猫心肌缺血再灌注对Ca2+┐ATPase活力及肌浆网钙摄取能力的影响

目的：观察猫心肌缺血再灌注过程中心肌细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力、肌浆网钙摄取能力、线粒体丙二醛及心肌ＡＴＰ含量变化。方法：利用猫体外循环模型，心脏低温停搏６０ｍｉｎ后，恢复正常血液灌注６０ｍｉｎ。测定心肌细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力、肌浆网钙摄取能力、心肌ＡＴＰ及线粒体丙二醛含量。结果：心脏缺血６０ｍｉｎ时，随着心肌ＡＴＰ含量的下降，Ｃａ２＋－ＡＴ－Ｐａｓｅ活力及肌浆网钙摄取能力下降，而丙二醛含量仅有轻微增加；恢复灌注６０ｍｉｎ后，Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力及肌浆网钙摄取能力进一步下降，同时丙二醛含量明显增加。结论：缺血期间心肌细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力及肌浆网钙摄取能力的下降主要与心肌能量储备降低有关，而复灌后Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力及肌浆网钙摄取能力进一步下降，可能与复灌过程中氧自由基大量产生。

内洋地黄素拮抗剂对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 结扎大鼠左冠状动脉前降支造成心肌缺血再灌注损伤 (MIR) ,观察MIR时心肌组织内洋地黄素水平的变化和内洋地黄素特异性拮抗剂地高辛抗血清对MIR时心肌的保护作用。方法 采用左冠状动脉前降支结扎 30min ,复灌4 5min建立在体大鼠MIR模型。SpraugeDawley大鼠随机分成 7组 ,每组 10只。假手术组 ,缺血再灌注模型组 ,生理盐水组 ,维拉帕米组 ,小剂量、中剂量、大剂量地高辛抗血清组。各组于再灌注 4 5min后立即取左室心尖部缺血区心肌 ,检测心肌匀浆中内洋地黄素含量、心肌细胞膜Na+ ,K+ ATP酶活性和线粒体内Ca2 + 含量。光镜及电镜下观察心肌组织形态学变化。结果 MIR时心肌组织内洋地黄素水平明显升高 ,细胞膜Na+ ,K+ ATP酶活性明显下降 ,线粒体内Ca2 + 水平升高 ,心肌组织结构发生明显损伤。中、大剂量地高辛抗血清能降低心肌组织内洋地黄素水平 ,恢复心肌细胞膜Na+ ,K+ ATP酶活性 ,降低线粒体内Ca2 + 水平 ,减轻MIR导致的心肌组织结构的损伤。结论 内洋地黄素拮抗剂地高辛抗血清对MIR大鼠心肌有明显的保护作用 ,其作用机制可能通过拮抗内洋地黄素 ,恢复心肌细胞膜Na+ ,K+ ATP酶活性 ,减轻细胞内Ca2 + 超载。

老龄大鼠脑缺血再灌注ATP酶和自由基代谢变化及其意义

目的 :从ATP酶活性变化和自由基损伤方面研究老龄大鼠脑缺血再灌注损伤的机制。方法 :青年(5月龄 )和老龄 (2 0月龄以上 )大鼠均分为模型组和正常对照组 ,观察大鼠全脑缺血 30min再灌注 6 0min后ATP酶和SOD活性及MDA、Ca2 + 、Na+ 、K+ 含量。结果 :老龄模型组Ca2 + 水平高于青年模型组和老龄对照组。老龄对照组脑组织Na+ -K+ -ATP酶低于青年对照组 ,老龄模型组低于青年模型组。老龄对照组Ca2 + -ATP酶低于青年对照组 ,老龄模型组低于青年模型组但高于老龄对照组。老龄对照组血清和脑组织中SOD活性低于青年对照组 ,老龄模型组低于青年模型组。老龄模型组血清和脑组织MDA/SOD比值高于老龄对照组。结论 :脑缺血再灌注损伤与钙超载和自由基损伤有关 ,但由于老龄大鼠脑组织ATP酶和钙含量及自由基代谢的增龄变化 ,使脑缺血再灌注后这些病理改变较青年大鼠更为明显并具有一定特点。

缺血/再灌注损伤对心肌细胞核膜NTPase活性和mRNA出核转运的影响

目的 :观察家免心肌缺血 /再灌注 (I/R)损伤时心肌细胞核膜核苷三磷酸酶 (NTPase)动力学及mRNA出核转运的变化。方法 :制备家兔离体心脏I/R模型 ,密度梯度离心法制备心肌细胞核膜 ,按Tiffany等的方法测定NT Pase活性及mRNA的转运率。结果 :心肌细胞核膜NTPase在以ATP或GTP为底物时 ,与对照组比较 ,I/R组最大反应速率 (Vmax)分别降低 2 6 %及 2 2 % (P <0 .0 1)。Km值分别升高 5 4%及 72 % (P <0 .0 1) ;而缺血组Vmax及Km值较对照组无明显差异。以ATP或GTP启动反应时I/R组 10min内心肌细胞核mRNA转出率分别较对照组降低 2 7%及 32 % (P <0 .0 1) ;而缺血组与对照组相比并无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :心肌缺血 /再灌注损伤时 ,心肌细胞核膜受损 ,核膜上NTPase活性降低 ,导致细胞核膜mRNA出核受阻 ,从而可能影响蛋白质的合成表达。

没食子酸丙酯对大鼠缺血再灌注心肌线粒体损伤的保护

目的观察没食子酸丙酯对大鼠缺血再灌注心肌线粒体损伤的保护。方法结扎大鼠冠状动30min再灌注20min,测定心肌线粒体中琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素氧化酶(CCO)、Ca2+·Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷光甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性及细胞色素、磷脂和丙二醛含量。结果没食子酸丙酯(20和40mg/kg,结扎冠状动脉前60minip)能显著减轻缺血再灌注所致琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素氧化酶(CCO)、Ca2+·Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷光甘肽过氧化物酶活性的抑制(P<0.05),及细胞色素aa3、细胞色素C和膜磷脂含量的减少,并能抑制丙二醛含量的升高。结论没食子酸丙酯对缺血再灌注时心肌线粒体功能具有保护作用,其机制可能是通过提高对氧自由基的清除功能和抑制脂质过氧化。

嘌呤核苷磷酸化酶活性和外源性透明质酸吸收率对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的研究

目的:探讨嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)活性和外源性透明质酸(HA)吸收率对大鼠肝脏低温保存及常温缺血再灌注损伤的作用。方法:将大鼠肝脏在UW﹑Celsior和HTK3种不同保存液中低温保存16、24h后,用37°CKrebs-Henseleit液连续循环灌注90min,分别于不同灌注时间检测灌洗液中PNP活性和外源性HA吸收率的变化。结果:低温保存16h和24h,UW和Celsior组再灌注60min与15min比较,PNP活性明显增高(P<0.05),而HTK组再灌注30min则显著增高;低温保存16h,UW和Celsior组再灌注60min与15min比较外源性HA吸收率明显下降(P<0.05),而HTK组再灌注30min出现外源性HA吸收率明显下降;低温保存24hUW组再灌注60min外源性HA吸收率明显下降,而Celsior和HTK组30min即出现外源性HA吸收率明显下降。结论:PNP和HA吸收率可作为评价肝脏缺血再灌注损伤的指标。

川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :观察大鼠海马CA— 1区缺血再灌注损伤后MDA值和ATPase活性的动态变化及川芎嗪的保护作用。方法 :Wistar大鼠双侧颈总动脉夹闭 2 0min ,造成不完全性脑缺血 ,松夹即为再灌注。大鼠随机分为假手术对照组 (SOC)、缺血再灌注组 (IR)和川芎嗪治疗组 (TMP)。结果 :①IR组MDA值再灌注 6h后恢复对照水平 ,川芎嗪能显著降低异常增高的MDA值 (P <0 .0 1 )。②IR组ATPase活性再灌注 2 4h后恢复对照水平 ,川芎嗪能明显改善酶活性 (P <0 .0 1 ) ,且能缩短酶活性恢复时程。结论 :川芎嗪能减少大鼠脂质过氧化 ,改善ATPase功能 ,减轻海马结构缺血再灌注损伤。

缺血再灌注损伤心肌电镜细胞化学的定性与定量分析─三磷酸腺苷酶（一）

本研究选择心脏瓣膜病患者２０例，随机分为两组，每组１０例．在瓣膜置换术中分别采用冷晶体停跳液（Ｓｔ．Ｔｈｏｍａｓ液）间断灌注（低温组）和温血停跳液持续灌注（常温组）的心肌保护方法．缺血期末和再灌注３０分钟心肌三磷酸腺苷酶（ＡＴＰ酶）电镜细胞化学定性分析结果示两组各期心肌线粒体和粗面内质网ＡＴＰ酶染色均为阳性，计算机图像分析结果表明ＡＴＰ酶活性灰度值组内及组间比较均无显著差异．由于影响ＡＴＰ酶活性的因素较多，故不能特异地反映心肌功能和结构的损伤程度．

没食子酸丙酯对大鼠缺血再灌注心肌线粒体功能的影响

目的观察没食子酸丙酯对大鼠缺血再灌注心肌线粒体功能的影响作用。方法结扎大鼠冠状动脉30 min再灌注20 min,测定心肌线粒体中琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素氧化酶(CCO)、Ca2+.Mg2+—ATP酶、Ca2+—ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶((GSH—PX)活性及细胞色素、磷脂和丙二醛含量。结果没食子酸丙酯(20和40 mg/kg,结扎冠状动脉前60 min ip)能显著减轻缺血再灌注所致琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素氧化酶(CCO)、Ca2+.Mg2+-ATP酶、Ca2+—ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶活性的抑制(P<0.05)及细胞色素aa3、细胞色素C和膜磷脂含量的减少,并能抑制丙二醛含量的升高。结论没食子酸丙酯对缺血再灌注时心肌线粒体功能具有保护作用,其机制可能是通过提高对氧自由基的清除功能和抑制脂质过氧化。

肝脏缺血再灌注损伤大鼠嘌呤核苷磷酸酶活性的研究

目的 :探讨大鼠肝脏低温保存及常温缺血再灌注过程中 ,不同保存液中嘌呤核苷磷酸酶 (PNP)活性的变化。方法 :将大鼠肝脏在 3种不同保存液中低温保存不同时限后 ,用 37℃Krebs Henseleit液连续循环灌注 90min ,分别于不同灌注时间检测灌洗液中PNP活性的变化。结果 :经过 8h的低温保存 ,再灌注 90min后 ,HTK保存的肝脏中PNP明显高于UW和Celsior ;经过 1 6h的低温保存后 ,再灌注 6 0min前 ,HTK保存的肝脏中PNP明显高于UW和Celsior;6 0min后HTK和Celsior保存的肝脏中PNP明显高于UW ;经过 2 4h的低温保存后 ,再灌注1 5min后 ,HTK保存的肝脏中PNP明显高于Celsior,而Celsior又明显高于UW。结论 :随着低温保存和再灌注时间的延长 ,大鼠肝脏中PNP逐渐增高且UW液的保存效果明显优于HTK和Celsior。

绞股蓝总皂甙抗大鼠海马结构缺血再灌注损伤的作用

为探讨绞股蓝总皂甙抗缺血再灌注损伤的作用,本文检沿了大鼠海马结构缺血再灌注损伤后腺苷三磷酸(ATP)酶活性,并观察了病理组织学的改变.结果:缺血再灌注损伤后,海马结构组织Na^+—K^+—ATPase,Ca^(2+)—ATPase活性为12.56±0.81和24.83±0.55,较正常对照组(Na^+—K^+—ATPase16.07±1.42,Ca^(2+)—ATPase31.46±4.81)的活性明显下降(P<0.01).绞股蓝防治组Na^+—K^+—ATPase,Ca^(2+)—ATPase活性为15.58±2.12和29.61±1.31,脑活素防治组Na^+—K^+—AT-Pase,Ca^(2+)—ATPase活性为15.04±1.50和29.19±1.92,较缺血再灌注组明显上升(P<0.01).绞股蓝总皂甙防治组与脑活素防治组之间无明显差异(P>O.05).同时,海马1区神经毡损伤明显减轻.提示绞股蓝总皂甙有改善ATPase的功能,进而减轻缺血再灌注损伤后海马1区神经组织损害的功效.

离体猪肾缺血再灌注肾损伤时LDH和ATP酶的变化

目的 :研究离体猪肾缺血再灌注 (IR)损伤时 ,血浆和肾组织中的LDH和ATP酶活性的变化。方法 :将31只猪肾随机均分为对照组、缺血组和缺血再灌注组 (IR组 )。对照组在猪放血后 ,即开腹取肾皮质作LDH、ATP酶活力以及组织学检测。缺血组肾缺血 5 0min ,即取肾皮质 ,检测同对照组。IR组于再灌注 0h、0 .5h、1h、1.5h、2h、2 .5h时各取血浆 ,测LDH活力 ;再灌注 2 .5h时取肾皮质 ,检测同对照组。结果 :缺血组肾组织中LDH高于对照组 ,Na+-K+ ATP酶活性低于对照组 ;IR组肾组织中LDH酶活性高于对照组和缺血组 ,Na+ -K+ ATP酶和Ca2 + -ATP酶活性低于对照组和缺血组 ,差异均具有显著性 (P <0 .0 5 )。血浆中LDH酶活性 ,再灌注 0 .5h、1h、1.5h、2h时高于再灌注前对照组 ,差异具有显著性 ;再灌注 2 .5h时 ,其值略高于对照组 ,但差异无显著性。IR组肾组织结构明显损伤 ,缺血组损伤轻于IR组。结论 :肾IR损伤时 ,LDH明显升高 ,再灌注 1.5h时达高峰 ;肾IR时 ,Na+ -K+ ATP酶和Ca2 + -ATP酶活力下降 ,可能参与IR肾损伤。

川芎嗪对大鼠心肌线粒体损伤的保护作用

目的 :观察川芎嗪对大鼠缺血再灌注心肌线粒体损伤的影响及其机制。方法 :结扎大鼠冠状动脉30min后灌注20min ,复制缺血再灌注模型。测定心肌线粒体中琥珀酸脱氢酶 (SDH)、细胞色素氧化酶 (CCO)、Ca2 + ·Mg2 + -ATP酶、Ca2 + -ATP酶、超氧化物歧化酶 (SOD)、谷光甘肽过氧化物酶 (GSH -PX)活力及细胞色素和丙二醛 (MDA)含量。结果 :川芎嗪保护组的SDH、CCO、Ca2 + -ATP酶、Ca2 + ·Mg2 + -ATP酶、SOD和GSH -PX活力显著高于缺血再灌注组 (P<0 05) ,其细胞色素aa3、细胞色素C和膜磷脂含量也显著高于缺血再灌注组 ,而MDA含量则显著性降低。结论 :川芎嗪对缺血再灌注时心肌线粒体膜酶活性变化及膜成分降解有较强的拮抗作用 ,其机理可能是通过提高对氧自由基的清除和抑制脂质过氧化。

线粒体融合蛋白2与缺血-再灌注损伤

线粒体是重要的细胞器之一,由线粒体外膜和线粒体内膜组成,其结构和功能受线粒体动力学调控。线粒体融合相关蛋白和线粒体分裂相关蛋白可参与线粒体融合和分裂过程,调控线粒体动力学,进而调节细胞结构、功能及能量代谢。其中线粒体融合蛋白(MFN)2是一种位于哺乳动物线粒体外膜上的蛋白,具有三磷酸鸟苷酶活性,可介导线粒体融合,参与线粒体自噬、线粒体-内质网结构偶联的形成和细胞凋亡等生理过程,并可显著影响缺血-再灌注损伤(IRI)的发生发展。本文综述MFN2的结构与调节、MFN2的功能、MFN2在IRI中作用的相关文献,探讨MFN2与IRI的关系及相关机制,以期为IRI的防治提供新的靶点和思路。

酮替芬对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨酮替芬对大鼠急性前脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 采用Pulsinelli四动脉结扎法略加改良制作动物模型。记录EEG ,检测脑水分、脑组织内CK、MDA、SOD、Na+-K+-ATP酶和Ca2 +-ATP酶。结果 酮替芬可以促进模型鼠EEG的恢复 ,减轻脑水肿 ,使脑组织CK释放和MDA含量减少 ,提高SOD、Na+-K+-ATP酶和Ca2 +-ATP酶的活性。结论 酮替芬对脑缺血再灌注损伤有保护作用 ,可能与其减轻脑水肿 ,抗脂质过氧化 ,维持钠钾泵和钙泵功能有关。

缺血后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的探讨缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法 80只SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组和延迟缺血后处理组各20只,缺血再灌注组、缺血后处理组和延迟缺血后处理组采用改良Zea-Longa法制备大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血再灌注组不作处理,缺血后处理组实施30s缺血+30s再灌注操作3个循环,延迟缺血后处理组再灌注15min后实施30s缺血+30s再灌注操作3个循环;假手术组仅结扎颈外动脉,不插入线栓。恢复灌注24h处死大鼠,取脑组织制作切片,应用图像处理软件计算脑梗死灶体积;提取右侧大脑半球线粒体,采用TBA法检测丙二醛含量,采用分光光度计法检测Na^+-K^+三磷酸腺苷酶(adenosine triphosphatase,ATPase)、Ca^(2+) ATPase和Mg^(2+) ATPase活性。结果假手术组未发现梗死灶,缺血再灌注组皮层及海马区见白色梗死灶,缺血后处理组皮层见苍白色梗死区,延迟缺血后处理组左侧皮层及海马区见苍白色梗死灶;缺血后处理组脑梗死灶体积[(30.81±3.63)%]较延迟缺血后处理组[(51.01±3.33)%]和缺血再灌注组[(54.25±3.69)%]小(P<0.05),延迟缺血后处理组脑梗死灶体积与缺血再灌注组比较差异无统计学意义(P>0.05);线粒体丙二醛水平在缺血再灌注组[(1.56±0.08)μm/g]、延迟缺血后处理组[(1.47±0.10)μm/g]和缺血后处理组[(0.87±0.04)μm/g]均高于假手术组[(0.40±0.06)μm/g],缺血再灌注组和延迟缺血后处理组高于缺血后处理组(P<0.05),缺血再灌注组与延迟缺血后处理组比较差异无统计学意义(P>0.05);Na^+-K^+ ATPase、Ca^(2+) ATPase和Mg^(2+) ATPase活性在缺血再灌注组(2.88±0.18、3.45±0.34、0.96±0.23)、延迟缺血后处理组(2.88±0.30、3.59±0.36、1.07±0.31)和缺血后处理组(4.93±0.17、4.91±0.40、2.59±0.26)均低于假手术组(6.12±0.71、6.75±0.23、3.79±0.33),缺血再灌注组和延迟缺血后处理组低于缺血后处理组(P<0.05),缺血再灌注组与延迟缺血后处理组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论缺血后处理可减轻局灶性脑缺血大鼠再灌注损伤,其机制可能与降低线粒体丙二醛表达、增加ATPase活性有关。

不同器官保存液对大鼠肝脏缺血再灌注损伤时嘌呤核苷磷酸酶活性和透明质酸吸收率的影响

目的探讨大鼠肝脏低温保存及常温缺血再灌注过程中在不同的保存液中嘌呤核苷磷酸酶（PNP）活性和透明质酸（HA）吸收率的变化。方法将大鼠肝脏在三种不同保存液中低温保存16h和24h后，用37℃ Krebs-Henseleit液连续循环灌注90min，分别于不同灌注时间检测灌洗液中PNP活性和外源性透明质酸的吸收率的变化。结果经过16h的低温保存后，再灌注60min前，HTK保存的肝脏中PNP明显高于UW和Celsior；60min后HTK和Celsior保存的肝脏中PNP明显高于UW；经过24h的低温保存后，再灌注15min后，HTK保存的肝脏中PNP明显高于Celsior，而Celsior又明显高于UW。低温保存16h后，再灌注时，3种保存液保存的肝脏对外源性透明质酸的吸收率均为负值，表明肝窦内皮细胞受到一定程度的损伤；保存24h者，UW液保存肝脏外源性透明质酸的吸收率明显高于Celsior液和HTK液。结论随着低温保存和再灌注时间的延长，大鼠肝脏中PNP活性逐渐增高，而外源性透明质酸的吸收率下降；二者可作为评价肝脏缺血再灌注损伤的指标。