Study on Anti-tumor Activity and Mechanism of Isoorientin

Isoorientin can play an anti-tumor effect through interfering with tumor cell proliferation, inducing tumor cell apoptosis, regulating reactive oxygen species level, inducing tumor cell autophagy, blocking tumor cell infiltration and metastasis, inhibiting tumor neovascularization and other pathways. This paper reviews the research progress of anti-tumor activity and mechanism of isoorientin in recent years.

基于指纹图谱、量值传递及化学计量学的薏苡竹叶散质量评价

建立高效液相指纹图谱进行外部质量控制,结合化学计量学探究内部质量影响因素,通过量值传递规律确定制备工艺稳定性,全面完善薏苡竹叶散(YZP)质量评价系统。利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012.130723版本)绘制15批YZP指纹图谱并评价相似度;选择Origin 2019b 64Bit进行聚类分析(CA),利用SIMCA 14.1进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA),获得导致质量差异的主要成分;测定15批淡竹叶药材和YZP中荭草苷和异荭草苷的含量,探究样品制备过程中的量值传递规律。结果表明,15批YZP指纹图谱得到21个共有峰,指认了6种成分,分别为9号峰(异荭草苷)、10号峰(荭草苷)、13号峰(牡荆素)、14号峰(异牡荆素)、15号峰(连翘酯苷A)和20号峰(连翘苷),相似度在0.956~0.995之间,符合相关规定;CA结果显示,15批YZP被分为两类,PCA共得到3个主成分,累计贡献率82.4%,OPLS-DA得出10个贡献率较大成分,包括已指认出的9号峰(异荭草苷)、13号峰(牡荆素)和20号峰(连翘苷),有利于进一步质量评价;15批淡竹叶饮片中荭草苷、异荭草苷的质量分数为0.2156%~0.9923%、0.530%~2.052%,15批YZP中荭草苷、异荭草苷的质量分数为0.022%~0.112%、0.065%~0.312%,饮片-YZP中荭草苷、异荭草苷转移率为78.41%~119.54%、74.57%~127.96%,转移率皆在平均值±30%范围内,未出现离散值,说明制备工艺较稳定。本文建立了HPLC指纹图谱结合多指标含量测定方法,有效控制YZP外部质量,通过化学计量学确定了影响质量的内部因素,转移率稳定确定制备工艺稳定可靠,为YZP全面质量评价奠定基础。

异荭草苷通过MAPK/FoxO信号通路减轻LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症反应

为了研究异荭草苷(Isoorientin,ISO)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症反应的影响及其机制,将对数生长期的RAW264.7细胞随机分为对照组、模型组(LPS 1μg·mL^(-1))和异荭草苷(ISO 2.5~40μg·mL^(-1)+LPS)给药组。各组细胞培养24 h后,MTT法检测ISO对RAW 264.7细胞毒性,Griess法检测细胞培养液中一氧化氮(NO)的含量,ELISA法检测细胞培养液中TNF-α的含量,q RT-PCR方法检测环氧合酶2(COX-2)m RNA的表达水平,蛋白质印迹分析法测定细胞中COX-2、JNK、p-JNK、p38、p-p38、FoxO1和FoxO3蛋白的表达。结果表明,与LPS模型组比较,ISO显著抑制LPS诱导的TNF-α(P<0.001)和NO(P<0.01)的产生,且未见其细胞毒性。此外,ISO以剂量依赖的方式显著抑制RAW 264.7细胞COX-2基因(P<0.001)和蛋白(P<0.05)的表达。蛋白质印迹分析显示,ISO显著抑制MAPK信号通路中p-JNK和p-p38的磷酸化,并减少Fox O1/3的核转位。综上所述,ISO可抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症反应,其作用机制可能与其在MAPK/FoxO信号通路中发挥调节作用有关。

云南不同来源大发表中异荭草苷含量比较研究

目的 考察不同产地、部位、生长年限及采收期大发表药材中异荭草苷的含量变化,为大发表药材后续研究应用提供参考。方法 采用高效液相色谱法,测定云南大理、楚雄、玉溪3个大发表药材主要产地,以及玉溪产大发表药材的不同部位、生长年限及采收期的异荭草苷含量。结果 不同产地的大发表药材中异荭草苷含量存在差异,其中,玉溪产大发表药材的异荭草苷含量为190μg/g,较优于大理和楚雄;大发表药材的不同部位中异荭草苷含量存在显著差异,异荭草苷含量最高的是花,其次是叶、枝、茎、根等;从1年生到3年生,大发表药材中异荭草苷含量变化趋势不明显;从7月初到11月初,大发表药材中异荭草苷含量逐渐升高。结论 初步揭示了不同产地、部位、生长年限及采收期大发表药材中异荭草苷的含量变化情况,为大发表药材质量控制研究和推广应用提供参考。

响应面法优化黔产鸭跖草多糖和异荭草苷提取工艺研究

目的:优化黔产鸭跖草中多糖和异荭草苷提取工艺。方法:采用中心组合设计-响应面法,以鸭跖草多糖和异荭草苷提取率为响应值,提取时间、提取温度、料液比为自变量,结合单因素考察结果,设计3因素3水平试验。结果:得到最佳提取工艺参数为提取时间2.3 h,提取温度95℃,料液比1∶20。结论:综合考虑2种活性成分,响应面优化黔产鸭跖草有效成分工艺切实可行,具有较强的实际意义。

食物黄酮异荭草素及其银纳米颗粒的保肝活性

为提高食物黄酮异荭草素(Iso)的生物活性和预防苯并(a)芘(BaP)诱发的肝损伤提供一定的依据,以Iso及其银纳米颗粒(Iso-AgNPs)为研究对象,建立食品高温有害产物BaP损伤HL-7702人肝细胞模型,基于细胞凋亡、自噬和焦亡3种程序性死亡方式,通过MTT、台盼蓝染色、荧光标记、流式细胞术、Western blotting等方法检测Iso-AgNPs的保肝作用。结果表明:相较于Iso,Iso-AgNPs能更好地钝化BaP对HL-7702人肝细胞活力的作用,促进细胞增殖,显著抑制BaP诱导的HL-7702人肝细胞凋亡性、自噬性和焦亡性损伤。因此,Iso-AgNPs可提高Iso的生物活性且预防肝细胞损伤。

异荭草苷对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的影响及机制

目的:探究异荭草苷对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的作用及机制。方法:36只大鼠随机分为对照组、模型组、异荭草苷低、中、高剂量组和地塞米松组,除对照组外,其余组采用香烟烟雾暴露+脂多糖(LPS)法建立COPD大鼠模型,药物干预14 d后,称重计算肺指数,HE染色检测肺组织病理损伤,Smith评分法进行肺损伤评分,肺功能检测仪检测肺活量(FVC)、一秒用力呼气容积(FEV_(1))、一秒率(FEV_(1)/FVC),血气分析仪检测动脉氧分压(PaO_(2))、血氧饱和度(SaO_(2))、动脉二氧化碳分压(PaCO_(2)),ELISA检测肺组织炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-8水平,试剂盒检测肺组织氧化应激指标MDA和SOD含量,Western blot检测Toll-样受体4(TLR4)、髓样分化因子(MyD88)、核因子-κB p65(NF-κB p65)及p-NF-κB p65蛋白水平,并计算p-NF-κB p65/NF-κB p65。结果:与对照组比较,模型组肺组织出现炎症浸润,肺泡严重塌陷,肺泡壁增厚,肺间质水肿;与模型组比较,异荭草苷中、高剂量组和地塞米松组大鼠肺组织病理损伤明显改善,肺指数和肺损伤评分显著降低(P<0.05),肺功能指标FVC、FEV_(1)、FEV_(1)/FVC显著升高(P<0.05),血气分析指标PaO_(2)水平和SaO_(2)百分比显著升高(P<0.05),PaCO_(2)水平显著降低(P<0.05),肺组织IL-6、IL-1β、IL-8、TNF-α、MDA水平降低(P<0.05),SOD水平升高(P<0.05),TLR4、MyD88蛋白表达下调(P<0.05),p-NF-κB p65/NF-κB p65降低(P<0.05)。结论:异荭草苷可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB p65减少炎症因子分泌,降低氧化应激水平,改善COPD大鼠肺功能,缓解肺损伤。

黄荊子标准汤剂质量标准研究

目的:构建黄荆子标准汤剂质量评价标准,为黄荆子标准汤剂的研发提供依据。方法:以不同产区12批黄荆子饮片为样本,制成黄荆子标准汤剂,通过考察异荭草苷和荭草苷的转移率,确定主要的工艺参数,且形成黄荆子标准汤剂指纹图谱分析分法,并对其指纹图谱共有峰进行指认。结果:12批黄荊子标准汤剂中异荭草苷和荭草苷转移率分别为70.19%~82.65%、70.97%~82.20%,通过特征图谱分析共得出了10个主要特征峰,对12批黄荊子饮片标准汤剂分别进行相似度评价,其相似度均大于0.97。结论:黄荊子标准汤剂制备方法合理规范,指纹图谱相似度高,且方法精密度、稳定性、重复性及加样回收率均良好,所形成的品质判断方法简单、准确,将为黄荊子的标准汤剂、配方颗粒及相关经典名方制剂(汤剂)的品质研究提供重要依据。

分光光度法测定竹叶提取物中总黄酮含量的改进

针对测定竹叶提取物中总黄酮含量的分光光度法,作出部分优化:以碱性显色体系显色,增加显色剂用量,分别使用芦丁和异荭草苷作为标准品,制作标准曲线,竹叶提取物中总黄酮测定结果存在差异。在浓度0~40 mg/L范围内,芦丁、异荭草苷标准曲线的相关系数(r^(2))分别为0.9999、0.9998,平均加标回收率为97.93%、99.65%,对应测出总黄酮含量分别为30.3%与26.3%,RSD为1.35%、0.7%(n=6)。与高效液相色谱法测定结果比较,实验结果表明用异荭草苷制作标准曲线优于芦丁。

三叶青藤叶中总黄酮、荭草苷和异荭草苷提取分离方法及HPLC检测条件的研究

目的:建立三叶青藤叶中总黄酮、荭草苷及异荭草苷的提取分离和含量测定方法。方法:分别选取不同浓度的乙醇、丙二醇和丁二醇作为溶剂对三叶青藤叶中的有效成分进行提取,分别筛选出对总黄酮、荭草苷及异荭草苷提取率最高的溶剂,并采用高效液相色谱法(HPLC)进行探究。结果:选取荭草苷提取分离溶剂为30%丙二醇,异荭草苷的提取分离溶剂为40%乙醇。荭草苷的线性关系方程为Y=1.0524X-0.5086,在0.4~4μg/mL范围内的峰面积与进样浓度线性关系良好(R2=0.9997)。采用30%丙二醇提取三叶青藤叶中荭草苷的平均含量为3.58μg/g。异荭草苷的线性关系方程为Y=1.6650X-0.8264,在0.4~4μg/mL范围内的峰面积与进样浓度线性关系良好(R2=0.9996)。采用40%乙醇提取三叶青藤叶中异荭草苷的平均含量为1.47μg/g。结论:建立了三叶青藤叶总黄酮、荭草苷及异荭草苷的提取分离和含量测定方法。建立的高效液相色谱法方法简便、准确,重复性好,可应用于三叶青中这几种成分的含量测定。

白花败酱草中异牡荆苷和异荭草苷的高速逆流色谱分离和制备

应用高速逆流色谱分离制备白花败酱草中的异荭草苷和异牡荆苷,以乙酸乙酯∶乙醇∶水(4∶1∶5)为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速2.0 mL/m in,主机800 r/m in,检测波长254 nm。以此分离条件经一步洗脱,从300 mg白花败酱草粗提物中制备得到异荭草苷24.1 mg和异牡荆苷49.8 mg,产物纯度经HPLC检测高达98.0%,结构经UV、IR、MS1、H NMR和13C NMR鉴定,二者均为首次从败酱属植物中分离得到。

秦岭龙胆的化学成分

从秦岭龙胆 (GentianaapiataN .E .Br.)全草的乙醇提取物中分离得到 4个化合物 ,通过波谱分析分别鉴定为异荭草甙 (isoorientin) ,龙胆苦甙 (gentiopicroside) ,asystasiosideA和蔗糖 (D sucrose) .采用二维NMR分析 ,确定了asystasiosideA的立体结构 .

异荭草苷体内外抗呼吸道合胞病毒活性研究

【目的】研究清热消炎中草药淡竹叶中异荭草苷的体内外抗病毒活性,并初步探讨其作用机制。【方法】采用MTT法测定异荭草苷的细胞毒性,并以异荭草苷的最大无毒浓度为起始浓度,采用空斑减数法测定其体外抗RSV活性,计算其抗病毒的选择性指数(SI值);继而采用空斑减数法,研究异荭草苷对RSV复制周期不同阶段的影响,采用实时定量PCR法,检测异荭草苷对病毒蛋白m RNA合成的影响;选取3周龄BALB/c雄性小鼠研究异荭草苷体内抗RSV活性,小鼠灌胃给药4 d,经鼻腔滴入RSV病毒液造模,继续灌胃给药3 d,取小鼠肺组织称重、切片、HE染色,显微镜下观察肺组织病理性改变,并用空斑减数法检测小鼠肺组织内病毒含量。【结果】异荭草苷体外抑制RSV A2株和LONG株的IC50分别为(3.6±0.8)μg/m L和(2.4±0.2)μg/m L,比阳性药利巴韦林的活性略低,因异荭草苷的细胞毒性比利巴韦林小,其抗RSV的选择性指数(SI)为利巴韦林8.3倍;初步的作用机制研究表明,异荭草苷主要抑制RSV在宿主细胞内的复制过程,也可一定程度地抑制病毒进入宿主细胞,实时定量PCR结果显示,异荭草苷可以不同程度地降低RSV的L、F和P蛋白对应的m RNA的表达;异荭草苷可降低小鼠肺组织的病毒滴度,且可缓解病毒引起的炎症。【结论】清热消炎中药淡竹叶中的异荭草苷,具有较好的体内外抗病毒活性,且能一定程度缓解病毒性炎症;该化合物主要在病毒进入宿主细胞后的复制阶段(复制晚期)起作用,能抑制与病毒复制晚期相关的L、F和P蛋白的m RNA表达。

HPLC测定不同来源竹叶中荭草苷、异荭草苷和异牡荆苷的含量

目的 :测定不同来源竹叶中荭草苷、异荭草苷和异牡荆苷的含量。方法 :用HPLC法测定 ,以MeOH H2 O HAc(35∶6 5∶1)为流动相 ,340nm为检测波长。结果 :不同来源最高含量为 0 .89% ,最低含量为 0 .0 7%。结论 :该法简单、快速、准确。

毛獐牙菜化学成分的研究

从毛獐牙菜中分得４种成分，根据光谱数据和理化性质测定，鉴定为异红草甙、龙胆苦甙、葡萄糖和齐墩果酸，均为首次从本植物中分离鉴定。

秦岭龙胆的化学成分研究

从秦岭龙胆(GentianaapiataN.E.Br.)全草的乙醇提取物中首次分离得到4个化合物,通过波谱分析分别鉴定为异荭草甙(isoorientin )、龙胆苦甙(gentiopicroside )、秦岭龙胆甙A(apiatosideA )和蔗糖(D-(+)-sucrose ),其中 为新化合物。

异荭草素的药理作用

异荭草素是一种木犀草素糖苷类黄酮化合物,存在于多种药用植物中。异荭草素具有多种药理活性,如抗氧化、抑制炎症发展、改善胰岛素抵抗、弱化肝纤维化发展以及诱导肝癌细胞凋亡等。本文综述了近几年来异荭草素药理作用及相应机制研究的进展,并对如何推进异荭草素在肝癌治疗领域的应用提出了建议和展望。

HPLC波长切换法同时测定粗茎秦艽中6个成分的含量

本实验建立了HPLC波长切换法同时测定云南丽江粗茎秦艽中马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、异荭草苷、异牡荆苷6种成分的含量,并对各成分含量间的相关性进行分析,为粗茎秦艽药材质量的全面评价提供了科学依据。采用Sepax Gp-C18（150 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,甲醇-0.1%磷酸为流动相体系,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温25℃,检测波长235 nm（0～51 min）、270 nm（51～57 min）、243 nm（57～65 min）、270 nm（65～80 min）。马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、异荭草苷、异牡荆苷的量分别在0.01000～10.0000、0.00216～2.1600、0.0480～48.0000、0.0010～1.0000、0.00034～0.3400、0.00026～0.2600μg范围内与色谱峰峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为98.52%～99.31%,RSD均小于3.5%（n=6）;对各成分含量间相关性分析发现环稀醚萜苷类与黄酮类组分含量间无相关性,四种环烯醚萜苷类成分的含量之间存在着显著相关性,两种黄酮类成分的含量之间也存在相关性。该方法简便、快速、准确,重现性好,更符合中药材复杂体系的多指标质量控制发展趋势,为粗茎秦艽药材的质量控制找到了简便易行的方法。

HPLC测定四川及青海地区獐牙菜植物中6种主要成分的含量

目的：建立反相高效液相色谱法同时测定四川及青海地区部分獐牙菜中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷、当药醇苷、异荭草苷、1,8-二羟基-3-甲氧基咄酮的含量。方法：采用RP-HPLC,使用Kromasil C_(18)(4．6mm×2．50 mm,5μm)柱；流动相甲醇-水(含0．02%磷酸)；梯度洗脱程序为0～50 min,甲醇的体积分数(下同)由20%上升至80%；50-55 min由80%增至100%,55-60 min为100%,流速1 mL·min(-1),检测波长254 nm；柱温35℃。结果：6种成分均达到基线分离,线性良好。结论：该方法快速、准确、重复性好,为该类药材的入药提供了理论依据。

UPLC-MS/MS同时测定Beagle犬血浆中原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷

目的建立Beagle犬血浆中同时测定原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。方法 Beagle犬单次股静脉注射88 mg.kg-1的注射用复方荭草(冻干粉针),分时取血处理。色谱采用Waters BEH C18反相柱,流动相为乙腈-水(含0.1%甲酸)梯度洗脱,质谱采用多反应离子监测(MRM)方式进行检测,用于定量分析的离子对分别为原儿茶酸m/z109.0→m/z152.8、异荭草素m/z449.2→m/z299.1、野黄芩苷m/z463.1→m/z287.1。结果原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷的线性范围分别为0.002～0.569、0.022～5.450和0.024～5.860 mg·L-1,方法的准确度,日内、日间精密度和稳定性均符合要求。结论该方法快速、灵敏、专属性强,可用于原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷的药代动力学研究。