金黄色葡萄球菌isdb基因的克隆表达及其小鼠免疫试验

为了研究金黄色葡萄球菌表面Isdb蛋白的免疫原性,应用PCR方法扩增出金黄色葡萄球菌Wood46株的isdb基因并进行序列分析,再将isdb基因插入到pET32-a(+)载体上,构建了pET32-a(+)-isdb重组质粒,将重组质粒转化到宿主菌大肠杆菌BL21中并诱导表达和纯化Isdb蛋白。用纯化的Isdb蛋白免疫小鼠,检测小鼠血清中抗体水平;在二次免疫之后的第2周,用金黄色葡萄球菌Wood46、HLJ23-1株对小鼠攻毒,每组8只小鼠。研究结果发现:isdb基因在不同菌株中高度保守;Isdb蛋白在宿主菌中获得成功表达;在免疫后血清抗体效价与对照组相比,均显著升高(P<0.05);攻毒结果表明Isdb蛋白对Wood46和HLJ23-1两种菌株攻毒保护率分别为62.5%和75%。以上结果表明Isdb蛋白具有较好的免疫原性和免疫保护作用。