HPLC-MS法测定人血浆中厄贝沙坦的浓度

目的建立快速、灵敏的HPLC-MS法测定人血浆中厄贝沙坦的浓度，并研究厄贝沙坦片在健康人体内的药动学。方法以对乙酰氨基酚为内标，血浆样品经乙酸乙酯萃取后，以乙腈-水（40：60，v／v）为流动相，经Sinochrom ODS-BP C18柱分离，以负离子方式检测，扫描方式为选择离子监测（SIM）。用于定量分析的离子分别为m／z 427．35（厄贝沙坦）和m／z 150．10（对乙酰氨基酚）。结果测定血浆中厄贝沙坦方法的线性范围为20～5000ng·mL^-1（r〉0．997），定量下限20ng·mL^-1。日内RSD％为3．8％～6．1％，日间RSD％为3．3％～14．4％，厄贝沙坦提取回收率为71．3％～87．9％；内标对乙酰氨基酚提取回收率为93．7％。每个样品分析时间为4．0min。应用此法研究了20名健康受试者单剂量口服150mg厄贝沙坦片后的药动学特点。结论该法选择性强，灵敏度高，适用于厄贝沙坦的临床药动学研究。

厄贝沙坦对2型糖尿病大鼠肾组织中核因子-κB和MMP-9/TIMP-1表达的影响

目的:观察2型糖尿病大鼠模型肾组织中核因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)的表达,并探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂厄贝沙坦对NF-κB、MMP-9、TIMP-1及肾脏结构与功能的影响。方法:将24只雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组(A组)8只、模型组16只,应用高糖高脂加小剂量链脲佐菌素方法制备2型糖尿病大鼠模型,造模成功后模型组再分为糖尿病组(B组)8只和厄贝沙坦治疗组(C组)8只。6周后采用免疫组织化学及RT-PCR法检测各组大鼠肾脏组织中MMP-9、TIMP-1及NF-κBp65 mRNA的表达,观察肾脏结构和功能的变化。结果:(1)B组大鼠肾组织中NF-κB、TIMP-1的表达较A组和C组明显增强,C组表达强度介于A组和B组之间;MMP-9的表达情况则与之相反。(2)与A组和C组相比,B组肾小球基底膜明显增厚,系膜外基质及尿蛋白排泄率明显增多,C组的病理变化则较B组有所减轻。结论:NF-κB、MMP-9、TIMP-1参与了2型糖尿病肾病的发生、发展病理过程。厄贝沙坦通过抑制NF-κB活性、上调MMP-9、下调TIMP-1发挥其降低蛋白尿、延缓肾脏病理改变发生等治疗作用。

厄贝沙坦对糖尿病肾病模型大鼠结缔组织生长因子的影响

目的观察血管紧张肽Ⅱ受体拮抗药厄贝沙坦对2型糖尿病模型大鼠肾脏结缔组织生长因子(CTGF)的影响。方法将SD大鼠分为假手术组(sham组)、糖尿病肾病模型组(DN组,采用右肾切除+高脂饮食+STZ制作糖尿病肾病模型)和厄贝沙坦治疗组(DNE组,采用STZ制作糖尿病肾病模型后给予厄贝沙坦治疗),实验第12周末测定大鼠血糖、血胰岛素、血脂、24 h尿蛋白定量、肌酐清除率(Ccr),免疫组化观察肾CTGF表达情况。结果DN组大鼠血糖、血胰岛素、血脂、24 h尿蛋白定量、肌酐清除率(Ccr)及CTGF的表达均高于Sham组(P<0.05或P<0.01),DNE组明显低于DN组(均P<0.05)。肾局部CTGF与尿蛋白、肾小球体积呈正相关(P<0.05)。结论2型糖尿病肾病CTGF表达升高,厄贝沙坦可能通过抑制CTGF表达而减轻DN损害,保护肾功能。

厄贝沙坦、依那普利及其合用对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护的对比研究

目的对比观察厄贝沙坦、依那普利及其合用对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用及可能机制。方法将40只Wistar雄性大鼠随机分为4组,药物预处理1周后测定体重,血流动力学监测下建立大鼠心肌缺血再灌注模型。实验终点取血测CK-MB、TNF-α活性;伊文氏兰逆行主动脉灌注,TTC染色后称取左室、缺血及坏死区重量。结果4组所测得的体重、血流动力学指标差异无显著性;厄贝沙坦组、依那普利组、两药合用组心肌坏死范围、缺血范围明显小于对照组(P<0.01 -0.001);TNF-α、CK-MB活性3个治疗组均小于时照组。结论厄贝沙坦、依那普利对MIRl有相似的保护作用,两药合用并无叠加效应。

胺碘酮、厄贝沙坦及其合用对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护的对比研究

目的对比观察胺碘酮、厄贝沙坦及其合用对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用及可能机制。方法将50只SD雄性大鼠随机分为5组,按实验要求预处理1周后,小动物呼吸机、心电监护下建立大鼠MIRI模型。测再灌注120min时血流动力学指标;取血测MDA含量、SOD活性;心肌染色后称取左室、缺血及梗死区重量。结果5组血流动力学指标差异无显著性(P>0.05);药物干预组再灌注心律失常、缺血范围、梗死范围、MDA含量、SOD活性与假手术组、缺血再灌注组有显著差异(P<0.05);联合用药组与单药组有显著差异(P<0.05)。结论胺碘酮、厄贝沙坦对MIRI有保护作用,联合用药有叠加效应。

伊贝沙坦治疗轻中度原发性高血压的疗效和安全性

目的:观察伊贝沙坦治疗轻中度原发性高血压的疗效和安全性。方法:采用随机双盲平行对照试验的方 法。将符合条件的轻中度原发性高血压患者65例随机分为伊贝沙坦组和贝那普利组。每天一次口服伊贝沙 坦150mg或贝那普利10mg,疗程共8周。结果:(1)治疗8周后,伊贝沙坦组降压总有效率75%,贝那普利组 总有效率68.8%,两组无统计学差异(P<0.05)。(2)治疗前后收缩压、舒张压下降幅度分别为:伊贝沙坦组 11.4%和12.6%,贝那普利组8.8%和11.0%,无统计学差异(P>0.05)。(3)不良反应的发生率,伊贝沙坦组 为3.1%,贝那普利组为15.2%,二者有显著性差异(P<0.05)。常见的不良反应有咳嗽、头晕等。结论:伊贝 沙坦150mg/d治疗轻中度原发性高血压安全有效,不良反应发生率低于贝那普利。

厄贝沙坦治疗慢性肾功能不全合并高尿酸血症的疗效观察

目的探讨厄贝沙坦治疗慢性肾功能不全合并高尿酸血症的疗效。方法将84例慢性肾功能不全合并高尿酸血症的患者随机分为A、B、C3组，分别给予厄贝沙坦、厄贝沙坦双倍剂量和非血管紧张素受体拮抗剂类降压药治疗，凡影响尿酸代谢的药物均不使用。于治疗前和治疗后15、30、45d检测血尿酸、血压水平及。肾功能。结果A、B两组患者治疗后血尿酸值明显下降，有显著性差异（P〈0．01），而C组患者治疗前、后血尿酸水平无显著性差异（P〉0．05）。3组患者血压水平均控制在135／85mmHg以下，且血尿酸下降水平与血肌酐的下降水平无相关关系。结论厄贝沙坦降压保护肾功能同时能明显的降低血尿酸水平。

依那普利、厄贝沙坦单用和联用对高血压大鼠主动脉重塑与中膜钠泵及钙泵的影响

目的观察依那普利、厄贝沙坦单用及联用改善肾血管性高血压大鼠(RHR)主动脉重塑的疗效,观察RHR主动脉平滑肌细胞膜钠泵、钙泵活性及钠泵α1亚单位、细胞质膜钙泵亚型1(PMCA1)mRNA表达水平变化,探讨依那普利及厄贝沙坦改善动脉重塑的可能机制。方法建立"两肾一夹"RHR模型,设立假手术组(n=6)、模型组(n=6)、依那普利组[10mg/(kg.d),n=6]、厄贝沙坦组[50mg/(kg.d),n=6]、依那普利+厄贝沙坦组[5mg/(kg.d)+25mg/(kg.d),n=6)],药物连续干预6周。采用HE染色、免疫组化染色、Masson染色观察主动脉中膜形态和结构变化,放射免疫法检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,酶学比色法检测细胞膜钠泵及钙泵活性,realtime PCR法检测细胞膜钠泵及钙泵mRNA表达水平。结果 RHR血压显著升高,主动脉中膜面积及厚度明显增加,组织局部钠泵、钙泵活性及钠泵α1亚单位、PMCA1 mRNA表达水平明显降低(P<0.01)。依那普利及厄贝沙坦均能减小RHR主动脉中膜面积及厚度,改善平滑肌肥大和胶原纤维含量增加,且均能升高RHR主动脉中膜钠泵、钙泵活性(P<0.01或P<0.05)。依那普利降低主动脉中膜AngⅡ含量,上调钠泵α1亚单位、PMCA1 mRNA表达水平(P<0.01),而厄贝沙坦升高动脉中膜AngⅡ含量(P<0.01),对钠泵α1亚单位、PMCA1 mRNA表达水平无显著影响。两药联合降压及减小动脉中膜面积、厚度和升高钠泵、钙泵活性存在协同作用(P<0.01)。结论依那普利、厄贝沙坦联用改善主动脉重塑优于两药单用,其机制可能与它们升高主动脉中膜钠泵和钙泵活性有关。依那普利可能通过上调钠泵及钙泵mRNA表达水平改善钠泵及钙泵活性受抑。

CyPA与急性肾损伤相关性及作用研究

研究亲环素A(Cy PA)在正常人群及急性肾损伤(AKI)患者外周血中的浓度变化,探讨Cy PA是否与急性肾损伤有关及其可能的作用机制.检测急性肾损伤患者外周血中厄贝沙坦治疗前后Cy PA、Ang II、TNFα、IL-6、IL-1α、MCP-1水平,并以正常人为对照组.结果发现AKI组外周血Cy PA水平治疗前高于正常对照组.AKI组Cy PA与Ang II及TNFα、IL-6、IL-1α正相关,与MCP-1负相关,相关系数分别为0.6,0.539,0.688,0.693,-0.725.说明Cy PA作为一种炎症细胞介质,可能协同Ang II,参与了AKI患者炎性反应,加重肾小管上皮细胞损伤及细胞凋亡.通过选择性地抑制或阻断Cy PA或Ang II受体可能为我们提供一条对急性肾损伤的新治疗途径.

厄贝沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的抑制作用

目的探讨厄贝沙坦对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠肾间质纤维化的抑制作用及其可能机制。方法 25只SD大鼠随机分为假手术组5只、UUO组和UUO厄贝沙坦治疗组(厄贝沙坦组)各10只,UUO组和厄贝沙坦组建立UUO大鼠模型,术后厄贝沙坦组给予厄贝沙坦50mg/(kg·d)灌胃,假手术组及UUO组大鼠以等量蒸馏水灌胃。术后第14天,取大鼠肾组织行Masson染色,观察肾脏组织病理改变并进行肾间质纤维化评分,采用Western blot法检测肾组织钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、β-链蛋白(β-catenin)、Snail1蛋白表达情况。结果术后第14天,假手术组大鼠肾组织形态结构基本正常;UUO组大鼠出现明显肾小管萎缩,间质炎细胞浸润,间质增宽及小管间质纤维化表现;厄贝沙坦组大鼠肾组织病理学改变较UUO组明显减轻;UUO组大鼠肾间质纤维化评分(2.35±0.21)高于厄贝沙坦组(1.58±0.34)和假手术组(0.23±0.16)(P<0.05),厄贝沙坦组高于假手术组(P<0.05);术后第14天,UUO组大鼠肾组织E-cadherin表达水平(0.41±0.21)低于假手术组(1.31±0.13)和厄贝沙坦组(0.72±0.16),α-SMA、β-catenin和Snail1表达水平(1.50±0.23、1.47±0.14、1.25±0.06)高于假手术组(0.46±0.19、0.51±0.11、0.29±0.17)和厄贝沙坦组(0.86±0.26、0.77±0.21、0.68±0.24)(P<0.05);厄贝沙坦组大鼠肾组织E-cadherin表达水平低于假手术组,α-SMA、β-catenin和Snail1蛋白表达水平高于假手术组(P<0.05)。结论厄贝沙坦可部分抑制UUO大鼠肾间质纤维化,其机制可能与抑制β-catenin/Snail1通路有关。

柱切换离子色谱法测定厄贝沙坦中的叠氮根离子

目的:用双泵柱切换离子色谱系统直接进样测定厄贝沙坦中的痕量叠氮根离子。方法:采用Dionex IonPac NG1柱将所需分析的痕量N3-从厄贝沙坦基质中分离出来,再将被分析组分通过Dionex TAC-ULP1进行浓缩,最后将浓缩的N3-通过Di-onex IonPac AS18+AG18分析柱进行分离,抑制性电导检测器进行检测。结果:方法重复性良好,回收率在95.4%～98.9%之间,最低检出限为3 ng.mL-1,在0.04～0.40μg.mL-1浓度范围内线性关系良好。结论:本文方法可以在脂溶性药物的痕量离子测定中广泛应用。