滋阴凉血方联合泼尼松对免疫性血小板减少性紫癜小鼠免疫功能及ST2/IL-33通路的影响

目的:探讨滋阴凉血方联合泼尼松对免疫性血小板减少性紫癜小鼠免疫功能及ST2/IL-33通路的影响。方法:40只BALB/c小鼠,其中32只采用注射抗血小板血清构建免疫性血小板减少性紫癜小鼠模型,造模成功后,随机分为模型、滋阴凉血方(0.2 ml/10 g)、泼尼松(0.2 ml/10 g)和滋阴凉血方+泼尼松(0.2 ml/10 g)共4组,每组8只,剩余8只小鼠设为空白组。分别按剂量灌胃给药,模型组与空白组灌胃等量生理盐水,1次/d×2周。采集血样和脾脏组织,使用全自动血液分析仪测定外周血小板数;HE染色观察脾脏组织病理学变化;酶联免疫吸附法检测血清转化生长因子β、白细胞介素(IL)-17及外周血血小板生成素水平;Western blot检测脾脏组织IL-33、s ST2、ST2表达;流式细胞术检测外周血Th17、Treg细胞数。结果:与空白组相比,模型组小鼠血小板数、血小板生成素、转化生长因子β水平及Treg细胞均明显降低(P<0.05),IL-17水平、Th17细胞及IL-33、s ST2、ST2蛋白表达明显增加(P<0.01);与模型组相比,滋阴凉血方+泼尼松组血小板数、血小板生成素、转化生长因子β水平及Treg细胞均明显上升(P<0.05),IL-17水平、Th17细胞及IL-33、s ST2、ST2蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论:滋阴凉血方+泼尼松可有效地调节Th17/Treg平衡,进而有效改善免疫性血小板减少性紫癜,其机制可能与调节ST2/IL-33信号通路有关。

sST2与IL-33在不同类型心力衰竭患者中的分析

目的:通过测定不同类型心力衰竭患者血清中可溶性ST2(sST2)与白介素-33(IL-33)水平,探讨其在心衰中的意义及价值。方法:选取60例心力衰竭(HF)住院患者,按病因分为冠心病组、高心病组、扩心病组和风心病组四组,同时选取30例健康者为对照组。分别于入院急性期、稳定期检测血清sST2及IL-33水平;比较不同类型HF组与对照组以及各组间sST2及IL-33水平差异;评价sST2与IL-33等指标的相关性,绘制sST2和2c-33与NT-proBNP诊断HF的ROC曲线。结果:急性期和稳定期HF组的sST2及IL-33水平均高于对照组(P<0.05),HF组急性期sST2水平高于稳定期(P<0.05)、IL-33水平低于稳定期(P<0.05);各不同类型HF组的不同时期sST2和2c-33水平无统计学差异(P>0.05)。心功能Ⅱ级患者sST水平低于心功能Ⅲ级者(P<0.05)、亦明显低于心功能IV级者(P<0.01);不同心功能组IL-33水平无统计学差异。sST2与NT-proBNP、NYHA及hs-CRP呈正相关,与LVEF、FS呈负相关,与IL-33无相关性;sST2诊断HF的ROC曲线下面积为0.769(95%CI:0.673~0.866,P<0.01)。结论:HF组血清sST2、IL-33水平较健康对照组明显升高,sST2水平与HF的分级具有相关性。血清sST2水平可作为诊断HF的补充手段,预测预后。

IL-33/ST2信号通路及相关药物研究进展

目的:介绍IL-33/ST2信号通路,总结其与各项疾病的发生发展机制之间的关系以及相关药物的研发进展,为相关疾病的治疗策略提供新的思路。方法:通过汇总分析现有的研究IL-33/ST2信号通路与多种疾病的发病机制关联的文献,对IL-33/ST2信号通路与各项疾病之间的关系以及相关药物的研发进展进行讨论总结。结果与结论:IL-33作为免疫反应和细胞损伤的警报分子,其信号转导通路在过敏性疾病、慢性炎症性疾病、恶性肿瘤和心血管疾病等多种疾病的发病过程中发挥了十分关键的作用,这些研究成果为多种疾病的治疗策略提供了新的思路。多家国内外公司已经开始研发针对IL-33/ST2的靶向药物,绝大多数为单抗药物,且已经进入不同的临床试验阶段,具有重要的应用前景。

加味宣白承气汤对慢性阻塞性肺疾病患者血清IL-21、CTRP-9和IL-33的影响

目的 观察加味宣白承气汤对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血清白细胞介素-21(IL-21)、肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP-9)和白细胞介素-33(IL-33)的影响。方法 120例患者随机分为研究组与对照组各60例。对照组患者给予常规治疗,研究组在此基础上予加味宣白承气汤治疗。检查两组患者治疗前后肺功能指标[用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)、第1秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比(FEV1/FVC)]、中医证候积分、6 min步行试验(6MWT)和血清指标(IL-21、CTRP-9、IL-33),并统计两组患者临床疗效。结果 研究组总有效率为91.67%,显著高于对照组的78.33%(P<0.05);治疗后,研究组FVC、FEV1、FEV1/FVC、中医证候积分和6MWT改善较对照组明显(P<0.05),IL-21、CTRP-9、IL-33均显著低于对照组(P<0.05)。结论 采用加味宣白承气汤治疗急性加重期慢性阻塞性肺疾病患者可抑制IL-21、CTRP-9和IL-33的表达,从而促进肺功能和临床症状康复。

IL-33促进非小细胞肺癌EMT的研究

目的探讨IL-33参与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的过程及临床意义。方法生物信息学分析IL-33在非小细胞肺癌中的生物学行为。https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/网站下载非小细胞肺癌芯片GSE5843和GSE102287进行生存分析。免疫组织化学评估非小细胞肺癌中蛋白IL-33、ST2的表达,免疫荧光法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的组织定位和分布。体外CCK-8法检测IL-33刺激下A549、SK-MES-1细胞的细胞活力,划痕实验和Transwell实验检测IL-33促进A549、SK-MES-1细胞迁移和侵袭能力。免疫印迹实验检测最佳浓度IL-33处理下ST2、E-cadherin、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-9(Matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)蛋白的表达。结果生物信息学分析发现IL-33可通过EMT参与NSCLC的进展和转移,生存分析提示IL-33与非小细胞肺癌预后有关,IL-33高表达者,预后差(P<0.05)。免疫组化结果显示与癌旁组织相比,非小细胞肺癌中IL-33、ST2高表达,E-cadherin表达下降,Vimentin明显增多(P<0.05),且在肺腺癌与肺鳞癌之间的表达无明显差异(P>0.05)。IL-33可促进A549、SK-MES-1细胞增殖、迁移和侵袭。与HPAEpiC细胞相比,A549、SK-MES-1细胞高表达ST2、Vimentin、MMP-9、E-cadherin(P<0.05),IL-33刺激下A549、SK-MES-1细胞ST2、Vimentin、MMP-9表达明显升高,E-cadherin明显下降(P<0.05)。结论非小细胞肺癌中IL-33通过ST2促进EMT过程,促进非小细胞肺癌进展。

血小板与淋巴细胞比值联合IL-33对早期胃癌的诊断价值

目的 探究血小板与淋巴细胞比值联合IL-33对早期胃癌的诊断价值。方法 选取46例早期胃癌患者(胃癌组)、42例胃良性病变患者(病变组)和40例健康体检者(对照组)为研究对象。从医院病历系统调取所有患者及对照组人员的一般资料,患者入院第二天(对照组于体检当天)采集患者空腹静脉血5 mL,分析测定IL-33,检测白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、血小板水平。并绘制受试者操作特征曲线(receiver operator characteristic curve, ROC)。结果 胃癌组患者的幽门螺杆菌感染率最高,淋巴细胞计数最低,血小板与淋巴细胞比值(platelet to lymphocyte ratio, PLR)、IL-33水平最高(P<0.05);早期胃癌患者的年龄≥60岁、肿瘤直径≥3 cm、分化程度低者,IL-33水平显著提高(P<0.05);早期胃癌患者的年龄≥60岁、肿瘤直径≥3 cm者,PLR水平显著提高;PLR诊断早期胃癌的截断值为122,ROC曲线下面积AUC(0.95CI)为0.725(0.508~0.925);IL-33诊断早期胃癌的截断值为185 ng/mL,ROC曲线下面积AUC(0.95CI)为0.757(0.554~0.951);联合检测诊断早期胃癌的ROC曲线下面积AUC(0.95CI)为0.809(0.691~0.918)。联合诊断效能显著高于单独诊断。结论 临床上对早期胃癌患者PLR和IL-33的水平进行有效的监测,并对二者的诊断效能进行联合分析,能够辅助临床医师对患者的疾病发生发展进行判断,值得临床借鉴。

地骨皮甲素调节IL-33/ST2信号对中耳炎大鼠的研究

目的探讨地骨皮甲素调节IL-33/ST2信号对中耳炎大鼠免疫功能及钠通道的研究。方法50只SD大鼠,随机分为NO组(正常大鼠灌胃生理盐水),MO组(模型大鼠灌胃生理盐水),OS组(模型灌胃40 mg·kg^(-1)地骨皮甲素),ST组(模型灌胃0.2 mL 1 kg·L^(-1)IL-33/ST2信号抑制剂),UN组(模型灌胃40 mg·kg^(-1)地骨皮甲素和0.2 mL 1 kg·L^(-1)IL-33/ST2信号抑制剂)。听性脑干反应检测听力水平,HE染色检测中耳黏膜组织病理形态,ELISA法检测免疫功能相关指标,Real-time PCR法检测中耳黏膜组织上皮钠通道mRNA表达,免疫印迹法检测IL-33/ST2信号相关蛋白表达。结果与NO组相比,MO组纯音听力阈值、IL-4含量、IL-33、ST2蛋白表达升高(P<0.05),INF-γ含量、α-ENaC、β-ENaC、γ-ENaC mRNA表达降低(P<0.05),与MO组比较,OS组、ST组、UN组纯音听力阈值、IL-4含量、IL-33、ST2蛋白表达降低(P<0.05),INF-γ含量、α-ENaC、β-ENaC、γ-ENaC mRNA表达升高(P<0.05),且ST组与OS组相比无明显差异(P>0.05),UN组比ST组降低明显(P<0.05);与NO组相比,MO组中耳黏膜出现病理变化,与MO组相比,OS组、ST组、UN组病理症状明显改善。结论地骨皮甲素可显著改善中耳炎大鼠免疫功能,促进钠通道表达,其作用机制可能与抑制IL-33/ST2信号通路有关。

IL-33缺陷调节小鼠抗弓形虫感染的CD8^(+)T细胞应答

目的探讨IL-33缺陷(IL-33^(-/-))对弓形虫感染小鼠的炎症反应和CD8^(+)T细胞功能的影响。方法C57BL/6野生型(Wild-type,WT)和IL-33^(-/-)小鼠分别设感染组和对照组,建立弓形虫感染模型,记录小鼠死亡时间,绘制生存曲线;分别取感染后48 h、96 h各组小鼠外周血及肝、脾组织,HE染色观察组织病理变化;微量样本多指标流式蛋白定量技术(cytometric bead array,CBA)及ELISA检测血浆炎症因子(IL-12P70、TNF-α、IFN-γ、MCP-1、IL-6及IL-4)水平;qPCR检测小鼠脾细胞中弓形虫速殖子表面抗原-1(SAG-1)的mRNA水平;流式细胞术分析脾脏CD8^(+)T细胞穿孔素、颗粒酶和IFN-γ水平。结果与WT感染组小鼠比较,96 h时IL-33^(-/-)感染组小鼠脾脏SAG-1 mRNA表达降低(F=13.96,P<0.05),肝、脾组织的炎症改变较轻,生存时间延长(χ^(2)=6.87,P<0.01);与WT感染组小鼠比较,感染96 h时IL-33^(-/-)感染组血浆IL-4浓度升高较高(F=328.32,P<0.01),而TNF-α、IFN-γ、MCP-1均明显较低(F TNF-α=32.66、F IFN-γ=59.32、F MCP-1=43.78,均P<0.01);感染96 h,IL-33^(-/-)感染组小鼠脾脏CD8^(+)T细胞穿孔素(F=574.20,P<0.01)、颗粒酶(F=14.68,P<0.05)和IFN-γ(F=15.22,P<0.05)表达均高于WT感染组。结论在小鼠急性弓形虫感染中,IL-33抑制脾脏CD8^(+)T细胞应答,促进全身炎症反应。

IL-33参与2型炎症瘙痒的神经免疫机制研究进展

IL-33是白细胞介素1家族来源的核细胞因子,通过其受体作用于多种细胞,如肥大细胞、2型固有淋巴细胞、嗜碱性粒细胞,是2型免疫反应发生及维持的重要细胞因子之一。近年来研究表明,IL-33激活外周神经系统参与瘙痒信号的传递。本文回顾了IL-33介导受体激活的信号转导机制/2型炎症皮肤病中IL-33参与瘙痒的神经免疫机制及IL-33靶向药物研究进展。

不同程度支气管肺发育不良患儿血清IL-33、MMP-16、VDBP水平变化及临床意义

目的探讨不同程度支气管肺发育不良(BPD)患儿血清白细胞介素-33(IL-33)、基质金属蛋白酶-16(MMP-16)、维生素D结合蛋白(VDBP)水平变化及临床意义。方法选取2019年6月至2021年12月保定市第二中心医院早产128例BPD患儿作为研究组,另选取同期同院无BPD早产儿64例作为对照组,比较两组血清IL-33、MMP-16、VDBP水平;根据吸入氧浓度(FiO_(2))将研究组分为轻度、中度、重度BPD亚组,对比不同程度亚组血清IL-33、MMP-16、VDBP水平,Spearman相关分析各血清指标水平与病情程度的相关性,受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)评估预测价值。结果研究组血清IL-33、MMP-16水平高于对照组,VDBP水平低于对照组,差异有统计学意义(t值分别为16.291、12.451、12.067,P<0.05);随病情程度加重血清IL-33、MMP-16水平增高,VDBP水平降低(F值分别为169.273、108.204、65.075,P<0.05);Spearman相关分析显示血清IL-33、MMP-16水平与病情程度呈正相关,VDBP水平与病情程度呈负相关(r值分别为0.855、0.779、-0.833,P<0.05);血清IL-33、MMP-16、VDBP联合鉴别轻度与中度BPD的AUC为0.900(0.821~0.952),联合评估重度BPD的AUC为0.941(0.885~0.975),均大于各指标单一评估;不同程度亚组治疗前、治疗4周后血清IL-33、MMP-16水平均与疗效呈负相关,VDBP水平均与疗效呈正相关(P<0.05)。结论BPD患儿血清IL-33、MMP-16、VDBP水平与病情程度、疗效密切相关,可作为临床评估的重要辅助指标。

IL-33通过miR-19a-3p/MAPK6通路影响心肌缺氧/复氧损伤的机制研究

目的 探讨白细胞介素-33(IL-33)通过miR-19a-3p/MAPK6通路对心肌缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及可能的分子机制。方法 建立H/R诱导的新生小鼠心肌细胞体外模型,使用IL-33进行预处理,向心肌细胞中转入miR-19a-3p mimic,以上调miR-19a-3p表达,转入miR-19a-3p inhibitor,以抑制miR-19a-3p表达,转入pc DNA-MAPK6以上调MAPK6表达。通过Caspase-3活性、细胞凋亡ELISA法和原位细胞凋亡染色检测心肌细胞凋亡。Target Scan数据库预测miR-19a-3p的潜在靶点,双荧光素酶检测报告显示miR-19a-3p与MAPK6之间关系;RT-qPCR法检测心肌细胞miR-19a-3p和MAPK6 mRNA表达,Western blot法检测MAPK6蛋白表达。结果 IL-33预处理可以抑制H/R诱导的miR-19a-3p表达下调和细胞凋亡。双荧光素酶测定报告显示,miR-19a-3p靶向调控MAPK6。IL-33抑制了H/R诱导的MAPK6表达上调,过表达MAPK6减弱了IL-33对H/R的抗凋亡作用。过表达miR-19a-3p抑制了H/R诱导的MAPK6表达上调,而敲低miR-19a-3p可以消除IL-33对H/R诱导的MAPK6表达下调。结论 IL-33通过调控miR-19a-3p/MAPK6信号通路,减少H/R诱导的心肌细胞凋亡。

IL-33/ST2在子宫内膜异位症中的表达及诊断效能分析

目的分析IL-33/ST2在子宫内膜异位症和健康人群中的表达差异,评估其对子宫内膜异位症的诊断价值。方法收集子宫内膜异位症患者和对照人群组织和外周血。利用实时荧光定量PCR检测子宫内膜异位症病灶和对照组子宫在位内膜中IL-33及ST2的表达;通过免疫组织化学法分析两组组织中IL-33的表达;应用酶联免疫吸附实验检测两组外周血中IL-33及ST2的水平;利用Mann-Whitney U检验分析两组外周血sST2及肿瘤标志物CA19-9,CA125水平差异,通过二元Logistic回归分析构建联合诊断模型。绘制ROC曲线,并计算AUC,分析不同诊断指标的诊断效能。结果子宫内膜异位症患者病灶中IL-33及ST2的表达高于对照组(P=0.0372,P=0.0322),IL-33在异位内膜组织上皮细胞中的表达高于基质细胞。子宫内膜异位症患者外周血中sST2、CA19-9、CA125水平高于对照组(P=0.038,P=0.011,P<0.001)。二元Logistic回归分析显示sST2、CA125与子宫内膜异位症的发病显著相关(P=0.036,P=0.001)。通过绘制ROC曲线发现sST2、CA125联合诊断子宫内膜异位症AUC(0.899)及特异性(88.00%)高于各指标单独诊断,且具有较高的灵敏度(80.65%)。结论子宫内膜异位症患者病灶组织中IL-33及ST2表达增高,外周血中sST2水平升高。sST2、CA125联合诊断模型有较好的诊断效能,可为临床无创诊断子宫内膜异位症提供新思路。

超声引导聚桂醇治疗CSP的疗效及对E-cad、IL-33的影响

目的 探讨剖宫产瘢痕部位妊娠(CSP)在超声引导下聚桂醇治疗的疗效及对E-cad、IL-33的影响。方法 选取2018年1月至2020年1月在衡水市第二人民医院妇科收治的CSP患者184例为研究对象,其中行超声引导下聚桂醇注射联合清宫术治疗的CSP患者92例作为观察组,行子宫动脉栓塞术联合清宫术患者92例作为对照组。比较两组临床疗效、E-cad、IL-33水平及预后。结果 (1)观察组的总有效率高于对照组(χ^(2)=23.471,P<0.05);观察组β-hCG转阴时间、住院时间、手术时间、术中出血量、月经恢复正常时间、术后排卵恢复时间均显著低于对照组(t值分别为11.254、17.145、27.160、20.935、18.529、18.204,P<0.05)。观察组术后不良反应和并发症总发生率显著低于对照组(χ^(2)=30.365,P<0.05)。(2)治疗后15天、1个月、3个月,观察组的FSFI评分、FSH水平均高于对照组(FSFI评分:t值分别为11.591、14.390、20.783;FSH:t值分别为14.350、20.051、19.265,P<0.05),观察组血清E2水平显著低于对照组(t值分别为15.691、23.466、30.263,P<0.05)。(3)治疗后15天、1个月、3个月,观察组血清E-cad、IL-33均显著低于对照组(E-cad:t值分别为27.395、30.481、16.174;IL-33:t值分别为30.467、24.595、17.227;P<0.05)。(4)血清E-cad与β-hCG转阴时间、术中出血量、血流信号分级、瘢痕处肌层厚度、月经恢复正常时间、E2、IL-33呈显著正相关(r值分别为0.386、0.562、0.672、0.683、0.735、0.593、0.651,P<0.05),与FSH呈显著负相关(r=-0.682,P<0.05);血清IL-33与β-hCG转阴时间、术中出血量、血流信号分级、瘢痕处肌层厚度、月经恢复正常时间、E2水平呈显著正相关(r值分别为0.482、0.381、0.557、0.491、0.672、0.607,P<0.05),与FSH水平呈现显著负相关(r=-0.592,P<0.05)。结论 超声引导下聚桂醇治疗CSP疗效显著,且可降低患者血清中E-cad与IL-33水平,二者与CSP各临床指标密切相关,有希望成为CSP诊断及预后的重要分子标记物。

老年女性绝经后骨质疏松患者血清IL-33水平和骨转换标志物表达水平与骨折风险的关联性研究

目的探讨老年女性绝经后骨质疏松(PMO)患者血清白细胞介素-33(IL-33)水平和骨转换标志物表达水平与骨折风险的关联性。方法招募2019年6月至2021年3月上海市健康医学院附属崇明医院收治的277例因跌倒发生脆性骨折的老年女性PMO患者作为骨折组,另外纳入同期无骨折记录的老年女性PMO患者作为对照组(250例)。比较两组血清IL-33水平,采用Spearman秩相关分析探讨血清IL-33水平与骨转换标志物水平的相关性,采用多因素logistic回归分析影响PMO女性发生骨折的危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IL-33水平预测PMO女性发生骨折的效能。结果骨折组患者血清甲状旁腺激素(PTH)、1型胶原蛋白C末端肽(CTX-1)、1型前胶原氨基端肽(P1NP)、骨钙素(OC)、骨特异碱性磷酸酶(BALP)水平高于对照组,血清25-羟基维生素D[25(OH)D]水平和骨密度(BMD)低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,骨折组患者血清IL-33水平与血清25(OH)D水平呈正相关(r s=0.158,P=0.009),与血清CTX-1(r s=-0.233,P<0.001)、OC(r s=-0.357,P<0.001)、PTH(r s=-0.326,P<0.001)水平呈负相关。多因素logistic回归分析结果显示,较高水平的血清IL-33(OR=0.125)和BMD(OR=0.554)是抑制PMO女性发生骨折的保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清IL-33水平具有预测PMO女性发生骨折风险的应用价值(P<0.05),最佳截断值为6.57 pg/ml,其对应的灵敏度和特异度分别为94.80%和91.30%。结论PMO女性人群血清IL-33和骨转移标志物水平与骨折风险具有关联性,对其水平进行监测有助于临床医师对风险患者予以及时干预。

大麻素受体激动剂ACEA通过调节IL-33促进脊髓损伤后髓鞘恢复

目的探讨激活大麻素1型受体(CB1R)激动剂ACEA在小鼠脊髓损伤(SCI)后促进髓鞘恢复的保护作用,并明确白细胞介素33(IL-33)在其中的作用。方法脊髓胸10节段横断法对小鼠进行SCI造模,随机分为假手术组(Sham组)、SCI(0、3、7、14 d)+Saline组、SCI(3、7、14 d)+ACEA组和SCI 14 d+IL-33组,采用Western blotting测定损伤部位的髓鞘蛋白(MBP)和IL-33的表达水平;应用体外小鼠少突胶质前体细胞(OPC)原代培养氧糖剥夺(OGD)模型模拟SCI,分为对照组(Control组)、OGD 6 h组、OGD 6 h+ACEA组、OGD 6 h+IL-33组。免疫荧光观察ACEA对OPC分化的作用。结果与Sham组相比,SCI后小鼠脊髓组织中MBP蛋白显著减少(P<0.01),IL-33蛋白水平显著增加(P<0.01);SCI后给予ACEA可显著增加MBP和IL-33蛋白水平(P<0.05,P<0.01);SCI后给予IL-33后CC1的细胞占比显著增多(P<0.01)。与Control组细胞相比,OGD 6 h后OPC分化成熟标志物MBP的数目占比显著减少(P<0.01),但可显著增加OPC细胞中IL-33的荧光强度(P<0.01);OGD后给予ACEA可明显升高表达MBP的细胞占比(P<0.05)和IL-33的荧光强度(P<0.01);OGD后给予IL-33可显著增强OPC细胞中IL-33的荧光强度(P<0.05)。结论CB1R激动剂ACEA在小鼠SCI后可能通过在晚期上调IL-33的表达促进CC1成熟,髓鞘恢复。

IL-33及其受体ST2L在银屑病患者外周血T细胞及皮损组织中的表达

目的:研究IL-33及其受体ST2L在银屑病患者外周血T细胞和皮损组织中的表达。方法:采用免疫组织化学法检测寻常型银屑病(PV组)、脓疱型银屑病(PP组)和色素痣切除者[为对照组(CON组)]皮损中IL-33、ST2L的表达和分布。分别采用免疫印迹法和RT-PCR法检测经IL-17A诱导后Jurkat T细胞、HaCat角质形成细胞中IL-33及IL-33 mRNA的表达情况;用同样的方法检测经IL-33诱导后Jurkat T细胞、PV组T细胞、PP组T细胞、CON组T细胞中ST2L及ST2L mRNA表达情况。结果:PV组和PP组患者的皮损中,观察到IL-33及其受体ST2L蛋白在表皮和真皮细胞中均有不同密度的阳性染色。CON组T细胞中表达微量IL-33蛋白,但在银屑病组中,包括PV组和PP组中T细胞有IL-33蛋白明显表达,PP组表达量大于PV组,差异有统计学意义(P<0.05);IL-33诱导Jurkat T细胞、PV组和PP组患者T细胞表达一定量ST2L蛋白和mRNA,呈剂量依赖性;PV组和PP组中ST2L蛋白表达高于在同一浓度CON组IL-33诱导产生的ST2L水平,差异具有统计学意义(P<0.05);IL-17A诱导Jurkat T细胞产生IL-33蛋白和mRNA呈一定量效和时效关系;IL-17A诱导HaCat角质形成细胞表达IL-33蛋白和mRNA,呈剂量依赖性,IL-33蛋白主要在HaCat角质形成细胞的细胞核中表达,部分胞质有一定表达,且IL-17A高浓度刺激后,其表达量明显增加。结论:银屑病患者的外周血T细胞和皮损中IL-33及其受体ST2L表达水平明显升高,表明IL-33在银屑病的发生发展中可能发挥重要作用。

IL-33通过调节NF-κB信号通路促进肝癌细胞增殖和迁移

目的探讨IL-33通过对NF-κB信号通路及炎症因子的调控,对肝癌HepG2细胞增殖和迁移的影响。方法RT-PCR检测IL-33在不同肝癌细胞系中的表达,Western Blot检测IL-33对HepG2细胞NF-κB信号通路激活相关蛋白(NF-κB、p-NF-κB、IKB、p-IKB)的调控,ELISA检测IL-33对HepG2细胞中IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-18等炎症因子释放的调控,EdU增殖实验检测IL-33对HepG2细胞增殖的影响,CCK8实验检测IL-33对HepG2细胞24 h和48 h活力的影响,Transwell小室实验和划痕实验检测IL-33对HepG2细胞迁移的影响。结果IL-33 mRNA表达分别为LO2(1.01±0.01)、MHCC97H(1.08±0.05)、LM3(1.76±0.21)、HepG2(3.88±0.35)、SMCC7721(2.24±0.43)和Hep3B(2.13±0.30),差异有统计学意义(F=19.621,P=0.001)。IL-33处理24 h组中IL-1α(3185.25±194.67)、IL-1β(2103.69±124.75)、IL-6(446.58±36.82)、IL-18(1492.60±180.31),高于对照组的1001.58±18.65、1642.81±45.66、151.34±20.13、915.48±36.15,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-33处理24 h组中NF-κB磷酸化蛋白(4.53±0.36)及IKB磷酸化蛋白(2.76±0.28)相对表达水平均高于对照组(1.25±0.23、0.49±0.09),差异有统计学意义(P<0.05)。IL-33处理24 h组细胞增殖(1.41±0.08)、24 h细胞活力(135.69±6.88)%、48 h细胞活力(176.34±25.69)%,高于对照组的(0.86±0.04)、(98.65±1.05)%、(119.89±10.86)%,差异有统计学意义(t=13.750,P<0.01;t=9.218,P<0.01;t=3.506,P=0.017)。Transwell小室和划痕实验结果发现,IL-33处理24 h组细胞侵袭数量(256.38±10.11)个、迁移相对距离(0.74±0.05),高于对照组的(185.63±23.54)个、(0.45±0.12),差异有统计学意义(t=4.783,P=0.005;t=3.864,P=0.012)。结论IL-33可通过调控NF-κB信号通路及炎症因子等的分泌,进而促进肝癌HepG2细胞增殖和迁移。

补肺健脾通窍方对肺脾气虚型变应性鼻炎患儿IL-33、EOS、IgE及T淋巴亚群的影响

目的:探讨补肺健脾通窍方在变应性鼻炎肺脾气虚型患儿治疗中的应用价值。方法:将2019年11月至2022年5月在我院就诊的肺脾气虚型变应性鼻炎患儿随机分组,每组65例。对照组采用氯雷他定片治疗,观察组联合补肺健脾通窍方治疗,两组均治疗4周后比较疗效。结果:观察组血清白介素-6(IL-6)、白介素-33(IL-33)、嗜酸性粒细胞(EOS)、免疫球蛋白E(IgE)低于对照组,中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)高于对照组,差异具统计学意义(P<0.05);观察组血清CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、CD3^(+)高于对照组,差异具统计学意义(P<0.05);观察组鼻结膜炎生存质量问卷(RQLQ)评分、中医总症状积分低于对照组(P<0.05);观察组总有效率96.92%(63/65),高于对照组的84.62%(55/65)(P<0.05)。结论:采用补肺健脾通窍方治疗肺脾气虚型变应性鼻炎患儿,有助于减轻炎症反应,调节免疫功能,促进病情好转,提高临床疗效。

C端带Flag标签重组小鼠IL-33慢病毒载体的构建及鉴定

目的构建C端携带Flag标签蛋白的重组小鼠IL-33慢病毒表达载体,为进一步研究IL-33在肿瘤免疫中的作用提供实验基础。方法设计引物在小鼠IL-33基因的C端加入Flag标签,PCR法扩增带有标签的目的基因,再接入经酶切后的线性化pLVX-puro慢病毒载体。带标签的目的基因重组载体用两种限制性内切酶ApaI和XhoI酶切后,进行琼脂糖凝胶电泳鉴定,最后测定目的基因序列。结果成功构建重组小鼠IL-33慢病毒表达载体并将Flag标签成功插入到目的基因的C端。结论成功构建了重组慢病毒表达载体pLVX-mIL-33-Flag,为下一步在肿瘤中研究IL-33的作用和机制奠定了基础。

IL-33基因重组和表达不影响重组狂犬病病毒体外表型特征

目的 构建白细胞介素33(IL-33)基因重组的狂犬病病毒,明确表达IL-33对重组病毒体外表型特征的影响。方法从狂犬病强毒株感染的小鼠脑内扩增获得的IL-33基因,通过反向遗传操作技术插入亲本病毒LBNSE基因组的G、 L基因之间,并拯救过表达IL-33的重组病毒;将重组狂犬病毒rLBNSE-IL33和亲本毒株LBNSE感染BSR仓鼠肾细胞或NA小鼠神经瘤细胞;在感染复数=0.01的情况下,测序和荧光抗体病毒中和试验检测重组病毒在传代过程中的稳定性;检测病毒滴度病灶形成单位(FFU)绘制多步生长曲线(感染复数=0.01);细胞毒性检测试剂盒检测细胞活性;ELISA检测不同感染复数感染细胞上清中IL-33的含量。结果 拯救获得过表达IL-33的rLBNSE-IL33,rLBNSE-IL33能够稳定连续传代至少10代,且毒价约为108FFU/mL;rLBNSE-IL33能够以剂量依赖的形式高水平表达IL-33,但检测被LBNSE感染的细胞上清,没有检测到IL-33的高表达;检查rLBNSE-IL33和亲本毒株LBNSE在BSR和NA细胞中5 d内的滴度,显示无明显差别,具有相似的生长动力学特性;过表达IL-33对感染细胞增殖及活性无显著影响。结论 IL-33基因重组和表达对狂犬病病毒体外表型特征无显著影响。