IL-6)/信号转导与转录激活子3(STAT3)信号通路对急性软组织损伤(ASTI)大鼠炎症反应的影响。方法将SPF级SD大鼠随机分为对照组、模型组、化瘀止痛贴膏低、中、高剂量组、精制狗皮膏组。利用机械冲击挫伤法建立ASTI动物模型,建模成功后,各组贴敷相应药物,1次/d,每次给药8 h,连续7 d。对大鼠进行ASTI损伤评分;采用血液流变检测仪检测血液流变学指标;苏木精和伊红(HE)染色法观察大鼠损伤部位肌肉组织病理变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠损伤部位肌肉组织中IL-6、IL-β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测损伤部位肌肉组织中IL-6与STAT3 mRNA表达;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠损伤部位肌肉组织中IL-6/STAT3信号通路蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠软组织损伤评分、全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、肌肉组织病理学评分、IL-6、IL-β、TNF-α水平、IL-6与STAT3 mRNA表达水平及IL-6、p-STAT3/STAT3蛋白表达水平升高(均P<0.05);与模型组比较,化瘀止痛贴膏低、中、高剂量组和狗皮膏药组大鼠软组织损伤评分、全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、肌肉组织病理学评分、IL-6、IL-β、TNF-α水平、IL-6与STAT3 mRNA表达水平及IL-6、p-STAT3/STAT3蛋白表达水平降低(均P<0.05);化瘀止痛贴膏高剂量组与精制狗皮膏组大鼠以上指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论化瘀止痛贴膏可能通过下调IL-6/STAT3信号通路缓解ASTI大鼠的炎症反应。

IL-35、Beclin-1在乳腺癌患者外周血中的水平及意义

目的探讨白细胞介素(IL)-35、自噬相关蛋白Beclin-1在乳腺癌患者外周血中的水平及意义。方法选取2022年5-10月在上海市嘉定区妇幼保健院诊治的原发性乳腺癌女性患者44例(乳腺癌组)、乳腺良性肿瘤女性患者40例(乳腺良性肿瘤组)及体检的健康者40例(健康对照组)作为研究对象。采用酶联免疫吸附试验检测并比较各组外周血中IL-35和Beclin-1水平,同时检测乳腺癌患者糖类抗原15-3(CA15-3),比较不同临床病理特征的乳腺癌患者IL-35、Beclin-1、CA15-3水平;分析乳腺癌患者外周血IL-35、Beclin-1、CA15-3水平之间的相关性。结果乳腺癌组和乳腺良性肿瘤组外周血IL-35水平均高于健康对照组(P<0.05),Beclin-1水平均低于健康对照组(P<0.05)。乳腺癌组外周血IL-35水平高于乳腺良性肿瘤组(P<0.05),Beclin-1水平低于乳腺良性肿瘤组(P<0.05)。不同病理分级、淋巴结转移情况的乳腺癌患者外周血IL-35、Beclin-1水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);不同雌激素受体(ER)检测结果的乳腺癌患者外周血IL-35水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),而Beclin-1水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌患者外周血IL-35水平与Beclin-1水平呈负相关(r=-0.484,P<0.05);IL-35、Beclin-1水平与CA15-3水平均无相关性(均P>0.05)。结论乳腺癌患者外周血IL-35水平升高、Beclin-1水平降低。不同病理分级、淋巴结转移情况的乳腺癌患者外周血IL-35、Beclin-1水平有明显差异。乳腺癌患者外周血IL-35水平与Beclin-1水平呈负相关,而IL-35、Beclin-1水平与肿瘤标志物CA15-3水平均无关。

血清IL-35 CCL19水平与系统性红斑狼疮患儿免疫学指标的相关性研究

目的:观察系统性红斑狼疮(SLE)患儿血清白介素-35(IL-35)、C-C基序趋化因子配体19(CCL19)变化情况,并分析其与患儿免疫学指标的关联性。方法:纳入2022年1月至2024年3月本院收治的SLE患儿97例,并同期选取97例健康儿童进行对照研究,观察患儿血清IL-35、CCL19水平变化,并分析其与免疫学指标(包括抗ds-DNA抗体、免疫球蛋白(Ig)及补体C3、C4)的相关性。结果:与健康儿童相比,SLE患儿血清IL-35水平明显较低,CCL19水平明显较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与非活动期SLE患儿相比,活动期SLE患儿血清IL-35、C3、C4水平明显较低,CCL19、抗ds-DNA抗体、IgM、IgG、IgA水平明显较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示:SLE患儿血清IL-35水平与抗ds-DNA抗体、IgM、IgG、IgA水平成负相关性,与C3、C4水平成正相关,差异均有统计学意义(r=-0.314、-0.203、-0.301、-0.201、0.318、0.383,P<0.05);SLE患儿血清CCL19水平与抗ds-DNA抗体、IgM、IgG、IgA水平成正相关性,与C3、C4水平成负相关差异均有统计学意义(r=0.272、0.209、0.362、0.202、-0.219、-0.391,P<0.05)。线性回归显示:SLE患儿抗ds-DNA抗体与IL-35水平存在负向影响关系,差异有统计学意义(P<0.05),C3则与IL-35水平存在正向影响关系,差异有统计学意义(P<0.05);SLE患儿IgG与CCL19水平存在正向影响关系,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SLE患儿血清IL-35、CCL19水平异常变化,与抗ds-DNA抗体、IgM、IgG、IgA水平存在一定的相关性,其中抗ds-DNA抗体、C3与IL-35,IgG与CCL19间存在一定的影响关系。

嘎木珠尔灌肠通过对IL-6/STAT3信号通路的调节而改善结肠炎模型大鼠的结肠炎症

目的:观察嘎木珠尔灌肠对结肠炎模型大鼠结肠病变的影响;并研究其对IL-6/STAT3信号通路的调节作用。方法:40只大鼠被随机分组;空白组、造模组、柳氮磺吡啶组及嘎木珠尔组,每组10只。以乙醇/TNBS灌肠造模后分别以生理盐水、柳氮磺吡啶及嘎木珠尔灌肠。14天后对结肠大体形态及结肠病理切片进行观察,免疫组化分析结肠IL-6及STAT3的表达。结果:造模后结肠大体评分及组织病理评分均显著增高(P均<0.01);结肠IL-6及STAT3阳性染色细胞数量均显著增多(P均<0.01)。经柳氮磺吡啶及嘎木珠尔治疗后结肠大体评分均明显降低(P<0.01、P<0.05);结肠组织病理评分均显著降低(P均<0.01);结肠IL-6及STAT3阳性染色细胞数均显著减少(P均<0.01)。结论:嘎木珠尔灌肠能减轻结肠炎模型大鼠的结肠炎症,并可改善其病理结构的破坏。其可能通过对IL-6/STAT3信号通路下调而发挥作用。

NLRP3炎症小体的激活在骨关节疾病中的研究进展

炎症是对多种刺激的关键反应,细胞因子等炎症分子在包括骨和关节疾病在内的多种疾病的发病机制中发挥核心作用。促炎性细胞因子主要由免疫细胞产生,介导炎症和先天免疫反应。炎症小体是新近公认的先天免疫的重要参与者。最典型的是NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体,NLRP3检测外源性致病性侵袭和内源性细胞损伤,并通过形成NLRP3炎症小体做出反应。NLRP3炎症小体的3个主要成分是NLRP3(捕获危险信号并募集下游分子)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1[caspase-1,引起细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-18的成熟以介导细胞因子释放和焦亡]和含有半胱天冬酶募集结构域的细胞凋亡相关斑点样蛋白(ASC,是连接NLRP3和caspase-1的桥梁)。此外,促炎性细胞因子加速骨吸收和软骨破坏,导致骨和关节组织破坏。因此,促炎性细胞因子参与调节骨和关节疾病的发病机制。该文综述了近年来关于NLRP3炎症小体在骨关节疾病中激活和功能等方面的研究进展。

神经肌肉电刺激通过调控白细胞介素6/信号转导子及转录激活子3信号通路促进脊髓损伤后小鼠运动功能恢复

目的观察神经肌肉电刺激(NMES)对脊髓损伤后小鼠白细胞介素6(IL-6)/STAT3信号通路的影响,探讨其对运动功能恢复的机制。方法选取SPF级小鼠72只随机分成假手术(sham)组、脊髓损伤组(SCI)和NMES组。利用BMS评分、斜坡实验与电生理(EMG)评估小鼠脊髓损伤后肢体运动恢复情况。Western blotting和Real-time PCR检测各组小鼠脊髓组织中相关炎症因子、IL-6/STAT3信号通路与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。HE染色观察各组小鼠脊髓形态结构。结果NMES组BMS评分和小鼠斜坡实验均高于SCI组(P<0.05);NMES组小鼠运动诱发电位(MEP)最大振幅高于SCI组(P<0.05);NMES组脊髓组织TNF-α、IL-12A与GFAP表达量均低于SCI组(P<0.05),TGF-β、IL-10与BDNF表达量均高于SCI组(P<0.05);与SCI组相比,NMES组小鼠脊髓空洞较少,脊髓形态修复较好;与SCI组相比,NMES组IL-6/STAT3信号通路蛋白表达均低于SCI组(P<0.05)。结论神经肌肉电刺激通过抑制IL-6/STAT3信号通路发挥抗炎作用,从而促进脊髓损伤后小鼠后肢运动功能的恢复。

椎间盘退变程度与髓核中miRNA-142-3p、混合谱系激酶3及白细胞介素1β的相关性

背景:研究表明,miRNA水平与椎间盘细胞的凋亡和增殖、细胞外基质代谢和炎症反应密切相关,而miR-142-3p在椎间盘退变中的具体作用尚不清楚。目的:探讨人腰椎间盘髓核组织中miRNA-142-3p、混合谱系激酶3、白细胞介素1β表达与椎间盘退变程度的相关性。方法:选择2020年1月至2022年3月在苏州市第九人民医院因腰椎间盘退行性疾病而行手术的患者82例,术前均行MRI检查,根据Videman分级标准将患者分为轻度退变组(n=36)、中度退变组(n=26)和重度退变组(n=20),获取82份髓核组织标本,检测各组髓核组织中miRNA-142-3p、混合谱系激酶3、白细胞介素1β、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原的基因表达,以及混合谱系激酶3、白细胞介素1β、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原的蛋白表达,采用Spearman相关系数法评估miRNA-142-3p、混合谱系激酶3、白细胞介素β表达与腰椎间盘退变程度的相关性。采用随机数字表法将30只成年SD大鼠分为假手术组(仅穿刺皮肤与肌肉后处死)、轻度退变组(穿刺Co7/8椎间盘1周后处死)与重度退变组(穿刺Co7/8椎间盘2周后处死),每组10只,检测各组髓核组织中混合谱系激酶3、白细胞介素1β的蛋白表达,以及miRNA-142-3p、混合谱系激酶3、白细胞介素1β的基因表达。结果与结论:①人髓核组织:miRNA-142-3p的表达由高到低的顺序为轻度退变组>中度退变组>重度退变组(P<0.05),混合谱系激酶3、白细胞介素1β基因与蛋白表达由低到高的顺序为:轻度退变组<中度退变组<重度退变组(P<0.05),Ⅰ型胶原基因与蛋白表达由低到高的顺序为:轻度退变组<中度退变组<重度退变组(P<0.05),Ⅱ型胶原基因与蛋白表达由高到低的顺序为:轻度退变组>中度退变组>重度退变组的趋势(P<0.05);Spearman相关分析显示,椎间盘退变程度与miRNA-142-3p表达呈负相关(P<0.05),与混合谱系激酶3、白细胞介素1β表达呈正相关(P<0.05);②大鼠髓核组织:与假手术组比较,轻度退变组髓核组织中混合谱系激酶3、白细胞介素1β基因与蛋白表达升高(P<0.05),miRNA-142-3p表达降低(P<0.05);与轻度退变组比较,重度退变组髓核组织中混合谱系激酶3、白细胞介素1β基因与蛋白表达升高(P<0.05),miRNA-142-3p表达降低(P<0.05);③结果表明,人腰椎间盘退变程度与髓核组织中miRNA-142-3p表达呈负相关,与混合谱系激酶3和白细胞介素1β表达呈正相关。

NLRP3炎症小体在人骨关节炎软骨中的表达及作用

目的探究NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体在人骨关节炎(OA)软骨中的表达及作用。方法收集OA病人软骨30例和正常软骨10例,采用逆转录实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测NLRP3炎症小体组分NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)及炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)mRNA的表达,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测NLRP3、ASC、caspase-1蛋白的表达,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测IL-1β蛋白的表达。结果OA组软骨组织内NLRP3、ASC、caspase-1在mRNA水平和蛋白水平上均较正常软骨组显著升高,差异具有统计学意义(t=4.042~6.704,P<0.001)。OA组软骨组织中IL-1β的mRNA和蛋白水平均较正常软骨组显著升高,差异具有统计学意义(t=4.826、6.144,P<0.001)。结论OA软骨中NLRP3炎症小体组分表达升高以及IL-1β含量增加,参与了OA关节软骨炎症环境的形成。

血清NLRP3、IL-18水平与多囊卵巢综合征患者不孕的关系

目的 探讨血清NOD样受体蛋白3(NLRP3)、白细胞介素-18(IL-18)水平与多囊卵巢综合征不孕的相关性。方法 选取2020年3月—2023年3月南开大学附属妇产医院和天津市第一中心医院收治的294例多囊卵巢综合征不孕患者作为研究组,280例输卵管异常、子宫内膜异位症等导致的不孕患者作为对照组。比较两组患者的临床资料;采用酶联免疫吸附试验检测血清NLRP3、IL-18水平;采用多因素逐步Logistic回归模型分析多囊卵巢综合征患者不孕的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清NLRP3、IL-18预测多囊卵巢综合征患者不孕的价值。结果 两组的年龄、不孕时间、吸烟、饮酒、收缩压、舒张压、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、卵泡刺激素比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。研究组体质量指数(BMI)、甘油三酯、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、促黄体生成素及转铁蛋白均高于对照组(P<0.05)。研究组血清NLRP3、IL-18水平均高于对照组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,血清NLRP3[OR=4.293(95%CI:1.941,9.495)],血清IL-18[OR=4.104(95%CI:1.770,9.515)],HOMA-IR[OR=3.404(95%CI:1.477,7.846)],BMI[OR=3.391(95%CI:1.542,7.455)]是PCOS患者不孕的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清IL-18、NLRP3及两者联合预测PCOS患者不孕的曲线下面积分别为0.748(95%CI:0.698,0.801)、0.844(95%CI:0.796,0.894)、0.905(95%CI:0.855,0.950);血清IL-18、NLRP3及两者联合预测PCOS患者不孕的敏感性分别为66.32%(95%CI:0.572,0.746)、79.39%(95%CI:0.713,0.857)、88.53%(95%CI:0.844,0.934);血清IL-18、NLRP3及两者联合预测PCOS患者不孕的特异性分别为70.68%(95%CI:0.623,0.799)、73.28%(95%CI:0.656,0.827)、86.32%(95%CI:0.830,0.908)。结论 血清NLRP3、IL-18水平升高与多囊卵巢综合征患者不孕密切相关,可作为预测多囊卵巢综合征患者不孕的生物学指标。

基于IL-6/STAT3信号通路探讨miR-34a-5p过表达对溃疡性结肠炎的影响及小檗碱的干预作用

目的基于白细胞介素6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路探讨微小RNA-34a-5p(miR-34a-5p)过表达对溃疡性结肠炎(UC)的影响及小檗碱(BBR)的干预作用。方法体外传代培养人结肠癌HT-29细胞。取传3代、对数生长期、生长状态良好的HT-29细胞,随机分为空白对照组、NC mimics组、miR-34a-5p mimics组,NC mimics组和miR-34a-5p mimics组分别转染NC mimics、miR-34a-5p mimics,空白对照组不予转染。转染6 h更换新鲜培养基继续培养48 h,收集细胞,采用RT-qPCR法验证转染效率。收集三组转染后细胞,采用CCK-8法检测细胞活力;分离三组培养上清液,采用ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-α含量;收集三组转染后细胞,分别采用RT-qPCR法、Western blotting法检测IL-6、STAT3 mRNA和蛋白表达。取HT-29细胞,加入LPS刺激48 h,建立UC细胞模型。取UC细胞,分别加入0、2.5、5、10、20、40、80、160、320μg/mL BBR干预24 h,采用CCK-8法检测细胞活力。随机将UC细胞分为模型组和BBR组,BBR组予BBR干预24 h,模型组不予BBR干预。分离两组培养上清液,采用ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-α含量;取两组干预24 h细胞,采用RT-qPCR法检测miR-34a-5p以及IL-6、STAT3mRNA表达。结果miR-34a-5p mimics组miR-34a-5p相对表达量高于NC mimics组和空白对照组(P均<0.05),NC mimics组与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。miR-34a-5p mimics组细胞活力低于NC mimics组和空白对照组(P均<0.05),NC mimics组与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。miR-34a-5p mimics组培养上清液IL-6、IL-1β、TNF-α含量均低于NC mimics组和空白对照组(P均<0.05),NC mimics组与空白对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。miR-34a-5p mimics组IL-6、STAT3 mRNA以及IL-6蛋白相对表达量均低于NC mimics组和空白对照组(P均<0.05),NC mimics组与空白对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。40、80、160、320μg/mL BBR干预24 h UC细胞活力均高于0、2.5、5、10、20μg/mL BBR干预24 h UC细胞(P均<0.05),故选择20μg/mL BBR进行后续实验。BBR组培养上清液IL-6、IL-1β、TNF-α含量均低于模型组(P均<0.05);BBR组miR-34a-5p相对表达量高于模型组,IL-6、STAT3 mRNA相对表达量均低于模型组(P均<0.05)。结论miR-34a-5p过表达能够通过抑制IL-6/STAT3信号通路减轻UC炎症反应;BBR则能通过上调miR-34a-5p表达和抑制IL-6/STAT3信号通路,减轻UC炎症反应,阻延UC癌变。

脓毒症相关急性肾损伤患者血清NLRP3、IL-17表达水平与肾功能、肾脏预后的关系

目的 探讨脓毒症相关急性肾损伤(AKI)患者血清NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、白介素-17(IL-17)表达水平与肾功能、肾脏预后的关系。方法 选取2021年1月至2023年12月承德医学院附属医院收治的120例脓毒症患者为单纯脓毒症组,另外选取102例脓毒症相关AKI患者为AKI组。连续随访28 d,根据AKI组肾脏预后情况分为预后良好组(n=83)和预后不良组(n=19)。采用Pearson相关分析探讨脓毒症相关AKI患者血清NLRP3、IL-17水平与肾功能相关指标的相关性;采用受试者工作特性(ROC)曲线评估血清NLRP3、IL-17对脓毒症相关AKI患者肾脏预后的预测价值。结果 AKI组血清NLRP3、IL-17水平高于单纯脓毒症组,差异有统计学意义(P<0.05)。AKI组血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、血尿酸(UA)高于单纯脓毒症组,肾小球滤过率(eGFR)低于单纯脓毒症组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,脓毒症相关AKI患者血清NLRP3、IL-17水平与Scr、BUN、UA均呈正相关,与eGFR呈负相关(P<0.05)。预后不良组血清NLRP3、IL-17水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清NLRP3、IL-17及二者联合预测脓毒症相关AKI患者肾脏预后的曲线下面积(AUC)分别为0.859、0.770、0.906。结论 血清NLRP3、IL-17水平升高与脓毒症相关AKI患者肾功能显著相关,两指标有望作为预测患者肾脏预后的潜在生物标记物。

血清白细胞介素1β、半胱胺酸天冬氨酸蛋白水解酶3水平与颅内动脉瘤患者术后发生脑血管痉挛的关系

目的探讨血清白细胞介素1β(IL-1β)、半胱胺酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)水平与颅内动脉瘤患者术后发生脑血管痉挛的关系。方法选取2020年1月至2022年1月于北京市平谷区医院及首都医科大学附属北京天坛医院拟行介入栓塞术手术治疗的80例颅内动脉瘤患者,根据术后脑血管痉挛发生情况将其分为发生组(n=33)和未发生组(n=47)。收集所有患者的基线资料,记录所有患者的实验室指标,采用Pearson相关性检验分析血清IL-1β、Caspase-3之间的相关性,采用Logistic回归模型分析颅内动脉瘤患者术后发生脑血管痉挛的影响因素,绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析血清IL-1β、Caspase-3对颅内动脉瘤患者术后发生脑血管痉挛的预测价值。结果发生组患者血清IL-1β、Caspase-3水平、白细胞计数均高于未发生组患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素分析结果显示,血清IL-1β、Caspase-3及白细胞计数水平升高均是颅内动脉瘤患者术后脑血管痉挛发生的危险因素(OR﹥1,P﹤0.05)。Pearson相关性检验结果显示,血清IL-1β与血清Caspase-3之间呈正相关(r=0.853,P﹤0.01)。血清IL-1β、Caspase-3及两者联合预测颅内动脉瘤患者术后发生脑血管痉挛的曲线下面积(AUC)分别为0.784、0.783、0.845,预测价值均较高,两者联合预测的AUC最大。结论颅内动脉瘤患者术后脑血管痉挛发生风险较高,血清IL-1β、Caspase-3水平升高与颅内动脉瘤患者术后脑血管痉挛发生有关,且两者联合预测术后脑血管痉挛发生的效能较高,可能成为临床预测术后发生脑血管痉挛及治疗靶点的生物学指标。

含NOD样受体家族Pyrin域蛋白3/白介素-1β信号通路在脓毒症相关肾损伤中的研究进展

脓毒症相关急性肾损伤(SA-AKI)发病机制复杂,有研究显示,在SA-AKI的发病过程中,NOD样受体家族的NLRP3(NLRP3)被激活,进而增加白细胞介素1β (IL-1β)的产生,介导炎症反应的发展。因此,针对近年NLRP3/IL-1β信号通路在SA-AKI中的研究进展进行了综述,以期为阐述SA-AKI的发病机制提供新的思路,同时也为SA-AKI的诊断和治疗提供了新的策略。

过表达膜定位IL-3的293T细胞外泌体的纯化及体外功能验证

目的体外验证过表达膜定位IL-3的293T细胞外泌体的功能,为在阿尔茨海默病模型动物的体内功能验证奠定基础。方法利用本课题组的专利结构,构建能定位于外泌体膜上的重组IL-3慢病毒载体,包装病毒感染293T细胞,筛选稳定表达细胞株。用流式细胞测量术和免疫荧光技术对IL-3的膜定位进行验证;超滤离心纯化IL-3外泌体,透射电镜观察外泌体形态;纳米流式测量术检测外泌体粒径分布及浓度;Western blot检测IL-3及外泌体相关标志蛋白质表达;免疫荧光技术检测其对小胶质细胞系BV-2吞噬Aβ淀粉样蛋白能力的影响。结果经过载体构建、病毒感染、嘌呤霉素筛选和验证,得到稳定过表达膜定位IL-3的293T细胞株;收集纯化外泌体,在透射电镜下可见直径50~100 nm的双层膜囊泡结构;免疫印迹结果显示CD63、ALIX、TSG101等多种外泌体标志蛋白质检测阳性,且与对照相比富含IL-3,提示IL-3外泌体纯化成功;免疫荧光技术检测结果显示IL-3外泌体能在体外促进BV-2细胞对Aβ淀粉样蛋白的吞噬作用。结论过表达膜定位IL-3的基因修饰293T细胞外泌体在体外兼具IL-3和外泌体的作用,能够促进小胶质细胞的吞噬作用,为阿尔茨海默病的临床治疗提供新的思路。

IL-17B和STAT3在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的:探究白介素(IL)-17B、细胞信号和转录激活因子(STAT)3蛋白在上皮性卵巢癌(EOC)组织中的表达及临床意义。方法:免疫组化法检测IL-17B和STAT3在50例EOC、28例卵巢上皮性良性肿瘤及18例正常卵巢组织中的表达情况,探讨IL-17B和STAT3表达与EOC临床病理特征及预后的关系。结果:EOC中IL-17B和STAT3表达与FIGO分期、病理类型、组织分化程度有关(P<0.05),与年龄、淋巴结转移无关(P>0.05)。IL-17B和STAT3在EOC中表达呈正相关(r=0.364)。EOC中IL-17B和STAT3高表达与患者不良预后密切相关,IL-17B和STAT3高表达者的总生存期明显缩短(P<0.05)。结论:IL-17B和STAT3可能参与EOC的发生、发展,有望作为EOC临床预后预测指标。

大柴胡汤含药血清通过JAK2/STAT3信号通路抑制AR42J细胞炎症反应

目的探讨大柴胡汤含药血清对胰腺腺泡细胞炎症反应的防治作用及可能机制。方法HPLC法检测大柴胡汤中指标成分含量;采用雨蛙肽处理AR42J细胞复制急性腺泡细胞炎症模型,采用CCK-8方法检测大柴胡汤含药血清对细胞活力的影响;Western blot方法检测细胞内JAK2、STAT3及NFκB磷酸化程度;ELISA法检测IL-6和TNF-α含量。结果大柴胡汤中黄芩苷和芍药苷含量分别为13.02 mg/mL、7.19 mg/mL,大柴胡汤含药血清用量不超过20%;大柴胡汤含药血清降低炎性细胞上清液中TNF-α和IL-6含量,降低细胞内JAK2、STAT3及NFκB磷酸化作用,减轻细胞炎症反应;STAT3抑制剂cucurbitacin可减弱大柴胡汤的炎症抑制作用。结论大柴胡汤含药血清可减轻腺泡细胞急性炎症作用,其机制可能为抑制细胞内JAK2/STAT3信号通路进而降低NFκB活性,减少促炎性细胞因子合成。