山慈菇提取物对人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察不同浓度山慈菇提取物对人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:以SW480细胞为研究对象,设立不同浓度山慈菇提取物与空白组,采用CCK-8法检测SW480细胞的活性,克隆形成实验检测SW480细胞克隆形成能力,Hoechst 33258染色检测SW480细胞凋亡时细胞核的形态学变化,Western blot法检测SW480细胞中星形细胞上调基因-1(Astrocyte elevated gene-1,AEG-1)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2-associated X的蛋白质(Bax)表达水平,最后采用shRNA干扰技术沉默SW480细胞中AEG-1基因的表达检测AEG-1基因是否能影响SW480细胞的增殖以及Bcl-2和Bax的蛋白表达。结果:与空白组比较,山慈菇提取物能显著抑制SW480细胞活性和细胞克隆形成能力(P<0.05);Hoechst 33258染色后观察可见细胞形态皱缩并形成凋亡小体;与空白组比较,山慈菇提取物组AEG-1和Bcl-2蛋白表达水平明显降低,Bax蛋白表达水平则明显增加(P<0.05);经shRNA沉默AEG-1基因表达后,SW480细胞中AEG-1蛋白水平显著下降(P<0.05);与阴性对照组比较,AEG-1沉默慢病毒转染组SW480细胞中Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05),Bax蛋白表达明显增加(P<0.05),细胞活性和细胞克隆形成能力均受到明显抑制(P<0.05)。结论:山慈菇提取物具有明显抑制SW480细胞增殖并诱导凋亡的作用,其机制可能与抑制AEG-1蛋白表达、继而下调Bcl-2蛋白的表达水平、上调Bax蛋白表达水平有关。

山慈菇提取物对肝癌细胞增殖及TNF-α、IL-1β、IL-6表达的影响

目的观察山慈菇提取物对肝癌SMMC-7721细胞增殖及TNF-α、IL-1β、IL-6表达的影响。方法对SMMC-7721细胞分别给予0、100、200、400、600、800、1000 mg/L山慈菇提取物培养24、48、72 h,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率。将SMMC-7721细胞分为0 mg/L组、400 mg/L组、600 mg/L组、800 mg/L组,分别加入0、400、600、800 mg/L的山慈菇提取物培养24 h,采用平板克隆形成实验测算细胞克隆形成率,光学倒置显微镜下观察细胞形态变化,采用qRT-PCR法检测细胞中的TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA,采用ELISA法检测细胞培养液上清中的TNF-α、IL-1β、IL-6。结果400、600、800 mg/L组细胞克隆形成率低于0 mg/L组,600、800 mg/L组克隆形成率低于400 mg/L组(P均<0.05)。400、600、800 mg/L组随着药物浓度增大,细胞形态皱缩,贴壁差,细胞易脱落,尤以800 mg/L组最明显。400、600、800 mg/L组细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达及细胞培养液上清TNF-α、IL-1β、IL-6水平均低于0 mg/L组,600、800 mg/L组低于400 mg/L组(P均<0.05)。结论山慈菇提取物可抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖,并抑制细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6的表达与分泌。山慈菇提取物可能是通过抑制炎症因子分泌,调节肿瘤微环境,从而抑制肿瘤细胞增殖。

正交试验法优选山黄祛痛喷雾剂醇提工艺

目的优选山黄祛痛喷雾剂醇提工艺。方法采用L9(34)正交试验法考察乙醇浓度、乙醇用量、回流时间、回流次数4个因素在不同水平对秋水仙碱、槲皮素含量和出膏率的影响。结果影响因素按程度大小依次为回流次数、乙醇浓度、回流时间和乙醇用量;山黄祛痛喷雾剂最佳醇提工艺为丽江山慈菇和凤仙透骨草采用8倍量70%乙醇,回流提取2次,每次1. 5 h。结论该醇提工艺稳定可行、质量可控,可用于山黄祛痛喷雾剂的制备。