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Application of stem cell-derived retinal pigmented epithelium in retinal degenerative diseases: present and future 被引量:2
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作者 Mingyue Luo Youxin Chen 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2018年第1期150-159,共10页
As a constituent of blood-retinal barrier and retinal outer segment(ROS) scavenger, retinal pigmented epithelium(RPE) is fundamental to normal function of retina. Malfunctioning of RPE contributes to the onset and... As a constituent of blood-retinal barrier and retinal outer segment(ROS) scavenger, retinal pigmented epithelium(RPE) is fundamental to normal function of retina. Malfunctioning of RPE contributes to the onset and advance of retinal degenerative diseases. Up to date, RPE replacement therapy is the only possible method to completely reverse retinal degeneration. Transplantation of human RPE stem cell-derived RPE(h RPESC-RPE) has shown some good results in animal models. With promising results in terms of safety and visual improvement, human embryonic stem cell-derived RPE(h ESC-RPE) can be expected in clinical settings in the near future. Despite twists and turns, induced pluripotent stem cell-derived RPE(i PSC-RPE) is now being intensely investigated to overcome genetic and epigenetic instability. By far, only one patient has received i PSCRPE transplant, which is a hallmark of i PSC technology development. During follow-up, no major complications such as immunogenicity or tumorigenesis have been observed. Future trials should keep focusing on the safety of stem cell-derived RPE(SC-RPE) especially in long period, and better understanding of the nature of stem cell and the molecular events in the process to generate SC-RPE is necessary to the prosperity of SC-RPE clinical application. 展开更多
关键词 retinal pigmented epithelium transplantation stem cell human embryonic stem cell induced pluripotent stem cell
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Therapeutic effect of microencapsulated porcine retinal pigmented epithelial cells transplantation on rat model of Parkinson's disease 被引量:1
2
作者 张厚亮 邬剑军 +3 位作者 任惠民 王坚 苏雅茹 蒋雨平 《Neuroscience Bulletin》 SCIE CAS CSCD 2007年第3期137-144,共8页
Object To investigate the therapeutic effect of microencapsulated porcine retinal pigmented epithelial cells (RPE-M) transplantation on rat model of Parkinson's disease (PD). Methods Primary porcine RPE cells wer... Object To investigate the therapeutic effect of microencapsulated porcine retinal pigmented epithelial cells (RPE-M) transplantation on rat model of Parkinson's disease (PD). Methods Primary porcine RPE cells were harvested by enzyme digestion and expanded in culture medium. Determine the levels ofdopamine (DA) and homovanillic acid (HVA) by high performance liquid chromatography electrochemical (HPLC) assay, and the levels of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and glial-derived neurotrophic factor (GDNF) were detected by ELISA. Alginate-polylysine-alginate (APA) microencapsulated cells were produced by using a high voltage electrostatic system. PD rat model was established by unilateral injection of 6-hydroxydopamine (6-OHDA) into the medial forebrain bundle (MFB). After that, the RPE-M was transplanted into the corpus striatum of PD rat, and then the rotation test scores were recorded and biochemical changes of the corpus striatum were tested. Results The levels of DA, HVA, BDNF and GDNF secreted by RPE were stable in the RPE culture supernatant and were not changed by the microencapsulation. Eighty-three percent rats developed PD by unilateral lesion of 6-OHDA in the MFB. The RPE-M transplantation had therapeutic effect on 33% PD rats. Conclusion Porcine RPE cells grow actively in vitro and could secrete DA, HVA, BDNF, and GDNF constantly, which does not be affected by the passage culture and the APA miroencapsulation. RPE-M transplantation of may be a curative therapy for PD. 展开更多
关键词 retinal pigment epithelium DOPAMINE microcapsulations transplantation Parkinson's disease
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姜黄素对IL-1β诱导的兔RPE细胞中核因子-κB相关炎性因子表达的抑制作用 被引量:9
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作者 刘丽娅 马景学 +3 位作者 刘丹岩 安建斌 周娜磊 马月磊 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期804-812,共9页
背景白细胞介素-1β(IL-1β)是增生性玻璃体视网膜病变(PVR)早期释放的重要炎性因子,研究证实姜黄素能抑制IL-1β诱导的兔视网膜色素上皮(RPE)细胞的增生,但其是否能够对PVR发挥抗炎作用尚不清楚。目的观察姜黄素对IL-1β诱导的... 背景白细胞介素-1β(IL-1β)是增生性玻璃体视网膜病变(PVR)早期释放的重要炎性因子,研究证实姜黄素能抑制IL-1β诱导的兔视网膜色素上皮(RPE)细胞的增生,但其是否能够对PVR发挥抗炎作用尚不清楚。目的观察姜黄素对IL-1β诱导的兔RPE细胞移行的影响,探讨姜黄素对IL-1β诱导的RPE细胞中炎性因子表达的影响。方法采用对数生长期原代培养的第4代兔RPE细胞进行实验,在无血清DMEM培养基中分别添加0、0.1、1.0和10.0μg/L的IL-1β作用于细胞24h,分别采用Western blot和逆转录PCR法检测细胞中环氧合酶-2(COX-2)蛋白和mRNA的表达以筛选IL-1β最佳质量浓度。将培养的RPE细胞分为IL-1β组和姜黄素+IL-1β组,分别在无血清培养基中添加1.0μg/L IL-1β和1.0μg/L IL-1β联合10μg/ml姜黄素作用于细胞24、48和72h,仅用无血清培养基培养的细胞作为对照组。培养的细胞行苏木精-伊红染色,于光学显微镜下计算进入损伤区的细胞数,比较各组细胞的移行能力;分别采用Western blot法和逆转录PCR法检测各组RPE细胞中COX-2蛋白及其mRNA的相对表达量,采用Westernblot法检测并比较各组细胞中核因子-κB p65(NF—κB p65)蛋白和核因子κB抑制蛋白-α(IκB—α)的相对表达量;采用免疫化学染色法检测NF—κB p65、IκB-α和COX-2在各组RPE细胞中的表达和定位。结果初分离的兔RPE细胞呈球形,细胞中可见大量黑色素颗粒;第4代细胞色素颗粒明显减少,接近融合的细胞形态为长梭形,呈拉网状分布。免疫细胞化学染色法结果显示,细胞角蛋白(AE1/AE3)在细胞质呈阳性表达。对照组在培养24、48和72h移行的细胞数分别为(31.93±1.21)、(36.27±2.50)和(38.33±2.40)个,IL-1β组分别为(45.73±2.30)、(71.13±1.92)和(80.60±1.71)个,而姜黄素+IL-1β组分别为(13.13±2.20)、(14.93±1.10)和(12.60±1.51)个,各时间点IL-1β组细胞移行细胞数均明显高于对照组,而姜黄素+IL-1β组移行细胞数均明显低于对照组和IL-1β组,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。IL-1β质量浓度为1.0μg/L时,RPE细胞中COX-2蛋白及其mRNA的相对表达量达峰,以1.0μg/L IL-1β的剂量进行后续实验。细胞培养后24、48和72h,姜黄素+IL-1β组细胞中COX-2蛋白及其mRNA的相对表达量均明显低于IL-1β组,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。IL-1β作用于细胞后48h,细胞中NF—κB p65蛋白的相对表达量最高,与IL-1β组相比,各时间点姜黄素+IL-1β组细胞中NF—κB p65蛋白相对表达量降低,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。IL-1β组药物作用于细胞后48h细胞中IκB—α降至最低,各时间点姜黄素+IL-1β组细胞中IκB-α值均明显高于IL-1β组,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。免疫细胞染色结果显示,IL-1β组RPE细胞的细胞核及细胞质中NF—κB p65呈强阳性表达,对照组表达较弱,姜黄素+IL-1β组细胞中NF—κB p65的表达强度较IL-1β组明显降低;与对照组相比,IL-1β组细胞的细胞质中IκB-α表达强度明显减弱,而COX-2表达明显增强;与IL-1β组比较,姜黄素+IL-1β组细胞中IκB-α表达明显增强,而COX-2表达明显减弱。结论姜黄素可抑制IL-1β引起的兔RPE细胞的移行,IL-1β通过激活NF—κB信号通路刺激细胞中COX-2的表达,姜黄素可通过阻断这一途径而抑制炎性因子的表达,从而发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 姜黄素/药理学 视网膜色素上皮/细胞学 细胞移行/药物作用 白细胞介素-1β/拮抗剂 和抑制剂细胞因子/代谢 炎症/病因 增生性玻璃体视网膜病变/药物疗法 细胞培养
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兔虹膜和视网膜色素上皮细胞的体外培养比较 被引量:4
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作者 戴荣平 刘熙朴 +1 位作者 董方田 叶阿里 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2003年第1期47-49,共3页
目的 观察比较有色素兔虹膜色素上皮(IPE)及视网膜色素上皮(RPE)细胞的体外生长状况。方法采用酶消化法及酶辅助机械分离法分别分离IPE和RPE细胞。观察培养的两种细胞的生长状况,并对其进行免疫组化鉴定。结果原代IPE及RPE细胞大多呈圆... 目的 观察比较有色素兔虹膜色素上皮(IPE)及视网膜色素上皮(RPE)细胞的体外生长状况。方法采用酶消化法及酶辅助机械分离法分别分离IPE和RPE细胞。观察培养的两种细胞的生长状况,并对其进行免疫组化鉴定。结果原代IPE及RPE细胞大多呈圆形或六边形,细胞内充满了黑色素颗粒。随着传代的增加,呈梭形或纤维细胞样生长的细胞增多,细胞中的色素颗粒也逐渐减少。细胞角蛋白免疫组化染色显示IPE及RPE细胞绝大多数呈棕黄色阳性反应。Desmin免疫组化染色显示IPE细胞中阳性细胞约占5%。 结论 分离培养的IPE和RPE细胞纯度很高,IPE细胞中绝大多数为后层IPE细胞。IPE和RPE细胞的形态及体外生长特点类似。 展开更多
关键词 虹膜 视网膜 色素上皮细胞 细胞培养 体外 IPE RPE
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人视网膜色素上皮细胞的培养 被引量:3
5
作者 吴宏 张绍昆 +2 位作者 张艳萍 王桂云 张晓光 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期651-652,共2页
目的 :培养人视网膜色素上皮细胞 ,为采用视网膜色素上皮移植治疗色素变性奠定基础。方法 :用胰酶消化法获取人胎儿视网膜色素上皮细胞进行原代及传代培养。角蛋白抗体免疫细胞化学染色鉴定细胞。结果 :视网膜色素上皮细胞在体外生长良... 目的 :培养人视网膜色素上皮细胞 ,为采用视网膜色素上皮移植治疗色素变性奠定基础。方法 :用胰酶消化法获取人胎儿视网膜色素上皮细胞进行原代及传代培养。角蛋白抗体免疫细胞化学染色鉴定细胞。结果 :视网膜色素上皮细胞在体外生长良好 ,胞浆内含有丰富的色素颗粒。抗角蛋白反应阳性。结论 展开更多
关键词 视网膜色素上皮 细胞培养 移植 色素变性
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兔眼与猪眼视网膜色素上皮细胞分离及培养方法的对比 被引量:5
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作者 刘丽娅 马景学 +2 位作者 高彦军 安建斌 温晓英 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2010年第1期11-14,共4页
目的分别对兔眼及猪眼视网膜色素上皮(RPE)细胞进行体外分离、培养和鉴定,探讨二者的异同点及注意事项。方法对有色兔眼和猪眼的RPE细胞采用胰蛋白酶消化法进行分离、培养和传代,取第4代细胞用于实验。免疫细胞化学染色对传代的细... 目的分别对兔眼及猪眼视网膜色素上皮(RPE)细胞进行体外分离、培养和鉴定,探讨二者的异同点及注意事项。方法对有色兔眼和猪眼的RPE细胞采用胰蛋白酶消化法进行分离、培养和传代,取第4代细胞用于实验。免疫细胞化学染色对传代的细胞进行鉴定。光学显微镜下观察并比较培养的2种动物来源RPE细胞的形态、特征,并对2种动物来源的RPE细胞的培养过程进行比较。结果2种动物来源的RPE细胞分离方法的不同与各自眼球的解剖结构相关,主要体现在消化过程,猪眼RPE细胞1次消化即可分离,兔眼RPE细胞需2次消化得到。原代猪眼RPE细胞24h内贴壁较兔眼48~72h贴壁时间早。培养早期细胞生长活跃,随传代次数增加活力下降,色素颗粒减少。免疫细胞化学染色提示细胞角蛋白(AE1/AE3)表达阳性。结论2种动物来源的RPE细胞均可通过胰蛋白酶消化法分离,获得的RPE细胞数量多,培养成功率高。猪眼RPE细胞的分离培养更为容易。4代以内的RPE细胞适合于实验研究。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮细胞 细胞培养
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柔红霉素联合bax基因转染对兔实验性增生性玻璃体视网膜病变的影响 被引量:4
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作者 杜红俊 惠延年 +2 位作者 王雨生 韩泉洪 马吉献 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第13期1159-1161,共3页
目的 :观察柔红霉素 (DNR)和bax基因转染联合应用对兔实验性增生性玻璃体视网膜病变 (proliferativevitre oretinopathy ,PVR)形成的影响 .方法 :将 2 .5× 10 5个正常视网膜色素上皮 (retinalpigmentepithelial,RPE)细胞和 3.5... 目的 :观察柔红霉素 (DNR)和bax基因转染联合应用对兔实验性增生性玻璃体视网膜病变 (proliferativevitre oretinopathy ,PVR)形成的影响 .方法 :将 2 .5× 10 5个正常视网膜色素上皮 (retinalpigmentepithelial,RPE)细胞和 3.5×10 5个经bax基因转染的RPE细胞注入兔玻璃体腔 ,观察诱发兔眼PVR形成的能力 ,同时观察 10nmolDNR对PVR形成的抑制作用 .结果 :在 3,7,14 ,2 1和 2 8d时RPE组PVR的平均分级为 :0 .6 2 5 ,2 .0 0 0 ,3.0 0 0 ,4 .12 5和 4 .2 5 0 ,基因转染细胞组PVR的平均分级为 :0 .5 0 0 ,0 .875 ,2 .0 0 0 ,3.12 5和3.6 2 5 ,后者PVR分级均低于RPE细胞组 (P <0 .0 5 ) .2 8d时正常细胞组视网膜脱离发生率为 10 0 % (n =8) ,bax基因转染细胞组的视网膜脱离发生率为 6 2 .5 % (n =8) .在 7,14 ,2 1和 2 8d时 ,DNR对正常细胞组PVR的抑制率分别为6 0 % ,6 4 % ,5 7%和 5 7% ,对基因转染细胞组PVR分级的抑制率分别为 73% ,71% ,6 8%和 6 9% ,后者普遍大于前者 .结论 :DNR可以抑制PVR的形成 。 展开更多
关键词 增生性玻璃体视网膜病变 视网膜色素上皮 BAX基因 基因转染 柔红霉素
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复明片对兔视网膜脱离后视网膜色素上皮细胞增殖的影响 被引量:4
8
作者 刘娉 彭清华 +4 位作者 李建超 彭抿 吴大力 张波涛 杨霞 《湖南中医药大学学报》 CAS 2007年第5期36-39,共4页
目的研究复明片对兔实验性视网膜脱离后视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)增殖的影响。方法用有色家兔96只设正常对照组(A组),制作视网膜脱离模型后分模型组(B组)、西药对照组(C组)、复明片组(D组)。并于造模后7、14... 目的研究复明片对兔实验性视网膜脱离后视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)增殖的影响。方法用有色家兔96只设正常对照组(A组),制作视网膜脱离模型后分模型组(B组)、西药对照组(C组)、复明片组(D组)。并于造模后7、14、21 d分别取视网膜组织制备细胞悬液,流式细胞仪检测各兔增殖细胞核抗原(PCNA)在视网膜神经上皮层的表达。结果脱离后视网膜神经上皮层PCNA阳性细胞表达均呈上升趋势,7d后开始下降,且复明片组相较其余各组比较均有统计学意义(P<0.05)。结论复明片通过恢复视网膜色素上皮与神经上皮之间的接触,阻止RPE的增殖即PCNA的表达。 展开更多
关键词 复明片 视网膜色素上皮细胞 增殖细胞核抗原 流式细胞仪 黄芪 生地 茯苓
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Cyclosporine玻璃体腔内注射对异种视网膜色素上皮移植的排异抑制作用 被引量:3
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作者 盛耀华 胡毅倩 岑洁 《眼科新进展》 CAS 2001年第6期389-392,共4页
目的 观察兔眼视网膜下腔植入人胚眼视网膜色素上皮 (retinal pigm ent epithe-lium,RPE)后不同时期的眼底和组织学改变。研究环胞菌素 A (Cyclosporines,Cs A )玻璃体腔内注射能否抑制人胚眼 RPE在兔眼视网膜下腔中诱导的异种移植排... 目的 观察兔眼视网膜下腔植入人胚眼视网膜色素上皮 (retinal pigm ent epithe-lium,RPE)后不同时期的眼底和组织学改变。研究环胞菌素 A (Cyclosporines,Cs A )玻璃体腔内注射能否抑制人胚眼 RPE在兔眼视网膜下腔中诱导的异种移植排异反应。方法 人胚眼色素上皮片和浓缩色素上皮细胞悬液植入 36只兔眼的视网膜下腔 ,其中 16眼为对照组 ,用于观察排异的自然转规。分别于 7d(8眼 )和 30 d(8眼 )后获取组织标本。另 2 0眼为实验组。RPE移植后 ,每周一次玻璃体腔内注射 Cs A1mg(12眼 )或 Cs A0 .1mg(8眼 )。视网膜和视神经的毒性反应使用 ERG进行检查。结果 人胚眼 RPE片和浓缩的 RPE细胞均能在视网膜下腔短期存活。移植的 RPE与视细胞结合良好并显示吞噬功能。排异反应发生时间约在术后 10~ 30 d。对照组中 7d的排异发生率为 0 /8;30 d排异发生率为 7/8。排异发生后荧光造影中移植区为高荧光区 ,组织切片中显示有大量的组织细胞积聚。 Cs A1mg组 30 d排异发生率为 0 /12 ,0 .1mg组为 5 /8。ERG波幅的下降与 Cs A剂量和注射次数呈正相关。结论 异种 RPE视网膜下腔移植在无免疫抑制剂的条件下 ,只能短期存活。Cs A玻璃体腔中注射能抑制异种 RPE移植的排异反应但易引起明显的视网膜毒性反应。 展开更多
关键词 人胚眼 视网膜色素上皮细胞 异种移植 排异反应 玻璃体腔 环胞菌素A
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人胚眼色素上皮细胞的培养 被引量:6
10
作者 盛耀华 李增琦 《眼科研究》 CSCD 1999年第5期358-360,共3页
目的 准备可供植入的人色素上皮细胞。方法 将 12~ 2 4周人胚眼的视网膜色素上皮细胞 (RPE)自脉络膜毛细血管床上撕离 ,置入培养皿中作贴壁培养。结果 培养的RPE细胞可在培养皿中存活 2~ 3个月。顺极性和反极性培养不影响细胞的形... 目的 准备可供植入的人色素上皮细胞。方法 将 12~ 2 4周人胚眼的视网膜色素上皮细胞 (RPE)自脉络膜毛细血管床上撕离 ,置入培养皿中作贴壁培养。结果 培养的RPE细胞可在培养皿中存活 2~ 3个月。顺极性和反极性培养不影响细胞的形态和存活时间。培养的RPE细胞具有吞噬视细胞外节的功能。 展开更多
关键词 细胞培养 视网膜 色素上皮细胞 眼底病
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兔视网膜色素上皮细胞培养和鉴定 被引量:5
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作者 胡健艳 陈雪 +1 位作者 陈辉 于靖 《南通大学学报(医学版)》 2005年第3期171-173,共3页
目的:进行兔视网膜色素上皮细胞(RPE)细胞的体外培养,探讨RPE培养与鉴定方法,为研究其生理功能、生化特征和病理过程提供细胞模型。方法:用改良的眼杯固定法,将其固定在眼球托上,用胰酶直接消化视网膜色素上皮面,收取RPE细胞。作细胞形... 目的:进行兔视网膜色素上皮细胞(RPE)细胞的体外培养,探讨RPE培养与鉴定方法,为研究其生理功能、生化特征和病理过程提供细胞模型。方法:用改良的眼杯固定法,将其固定在眼球托上,用胰酶直接消化视网膜色素上皮面,收取RPE细胞。作细胞形态学、免疫组织化学、免疫荧光鉴定。结果:RPE细胞培养早期生长活跃、胞核透明、胞浆含丰富黑色素颗粒,多巴氧化酶呈阳性反应.免疫组织化学染色和免疫荧光染色提示角蛋白表达强阳性。结论:培养的大量细胞可用于RPE的体外实验研究,多巴染色是鉴定RPE细胞一种较好的方法。 展开更多
关键词 兔视网膜色素上皮细胞 免疫组织化学染色 RPE细胞 养和 免疫荧光染色 体外实验研究 细胞形态学 黑色素颗粒 多巴氧化酶 体外培养 鉴定方法 生理功能 细胞模型 病理过程 生化特征 细胞培养 蛋白表达 阳性反应 多巴染色 固定法
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自体虹膜色素上皮细胞移植治疗视网膜色素上皮细胞变性研究 被引量:1
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作者 徐国兴 谢茂松 +4 位作者 郭健 郑卫东 何青 林鸿 高珊 《国际眼科杂志》 CAS 2008年第3期538-539,共2页
目的:研究自体虹膜色素上皮细胞(iris pigment epithelium,IPE)移植治疗视网膜色素上皮细胞变性的效果。方法:采用酶-机械分离-酶消化法获取高纯度、高活力的IPE细胞用于移植,采用外路法将IPE细胞悬液移植入视网膜下腔。结果:IPE移植术... 目的:研究自体虹膜色素上皮细胞(iris pigment epithelium,IPE)移植治疗视网膜色素上皮细胞变性的效果。方法:采用酶-机械分离-酶消化法获取高纯度、高活力的IPE细胞用于移植,采用外路法将IPE细胞悬液移植入视网膜下腔。结果:IPE移植术后患者眼底移植区色素沉着减少,未见渗出,出血,视网膜平,视力入院时的0.15,术后2wk提高至0.2。多焦ERG显示移植区P1波平均反应密度上升。结论:自体虹膜色素上皮细胞移植有望成为视网膜色素上皮细胞变性疾病治疗的一新方法。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮变性 治疗 虹膜色素上皮 移植
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视网膜色素变性的视网膜移植治疗 被引量:4
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作者 冯霞 刘哲丽 《国际眼科杂志》 CAS 2006年第4期865-868,共4页
视网膜色素变性是一种遗传性致盲性眼病,发病率较高,危害性较大。临床上治疗方法很多,但尚无一种理想有效的方法。传统中医治疗,药物治疗,近几年兴起的基因治疗及视网膜移植治疗各有特点。其中视网膜移植治疗是近几年研究的热点,并且被... 视网膜色素变性是一种遗传性致盲性眼病,发病率较高,危害性较大。临床上治疗方法很多,但尚无一种理想有效的方法。传统中医治疗,药物治疗,近几年兴起的基因治疗及视网膜移植治疗各有特点。其中视网膜移植治疗是近几年研究的热点,并且被认为是最有前景的治疗措施。现就视网膜移植治疗视网膜色素变性的相关研究进展作一综述。 展开更多
关键词 视网膜色素变性 视网膜移植 视网膜色素上皮
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兔眼虹膜色素上皮细胞的培养与鉴定 被引量:1
14
作者 佘华宁 郑玉萍 +2 位作者 权彦龙 曹振平 任百超 《国际眼科杂志》 CAS 2006年第3期612-614,共3页
目的:体外培养和观察兔眼虹膜色素上皮细胞(IPEC),为临床和实验研究IPE细胞提供基础。方法:采用酶消化加酶辅助机械分离法分离IPE细胞,观察培养细胞的生长情况,并采用免疫荧光法对其进行鉴定。结果:原代培养的IPE细胞多数呈圆形或六边形... 目的:体外培养和观察兔眼虹膜色素上皮细胞(IPEC),为临床和实验研究IPE细胞提供基础。方法:采用酶消化加酶辅助机械分离法分离IPE细胞,观察培养细胞的生长情况,并采用免疫荧光法对其进行鉴定。结果:原代培养的IPE细胞多数呈圆形或六边形,细胞内充满黑色颗粒。传代培养的IPE细胞呈梭形或纤维细胞样生长,细胞中的色素颗粒也逐渐减少。免疫荧光法对培养细胞进行cytokeratin染色显示IPE细胞成阳性反应,阳性率达100%。结论:采用酶消化加酶辅助机械分离法可成功地分离培养出IPE细胞。 展开更多
关键词 虹膜色素上皮 细胞培养
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兔视网膜色素上皮细胞移植术后急性排斥反应的病理学研究 被引量:1
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作者 刘哲丽 张劲松 吴景天 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期18-19,共2页
目的:研究视网膜色素上皮细胞移植后排斥反应的发生及其控制过程。方法:以经巩膜外路移植方法行家兔同种异体视网膜色素上皮细胞移植,应用光镜及电镜观察移植后14d受体视网膜及移植细胞的病理学改变和免疫抑制剂对其影响。结果:... 目的:研究视网膜色素上皮细胞移植后排斥反应的发生及其控制过程。方法:以经巩膜外路移植方法行家兔同种异体视网膜色素上皮细胞移植,应用光镜及电镜观察移植后14d受体视网膜及移植细胞的病理学改变和免疫抑制剂对其影响。结果:单纯移植组移植排斥反应变化明显;免疫抑制剂组无排斥反应的变化。结论:家兔同种异体间视网膜色素上皮细胞移植有急性排斥反应的发生,但在控制排斥反应的情况下。 展开更多
关键词 排斥反应 细胞移植 视网膜色素上皮 病理学
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体外培养的成年兔眼色素上皮细胞屏障功能的研究 被引量:1
16
作者 丛丽丹 孙大卫 +2 位作者 焦万秋 张中宇 彭绍民 《眼科新进展》 CAS 2008年第3期166-168,共3页
目的研究体外培养的成年兔眼视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞的血-视网膜外屏障功能。方法对成年兔眼RPE细胞进行原代培养,免疫组织化学通过MNF116和S-100鉴定细胞纯度。将细胞接种于铺有层粘连蛋白的Transwell滤膜... 目的研究体外培养的成年兔眼视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞的血-视网膜外屏障功能。方法对成年兔眼RPE细胞进行原代培养,免疫组织化学通过MNF116和S-100鉴定细胞纯度。将细胞接种于铺有层粘连蛋白的Transwell滤膜上,分别于培养过程中不同时间点进行跨膜电阻测定,待电阻达到平台期后对膜切面行透射电子显微镜观察;并通过细胞ZO-1免疫荧光化学法了解紧密连接的形成情况。结果成功原代培养了兔眼RPE细胞并且无其他细胞污染。接种于Transwell后,RPE细胞TER值3周达到最高值约88.14Ω·cm2,维持1周并开始下降。透射电镜可见细胞表面有大量微绒毛并形成紧密连接。ZO-1免疫荧光化学结果可见细胞形态基本呈多边形,紧密连接基本形成。结论成年兔眼RPE细胞通过培养于铺有层粘连蛋白的Transwell滤膜上可以成功建立细胞屏障功能模型。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮 细胞培养 血-视网膜屏障 紧密连接
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酶-机械分离-酶消化法分离培养兔眼虹膜色素上皮细胞 被引量:1
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作者 赵平千 罗敏 +1 位作者 刘海燕 刘嫣 《眼科新进展》 CAS 2004年第6期432-434,共3页
目的 建立兔眼虹膜色素上皮细胞体外培养体系。方法 采用酶 机械分离 酶消化法分离兔眼IPE细胞 ,台盼蓝染色法测定细胞活力 ,在体外对其进行原代及传代培养扩增 ,倒置相差显微镜观察IPE细胞的生长情况。取第 2次传代的IPE细胞行AE1/... 目的 建立兔眼虹膜色素上皮细胞体外培养体系。方法 采用酶 机械分离 酶消化法分离兔眼IPE细胞 ,台盼蓝染色法测定细胞活力 ,在体外对其进行原代及传代培养扩增 ,倒置相差显微镜观察IPE细胞的生长情况。取第 2次传代的IPE细胞行AE1/AE3及S 10 0抗体细胞免疫组化染色对其进行鉴定。结果 酶 机械分离 酶消化法分离得到IPE细胞的活力为 70 %~ 85 % .原代细胞 16~ 4 8h贴壁 ,72h后开始生长 ,细胞大多呈多角形或方形 ,少数为梭形 ,12~ 16d生长融合为单层细胞。第 1次传代的IPE细胞 6~ 12h贴壁 ,5~ 7d生长融合为细胞单层。IPE细胞在体外培养可传 5~ 6代。免疫组化染色显示 ,几乎所有细胞胞浆呈现棕黄色阳性反应 ,对照组胞浆不染色。结论 酶 机械分离 酶消化法分离培养兔眼IPE细胞易于操作 ,联合应用细胞角蛋白、S 10 0蛋白单克隆抗体的免疫组化技术可用来鉴定IPE细胞。 展开更多
关键词 虹膜色素上皮 细胞培养
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视网膜色素上皮移植最新进展 被引量:2
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作者 林艳辉 郭小健 《眼科新进展》 CAS 2005年第5期470-472,共3页
视网膜色素上皮细胞移植是近年治疗视网膜变性疾病的一个引人注目的领域。目前视网膜色素上皮移植技术已逐步应用于临床。现就视网膜色素上皮细胞移植的供体材料选择、受体要求、目的基因导入及其临床应用的最新进展作一综述。
关键词 视网膜色素上皮 移植 供体 宿主
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移植的人胚眼色素上皮在猴眼视网膜下腔中的自然转归 被引量:1
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作者 盛耀华 李增琦 +2 位作者 胡毅倩 曹慧韵 Peter Gouras 《眼科研究》 CSCD 2000年第3期231-234,共4页
目的 观察猴视网膜下腔植入人胚眼视网膜色素上皮 (RPE)后不同时段的眼底、荧光血管造影和组织学的改变。方法  12~ 2 4周的人胚眼色素上皮片和酶解后的浓缩色素上皮细胞悬液经一步法或二步法植入猴眼视网膜下腔。结果 猴眼发生排... 目的 观察猴视网膜下腔植入人胚眼视网膜色素上皮 (RPE)后不同时段的眼底、荧光血管造影和组织学的改变。方法  12~ 2 4周的人胚眼色素上皮片和酶解后的浓缩色素上皮细胞悬液经一步法或二步法植入猴眼视网膜下腔。结果 猴眼发生排异反应的时间为 2~ 6月 ,猴眼黄斑区发生排异反应的比例高于黄斑周围区。结论 异种RPE视网膜下腔的移植在无免疫抑制剂的条件下 ,只能短期存活。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮 异种移植 免疫排异 黄斑变性
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异体恒河猴视网膜色素上皮细胞移植探讨 被引量:1
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作者 徐国兴 郭健 +1 位作者 丁静文 周建华 《医学研究杂志》 2008年第9期36-38,共3页
目的观察供体视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)在视网膜下腔生长情况,为视网膜色素上皮细胞移植的临床应用提供实验基础。方法体外获取恒河猴视网膜色素上皮细胞经传代培养至第3代,用5-溴脱氧尿嘧啶标记后经外路将... 目的观察供体视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)在视网膜下腔生长情况,为视网膜色素上皮细胞移植的临床应用提供实验基础。方法体外获取恒河猴视网膜色素上皮细胞经传代培养至第3代,用5-溴脱氧尿嘧啶标记后经外路将供体色素上皮细胞移植到受体恒河猴视网膜下腔,用光镜和电镜观察移植细胞的存活情况。结果供体细胞在受体视网膜下腔形成有极性的单细胞层,贴附于Bruch膜上,并形成微绒毛和基底内褶,细胞内可见吞噬体。结论外路法是一种切实可行的视网膜色素上皮移植方法,移植后的细胞可存活并恢复正常的结构和功能。 展开更多
关键词 恒河猴 视网膜色素上皮细胞 移植 外路法
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