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福氏志贺菌ipaB基因的克隆表达及免疫原性研究 被引量:1
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作者 王国富 薛士鹏 +1 位作者 白丽 吴利先 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第19期3183-3185,共3页
目的:构建福氏志贺菌ipaB基因的原核表达载体,诱导表达并纯化。探讨重组蛋白IpaB经口服免疫小鼠后,机体产生的免疫应答。方法:用PCR扩增ipaB目的基因,克隆至pQE-30表达载体中,转化宿主菌DH5α,经IPTG诱导表达蛋白IpaB;Western blot分析... 目的:构建福氏志贺菌ipaB基因的原核表达载体,诱导表达并纯化。探讨重组蛋白IpaB经口服免疫小鼠后,机体产生的免疫应答。方法:用PCR扩增ipaB目的基因,克隆至pQE-30表达载体中,转化宿主菌DH5α,经IPTG诱导表达蛋白IpaB;Western blot分析其抗原性。纯化后灌胃免疫小鼠,ELISA法检测血清IgG、IgA、小肠黏液sIgA和粪便sIgA。结果:ipaB基因全长1743bp。经SDS-PAGE分析相对分子量(Mr)约为64000。Western blot分析能与福氏志贺菌全菌抗血清反应。免疫小鼠后,血清IgA、IgG,粪sIgA,肠黏液sIgA明显高于对照组(P<0.01)。结论:成功构建了ipaB基因的原核表达载体并能高效表达,纯化后口服免疫可有效诱导黏膜免疫应答,产生高水平的sIgA,发挥局部黏膜免疫作用,为进一步研究细菌性痢疾的疫苗和发病机制奠定基础。 展开更多
关键词 志贺菌 弗氏 ipab基因 克隆 表达 免疫原性
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福氏志贺菌ipaB基因的克隆及其在酵母细胞中的表达
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作者 姚潇 王恒樑 +2 位作者 闫晓宇 杨伯伦 黄留玉 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期418-421,共4页
ipaB gene amplified from S. flexneri 2a by PCR was cloned into pGBKT7 vector (Named pGBKT-ipaB) and sequencing indicated that the amino encoded by the cloned gene was the same as the reported; The recombination plasmi... ipaB gene amplified from S. flexneri 2a by PCR was cloned into pGBKT7 vector (Named pGBKT-ipaB) and sequencing indicated that the amino encoded by the cloned gene was the same as the reported; The recombination plasmid pGBKT-ipaB was transformed into the yeast strain AH109, in which the fusion expression of IpaB was analyzed with SDS-PAGE and Western blotting. This provided the basis for screening the interacting protein with IpaB by two hybrid system and understanding the function of IpaB in the pathogenesis of S. flexneri further. 展开更多
关键词 福氏志贺菌 ipab基因 克隆 酵母细胞 表达
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福氏志贺菌ipaB基因的克隆及序列测定
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作者 王国富 白丽 +1 位作者 薛士鹏 吴利先 《大理学院学报(综合版)》 CAS 2012年第3期28-30,共3页
目的:克隆福氏志贺菌(Shigella flexneri,S.flexne)的ipaB基因。方法:以福氏志贺菌2a 2457T(Nal)r为模板,用PCR扩增ipaB目的基因片段,克隆至pQE-30表达载体中,构建含目的基因的表达质粒pQE-ipaB。结果:构建了重组质粒pQE-ipaB,ipaB基因... 目的:克隆福氏志贺菌(Shigella flexneri,S.flexne)的ipaB基因。方法:以福氏志贺菌2a 2457T(Nal)r为模板,用PCR扩增ipaB目的基因片段,克隆至pQE-30表达载体中,构建含目的基因的表达质粒pQE-ipaB。结果:构建了重组质粒pQE-ipaB,ipaB基因全长1 743 bp,经测序分析与预期相符。结论:成功克隆了ipaB基因。 展开更多
关键词 福氏志贺菌 ipab基因 克隆 测定 一致
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