射干的毛细管电泳指纹图谱研究

采用毛细管区带电泳法,以80mmol/L硼酸 15mmol/L硼砂缓冲液(用氢氧化钾溶液调pH9 7)为背景电解质,运行电压12 1kV,检测波长228nm,重力进样10s(高度7cm),建立了射干药材的毛细管电泳指纹图谱(CEFP)。标定CE指纹峰为21个,方法的精密度和重现性较好,相对迁移时间的相对标准偏差(RSD)不大于3 5%,相对峰面积的RSD约为5 0%,10个产地样品的CEFP与标准CEFP的相似度为0 913～0 993。同时,对指纹图谱中各指纹峰确立的方法和各组分含量情况的评价方法进行了初步探讨。

薄叶鸢尾的化学成分研究

目的 :从鸢尾属植物薄叶鸢尾 (IrisleptophyllaLingel.)根茎中分离出黄酮类化合物。方法 :采用80 %乙醇提取 ,硅胶柱层析及重结晶等方法从鸢尾属植物薄叶鸢尾中分离其化学成分。通过波谱及化学方法进行结构鉴定。结果 :分离得到 8个化合物 ,其中 5个为异黄酮类成分 ,分别为 :次野鸢尾黄素irisflorentin(Ⅰ )、德鸢尾苷元irilone(Ⅱ )、野鸢尾苷iridin(Ⅲ )、鸢尾苷tectoridin(Ⅳ )、德鸢尾苷irilone 4′ glucoside(Ⅴ ) ,其余 3个化合物分别为胡萝卜苷 (Ⅵ )、β 谷甾醇 (Ⅶ )、十八烷基酸 (Ⅷ )。这些化合物都为在该植物中首次发现。

米泔水炮制后射干药材中6种异黄酮类含量的变化

目的考察米泔水炮制前后射干药材中6种异黄酮类成分的含量变化。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定射干生品及米泔水炮制品中射干苷、野鸢尾苷、鸢尾黄素、鸢尾甲黄素A、鸢尾甲黄素B、野鸢尾黄素的含量,流动相为乙腈-0.1磷酸水(每100 m L含甲基-β-环糊精和2-羟丙基-β-环糊精各0.375 g),梯度洗脱。结果射干药材经米泔水炮制后,射干苷及野鸢尾苷等苷类成分含量降低,而鸢尾黄素、鸢尾甲黄素A、鸢尾甲黄素B、野鸢尾黄素等苷元含量有所增加。结论米泔水炮制后射干中6种异黄酮类成分的含量均发生了变化,可促使异黄酮苷类成分向异黄酮苷元类成分转化。

HPLC法同时测定黄芩射干汤中8种有效成分的含量

目的建立同时测定黄芩射干汤中8种有效成分射干苷、野鸢尾苷、黄芩苷、汉黄芩苷、鸢尾黄素、黄芩素、次野鸢尾黄素、千层纸素A含量的方法。方法采用HPLC-VWD法,色谱柱为Promosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.1%磷酸水(A)-乙腈(B);梯度洗脱;检测波长270 nm;柱温:28℃。结果射干苷、野鸢尾苷、黄芩苷、汉黄芩苷、鸢尾黄素、黄芩素、次野鸢尾黄素及千层纸素A的质量与峰面积分别在0.05625~0.3375μg(r=0.9999)、0.01613~0.09677μg(r=1.000)、0.3146~1.888μg(r=1.000)、0.1199~0.7194μg(r=1.000)、0.008656~0.05194μg(r=0.9999)、0.05632~0.3379μg(r=0.9997)、0.01134~0.06802μg(r=1.000)、0.01035~0.06211μg(r=0.9998)呈良好的线性关系。结论该方法精密度、稳定性、重复性良好,适用于黄芩射干汤中上8种成分的含量测定。

HPLC法同时测定射干提取物多组分含量

目的：建立同时测定射干提取物中鸢尾苷、野鸢尾苷、鸢尾黄素、野鸢尾黄素、次野鸢尾黄素及白射干素6种有效成分含量的HPLC法。方法：采用KromasilC18色谱柱（5μm,4.6mm×200mm）,流动相为乙腈和0.5%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0mL/min;检测波265nm。结果：鸢尾苷、野鸢尾苷、鸢尾黄素、野鸢尾黄素、次野鸢尾黄素及白射干素线性范围分别是：0.3188~1.9129μg（r=0.9910）,0.1156~0.5782μg（r=0.9998）,0.0633~0.3164μg（r=0.9990）,0.4146~2.0730μg（r=0.9991）,0.0818~0.4091μg（r=0.991）,0.0458~0.2291μg（r=0.9990）,对照品线性关系良好,各对照品的平均回收率分别为：97.44%、98.29%、97.41%、98.01%、98.34%、96.73%。结论：该方法准确、可靠、重现性好可用于射干提取物的质量控制。

HPLC法测定不同产地中药射干的鸢尾苷含量

为快速鉴别不同产地中药射干Belamcanda chinensis(L.)DC中的鸢尾苷含量差异,以期筛选质量最优者,作为临床用药。试验利用射干干粉甲醇超声波提取,滤液用HPLC测定。结果表明:不同产地射干中鸢尾苷含量由高到低分别为:河南信阳>贵州铜仁>四川成都>广西龙州>河北安果>湖北兴山>辽宁沈阳>湖南龙山。

射贝止咳口服液制备工艺的研究

目的确定射贝止咳口服液的最佳制备工艺条件。方法采用4因素、三水平正交设计法,以组方中的射干总黄酮含量、浸膏率为指标,筛选影响射贝止咳口服液水提醇沉工艺的因素。结果射贝止咳口服液的最佳工艺条件为:第1次、第2次加水分别为10倍量、8倍量,浸泡30min,煎煮2h,煎煮2次,醇沉浓度为60%。结论该制备工艺科学合理、质量稳定,为射贝止咳口服液的最佳制备工艺。

清咽润喉丸中抗炎成分含量测定方法研究

目的建立清咽润喉丸中野鸢尾苷、野鸢尾黄素含量测定方法。方法利用L9(34)正交设计选择供试液制备的最佳方法,采用色谱柱C18(Synergi 4μpolar-RP80A,4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸水作流动相,梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,柱温为30℃,检测波长为265 nm。结果野鸢尾苷、野鸢尾黄素分别在0.02563~0.3845μg(r=0.9995)、0.07373~1.106μg(r=0.9996)范围内线性关系良好,且精密度、重现性、稳定性的RSD值分别为1.65%、1.45%、1.89%,平均加样回收率分别为96.05%、96.15%。结论该方法准确可靠、灵敏度高、分离效果好,可用于清咽润喉丸的含量测定和质量控制。

RP-HPLC法测定射干和鸢尾中射干甙、鸢尾甙的含量

用RP－HPLC法测定射手和鸢尾中射干甙、鸢尾甙的含量．色谱柱以十八烷基键合硅胶为填料，流动相为甲醇－0．2％磷酸溶液（23：77），检测波长265nm。射干甙、鸢尾甙的平均回收率分别为99．40％、100．23％，RSD分别为2．6％、2．2％。结果射干中含射干甙0．24％、鸢尾甙0．35％，鸢尾中含射干甙2．66％、鸢尾甙0．07％。该方法操作简单，结果准确可靠。

Microwave-assisted Extraction of Isoflavones from Belamcanda chinensis

Microwave-assisted extraction (MAE) of isoflavones from Beiamcanda chinensis was studied using ethanol as the solvent. The single factor experiment and the orthogonal method were used to optimize the MAE condition. It was concluded that two doses of intermittent microwave power radiation, 300 W each for 4 min, were needed for extraction. The mass ratio of solvent to material was 8:1 and the alcohol mass fraction was 80%. The extracted liquor was then concentrated under vacuum and degreased with petroleum ether. The yield of total isoflavones was about 8.8% and the contents of tectoridin and iridin were 67.6% and 16.3% respectively. Compared with direct-heating extraction (DHE), MAE may shorten extracting duration, reduce solvent consumption, and improve yield and purity of isoflavones from Belamcanda chinensis.

射干、川射干、白射干薄层色谱及含量测定研究

采用射干甙、鸢尾甙、射干甙元及次野鸢尾黄素作对照品，在含０．５％羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶ＨＦ２５４薄层板上，以氯仿—甲醇—甲酸为展开剂，用岛津ＣＳ—９３０薄层扫描仪，对射干、川射干、白射干作了薄层色谱、光谱扫描、色谱扫描的定性比较，以及通过方法学实验研究，拟订了含量测定方法，并对主要成分射干甙作含量测定比较。结果：白射干与射干的薄层色谱近似，川射干与射干的薄层色谱有较明显的差异；３种射干中的射干甙含量有明显的差异，同一品种，也因产地不同而异，白射干含０．３７％～０．５６％，射干含０．８１％～２．００％，川射干含３．７７％～５．６４％。

鸢尾素有效降低阿霉素诱导心肌损伤大鼠炎症反应和心肌细胞凋亡

目的研究鸢尾素(Irisin)对阿霉素诱导心肌损伤大鼠的炎症反应和心肌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法采用阿霉素诱导方法建立Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌损伤模型并随机分成正常对照组(control group)、心肌损伤模型组(model group)和低、中、高浓度鸢尾素处理组。Irisin处理4周后,检测各组大鼠心功能指标(HR、LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax),HE染色检测心肌组织病理变化,流式细胞术检测心肌组织中活性氧(ROS)水平;ELISA方法检测心肌组织中炎症因子(IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ)水平;Tunel染色检测心肌组织细胞凋亡情况;免疫印迹法检测心肌组织中p-AKT/AKT水平变化。结果模型组大鼠心功能指标显著下降,且心肌组织病理损伤严重;心肌组织中ROS阳性比例、炎症因子水平和细胞凋亡率均显著上升,而p-AKT/AKT水平显著下降(P<0.05)。经低、中、高浓度Irisin作用后,各组大鼠心功能指标逐渐回升,心肌组织病理损伤也逐渐减轻,且心肌组织中ROS阳性比例、炎症因子水平和细胞凋亡率均逐渐降低,而p-AKT/AKT水平显著上升(P<0.05)。结论Irisin有效降低阿霉素诱导的心肌损伤,通过抑制炎症反应、ROS水平和心肌细胞凋亡发挥作用并与AKT磷酸化相关。

HPLC法测定不同产地川射干中6个活性成分的含量

目的:比较不同产地川射干中射干苷、鸢尾甲苷A、鸢尾甲苷B、野鸢尾苷、野鸢尾黄素和次野鸢尾黄素6个活性成分的含量,为该药材资源的综合开发利用提供科学依据。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Extend C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇(A)-含0.3%甲基-β-环糊精的0.2%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 ml·min-1,检测波长为265nm,柱温30℃。结果:在上述条件下,射干苷、鸢尾甲苷A、鸢尾甲苷B、野鸢尾苷、野鸢尾黄素和次野鸢尾黄素平均回收率分别为100.3%,98.8%,98.1%,101.0%,101.3%,100.8%,RSD分别为0.70%,1.53%,0.39%,1.57%,1.41%,0.98%(n=6);进样量分别在0.040~1.213μg,0.010~0.306μg,0.017~0.498μg,0.006~0.171μg,0.006~0.169μg,0.003~0.090μg范围内线性关系良好(r≥0.999 4);25批样品中6个成分的含量分别为5.923 5~43.514 4 mg·g-1,1.385 6~9.253 1 mg·g-1,3.526 2~16.028 5 mg·g-1,0.985 6~7.654 1 mg·g-1,2.965 6~12.354 1 mg·g-1,0.856 2~5.146 5 mg·g-1。结论:本试验所建立的方法可为川射干的质量控制提供科学的依据。

野鸢尾苷的制备及其对小鼠离体小肠平滑肌调节作用研究

目的:从中药川射干中分离制备野鸢尾苷单体,初步探究野鸢尾苷对小鼠离体小肠平滑肌调节作用。方法:采用多溶剂萃取法制备野鸢尾苷,采用改良的Ellman比色法探究野鸢尾苷对乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响;并结合采用离体小肠平滑肌实验方法,取小鼠小肠平滑肌,在K⁃H液中制备小肠平滑肌环,通过BL⁃420S生物机能实验系统测定其张力的变化,观察野鸢尾苷对小鼠离体小肠平滑肌静息张力及对新斯的明、碘解磷定诱导小肠平滑肌收缩的影响。结果:多溶剂萃取法所得的野鸢尾苷单体,经HPLC峰面积归一化法计算其纯度>98%;野鸢尾苷对AChE活性具有抑制作用,其IC_(50)为4.09 mg·mL^(-1),且呈剂量依赖关系;野鸢尾苷(0.014~4.604 mg·mL^(-1))对正常小鼠离体小肠收缩有明显的兴奋作用,且抑制作用呈剂量依赖性,野鸢尾苷对胆碱酯酶复活剂碘解磷定引起小肠收缩抑制有显著性的拮抗作用(P<0.05),对胆碱酯酶抑制剂新斯的明促进小肠运动没有显著性协同作用(P>0.05)。结论:多溶剂萃取法是一种简单、高效的分离制备川射干中野鸢尾苷的方法;野鸢尾苷具有抑制AChE的拟胆碱作用,可促进小肠收缩运动,有望成为AChE抑制剂的候选物。

野鸢尾苷的制备及其体外抗炎活性机制的初探

目的 从中药射干中分离制备野鸢尾苷单体,并初步研其体外抗炎活性及作用机制。方法 采用多溶剂萃取法制备野鸢尾苷;在野鸢尾苷溶液对小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7无细胞毒性的浓度范围内,采用脂多糖诱导并建立体外细胞炎症模型,给予不同浓度野鸢尾苷溶液干预,采用Griess法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)的含量、ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的含量;并结合野鸢尾苷对乙酰胆碱酯酶活性的影响,初步揭示野鸢尾苷的抗炎活性及作用机制。结果 多溶剂萃取法所得的野鸢尾苷单体,经HPLC峰面积归一化法计算其纯度大于98%;给药12.5~100μg·mL-1野鸢尾苷对RAW 264.7无细胞毒性;与模型组比较,在给药12.5~100μg·mL-1野鸢尾苷时,对抑制巨噬细胞中TNF-α、NO、IL-1β、IL-6的释放具有极显著性差异,且呈剂量关系;野鸢尾苷对乙酰胆碱酯酶的活性具有抑制作用,其数半抑制浓度(IC50)为4.09 mg·mL-1,且呈剂量关系。结论 多溶剂萃取法是一种简单、高效分离制备射干中野鸢尾苷的方法;野鸢尾苷的抗炎机制可能是通过胆碱能抗炎通路,调节巨噬细胞释放TNF-α、IL-1β、IL-6炎性介质,并结合调节NO抗炎途径,从而实现多途径的抗炎作用。

不同产地川射干中异黄酮成分含量比较研究

目的:分析测定和对比不同产地川射干中射干苷、鸢尾甲苷A、鸢尾甲苷B、野鸢尾苷、鸢尾苷元、鸢尾甲黄素A、鸢尾甲黄素B 7个异黄酮成分,建立快速测定其含量的方法。方法:采用HPLC法测定7个异黄酮成分含量,色谱柱为Kromasil C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.5%醋酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1 m L·min^(-1),柱温35℃,检测波长266 nm;并以检测出的含量为指标,使用SPSS 19.0软件对15批样品进行聚类分析。结果:射干苷、鸢尾甲苷A、鸢尾甲苷B、野鸢尾苷、鸢尾苷元、鸢尾甲黄素A、鸢尾甲黄素B色谱峰分离良好;进样量分别在0.024 8~0.992、0.003 6~0.144、0.005 9~0.236、0.004 4~0.176、0.016 2~0.648、0.005 5~0.22、0.005 7~0.228μg范围内线性关系良好;平均加样回收率(n=6)分别为99.7%、97.7%、98.2%、98.2%、98.8%、103.0%、103.6%,RSD分别为0.57%、2.0%、1.3%、1.1%、0.81%、2.2%、2.3%。15批样品中上述7个成分的含量分别为33.27~58.63、0.62~6.87、1.36~9.95、0.79~7.25、5.42~24.65、0.78~4.56、0.94~8.63 mg·g^(-1);聚类分析结果显示15批样品可分为三大类,反映不同产地川射干药材成分的区别。结论:所建立的川射干HPLC含量测定方法可用于川射干的质量控制,聚类分析方法也可为川射干种植、栽培和质量评价提供依据。

线性回归色谱峰定位法在射干药材多组分同时测定中的应用

目的:将线性回归色谱峰定位法应用于射干药材多种药效组分的一测多评研究中,提高一测多评方法的准确度及可行性。方法:以射干药材中6个药效组分(射干苷、野鸢尾苷、鸢尾黄素、野鸢尾黄素、次野鸢尾黄素、白射干素)为研究对象,以射干苷为对照品计算其他各组分的相对校正因子;以射干苷及次野鸢尾黄素对照品建立线性方程,进行待测成分色谱峰定位;考察线性回归法在6根不同色谱柱上对待测组分色谱峰定位的结果,以考察方法的适用性及耐用性;与相对保留时间及保留时间差定位法进行比较,以考察线性回归色谱峰定位法的优越性;将用校正因子计算得到的结果与外标法测定结果进行比较,以考察方法的准确性。结果:采用线性回归法进行色谱峰定位时,保留时间理论值与测定值绝对误差很小,优于相对保留时间定位法;提高了色谱峰定位的准确性;实验中建立的校正因子重现性良好,4批药材中6个组分含量的计算值与外标法实测值之间通过夹角余弦法检验无显著性差异。结论:线性回归色谱峰定位法的应用可使多组分同时测定方法更具合理性和可行性。

2型糖尿病患者血清鸢尾素、摄食抑制因子-1、3-硝基酪氨酸水平与糖脂代谢和阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的关系研究

目的:探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清鸢尾素(Irisin)、摄食抑制因子-1(Nesfatin-1)、3-硝基酪氨酸(3-NT)水平与糖脂代谢和阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)的关系。方法:选择2020年4月~2021年9月期间中国人民解放军总医院京南医疗区收治的T2DM患者80例作为研究对象,根据多导睡眠图(PSG)检查结果,合并OSAHS的51例患者列为T2DM合并OSAHS组,剩余的29例纳为T2DM未合并OSAHS组。选择同期来中国人民解放军总医院京南医疗区体检的40例健康志愿者作为对照组。对比T2DM患者、对照组的Irisin、Nesfatin-1、3-NT水平,采用Pearson相关性分析显示Irisin、Nesfatin-1、3-NT与糖脂代谢指标的相关性。T2DM患者发生OSAHS的影响因素采用多因素Logistic回归分析。结果:T2DM合并OSAHS组、T2DM未合并OSAHS组Irisin低于对照组,且T2DM合并OSAHS组低于T2DM未合并OSAHS组(P<0.05)。T2DM合并OSAHS组、T2DM未合并OSAHS组Nesfatin-1、3-NT高于对照组,且T2DM合并OSAHS组高于T2DM未合并OSAHS组(P<0.05)。T2DM合并OSAHS组、T2DM未合并OSAHS组糖化血红蛋白(HbAlc)、空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2hPG)高于对照组,且T2DM合并OSAHS组高于T2DM未合并OSAHS组(P<0.05)。T2DM合并OSAHS组、T2DM未合并OSAHS组三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)较对照组高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,Irisin与HbAlc、FBG、2hPG呈负相关,Nesfatin-1、3-NT与HbAlc、FBG、2hPG呈正相关(P<0.05)。T2DM合并OSAHS组、T2DM未合并OSAHS组的年龄、合并高血压、体质量指数、AHI、空腹C肽、合并冠心病对比有差异(P<0.05)。Irisin、Nesfatin-1、3-NT、HbAlc、FBG、2hPG、年龄、合并高血压是T2DM患者发生OSAHS的影响因素(P<0.05)。结论:T2DM合并OSAHS患者的Irisin、Nesfatin-1、3-NT水平表达异常,参与着机体的糖脂代谢过程及OSAHS发生,且OSAHS发生同时还受到HbAlc、FBG、2hPG、年龄、合并高血压的影响,可考虑对上述因素进行早期监测,以进行相关干预。