酸损伤对兔食管下括约肌形态及功能的影响

目的 观察酸灌注对兔食管下括约肌 (L ES)形态及功能的影响 .方法 采用 0 .1mol·L- 1 HCL (1m L· min- 130 min· d- 1 for 4d )连续行兔食管灌注 ,测定 L ES的压力变化 .以 Fluo- 3作为钙指示剂 ,用激光共聚焦显微镜测定酸灌注前后细胞内游离钙的浓度变化 ,以及其对乙酰胆碱作用(Ach)的不同反应 .结果 酸灌注后 L ES产生明显的炎症改变 ,L ES压力降低 ,L ES平滑肌细胞内游离钙的浓度 [Ca2 + ]i明显降低 (P<0 .0 1) ,在应用 ACh时正常对照组 L ES平滑肌 [Ca2 + ]i 明显升高 (P<0 .0 1) ,而酸灌注组则无明显变化(P>0 .0 5 ) .结论 酸灌注可使兔 L ES产生明显的炎症改变 ,其平滑肌 [Ca2 + ]i 明显降低 ,可能影响兔 L

呫吨酮并吡啶衍生物XP-16诱导人肺癌A549细胞凋亡

目的探讨呫吨酮并吡啶衍生物5,9-二(2-吡咯烷基乙酰氨基)-7H-吡啶并[4,3-c]呫吨-7-酮(XP-16)对人肺癌A549细胞的抗肿瘤作用及其可能作用机制。方法通过MTT法、细胞形态学和克隆实验观察XP-16对A549细胞增殖的影响;应用Hoechst 33258和PI双染法观察细胞凋亡;荧光分光光度计检测细胞内钙([Ca2+]i)及线粒体膜电位;qRT-PCR检测Bad和金属硫蛋白1A(metallothionein 1A,MT-1A)mRNA表达。结果 XP-16能抑制A549细胞增殖,呈剂量和时间依赖性。XP-16作用A549细胞24 h后,A549细胞出现染色质聚集、核碎裂等典型的凋亡形态学改变;随XP-16剂量的增加,A549细胞凋亡百分率逐渐增大。XP-16作用后,A549细胞的[Ca2+]i和线粒体膜电位降低、Bad和MT-1A mRNA的表达增加。结论 XP-16具有诱导A549细胞凋亡的作用,可能与其降低[Ca2+]i和线粒体膜电位有关。MT-1A表达的上调可能是[Ca2+]i降低的结果。

参附注射液对肾小管上皮细胞缺氧再复氧损伤的改善作用及机制探讨

目的:探讨参附注射液(SF)对肾小管上皮细胞缺氧再复氧损伤的改善作用及机制。方法:将人近端肾小管上皮细胞系HK-2细胞分为5组:正常对照组、单纯缺氧再复氧模型组、低浓度参附组(1%)、中浓度参附组(2%)、高浓度参附组(5%)。观察各组细胞在缺氧4h再复氧8h刺激下的反应。用流式细胞仪碘化丙啶(PI)染色法和TUNEL检测细胞凋亡比例,激光共聚焦显微镜检测经Fluo-3AM标记的细胞内钙浓度,ELISA检测细胞培养液中MCP-1的浓度。结果:经流式细胞仪检测,缺氧再复氧刺激后细胞凋亡率达(32.97±1.19)%,明显高于正常对照组(P<0.01),SF可显著降低细胞凋亡率,并呈剂量依赖性(P<0.01),5%SF组凋亡率最低,与单纯模型组相比有统计学差异(P<0.01);TUNEL检测的细胞凋亡率变化趋势与流式细胞术一致;缺氧再复氧刺激后细胞内钙荧光值升高,达140.18±3.62,SF可降低胞内荧光值,并呈剂量依赖性(P<0.01),5%SF组荧光值最低61.77±4.82,与单纯模型组相比有统计学差异(P<0.01);HK-2细胞正常情况下分泌少量的MCP-1(12.04±0.44)pg/ml,在缺氧再复氧刺激下分泌量增加至(27.12±3.83)pg/ml。SF有抑制肾小管上皮细胞分泌MCP-1的作用(P<0.05),但未观察到剂量依赖性(P>0.05)。结论:参附注射液通过降低缺氧再复氧诱导的肾小管上皮细胞的凋亡率、钙超载及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的分泌发挥改善肾缺血再灌注损伤的作用。

异丙酚舒张血管平滑肌的作用机制

目的:检测异丙酚(Propofol)影响大鼠主动脉平滑肌细胞(ASMC)内游离钙离子浓度([Ca^(2+)]i)作用与影响三磷酸肌醇(inositol 1,4,5-triphosphate,IP_3)合成作用,探讨异丙酚舒张血管平滑肌的作用机制。方法:应用荧光分光光度法,通过荧光剂Fura-2/AM负荷,检测原代培养的ASMC内[Ca^(2+)]i的水平;应用[~3H]肌醇三磷酸测试系统,通过同位素竞争蛋白结合实验,检测ASMC合成IP_3水平。结果:(1)异丙酚与ASMC共同培养72小时后,检测到ASMC的[Ca^(2+)]i基线水平较对照组轻度降低,异丙酚可剂量依赖性抑制去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)引起的[Ca^(2+)]i升高作用;(2)当细胞外液无钙时或钙通道阻滞剂维拉帕米(Virapamil)存在时,异丙酚抑制[Ca^(2+)]i升高作用被部分减弱,但不被取消;(3)异丙酚可剂量依赖性地抑制NE、5-HT的促进IP_3合成作用。结论:异丙酚舒张血管平滑肌作用与抑制IP_3介导的细胞内钙释放作用(IICR)机制密切相关。