生物化学教材中氨基酸分类与理化性质的辨析

生物化学教学中关于蛋白质组成的氨基酸种类和分类及其理化性质是本科教学重要内容,目前生物化学教材中有关氨基酸的阐述存在错误或不足,该文根据文献资料补充和更新一些新知识,提出一些修正意见和补充说明,并解释具有三个解离基团氨基酸的等电点(isoelectric point,pI)计算的方法和原理。

牛乳中主要过敏原的分离及其氨基酸成分分析

以市售纯牛奶和奶粉为实验原料,参照牛奶中酪蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的性质和分离方法,先用等电点沉淀法将酪蛋白分离出来,然后通过饱和硫酸铵盐析、透析膜透析、Sephadex G-50凝胶层析和DEAE-纤维素离子交换层析等纯化步骤对牛奶和奶粉中主要的过敏原进行纯化评价。并对提纯蛋白主要过敏原的氨基酸含量进行了测定和分析,牛奶中酪蛋白氨基酸质量分数总和为59.26%,牛奶酪蛋白中7种人体必需氨基酸质量分数所占百分比为22.01%,奶粉酪蛋白中为14.60%,但是它们都不含有半胱氨酸,结果为低敏或无敏原配方奶的研制提供理论依据。

猪血小板衍生生长因子的氨基酸组成和等电点分析

目的：测定猪血小板衍生生长因子的氨基酸组成和等电点。方法：用酸水解及聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦的方法测定猪血小板衍生生长因子的氨基酸含量、组成成分和等电点。结果：酸水解法测定的猪血小板衍生生长因子含有１７种不同的氨基酸，其中含有相对较多的碱性氨基酸，其等电点为９．８～１０．３。结论：猪血小板衍生生长因子是一种强阳离子多肽，含有相对较多的碱性氨基酸，与其等电点为９．８～１０．３是一致的。

赤子爱胜蚓五种纯化纤溶酶的理化性质研究

从赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆｏｅｌｉａｄ）粗制品中纯化出五种纤溶酶组分（Ⅰ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ），在ＰＡＧＥ中均呈现单一带，并富含酸性氨基酸，酪氨酸含量也较高；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得分子量分别为３４０００、３０５００、２７０００、２４５００和２１５００；ｐＩ为ｐＨ３．８０～４．２５不等；最大吸收峰均在２７６ｎｍ；在ｐＨ６．０～１０．０及５０℃以下有较高的稳定性；最适ｐＨ在８．５左右；最适温度为（６０±２）℃。组分Ⅰ在７０℃（１０ｍｉｎ）时活性不变，对某些变性剂表现出一定耐受性，其活性不被贵州小慈菇蛋白酶抑制。

饮料浑浊活性蛋白研究进展

浑浊活性蛋白易与多酚发生相互作用,并引起饮料浑浊和沉淀。文章对饮料浑浊活性蛋白的性质、分离以及检测方法进行了综述,同时还对饮料浑浊活性蛋白的控制技术进行了分析,并对今后的研究重点进行了展望。

龙眼果干蛋白组成及不同组份特性比较

以龙眼果干为原料,利用碱溶酸沉法提取龙眼果干粗蛋白,并测定其等电点,研究不同等电点龙眼蛋白的含量及其氨基酸组成,配制人工胃液以模拟不同等电点龙眼蛋白的体内消化情况,测定等电点粗蛋白及其模拟体内消化液的总抗氧化能力。结果表明:龙眼蛋白提取过程中的最佳浸泡时间为2 h,其等电点为p H3.0、p H3.5、p H4.0、p H4.5、p H5.0,其中p I3.0、p I4.0、p I5.0组份蛋白含量分别占果肉总蛋白的12.69%、21.68%、17.12%,均含有16种氨基酸,其中7种为人体必需氨基酸;不同等电点组份蛋白及其消化液总抗氧化能力有所不同,p I5.0粗蛋白的总抗氧化能力为276.33 U/mg Protein,显著高于另外2组等电点蛋白,而粗蛋白消化液总抗氧化能力最高为p I4.0蛋白,达154.72 U/mg Protein。

芋艿分离蛋白的理化性质

针对芋艿分离蛋白的等电点、变性温度、氨基酸组成及亚基分子质量分布等重要理化性质进行研究。结果表明,芋艿分离蛋白各组分的等电点主要集中在p I值为6.73和5.21两个条带,分别占分离蛋白总量的16.36%和27.30%;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析表明芋艿分离蛋白主要由4种亚基组成,其分子质量分别分布在57 000、46 300、34 200、8 500 D左右,添加巯基乙醇可增加分子质量在23 100 D左右的条带,证明芋艿分离蛋白亚基间有二硫键的交联;差示扫描量热(differential scanning calorimetry,DSC)分析确定芋艿分离蛋白的变性温度为(71.3±0.2)℃,变性焓ΔH为1.550 J/g;氨基酸组成分析表明,非极性氨基酸含量占37.26%,极性氨基酸含量占62.74%;必需氨基酸(色氨酸除外)含量占39.02%,幼儿所必需的半必需氨基酸(即精氨酸、组氨酸)含量占9.9%。

氨基酸的等电点与pKa的关系

根据氨基酸的电离平衡 ,讨论了碱性和酸性氨基酸的等电点与 pKa的关系 。

荔枝果干蛋白质组成及其抗氧化性研究

分析荔枝干果肉蛋白组成并比较不同组份蛋白质的抗氧化性。采用等电点法提取不同组份蛋白质,利用氨基酸自动分析仪测定不同组份蛋白及总蛋白的氨基酸组成,用超高压液相质谱联用系统Q1扫描测定不同等电点组份中小分子蛋白分子量分布,用抗氧化试剂盒测定不同等电点组份蛋白质的抗氧化性。试验结果表明荔枝浆浸泡2 h为蛋白质的最佳提取时间,测得pH 3.5、pH 5.5、pH 6.5和pH 7.5为荔枝蛋白的4个等电点,且4个等电点组份蛋白含量分别占果肉总蛋白的12.03%、14.37%、17.18%、9.45%;不同组份蛋白氨基酸种类相同、含量不同;pI 3.5和pI 5.5组份中含量较高的小分子蛋白集中在5000 Da附近,pI6.5和pI7.5组份中含量较高的小分子蛋白主要集中在1000 Da和5000 Da附近。说明不同组份荔枝蛋白抗氧化性不同。荔枝蛋白四个等电点组份的蛋白氨基酸含量、分子量分布及抗氧化性不同。

缓症链球菌致热性外毒素蛋白的生化性质

目的 研究缓症链球菌外毒素蛋白的分子量、等电点、氨基酸组成及N 末端序列。方法 将纯化的毒素蛋白用SDS PAGE电泳 ,据低分子量标准蛋白质算出其相对分子质量 ;以微型聚丙烯酰胺等电聚焦 (miniIEF)法进行此毒素蛋白的等点电测定 ;采用电印迹将SDS PAGE电泳胶上的毒素蛋白转移到PVDF膜上 ,用Beckman 34 4HPLC仪测定外毒素蛋白的氨基酸组成 ;用自动化蛋白质序列仪测定缓症链球菌外毒素N 末端氨基酸序列。结果 缓症链球菌外毒素蛋白的相对分子质量为 34 0 0 0 ;测定毒素蛋白的等点电为 6 .2 ,是一种偏酸性蛋白 ;外毒素蛋白由 1 7种氨基酸组成 ,其中谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、门冬氨酸、赖氨酸、缬氨酸等氨基酸含量较高 ;缓症链球菌外毒素蛋白N 末端氨基酸序列为 :VSNLSRGMGA ,本毒素N 末端氨基酸序列与β溶血链球菌外毒素蛋白 (SPEA、SPEB、SEPC)N 末端氨基酸序列不同。结论 此外毒素蛋白的分子量、等电点、氨基酸组成和末端氨基酸序列均与其他 β溶血性链球菌外毒素不同 。

从多电离基氨基酸的解离公式推导其等电点

以几种常见的多电离基氨基酸的解离公式,推导出它们的等电点,得到如下公式:pI=1/2(pK1′+pK2′)或pI=1/2(pK2′+pK3′),并对推导过程及适用条件进行详细讨论,取得了由上述公式计算的理论值与实验测定值相符的结论。

动物多肽与钠通道选择性互作的微基序空间等电点

电压门控钠通道(Voltage-gated sodium channels,Nav,钠通道)是产生和传播神经冲动的重要离子通道,是动物多肽类毒素靶通道之一。动物多肽结合不同的钠通道受体位点,改变Nav的构象和通道动力学特性。本文聚焦钠通道与动物多肽的功能性结合,以经典动物多肽AaH2、Protoxin-II与Nav1.7互作的冷冻电镜颗粒结构为模板,探究多肽结合与钠通道激活、失活相关的电压感受器构象变化,提出多肽与钠通道互作的微结构域、氨基酸基序和空间等电点效价模型,以期为新型钠通道亚型特异性人工肽的设计和研制提供新思路。

利用Excel对粳稻全蛋白质组蛋白序列进行有序化管理

利用Excel具有的数据管理功能实现粳稻全蛋白质组所有蛋白序列有序化管理,进而实现对粳稻全蛋白质组蛋白序列排序和归类。本研究将粳稻全蛋白质组48 905条蛋白序列的24个理化性质参数、蛋白名称、蛋白登录号码和蛋白序列组成数据矩阵,导入Excel中。根据蛋白不同理化性质参数进行排序,筛选得到特定理化性质的蛋白;根据蛋白名称排序,实现蛋白质家族成员和蛋白选择剪切变异体的系统归类排序;通过对粳稻全蛋白质组理化参数分布的可视化,促进对粳稻全蛋白质组更直观和全面的认识。

四种芋艿蛋白组分的理化性质

以新鲜芋艿球茎为材料制备谷蛋白、醇溶蛋白、球蛋白和清蛋白4种蛋白组分,应用等电聚焦(IEF)、差示扫描量热仪(DSC)、氨基酸分析仪、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)以及圆二色谱(CD)等比较分析了4种芋艿蛋白成分的部分物化性质.结果显示:芋艿谷蛋白、醇溶蛋白、球蛋白和清蛋白的等电点分别为pH 6.76、6.67、5.23和5.04;4种主要蛋白组分分别含有3、3、2、2种不同相对分子质量的亚基,且亚基之间拟有二硫键的交联;4种蛋白组分的变性温度分别是71.2,71.9,70.1和67.1℃,其变性热焓分别为1.551,1.470,1.455和1.434 J/g;4种蛋白组分中的极性氨基酸分别是其蛋白含量的62.73%,64.3%,63.13%和61.62%,必需氨基酸分别是其蛋白含量的39.02%,28.20%,39.23%和38.47%;二级结构方面,清蛋白的α-螺旋含量最高,β-折叠含量最低;谷蛋白的β-折叠含量最高,α-螺旋含量最低.

人类精浆特异性抗原p30理化性质的初步研究

作者在分离纯化人类精浆特异性抗原p30的基础上,用不同凝胶浓度的SDS-PAGE检测该纯化p30的分子量,用等电聚焦检测其等电点,并分析其氨基酸组成。结果证明p30与前列腺特异性抗原属同一种糖蛋白。本文还探讨了不同作者所测p30理化参数不一致的原因。

遗传密码与氨基酸等电点

标准氨基酸按等电点去排列 ,可显示出氨基酸化学性质的周期性 ,与遗传密码方阵结合 ,得出氨基酸密码编辑的内在联系 .

遗传密码编码规律的探索

氨基酸(aa)与遗传密码之间的对应关系早已确定,若找出期编码规律.必然会加深对生命现象的理解.

膜分离氨基酸的模型研究

以稳态条件下膜两侧氨基酸电离反应平衡和溶液电荷守恒为理论基础,推导了氨基酸总截留率与氨基酸分子(两性离子)截留率、氢离子截留率和溶质电离度之间的关系式以及氨基酸溶液中各种离子截留率的表达式,建立了一个膜分离氨基酸的唯象模型。利用该模型进行模拟计算,计算曲线与实验曲线基本吻合,所建立的模型为膜分离多元有机酸的截留规律研究提供了理论参考。

以氨基酸的等电点判断梅拉德反应体系的pH值

以甘氨酸提供氨基、以葡萄糖提供羰基,对梅拉德反应条件之一的pH值进行了研究。实验表明:可以氨基酸的等电点(pI)判断梅拉德反应体系的酸碱环境(pH)。即:pI值是反应体系的临界值;当pH≤pI时,反应停留在中间产物阶段;当pH>pI时,反应顺利进行,并且,随着pH值的升高,反应产物变得丰富。

外科皮瓣中纤维囊的组织学及超微结构观察

目的 探讨纤维囊在外科皮瓣中的作用及意义。方法 应用光镜、电镜对６例纤维囊组织进行观察及形态学计量分析。结果 纤维囊主要由成纤维细胞、胶原纤维、成肌纤维细胞所组成，其内的毛细血管数目明显高于正常人真皮内毛细血管数目（Ｐ＜０．０１）。结论 纤维囊对外科皮瓣起支持保护及营养作用，对于填补组织缺损和弹性回缩起一定作用。