射干的毛细管电泳指纹图谱研究

采用毛细管区带电泳法,以80mmol/L硼酸 15mmol/L硼砂缓冲液(用氢氧化钾溶液调pH9 7)为背景电解质,运行电压12 1kV,检测波长228nm,重力进样10s(高度7cm),建立了射干药材的毛细管电泳指纹图谱(CEFP)。标定CE指纹峰为21个,方法的精密度和重现性较好,相对迁移时间的相对标准偏差(RSD)不大于3 5%,相对峰面积的RSD约为5 0%,10个产地样品的CEFP与标准CEFP的相似度为0 913～0 993。同时,对指纹图谱中各指纹峰确立的方法和各组分含量情况的评价方法进行了初步探讨。

射黄含片的质量标准研究

目的建立射黄含片(射干、黄芩)的质量标准。方法采用薄层色谱法对射黄含片中的射干和黄芩进行定性研究;采用高效液相色谱方法,选用DiamonsilC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05%磷酸溶液(42∶58),体积流量为1.0 mL/min,检测波长为270 nm,同时定量检测射黄含片中黄芩苷、射干苷和次野鸢尾黄素。结果定性鉴别专属性强;黄芩苷、射干苷和次野鸢尾黄素分别在进样量140～840 ng、40～240 ng和20～120ng范围内线性关系良好,r值均在0.999 8以上,平均加样回收率分别为98.89%(RSD为1.63%)、100.32%(RSD为1.06%)和98.65%(RSD为1.53%)(n=9)。结论该方法操作简便,结果准确,可用于射黄含片的质量控制。

金属离子对次野鸢尾黄素与牛血清白蛋白相互作用的影响

应用荧光光度法研究了金属离子Fe^3＋、Ca^2＋、Cu^2＋或Mn^2＋对次野鸢尾黄素（IFR）与牛血清白蛋白（BSA）相互作用的影响。实验结果表明，不存在金属离子时，IFR对BSA的荧光猝灭过程为动态猝灭，其结合过程的表观结合常数KA值为10^4～10^5数量级，结合位点数；r／约等于1。由热力学参数得出IFR与BSA结合过程是一个熵增加、Gibbs自由能降低的自发过程，分子间相互作用力以疏水作用力为主。在Fe^3＋或Ca^2＋的存在下，IFR对BSA的荧光猝灭类型由动态猝灭转变为静态猝灭，作用力类型也由以疏水作用力为主转变为以氢键与范德华力为主或以静电引力为主。Cu^2＋或Mn^2＋存在下，IFR对BSA的荧光猝灭类型及分子间作用力类型均没有发生改变。四种金属离子的参与都使得IFR与BSA结合作用的表观结合常数发生了明显的变化，但结合位点数仍维持在1左右。

中药射干毒性成分分析

研究中药射干[Belamcanda chinensis(L.)DC]的化合物成分。用70%乙醇提取,减压浓缩至浸膏,水溶解后得滤液和沉淀,滤液由大孔吸附树脂AB-8纯化,沉淀由乙酸乙酯溶解,用聚酰胺薄层层析、Sephadex LH-20等方法进一步提纯各组分,利用核磁共振鉴定结构。结果表明:该射干经分离得到5个化合物,分别为野鸢尾黄素(irisflorentin)、鸢尾苷元(tectorigenin)、鸢尾苷(tectoridin)、草夹竹桃甙(androsin)、鸢尾甲苷A(iristectorin A),其中草夹竹桃甙为毒性成分,首次在射干中发现。

HPLC法同时测定银翘马勃散中5种有效成分的含量

目的建立同时测定银翘马勃散中绿原酸、连翘酯苷A、牛蒡苷、连翘苷、次野鸢尾黄素5种成分含量的方法。方法采用HPLC法。COSMOSIL 5 C_(18)-AR-Ⅱ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇-0.4%磷酸水为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 m L·min^(-1);柱温:30℃;检测波长:272 nm。结果绿原酸、连翘酯苷A、牛蒡苷、连翘苷、次野鸢尾黄素的保留时间分别为24.963,39.996,45.863,47.983,63.868 min;线性范围分别为0.992~9.92(r=0.9999),0.498~4.98(r=0.9996),2.66~26.6(r=0.9999),0.092~0.92(r=0.9998),0.0149~0.149μg(r=0.9997);平均加样回收率分别为99.82%、96.38%、96.69%、103.23%、98.70%。结论该方法简单、准确、稳定,可用于银翘马勃散中绿原酸、连翘酯苷A、牛蒡苷、连翘苷、次野鸢尾黄素的同时测定,为银翘马勃散及其类方制剂的新药开发与质量评价提供参考。

射干的化学成分研究

目的研究中药射干[Belamcanda chinensis(L.)DC.])乙醇提取物中的化学成分。方法应用多种柱色谱方法进行分离和纯化,NMR和MS等波谱解析化学结构。结果从射干根茎的乙醇提取物中分离出5个化合物,分别鉴定为:异野鸢尾黄素7-O--βD-葡萄糖苷(Ⅰ)、鸢尾黄素(Ⅱ)、野鸢尾黄素(Ⅲ)i、rilin D(Ⅳ)和次野鸢尾黄素(Ⅴ)。结论化合物Ⅰ,命名为异野鸢尾苷(isoiridin),为一新化合物,化合物Ⅳ为首次从本属分离得到。

RP-HPLC测定射干抗病毒注射液中次野鸢尾黄素含量

目的 建立射干抗病毒注射液中次野鸢尾黄素的反相高效液相色谱分析方法。方法 色谱柱:Kromasil ODS(5μm,4.6mm×200mm),以水-甲醇-乙腈-四氢呋喃-冰醋酸(47.5:40:7:4:1.5,v/v)为流动相,流速0.80mL·min^(-1),柱温(30.5±1)℃,于265nm测定射干抗病毒注射液中次野鸢尾黄素的含量。结果 线性范围2.46～308μg·mL~_(-1)(r=0.9999),次野鸢尾黄素对照品的进样精密度RSD=0.43％,对照品溶液在24h内峰面积的RSD=0.41％,次野鸢尾黄素的检测限(S/N=3)为0.61mg·L^(-1),定量限(S/N=10)为1.22mg·L^(-1),回收率为99.9％。结论 该方法简便、准确、无干扰,可用于测定射干抗病毒注射液中的次野鸢尾黄素的含量。

高效液相色谱法测定栽培射干中次野鸢尾黄素的含量

目的应用高效液相色谱法测定栽培射干中次野鸢尾黄素的含量,考察其药材的内在质量。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为TSK ge1 ODS 80 TS250 mm×4.6 mm;流动相为甲醇-磷酸水溶液（pH=3）∶53%∶47%;流速为1 ml/min;检测波长为266 nm;柱温35℃。结果次野鸢尾黄素在0.0118-0.118μg范围内与色谱峰面积呈线性关系（r=0.9999）;平均加样回收率为99.84%,RSD为2.059%,次野鸢尾黄素的含量为0.1252%。结论该法简便、准确、灵敏度高,栽培射干中的次野鸢尾黄素的含量大于0.10%,符合《中国药典》要求。

黄射干的异黄酮类成分(英文)

从黄射干Ｉｒｉｓｔｅｃｔｏｒｕｍ的甲醇抽提物中分到５个异黄酮：鸢尾黄酮甲素（１），鸢尾花素（２），野鸢尾黄酮（３），鸢尾黄酮（４），鸢尾黄酮甙（５）。化合物（１）和（２）系首次从黄射干中分到。所有成分经详细光谱分析确定。

薄叶鸢尾的化学成分研究

目的 :从鸢尾属植物薄叶鸢尾 (IrisleptophyllaLingel.)根茎中分离出黄酮类化合物。方法 :采用80 %乙醇提取 ,硅胶柱层析及重结晶等方法从鸢尾属植物薄叶鸢尾中分离其化学成分。通过波谱及化学方法进行结构鉴定。结果 :分离得到 8个化合物 ,其中 5个为异黄酮类成分 ,分别为 :次野鸢尾黄素irisflorentin(Ⅰ )、德鸢尾苷元irilone(Ⅱ )、野鸢尾苷iridin(Ⅲ )、鸢尾苷tectoridin(Ⅳ )、德鸢尾苷irilone 4′ glucoside(Ⅴ ) ,其余 3个化合物分别为胡萝卜苷 (Ⅵ )、β 谷甾醇 (Ⅶ )、十八烷基酸 (Ⅷ )。这些化合物都为在该植物中首次发现。

射干地龙颗粒的含量测定及制剂稳定性研究

本试验旨在建立射干地龙颗粒中次野鸢尾黄素的含量测定方法及考察该制剂的稳定性,为制定该制剂质量标准中含量测定方法及保质期提供依据。采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,色谱柱:GL Sciences Inertsil ODS-3(150mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-0.2%磷酸溶液(39∶61),流速:1mL/min,检测波长:266nm,柱温:30℃,进样量:10μL;根据药典,采用强光照射试验、加速试验及长期稳定性试验考察射干地龙颗粒中次野鸢尾黄素含量的稳定性。试验结果表明,次野鸢尾黄素的含量在0.3422～86.60μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9995(n=10),平均加样回收率为99.80%,RSD为1.50%(n=9);强光照射试验、加速试验及长期稳定性试验结果表明,该产品稳定性良好;此方法简便、灵敏、重现性好,可用于射干地龙颗粒中次野鸢尾黄素的含量测定,且该制剂的稳定性良好。

HPLC法同时测定黄芩射干汤中8种有效成分的含量

目的建立同时测定黄芩射干汤中8种有效成分射干苷、野鸢尾苷、黄芩苷、汉黄芩苷、鸢尾黄素、黄芩素、次野鸢尾黄素、千层纸素A含量的方法。方法采用HPLC-VWD法,色谱柱为Promosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.1%磷酸水(A)-乙腈(B);梯度洗脱;检测波长270 nm;柱温:28℃。结果射干苷、野鸢尾苷、黄芩苷、汉黄芩苷、鸢尾黄素、黄芩素、次野鸢尾黄素及千层纸素A的质量与峰面积分别在0.05625~0.3375μg(r=0.9999)、0.01613~0.09677μg(r=1.000)、0.3146~1.888μg(r=1.000)、0.1199~0.7194μg(r=1.000)、0.008656~0.05194μg(r=0.9999)、0.05632~0.3379μg(r=0.9997)、0.01134~0.06802μg(r=1.000)、0.01035~0.06211μg(r=0.9998)呈良好的线性关系。结论该方法精密度、稳定性、重复性良好,适用于黄芩射干汤中上8种成分的含量测定。

黄芩射干汤中千层纸素A和次野鸢尾黄素的含量测定

目的建立黄芩射干汤有效成分千层纸素A和次野鸢尾黄素的定量分析方法。方法采用HPLC-DAD法测定制剂中千层纸素A和次野鸢尾黄素含量,使用Ultimate XB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温:25℃。结果千层纸素A和次野鸢尾黄素含量的线性范围分别为0.058 32~0.641 52μg(r=0.999 4)和0.053 76~0.591 36μg(r=0.999 6);平均回收率(n=6)分别为96.98%和97.37%,RSD分别为1.68%和1.98%。结论所建方法快速、准确,重复性好,可作为此制剂的定量分析方法。

射干总黄酮的提取工艺研究

目的研究射干中总黄酮的提取工艺。方法采用正交实验法进行优选,紫外分光光度法测定总黄酮的含量。结果乙醇用量和浓度对提取有显著性影响。结论最佳提取工艺为药材粒径<40目,加入药材6倍量70%乙醇,提取2次,每次提取1 h。

HPLC法测定小儿清肺止咳片中次野鸢尾黄素的含量

目的建立小儿清肺止咳片中次野鸢尾黄素含量测定的方法。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Diamonsil-C18柱,流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液(体积比53∶47),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为266 nm,柱温为30℃。结果次野鸢尾黄素质量浓度在2.5～40μg.mL-1间具有良好的线性关系(r=0.999 8),次野鸢尾黄素平均回收率为102.7%,方法精密度RSD值为0.54%(n=6)。结论本方法可用于小儿清肺止咳片中次野鸢尾黄素的含量测定。

细胞膜色谱在线HPLC-IT-TOF MS联用系统筛选分析射干中次野鸢尾黄素的抗EGFR活性作用

中药射干具有多种药理作用并得到广泛研究,但对其抗肿瘤活性组分的研究较少。本研究建立了一种用于筛选射干中抗肿瘤活性组分的方法。利用高表达表皮生长因子受体(EGFR)细胞制备细胞膜色谱柱,并通过十通切换阀与高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱(HPLC-IT-TOF MS)构建成二维在线联用系统。利用吉非替尼验证该系统的适用性,分子模拟对接实验研究活性组分与受体的相互作用方式,并利用MTT实验研究所筛选组分对EGFR细胞的体外抑制作用。结果表明,利用该系统可从射干总提取物中筛选出能够作用于EGFR的活性成分,并鉴定为次野鸢尾黄素;次野鸢尾黄素与EGFR的相互作用方式与阳性药吉非替尼相似;在浓度为0.4~50μmol/L范围内,吉非替尼、次野鸢尾黄素对高表达EGFR细胞的体外抑制作用具有剂量依赖性。EGFR细胞膜色谱在线HPLC-IT-TOF MS法有望成为从中草药中发现潜在抗肿瘤候选药物的有效方法。

止得咳颗粒质量标准的研究

目的建立止得咳颗粒的质量标准研究方法。方法采用薄层色谱法(TLC)对白前、射干进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)C_(18)色谱柱测定黄芩苷和次野鸢尾黄素的含量:流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液(49∶51);流速为1 mL/min;检测波长为266 nm。结果 TLC斑点清晰,阴性无干扰。HPLC定量测定中,黄芩苷和次野鸢尾黄素分别在947.1～7577.0 ng(r=0.9998)、18.03～180.30 ng(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为100.6%(RSD=0.4%)、93.1%(RSD=0.6%)。结论该方法简便、可行、灵敏、准确,可作为止得咳颗粒的质量控制方法。

RP-HPLC法同时测定复方黑参颗粒中肉桂酸和次野鸢尾黄素的含量

目的建立复方黑参颗粒中肉桂酸、次野鸢尾黄素含量测定方法。方法采用Diamonsil^(TM)C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-体积分数为0.05%的磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为266 nm,进样量为20μL,柱温为30℃。结果在上述色谱条件下,肉桂酸和次野鸢尾黄素在0.76～3.80 mg·L^(-1)(r=0.999 5)、0.44～2.18 mg·L^(-1)(r=0.999 5)内线性关系良好。肉桂酸和次野鸢尾黄素的平均加样回收率(n=9)分别为98.3%、99.9%;RSD分别为1.8%、0.6%。结论本方法可作为复方黑参颗粒的质量控制方法。

栽培射干化学成分的分离与鉴定

本文从栽培射干中分离出两个异黄酮类化合物。根据理化常数及光谱数据,证明成分Ⅰ为次野鸢尾黄素(Irisflorentin);成分Ⅱ为野鸢尾甙元(Irigenin)。

HPLC法测定咽喉清口含片中次野鸢尾黄素的含量

目的建立咽喉清口含片中次野鸢尾黄素的高效液相色谱含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Waters Symmetry C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液（62∶38）,检测波长为265 nm,流速为1.0 m L·min^-1,柱温为30℃。结果次野鸢尾黄素进样量在0.020 52-0.205 2μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9）,平均加样回收率为97.70%,RSD为2.77%（n=6）。结论本方法准确度高,重现性好,适用于咽喉清口含片中次野鸢尾黄素的含量测定。