垂体中叶素抑制内质网应激拮抗阿霉素诱导的H9c2心肌细胞损伤机制研究

目的利用阿霉素(doxorubicin,DOX)诱导的H9c2心肌细胞损伤模型研究垂体中叶素(intermedin,IMD)拮抗DOX心脏损伤的药理学作用和机制。方法建立H9c2细胞的DOX心脏损伤模型,设空白对照组、DOX(2μmol/L)模型组、IMD受体拮抗剂IMD17-47(1μmol/L)组和IMD8-47(10^(-8)、10^(-6)和10^(-5)mol/L)3个剂量处理组,采用CCK-8法检测心肌细胞活性,丙二醛(MDA)含量测定评价H9c2细胞的氧化应激水平,Western法检测caspase-3活化片段和内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GPR78)的表达水平,并采用Real-time PCR法检测内源性IMD及其受体系统的mRNA表达水平。结果与对照细胞相比较,DOX处理显著降低细胞存活率、增加细胞内MDA含量、caspase-3活性片段和内质网应激水平。与单纯DOX组相比较,IMD17-47抑制DOX诱导的内源性IMD的作用后明显降低细胞的存活率(P<0.05)、增加细胞内MDA含量(P<0.01)、caspase-3活化片段和内质网应激水平(P<0.01);外源性给予IMD干预呈剂量依赖性地促进DOX处理细胞的存活率、降低细胞的MDA含量、凋亡和内质网应激水平(P<0.05)。此外,DOX处理明显增加心脏组织内源性IMD及其受体的mRNA表达。结论 DOX诱导心肌细胞内源性IMD及其受体的表达,内源性IMD和外源性给予的IMD均通过DOX刺激增强的IMD受体系统,有效降低DOX诱导的氧化应激和内质网应激水平,实现其促进心肌细胞存活、抑制细胞凋亡的保护作用。

肾上腺髓质素2在肾性高血压大鼠心肌中的变化

目的：通过观察小分子生物活性肽肾上腺髓质素2在大鼠两肾一夹术后肾性高血压发生、发展过程中的变化，探讨其在病理、生理过程中的作用。方法清洁级雄性SD大鼠18只，体重180~220g，随机分为模型组和对照组。模型组行两肾一夹手术，对照组仅分离肾动脉，8周后作左心导管插管法测定血流动力学指标，并计算左室重量与体重比值；采用逆转录-聚合酶链反应方法测定心肌肾上腺髓质素2的mRNA含量变化；采用免疫组织化学方法测定左心室心肌组织的肾上腺髓质素2表达，并对表达强度进行半定量分析。结果模型组大鼠颈动脉收缩压、平均颈动脉压、LV±dp/dtmax、LVEDP较对照组明显升高（P均〈0.01），左室重量与体重也升高（P〈0.05）；模型组大鼠左室心肌肾上腺髓质素2的mRNA表达较对照组高（P〈0.01），免疫组化的累积光密度较对照组升高95%（P〈0.01），且主要发布在心肌细胞的细胞核。结论肾上腺髓质素2在肾性高血压大鼠的心肌内基因表达上调及蛋白合成增加，提示其在肾性高血压致心肌肥厚的过程中起重要作用。

小鼠垂体中叶素对异丙肾上腺素诱导的小鼠心脏肥大的保护作用研究

目的利用异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心脏肥大模型研究小鼠垂体中叶素(IMD)拮抗心脏肥大的药理学作用和机制。方法建立小剂量ISO皮下注射诱导心脏肥大的小鼠模型,研究IMD给药后的小鼠血流动力学指标和心质量/体质量比,然后利用心脏组织切片评价心肌细胞横截面积、凋亡和纤维化。采用荧光实时定量PCR法检测心脏组织的心钠素(ANP)、脑钠肽(BNP)、内源性IMD及其受体系统的mRNA表达水平。结果与ISO诱导的小鼠心脏肥大模型组相比较,腹腔注射IMD治疗明显降低ISO处理所增加的心质量/体质量比和心肌细胞横截面积、心脏肥大标志物ANP及BNP的mRNA水平,以及心肌细胞凋亡率和心肌组织纤维化率。同时,改善心脏功能,左室压力、等容收缩期左心室内压力上升的最大和下降的最小速率、每搏排血量、心输出量和射血分数明显增加,而左心室舒张末期压力显著降低。此外,ISO处理明显诱导心脏组织内源性IMD及其受体的表达。结论 ISO诱导心脏组织内源性IMD及其受体的表达,外源性给与IMD治疗可能通过ISO活化的IMD受体系统实现其拮抗心脏肥大的药理学保护作用。