骨碎补总黄酮对iPS⁃MSCs成骨分化的影响

目的研究骨碎补总黄酮对诱导多能干细胞来源的间充质干细胞(iPS-MSCs)成骨分化的影响。方法将骨碎补总黄酮稀释为15.63、31.25、62.5、125、250μg/mL的6个浓度,加入细胞培养基中,其中不含骨碎补总黄酮的培养基作为对照组,将iPS-MSCs分别接种于不同浓度的培养基中。采用CCK8法检测各组iPS-MSCs增殖情况,ALP活性检测及茜素红染色法检测各组成骨分化情况,RT-PCR检测各组OCN、CollagenⅠmRNA表达情况。结果CCK8法检测显示125、250μg/mL浓度的骨碎补总黄酮抑制iPS-MSCs生长,因此选用62.5μg/mL浓度以下研究iPS-MSCs的分化情况。在成骨诱导培养基培养后,3个处理组ALP活性均高于空白对照组,并伴有茜素红观察钙化结节相应增多,差异均具有统计学意义(P<0.01)。除此之外,RT-PCR结果显示3个浓度组的OCN、CollagenⅠmRNA表达量均高于空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论骨碎补总黄酮能够促进iPS-MSCs成骨分化,其作用机制可能与促成骨关键因子OCN和collagenⅠ的表达有关。