异丹叶大黄素和白藜芦醇对小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素6mRNA表达的影响

目的：观察异丹叶大黄素和白藜芦醇对分别由炎性三肽（ｆＭＬＰ）和钙离子载体Ａ２３１８７（Ａ２３１８７）诱导的小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６，ＩＬ６）ｍＲＮＡ表达水平的影响。方法：用半定量ｍＲＮＡ的ＲＴＰＣＲ。结果：异丹叶大黄素和白藜芦醇在２×１０－６和２×１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１浓度下，均能抑制ｆＭＬＰ和Ａ２３１８７诱导的小鼠腹腔巨噬细胞ＩＬ６ｍＲＮＡ的表达。结论：该２个化合物抑制ＩＬ６活性的作用机制之一是抑制ＩＬ６ｍＲＮＡ表达。

牙髓卟啉单胞菌内毒素对成骨细胞表达IL-1β mRNA和IL-6 mRNA的影响

目的:研究牙髓卟啉单胞菌(P.e)内毒素(LPS)对成骨细胞表达炎症因子白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的影响,探讨P.e-LPS参与根尖周病变牙槽骨吸收的病理机制。方法:应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),检测在不同浓度P.e-LPS(0～50μg/mL)和不同作用时间(0～24h),P.e-LPS诱导成骨细胞表达IL-1β mRNA和IL-6 mRNA的水平。应用SPSS11.0软件包对结果进行单因素方差分析和Dunnettt检验。结果:当P.e-LPS浓度大于5μg/mL,作用1h后,与0μg/mL和0h组比较,IL-1β mRNA和IL-6 mRNA的表达水平均显著提高(P<0.01),表明P.e-LPS诱导成骨细胞表达IL-1β mRNA和IL-6 mRNA具有剂量和时间依赖性。结论:P.e-LPS诱导成骨细胞表达IL-1β mRNA和IL-6 mRNA,是加速根尖病变的重要毒力因子。

依达拉奉对单肺通气患者围术期细胞因子IL-6、IL-8及其mRNA表达的影响

目的:观察依达拉奉对单肺通气患者围术期炎性细胞因子IL-6、IL-8及其mRNA表达的影响。方法:择期拟行肺叶切除术肺癌患者24例,ASAⅠ级或Ⅱ级,年龄48～67岁,随机分为2组:对照组(C组)和依达拉奉组(E组),每组12例。麻醉诱导:两组均静脉注射咪唑安定0.03mg/kg、芬太尼3μg/kg,吸入8%七氟醚。麻醉诱导后,E组给予依达拉奉0.5mg/kg;C组给予等量生理盐水。麻醉维持:间断静脉注射维库溴铵0.04～0.08mg/kg、芬太尼0.05～0.1mg,七氟醚呼气末浓度维持在1.8%～2.7%。两组均在麻醉后切皮前(T1)、膨肺后60min(T2)、术后1h(T3)采取血样测定白细胞介素IL-6、IL-8血浆浓度及其mRNA表达。结果:与T1比较,两组IL-6、IL-8血浆浓度及其mRNA表达于T2-3明显上升(P<0.05);与C组相比,E组IL-6、IL-8血浆浓度及其mRNA表达于T2-3显著低于C组(P<0.05)。结论:依达拉奉应用于单肺通气患者可有效抑制机体促炎细胞因子的生成和释放。

阿芬太尼对单肺通气患者围术期炎症细胞因子IL-6、IL-10及其mRNA表达的影响

目的观察阿芬太尼对单肺通气(OLV)患者围术期炎症细胞因子白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)及其mRNA表达的影响。方法择期拟行肺叶切除术肺癌患者24例,ASAⅠ级或Ⅱ级,年龄43～68岁,BMI 18.9～24.9 kg/cm2。随机分为两组:芬太尼组(F组)和阿芬太尼组(AF组),每组12例。麻醉诱导:两组均静脉注射咪唑安定0.03 mg/kg、吸入8%七氟醚、F组给予芬太尼3μg/kg(AF组给予阿芬太尼18μg/kg)。麻醉维持:间断静脉注射维库溴铵0.04～0.08 mg/kg,F组给予芬太尼0.05～0.10 mg,AF组给予阿芬太尼0.3～0.6 mg,七氟醚呼气末浓度维持在1.8%～2.7%。麻醉维持期间将BIS值维持在40～60。两组均在麻醉诱导后切皮前(T0)、单肺通气60 min(T1)、膨肺后60 min(T2)采取血样测定IL-6和IL-10浓度及其mRNA的表达。结果与F组比较,AF组血浆IL-6浓度、IL-6 mRNA表达、IL-6/IL-10比值和IL-6 mRNA/IL-10mRNA比值于T1、T2均明显降低(P<0.05);AF组血浆IL-10浓度、IL-10 mRNA表达于T1、T2均显著升高(P<0.05)。AF组各时点IL-6/IL-10比值和IL-6 mRNA/IL-10 mRNA比值无明显变化(P>0.05)。结论阿芬太尼应用于单肺通气患者可有效抑制IL-6的生成和释放,促进IL-10的生成和释放,有助于维持IL-6/IL-10的平衡状态,有利于患者预后。

IL-6mRNA在脑胶质瘤中的表达及意义

目的 :研究白细胞介素 6 (IL 6 )在人脑胶质瘤发病中的作用和意义。方法 :采用RT PCR半定量法检测IL 6mRNA在 34例胶质瘤及 8例正常脑组织中的表达。结果 :IL 6mRNA在胶质瘤和正常脑组织的表达率分别为 79.4 %和 12 .5 % ,差异十分显著 (P <0 .0 1) ,且与胶质瘤的病理分级相关。结论 :IL 6可能在胶质瘤的发生过程中发挥重要作用。

阿芬太尼预处理对下肢缺血再灌注患者外周血白细胞介素-6、白细胞介素-10及其mRNA表达的影响

目的观察阿芬太尼预处理对下肢缺血再灌注患者外周血白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)及其mRNA表达的影响。方法选取2011年1～7月在青岛市市立医院硬膜外麻醉下使用止血带的单侧下肢择期手术患者24例,随机分为两组:阿芬太尼组(A组)和对照组(C组),每组12例。上止血带前5 min A组患者缓慢静注阿芬太尼10μg/kg+生理盐水5 mL;C组患者给予5 mL生理盐水。分别于上止血带前(T1)、松止血带后30 min(T2)、4 h(T3)取静脉血检测细胞因子IL-6和IL-10的mRNA表达及其血浆浓度。结果于T1时A组和C组IL-6[(21.1±3.9)ng/L比(20.8±3.6)ng/L]、IL-10[(30.9±5.3)ng/L比(31.6±4.9)ng/L]浓度、IL-6/IL-10比值[(0.67±0.16)比(0.66±0.15)]及IL-6 mRNA/IL-10 mRNA比值[(1.98±0.47)比(1.94±0.50)]相比T2～3明显升高(P<0.05)。T2～3时,与C组比较,A组IL-6血浆浓度[(27.9±4.8)、(29.6±5.2)ng/L]、mRNA[(1.05±0.17)、(1.36±0.25)]、IL-6/IL-10[(0.71±0.12)、(0.73±0.15)]及IL-6 mRNA/IL-10 mRNA[(2.03±0.42)、(2.32±0.49)]比值明显低于C组(P<0.05)。结论术前应用小剂量阿芬太尼预处理用于下肢缺血再灌注患者可有效抑制促炎性细胞因子生成,有益于维持促炎性细胞因子/抗炎性细胞因子相对平衡。

IL-6受体α亚单位mRNA和蛋白在人白血病细胞中的表达

为了探讨IL 6R的α亚单位基因与蛋白在人白血病细胞中的表达 ,为临床利用IL 6 /IL 6R系统介导重组IL 6 PE4 0外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞提供可靠依据 ,采用RT PCR半定量技术、直接免疫荧光标记及流式细胞术检测了IL 6R的α亚单位基因及蛋白在多种人白血病细胞细胞系中的表达。结果表明 ,粒系、单核系、红白血病细胞系HL 6 0 ,KG 1,U937和TF 1均高表达IL 6R的α亚单位基因和蛋白 ;淋巴系白血病细胞系Raji亦有一定量的基因表达 ;而淋巴系细胞等CEM和HuT2 8以及慢性粒细胞白血病细胞系K5 6 2无论是IL 6Rα亚单位的基因还是蛋白均为阴性。相对表达丰度依次为KG 1>TF 1>U2 6 6 >U937>HL 6 0 >Raji。鉴于粒系、单核系、红白血病细胞高表达IL 6Rα亚单位的基因和蛋白 ,而IL 6Rα亚单位蛋白在正常人外周血细胞均为阴性表达这一事实 ,提示可以利用IL 6 /IL 6R系统介导重组IL 6 PE4 0外毒素融合蛋白进行靶向杀伤和治疗这些白血病 。

子宫内膜异位症大鼠子宫内膜白细胞介素-6mRNA表达的变化

目的 :探讨大鼠子宫内膜异位症 (内异症 )发生、发展过程中子宫内膜白细胞介素 - 6(IL - 6 )mRNA表达的变化。方法 :利用大鼠内异症动物模型 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)技术 ,检测子宫内膜白细胞介素 - 6 (IL - 6 )mRNA表达情况。结果 :正常对照组 ,各时间点间(2、4、6和 8周 )IL - 6mRNA表达无显著性差异 (P >0 0 5 )。内异症模型组 ,在成模后 2、4、6和 8周其在位、异位子宫内膜IL - 6mRNA的表达呈增高趋势 (P <0 0 1)。结论 :IL - 6mRNA可能与内异症的进展有关。

人白细胞介素-6mRNA的富集及其特性研究

白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)是当代细胞因子研究中倍受分子生物学家和免疫学家关注的生物活性肽。已经证明IL-6不仅对免疫效应细胞(B细胞、T细胞、巨噬细胞、天然杀伤细胞和淋巴因子激活杀伤细胞)

复发性流产患者绒毛组织中白细胞介素-6和白细胞介素-18的表达

目的研究白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-18(IL-18)在复发性流产(RSA)患者绒毛组织中的表达,探讨RSA的发病机制。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术,检测63例RSA妇女(RSA组)及50例正常早孕妇女(正常组)绒毛组织中IL-6 mRNA和IL-18 mRNA的表达水平,并将两者进行相关性分析。结果 RSA组绒毛组织中IL-6 mRNA的表达水平显著低于正常组,IL-18 mRNA水平显著高于正常组,相关分析显示,RSA组IL-6与IL-18 mRNA两者之间表达水平呈负相关(r=-0.49,P<0.01)。IL-6 mR-NA的表达水平与RSA患者流产次数无关,而IL-18 mRNA表达水平随着流产次数增多而增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论正常妊娠较RSA患者绒毛组织IL-6水平高,当IL-6表达降低或IL-18升高时,可能导致RSA,其中IL-18水平与流产次数呈正相关。

脾虚型AR大鼠鼻黏膜白介素mRNA的活性表达

目的:观察脾气虚型变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织白细胞介素-2,4,6(IL-2,4,6,)mRNA的表达,探讨脾气虚与变应性鼻炎的病理相关性。方法以卵清蛋白法和卵清蛋白加饮食不节法分别建立大鼠变应性鼻炎模型(AR模型组)和脾气虚变应性鼻炎模型(脾虚AR模型组),分别取鼻黏膜组织,RT-PCR检测IL-2,4,6,mR-NA表达水平,进行组间比较。结果IL-2mRNA的表达空白组与模型组相比较具有显著性差异(P<0.05),模型组鼻黏膜组织IL-2mRNA的表达明显降低。IL-4mRNA的表达空白组与模型组相比较具有显著性差异(P<0.01、P<0.05),模型组鼻黏膜组织IL-4mRNA的表达明显升高,脾虚AR模型组升高更明显。IL-6mRNA的表达空白组与模型组相比较具有显著性差异(P<0.01、P<0.05),模型组鼻黏膜组织IL-6mRNA的表达明显升高,但AR模型组升高更明显。结论变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织IL-2表达明显降低,IL-4,6表达明显升高,脾虚AR模型组升高更明显。说明IL-2,IL-4,IL-6活性表达水平可能是脾虚型变应性鼻炎的一个重要因素。

人参三醇皂甙促进人白细胞介素6转译的生物学效应

将PHA激活淋巴结细胞作为研究对象,观察了人参三醇皂甙(PTGS)对人白细胞介素6(IL-6)分泌的促进效应。应用同位素示踪技术观察细胞RNA合成和蛋白质合成与IL-6分泌的关系,结合IL-6mRNA体外转译体系,探讨了PTGS促IL-6诱生的机理。结果表明PTGS对IL-6基因的转录环节无明显作用,但对IL-6基因的转译环节具明显促进效应。

复方杜仲片对腰椎间盘突出症患者外周血中IL-6及其mRNA表达的影响

目的:检测腰椎间盘突出症(LIDH)患者外周血中白介素6(IL-6)浓度及其mRNA表达水平,探讨中药复方杜仲片治疗LIDH的分子作用机制。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分析LIDH患者治疗前后及正常人外周血中IL-6浓度及其mRNA表达水平的变化。结果:LIDH患者治疗前外周血中IL-6浓度及其mRNA表达水平较正常对照组显著增高,2组比较差异有统计学意义(P<0.05);经复方杜仲片治疗后IL-6浓度及其mRNA表达水平减低,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);LIDH患者治疗前后IL-6浓度及其mRNA表达水平自身比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:复方杜仲片能通过降低LIDH患者外周血中IL-6浓度及下调其mRNA表达水平,达到治疗LIDH的作用。

急性等容血液稀释对胃癌患者外周血免疫细胞因子IL-2、IL-6及其mRNA表达的影响

目的观察急性等容血液稀释（ANH）对胃癌患者ANH前后外周血免疫细胞因子白细胞介素（IL）-2、IL-6及其mRNA表达的影响。方法择期全麻下行胃癌根治术患者24例,ASAⅠ级或Ⅱ级,随机分为二组：观察组和对照组,每组12例。观察组在全麻诱导后行ANH,对照组未行ANH。分别于麻醉诱导后切皮前（T1）、术后1h（T2）、24h（T3）取静脉血检测细胞因子IL-2和IL-6的血浆浓度及其mRNA表达。结果与T1比较,观察组IL-2、IL-6血浆浓度及mRNA表达于T2~3显著升高（P〈0.05）,对照组于T2显著升高（P〈0.05）。与对照组比较,观察组IL-2、IL-6血浆浓度及mRNA表达于T2~3均明显高于对照组（P〈0.05）。结论急性等容血液稀释自体血回输对机体的IL-2、IL-6等免疫性细胞因子有正向调节作用,能增强机体免疫功能,有利于患者预后。

乙型肝炎患者外周血单个核细胞IL-6 mRNA表达的定量分析

目的：探讨IL-6参与乙型肝炎的免疫病理损伤和病毒清除的机理。 方法：采用ELISA法检定了慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）患者血清IL-6含量，竞争性RT-PCR-ELISA法分析了CHB外周血单个核细胞的IL-6 mRNA表达水平。 结果：CHB血清IL-6含量明显升高，竞争性RT-PCR结果表明对照组和患者组IL-6 mRNA靶片段表达频率分别为41.7%（5/12）和82.1%（23/28），定量ELISA表明5例对照组IL-6 mRNA 拷贝数在1000～10000之间，平均拷贝数的对数为3.65；而患者组均大于10000，平均拷贝数的对数为4.40。结论： IL-6在乙型肝炎发病中具有重要作用，而IL-6水平升高主要与患者外周血单个核细胞（peripheral blood monocyte cell，PBMC）IL-6 mRNA表达增强有关。

腹腔镜子宫切除术对单核细胞免疫功能的影响

目的探讨腹腔镜子宫切除术对患者单核细胞免疫功能的影响。方法择期实施子宫切除术患者20例,按手术方式分腹腔镜(LH)组和开放手术(AH)组各10例,分别于术前及术后第1、3、5天取静脉血检测单核细胞白细胞抗原(HLA-DR)、白细胞介素-6(IL-6)mRNA表达量及血清C-反应蛋白(CRP)水平。结果AH组患者术后第1天及第3天HLA-DR表达降低,IL-6mRNA及CRP升高,直到术后第5天才恢复;LH组患者上述值无明显变化。结论手术创伤大小可影响单核细胞免疫功能,腹腔镜子宫切除术有助于稳定单核细胞免疫功能,为患者术后迅速恢复提供了良好的病理生理基础。

异种骨移植中多种免疫因子的表达及转化生长因子-β的调节作用

目的:观察异种骨移植局部白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA和蛋白质的表达,探索转化生长因子β(TGF-β)对这些免疫因子的调节作用。方法:将复合了TGF-β的牛松质骨骨粒或单纯牛松质骨骨粒植入小鼠股部肌肉内,于植入后第4,7,14及21天取材检测。结果:在异种骨移植标本中多种细胞成份可表达I-L1α、IL-6及TNF-αmRNA和蛋白质。复合TGFβ的骨移植局部IL1-α、IL-6和TNF-αmRNA的表达明显低于单纯异种骨移植(P<0.01)。结论:在异种骨移植局部,多种细胞可以表达IL-1α、IL-6及TNF-αmRNA和蛋白质,且这种表达受到TGF-β的调节。

排石冲剂对草酸钙肾结石大鼠p47phox和TGF-β1表达的影响

目的观察排石冲剂对草酸钙肾结石大鼠p47phox、转化生长因子(TGF)-β1表达的影响,探讨排石冲剂治疗肾结石的作用机制。方法Wistar大鼠60只,随机分为6组:正常对照组、模型对照组、枸橼酸钾组和排石冲剂小、中、大剂量组(1.2,2.4,3.6 g·mL^-1),每组各10只。分别检测各组大鼠尿草酸、尿钙的含量;用Vonkossa钙结晶染色观察肾组织中草酸钙结晶,并采用形态分级评分法比较各组草酸钙结晶的量化评分;通过荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠肾组织中p47phox、TGF-β1、白细胞介素(IL)-6 mRNA的表达水平。结果与正常对照组比较,其余各组大鼠尿草酸及尿钙含量均显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,排石冲剂小剂量组的尿草酸及尿钙含量无明显差异(P>0.05),排石冲剂中剂量组尿草酸及尿钙含量显著降低(P<0.05);排石冲剂大剂量组、枸橼酸钾组的尿草酸及尿钙显著降低(P<0.01),但两组之间差异无统计学意义。与正常对照组比较,模型对照组、排石冲剂小剂量组草酸钙结晶评分显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,排石冲剂中剂量组评分显著降低(P<0.05),排石冲剂大剂量组、枸橼酸钾组评分显著降低(P<0.01)。与正常对照组比较,其余各组p47phox、TGF-β1、IL-6 mRNA表达水平均显著增强;与模型对照组比较,排石冲剂小、中剂量组无明显差异,排石冲剂大剂量组、枸橼酸钾组显著降低(P<0.05),但两组之间无明显差异。结论排石冲剂能降低大鼠尿草酸、尿钙的排泄,能抑制大鼠肾组织的钙质沉积,降低肾组织中p47phox、TGF-β1、IL-6 mRNA的水平。排石冲剂能抑制结石的形成,其作用机制可能与抑制草酸钙结石对肾小管上皮细胞的氧化炎症损伤有关。

荧光实时定量PCR检测STAT6圈套寡核苷酸对支气管哮喘小鼠脾淋巴细胞转录IL-4mRNA的影响

目的研究STAT6圈套寡核苷酸（ODN）对支气管哮喘（简称哮喘）小鼠脾淋巴细胞转录IL-4mRNA的影响作用。方法实验细胞分组：空白组（A组）、哮喘OVA组（B组）、治疗哮喘OVA组（C组）、干扰哮喘OVA组（D组）、脂质体哮喘OVA组（E组）。设计并人工合成STAT6圈套ODN及无序ODN，全硫代修饰的ODN。用OVA和氢氧化铝复制哮喘模型，用淋巴细胞分离液分离小鼠脾淋巴细胞，体外培养后，导入由阳离子脂质体2000转染剂携带的圈套ODN进入淋巴细胞培养，抽提RNA进行反转录，建立实时荧光聚合酶链反应（PCR）反应条件，通过比较ct进行基因表达的相对定量分析。观察圈套ODN的转染对脾淋巴细胞转录IL-4mRNA的影响。结果A、B、C、D、E组的IL-4mRNA分别表达为：0．02545±0．00433，0．06742±0．00128，0．03151±0．00530，0．06504±0．00775，0．05952±0．00561。A组和C组低于B组、D组和E组，其差异有统计学意义（t=6．204，P〈0．01），C组和A组间差异无统计学意义（t=1．310，P〉0．05），B组和D组、E组之间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论熔解曲线分析结果证明了PCR反应的特异性，应用SYBRGreenI实时荧光PCR可以特异、准确地分析STAT6圈套0DN能下调STAT6活性，降低转录IL-4mRNA的表达。

氯胺酮对小鼠烧伤模型炎症细胞因子表达的影响

目的观察氯胺酮对热烧伤小鼠的治疗效果及对炎症细胞因子表达的影响。方法将40只小鼠按随机数字表法分为4组,每组10只,热烧伤诱导小鼠Ⅲ度烧伤模型。氯胺酮Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和生理盐水组,按治疗方案分别给予相应治疗。3d后观察各组小鼠存活率以确定疗效最佳组。另取60只小鼠按随机数字表法分为氯胺酮组和芬太尼组和生理盐水对照组,每组20只,建立烧伤模型。氯胺酮组按最佳方案治疗。采用酶联免疫吸附法(ELIA)检测2h、6h、12h、24h时血清IL-6及TNF-α浓度;采用逆转录聚合酶链(RT-PCR)检测小鼠肝脏、肺脏组织中HSP-70 mRNA水平。结果氯胺酮Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组及生理盐水组小鼠存活率比较差异有统计学意义(P<0.05),氯胺酮Ⅲ组小鼠存活率最高(70%,P<0.05),为最佳治疗组;小鼠在烧伤后2h、6h、12h、24h时血清IL-6和TNF-α水平均明显低于芬太尼组和对照组(P<0.01);烧伤后12h时氯胺酮组小鼠肝脏、肺组织中HSP-70 mRNA水平均明显高于芬太尼组和对照组(P<0.01)。结论小鼠热烧伤后迅速、足量、持续使用氯胺酮可减低炎症细胞因子水平,提高小鼠存活率。