IL-12基因修饰瘤苗治疗小鼠眼内移植性黑色素瘤疗效观察

目的观察白细胞介素12(IL-12)基因修饰瘤苗对移植性黑色素瘤的疗效。方法将荷瘤模型鼠分为PBS治疗组,野生型肿瘤细胞疫苗(WTV)治疗组,IL-12基因修饰肿瘤细胞疫苗(GTV)治疗组。模型建立后的第3d、10d分别在各组鼠结膜下注射30μlPBS、30μl(3.0×106个细胞)灭活的WTV及GTV,观察角膜溃破时间、淋巴结和肺的转移率及生存时间。结果PBS组及WTV组角膜溃破时间早于GTV组,前两组间差异无统计学意义;模型建立后的第18d,GTV组淋巴结转移瘤发生率低于PBS组及WTV组,后两组间差异无统计学意义;模型建立后第28d的各组间小鼠肺转移瘤发生率及各组间小鼠生存时间均无统计学意义。结论IL-12基因修饰瘤苗对实验模型鼠荷瘤早期起到了一定的抗肿瘤效应。

IL-12基因修饰瘤苗联合CpG-ODN治疗小鼠眼内黑色素瘤的研究

目的:观察白细胞介素-12(Interleukin-12,IL-12)基因修饰瘤苗联合含非甲基化的胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(CpG)基序的寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucletide,ODN)即CpG-ODN治疗小鼠眼内黑色素瘤的疗效。方法:将荷瘤模型鼠分为磷酸盐缓冲液(phosphate-buffered saline,PBS)治疗组,IL-12基因修饰肿瘤细胞疫苗(gene modified tumor cell vaccine,GTV)治疗组及GTV联合CpG-ODN(GTVC)治疗组;鼠荷瘤模型建立后的第3d及第10d分别在各组鼠结膜下注射30μLPBS,30μL(3.0×106个细胞)灭活的GTV及含20μgCpG-ODN灭活的GTV,进行角膜溃破时间、淋巴结和肺部转移瘤发生率、生存时间及外周血CD4+和CD8+T细胞比例的观测。结果:GTV组及GTVC组角膜溃破晚于PBS组时间,前两组间差异无统计学意义;鼠荷瘤模型建立后的第18d,GTV组及GTVC组颈部淋巴结转移瘤发生率低于PBS组,前两组组间差异无统计学意义;鼠荷瘤模型建立后的第28d,GTVC组鼠肺转移瘤发生率低于PBS组及GTV组,后两组组间差异无统计学意义;PBS组及GTV组的外周血中CD4+与CD8+T细胞比值下降,GTVC组与阴性对照组组间差异无统计学意义;GTVC组小鼠生存时间长于另两组。结论:新型免疫佐剂CpG-ODN可增强IL-12基因修饰瘤苗的抗眼内黑色素瘤效应。

9例眼内出血性疾病误诊为脉络膜黑色素瘤的原因分析

目的探讨视网膜、脉络膜下出血误诊为脉络膜黑色素瘤的原因。方法回顾性分析华西医院眼科近27年来经组织病理学证实的9例视网膜或脉络膜下出血误诊为脉络膜黑色素瘤患者的临床资料。结果 9例患者就诊年龄31～82岁;病程5d～半年,4例在2周以内;仅1例有高血压病史。主要临床表现为视力下降或视野遮挡;8例视力光感至数指,仅1例矫正视力达0.4;晶体混浊和玻璃体混浊各3例,眼底不能窥入6例,眼底镜检查可见肿物3例,1例伴视网膜脱离。辅助检查:7例B超提示球内实性肿块;6例MR I检查提示多系脉络膜黑色素瘤;3例CT检查提示球内占位;3例屈光间质透明者均未行FFA检查;所有患者均未行彩超检查。治疗:8例患者行眼球摘除术,1例患者行玻璃体切割术。病理诊断:8例视网膜下出血,1例睫状体脉络膜下出血。结论对病史了解不全面、屈光间质混浊、缺乏必要的辅助检查是误诊的主要原因。

葡萄膜恶性黑色素瘤肿瘤标志物研究进展

葡萄膜恶性黑色素瘤(uveal melanoma,UM)是成人最常见的眼内原发性恶性肿瘤,在其发生发展过程中可释放多种肿瘤标志物(tumor marker,TM)。寻求有价值的特异性TM对UM早期诊断、靶向治疗和判断预后具有重要意义。我们对UM蛋白标志物及其近年来研究进展作一综述。

小鼠眼内移植性黑色素瘤诱导免疫偏离的表达

目的 观察小鼠前房和玻璃体腔的移植性黑色素瘤是否具有诱导免疫偏离的能力。方法 将雄性昆明小鼠 60只随机分为实验组及其相应的对照组共 5组。分别于实验组小鼠的前房或玻璃体腔接种黑色素瘤B16F10细胞 ,然后观察测量和比较其抗原特异性迟发型超敏反应 (DTH)的程度。结果 ( 1)小鼠前房和玻璃体腔移植性黑色素瘤均可进行性生长。 ( 2 )各组小鼠右耳DTH反应的肿胀值为前房组 ( 3 4± 3 5 ) μm ,玻璃体腔组 ( 3 6± 96) μm ,前房对照组 ( 194± 99) μm ,玻璃体腔对照组 ( 186± 5 5 ) μm以及空白对照组 ( 165± 118) μm。实验组与其相应对照组的差异具有显著性意义 (前房组t =-5 2 0 9,P =0 0 0 0 ;玻璃体腔组t =-3 871,P =0 0 0 2 )。 ( 3 )病理观察实验组“二免”后右耳未见炎性细胞浸润 ,而对照组则相反。结论 同种异体的昆明小鼠前房和玻璃体腔的移植性黑色素瘤均具有诱导其相关免疫偏离的能力。

国产^125I巩膜敷贴器治疗兔眼脉络膜黑色素瘤的有效性及安全性研究

背景脉络膜黑色素瘤（CM）是成人眼内常见的原发性恶性肿瘤，巩膜表面敷贴放射治疗（EPRT）是一种近距离放射疗法，是多年来治疗CM最常用的方法之一。但该治疗方法的研究与应用目前在国内报道较少，大多数的CM患者需行眼球摘除术。目的通过观察兔CM模型眼、正常兔眼经敷贴放射后的反应以及兔全身免疫状态，评价国产^125I巩膜敷贴器的有效性及安全性。方法新西兰大白兔40只，按随机数字表法分成5个组，每组8只兔8只眼（均取右眼）。其中放射治疗组1及模型对照组用于评价国产125I巩膜敷贴器的有效性；放射治疗组2、伪放射对照组、正常对照组用于评价国产125I巩膜敷贴器的生物安全性。有效性研究：利用B16F10鼠皮肤黑色素瘤细胞株植入兔眼制作动物模型，造模3周后放射治疗组1模型兔眼放置国产^125I巩膜敷贴器进行放射治疗，肿瘤局部照射总剂量为100Gy，模型对照组不进行治疗。每日间接检眼镜检查，每周行眼底照相、B型超声、彩色超声多普勒检查。安全性研究：放射治疗组2正常兔眼放置巩膜敷贴器，伪放射对照组正常兔眼植入不带放射粒子的敷贴器外壳，正常对照组不作任何干预。放射治疗组2、伪放射对照组于放置敷贴器前及敷贴器取出后3、7、15、30d抽取外周血，用流式细胞术检测外周血CD4＋、CD8＋T细胞数量。于放射治疗组1、模型对照组肿瘤种植后6周，放射治疗组2、伪放射对照组、正常对照组观察30d后耳缘静脉空气栓塞法处死实验兔，对实验眼进行常规组织病理学检查。结果放射治疗组1、模型对照组间放置敷贴器前肿瘤的平均高度差异无统计学意义（P=0．550）。放置敷贴器1周后，放射治疗组1肿瘤高度明显小于模型对照组，差异有统计学意义（P=0．001）；放射治疗组1放置敷贴器2周后肿瘤高度较敷贴前明显缩小，差异有统计学意义（P=0．007）。常规组织病理学检查发现，与模型对照组比较，放射治疗组1虽然仍有肿瘤细胞残存，但肿瘤内部血管明显减少且管径较细，肿瘤细胞排列紊乱，部分细胞空泡样变性，色素外露，大量纤维结缔组织增生。安全性研究中，放射治疗组2、伪放射对照组在各时间点CD4＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋T细胞流式细胞术结果比较，差异均无统计学意义（F分组=0．770、8．110、2．230；P=0．380、0．060、0．140；F时间=0．770、3．220、4．230；P=0．550、0．170、0．004）。放射治疗组2、伪放射对照组表现为角膜、结膜上皮下、巩膜表面慢性炎性细胞浸润，未见巩膜坏死、机化等表现。结论国产125I巩膜敷贴器对兔眼CM的疗效确切，对眼部其他组织以及兔令身免疫状态的影响较小。

微小RNAs与眼内恶性肿瘤

微小RNAs （miRNAs）是一类非编码的调节性小分子RNAs,长度约为22 nt.研究表明,miRNAs 对基因表达、肿瘤发生和组织特异性等方面发挥重要的调节作用,近年来对miRNAs作用机制的探索开创了miRNAs研究的新纪元.眼内恶性肿瘤是一类复杂的基因疾病,主要由基因结构和表达异常所致,miRNAs在眼内恶性肿瘤的形成过程中有决定性作用.就miRNAs与眼内恶性肿瘤的关系进行综述.

眼内恶性肿瘤基因靶向治疗研究进展

随着精准医学的发展,靶向治疗作为一种新型生物治疗手段,越来越成为研究的热点。本文就葡萄膜恶性黑色素瘤(uveal malignant melanoma,UM)、视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)和原发性玻璃体视网膜淋巴瘤(primary vitreoretinal lymphoma,PVRL)基因靶向治疗的研究进展进行综述。针对UM患者,GNAQ/GNA11基因的突变率超过90%,GαQ和Gα11蛋白抑制剂FR900359或其衍生物可能是一种潜在的治疗选择。蛋白激酶C和ERK激酶抑制剂联合治疗可能改善转移性UM患者的治疗反应。针对Yes相关蛋白的靶向治疗策略可能是未来治疗UM的有效手段。Nutlin-3a是MDM2-p53相互作用的小分子抑制剂,它在高浓度时可杀死视网膜母细胞株。SYK抑制剂是开发中的RB治疗潜在靶点。沉默CKS1B基因可以抑制RB细胞的生长和侵袭。伊布替尼可能预防或延迟CD79B阳性PVRL患者中枢神经系统受累。