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Facile Syntheses of 3-Isopentenyl Flavone and 3-Geranyl Flavone 被引量:1
1
作者 HUANG Chu-sheng SHI Jian-cheng +2 位作者 LIU Hong-xing CHEN Qian DUAN Hong-xia 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2012年第6期994-998,共5页
Although there was a strong steric effect,isopentenyl and geranyl moieties were successfully introduced into C3 position in flavone skeleton so as to synthesize the 3-isopentenyl flavone and 3-geranyl flavone under tw... Although there was a strong steric effect,isopentenyl and geranyl moieties were successfully introduced into C3 position in flavone skeleton so as to synthesize the 3-isopentenyl flavone and 3-geranyl flavone under two cyclization conditions(AcOH/HCl and concentrated H 2 SO 4 /MeOH) in this report.It was found that the optimum cyclization conditions for 3-isopentenyl flavone and 3-geranyl flavone were,respectively,AcOH/HCl and H 2 SO 4 /MeOH.Furthermore,the donating electron ability is in the sequence 3-geranyl flavone3-isopentenyl flavone according to the density functional theory(DFT) calculations,suggesting the longer alkyl chain at 3-position would be more favorable for enhancing the donating electron ability.The present synthetic routes might reveal potential applicability in our continued studies on the total syntheses of other natural 3-alkyl flavonoids. 展开更多
关键词 3-isopentenyl flavone 3-Geranyl flavone 3-Alkyl flavonoid
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1-2-Isopentenyl的高压研究
2
作者 黄鑫 张昆 张延斌 《电子世界》 2020年第4期97-100,共4页
1绪论1-2-Isopenteny(异物烯基嘌呤)是常见的细胞分裂素,参与调控植物生长与发育,准确分析它在植物体内的含量分布对研究植物生命活动有重大意义,但目前对细胞分裂素的检测手段明显不够。最近提出的电化学检测方法,是利用细胞分裂素与... 1绪论1-2-Isopenteny(异物烯基嘌呤)是常见的细胞分裂素,参与调控植物生长与发育,准确分析它在植物体内的含量分布对研究植物生命活动有重大意义,但目前对细胞分裂素的检测手段明显不够。最近提出的电化学检测方法,是利用细胞分裂素与生物活性物质(酶、受体)识别并反应,将化学信号转变为电信号,来检测目标物。研究1-2-Isopenteny的电子特性将为电化学生物传感器的实现提供依据. 展开更多
关键词 晶胞结构 不同压力 吸收系数 态密度 PBE isopentenyl 晶体结构 晶胞参数 电子结构 共价键 晶格常数 晶格参数 能带结构 高压研究
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淫羊藿中异戊烯基黄酮的鉴别和含量测定的综合实验设计
3
作者 张丽 党强维 +1 位作者 鲁会杰 李建龙 《甘肃高师学报》 2024年第2期73-78,共6页
为加深学生对传统中药淫羊藿的药效成分异戊烯基黄酮的认识,设计了综合化学实验.将淫羊藿粉末经乙醇热回流提取,蒸馏浓缩得到总浸膏,再将总浸膏溶于水,依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,得到石油醚相、乙酸乙酯相和正丁醇相.将三相... 为加深学生对传统中药淫羊藿的药效成分异戊烯基黄酮的认识,设计了综合化学实验.将淫羊藿粉末经乙醇热回流提取,蒸馏浓缩得到总浸膏,再将总浸膏溶于水,依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,得到石油醚相、乙酸乙酯相和正丁醇相.将三相的有机物分别用薄层色谱展开,在紫外灯下观察254 nm和365 nm荧光颜色和强度,同时用硫酸、氯化铁显色,表明各相均含有黄酮.以淫羊藿苷为标品,通过作标准曲线结合紫外光谱对其各相的异戊烯基黄酮含量进行平行测定,同时考察了方法的重复性和样品的稳定性. 展开更多
关键词 淫羊藿 异戊烯基黄酮 含量测定 综合实验
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新麦草异戊烯基转移酶PjIPT基因的功能验证
4
作者 任晓敏 云岚 +1 位作者 艾芊 赵乔 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期207-215,共9页
【目的】异戊烯基转移酶(isopentenyl transferases,IPT)参与反式玉米素(trans-zeatin,tZ)的生物合成。tZ是调节植物生长发育和抵抗逆境胁迫的一种细胞分裂素类型,在促进芽生长和调控植物侧枝发育方面具有重要作用。探索IPT的功能,为后... 【目的】异戊烯基转移酶(isopentenyl transferases,IPT)参与反式玉米素(trans-zeatin,tZ)的生物合成。tZ是调节植物生长发育和抵抗逆境胁迫的一种细胞分裂素类型,在促进芽生长和调控植物侧枝发育方面具有重要作用。探索IPT的功能,为后续新麦草产量性状改良提供了理论依据。【方法】通过对新麦草IPT进行系统发育和多序列比对,探究其编码氨基酸序列的特征和同源性。通过花粉管通道法获得过表达PjIPT拟南芥(Arabidopsis thaliana)植株,并运用逆转录PCR(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot,WB)对转基因植株进行验证,利用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)对其组织表达模式进行分析,使用液质联用系统测定反式玉米素。【结果】IPT在新麦草(Psathyrostachys juncea)和二粒小麦(Triticum dicoccoides)等麦类作物中具有高度同源性,且AtIPT9是PjIPT的同源蛋白。通过花粉管通道法获得过表达PjIPT拟南芥(Arabidopsis thaliana)植株,证明PjIPT上调植株分枝数。RT-PCR和蛋白质印迹分析显示,PjIPT在转录水平和蛋白水平均能够正常表达。利用不同部位组织RT-qPCR分析PjIPT的空间特异性表达,结果显示,PjIPT在拟南芥的分蘖节和叶中特异性表达。此外,反式玉米素的定量分析表明PjIPT通过参与tZ的生物合成去调控拟南芥植株分枝数。【结论】PjIPT是上调植株分枝数的关键基因。 展开更多
关键词 新麦草 异戊烯基转移酶 反式玉米素 分蘖 功能验证
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Genome-wide identification and characterization of the IPT family members in nine Rosaceae species and a functional analysis of MdIPT5b in cold resistance
5
作者 Yi Feng Jiahong Lv +9 位作者 Mengqun Peng Jie Li Yue Wu Min Gao Xinyi Wu Yi Wang Ting Wu Xinzhong Zhang Xuefeng Xu Zhenhai Han 《Horticultural Plant Journal》 SCIE CAS CSCD 2023年第4期616-630,共15页
Cytokinins are members of a group of phytohormones involved in various growth and developmental processes in plants.Isopentenyl transferase(IPT)is the rate-limiting enzyme in catalyzing the biosynthesis of cytokinins.... Cytokinins are members of a group of phytohormones involved in various growth and developmental processes in plants.Isopentenyl transferase(IPT)is the rate-limiting enzyme in catalyzing the biosynthesis of cytokinins.In this study,to understand the role of IPT family in cold resistance,78 IPT candidates were identified and characterized in nine Rosaceae genomes.The expansion of IPT families in the Rosaceae primarily occurred through segmental duplication rather than tandem duplication.In general,purifying selection controlled the evolution of IPT families in the Rosaceae,with IPT3 and IPT5 homologs as the primary drivers of evolution.Cis-elements,which are involved in the responses to many environmental stresses or phytohormone signals,were identified in the promoters of MdIPT members.This was consistent with the trends of expression of the MdIPT genes in apple(Malus domestica)calli.MdIPT5b was also found to exhibit multiple responses to phytohormones and stress signals.The ectopic expression of MdIPT5b resulted in an increase in cold resistance in transformed apple calli and tomato(Solanum lycopersicum)plantlets.The redox balance was partially stabilized through the accumulation of proline under cold stress.However,the ascorbate–glutathione cycle cannot be stabilized in the cold.All physiological and biochemical assays are preformed in spectrophotometer.These results showed that regulating the expression of IPT genes for moderate cytokinin improvement could enhance the accumulation of proline to stabilize the osmotic and redox balances to improve resistance to cold stress. 展开更多
关键词 ROSACEAE Apple isopentenyl transferase CYTOKININ Cold stress Bioinformatics
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天然产物8-异戊烯基-7,3′,4′-三羟基黄烷酮的全合成研究
6
作者 赵艳敏 李红俊 《合成化学》 CAS 2023年第7期550-553,共4页
8-异戊烯基-7,3′,4′-三羟基黄烷酮是一种新分离的天然产物,但在植物中含量低且分离困难,因此以廉价的2,4-二羟基苯乙酮和3,4-二羟基苯甲醛为原料,经过C-异戊烯基化、酚羟基保护、羟醛缩合、环化和去保护基等步骤,以21%的总收率第一次... 8-异戊烯基-7,3′,4′-三羟基黄烷酮是一种新分离的天然产物,但在植物中含量低且分离困难,因此以廉价的2,4-二羟基苯乙酮和3,4-二羟基苯甲醛为原料,经过C-异戊烯基化、酚羟基保护、羟醛缩合、环化和去保护基等步骤,以21%的总收率第一次全合成了天然产物8-异戊烯基-7,3′,4′-三羟基黄烷酮。所有新化合物的结构都经过^(1)H NMR、IR和HR-MS确认。 展开更多
关键词 天然产物 黄烷酮 异戊烯基黄烷酮 异戊烯基化 全合成
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保坍型聚羧酸减水剂的合成及性能研究 被引量:2
7
作者 吕晶 李修固 +2 位作者 屈国良 王立艳 王欢 《化工技术与开发》 CAS 2023年第7期7-11,36,共6页
以异戊烯基聚氧乙烯醚、丙烯酸、丙烯酸羟乙酯为单体,在氧化还原引发体系中,通过自由基共聚,合成了一种性能优良的高保坍型聚羧酸减水剂。研究了酸醚比、酯醚比、合成温度和加料方式对减水剂分散性能的影响,并分析了微观结构。研究结果... 以异戊烯基聚氧乙烯醚、丙烯酸、丙烯酸羟乙酯为单体,在氧化还原引发体系中,通过自由基共聚,合成了一种性能优良的高保坍型聚羧酸减水剂。研究了酸醚比、酯醚比、合成温度和加料方式对减水剂分散性能的影响,并分析了微观结构。研究结果表明,在水灰比为0.29,折固掺量为0.2%时,3h内合成的减水剂的水泥净浆流动度能保持稳定不变。混凝土实验结果表明,掺入减水剂的新拌混凝土的和易性优良,在3h内具有良好的保坍效果。 展开更多
关键词 聚羧酸减水剂 异戊烯基聚氧乙烯醚 丙烯酸羟乙酯 保坍型
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基于异戊烯基焦磷酸异构酶的改造及表达优化提高异戊二烯产量
8
作者 孙瓅 刘春立 +3 位作者 刘秀霞 李业 杨艳坤 白仲虎 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第21期1-8,共8页
异戊二烯是最简单的萜烯类化合物,是橡胶、食品、医药和化妆品工业的重要原料。在微生物中构建甲羟戊酸(mevalonate,MVA)代谢途径是目前生产异戊二烯及其衍生萜烯的有效途径,但关键酶的活性和表达水平会限制异戊二烯的合成。针对关键酶... 异戊二烯是最简单的萜烯类化合物,是橡胶、食品、医药和化妆品工业的重要原料。在微生物中构建甲羟戊酸(mevalonate,MVA)代谢途径是目前生产异戊二烯及其衍生萜烯的有效途径,但关键酶的活性和表达水平会限制异戊二烯的合成。针对关键酶-异戊烯基焦磷酸异构酶(isopentenyl diphosphate isomerase,IDI)的活性低等问题,该研究从酶工程、启动子工程和核糖体结合位点(ribosome binding site,RBS)工程3个方面对IDI的表达进行了优化。首先在大肠杆菌中建立了异戊二烯生产体系,挑选肺炎链球菌来源的IDI进行蛋白质建模和结构分析,计算得到了活性热点Met146并对其进行点突变。经过改造得到1株突变体Met146His,其将异戊二烯的产量提升至820.46 mg/L。接着针对该突变株进行启动子优化和RBS优化,最终得到的优化菌株将异戊二烯的产量提升至862.79 mg/L,是出发菌株的2.58倍。结果证明,对于IDI进行酶分子改造和表达优化以提高酶活性并调控表达水平,是提高异戊二烯产量的有效策略。IDI的优化也可以应用于异戊二烯的下游产物,如倍半萜和二萜等的生物合成。 展开更多
关键词 异戊烯基焦磷酸异构酶 理性设计 启动子优化 核糖体结合位点优化 异戊二烯
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植物中异戊烯基取代的酚类化合物及其分布
9
作者 王圆月 落艳娇 +2 位作者 张译心 申国安 郭宝林 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1604-1620,共17页
异戊烯基取代的酚类化合物由UbiA家族的异戊烯基转移酶(prenyltransferase)催化异戊烯基转移到芳香族化合物母核上,其亲脂性较无异戊烯基取代的化合物明显增强,并提高了与生物膜的亲和力,从而形成了各种具有重要生物学功能的活性分子,... 异戊烯基取代的酚类化合物由UbiA家族的异戊烯基转移酶(prenyltransferase)催化异戊烯基转移到芳香族化合物母核上,其亲脂性较无异戊烯基取代的化合物明显增强,并提高了与生物膜的亲和力,从而形成了各种具有重要生物学功能的活性分子,在植物防御和人体健康方面具有重要作用。本综述总结了538种异戊烯基酚类化合物的取代基类别和取代位点等,为发掘植物中新型异戊烯基转移酶,以及受体和供体的选择提供参考,以期有更多异戊烯基转移酶可应用于合成生物学来生产具有重要活性的异戊烯基酚类化合物。该文对国内外报道的378种类黄酮,80种香豆素类,27种醌类,32种二苯乙烯类,16种对羟基苯甲酸类,5种苯丙酸类共计538种异戊烯基取代的酚类化合物的取代基类别、取代位置以及在植物中的分布进行总结,发现异戊烯基酚类化合物主要分布在28个科中,且以C5和C10取代基为主。该文还综述了已鉴定功能的30余种植物芳香族异戊烯基转移酶。 展开更多
关键词 异戊烯基 酚类化合物 异戊烯基转移酶
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基于多指标定量指纹图谱和化学计量学的淫羊藿质量标准提高研究 被引量:1
10
作者 孙礼堂 刘明川 +3 位作者 曹健 宋彤彤 Jennifer Alfrey 李敏杰 《化学试剂》 CAS 北大核心 2023年第11期117-125,共9页
进一步完善淫羊藿质量评价体系,提高淫羊藿质量标准。以6种8-异戊烯基黄酮苷作为指标成分,通过HPLC对4个品种、共24批次淫羊藿开展多指标定量指纹图谱的研究,并结合聚类分析(Hierarchical Clustering Analysis,HCA)、主成分分析(Princip... 进一步完善淫羊藿质量评价体系,提高淫羊藿质量标准。以6种8-异戊烯基黄酮苷作为指标成分,通过HPLC对4个品种、共24批次淫羊藿开展多指标定量指纹图谱的研究,并结合聚类分析(Hierarchical Clustering Analysis,HCA)、主成分分析(Principal Component Analysis,PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(Orthogonal Partial Least Squares Discriminant Analysis,OPLS-DA)化学计量学方法进行质量评价。4个品种淫羊藿在相似度、指标成分含量上差异较大。发现朝藿定C、淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ和宝藿苷Ⅰ是造成不同品种淫羊藿差异的特征性成分,淫羊藿次苷Ⅰ和宝藿苷Ⅰ可作为药材质量控制指标成分。建立的多指标定量指纹图谱分析方法稳定、可靠,结合化学计量学可更加全面、快速对淫羊藿进行质量评价,为今后提高淫羊藿的质量标准提供了科学依据。 展开更多
关键词 淫羊藿 多指标定量指纹图谱 8-异戊烯基黄酮苷 化学计量学 质量标准提高
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异戊烯基转移酶基因导入番茄及转基因植株再生 被引量:19
11
作者 张赛群 叶志彪 +1 位作者 吴昌银 张启发 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期376-379,共4页
通过根癌农杆菌( Agrobacterium tumefaciens) 介导, 利用特异启动子PSAG12 与异戊烯基转移酶(Isopentenyltransferase,ipt) 基因构建的嵌合基因PSAG12ipt 对5 个番茄品种进行遗传转化, 结果共获得来自31 个不同外植体的44 株转化再... 通过根癌农杆菌( Agrobacterium tumefaciens) 介导, 利用特异启动子PSAG12 与异戊烯基转移酶(Isopentenyltransferase,ipt) 基因构建的嵌合基因PSAG12ipt 对5 个番茄品种进行遗传转化, 结果共获得来自31 个不同外植体的44 株转化再生植株。感染子叶的分化再生及转化植株田间生长正常。对其中部分转化再生植株进行PCR 检测证明为转基因植株, 并且在田间表现出生长旺盛及抗叶片衰老的特性。 展开更多
关键词 番茄 异戊烯基转移酶 遗传转化 基因导入
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不同磷酸化合物扩增外周血γδ T细胞的效率及条件优化 被引量:13
12
作者 习燕 苗天雨 +4 位作者 万浬科 王元虎 冯婷 巩天祥 李明远 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期868-871,共4页
目的研究异戊烯焦磷酸(IPP)与帕米磷酸钠(PAM)体外扩增成人外周血γδT细胞的效率及条件优化。方法梯度离心法分离人外周血单个核细胞(PBMC),分别加入(1.0、5.0、10.0、15.0)μg/mL IPP或(2.0、5.0、8.0、12.0)μg/mL PAM及(100.0、200.... 目的研究异戊烯焦磷酸(IPP)与帕米磷酸钠(PAM)体外扩增成人外周血γδT细胞的效率及条件优化。方法梯度离心法分离人外周血单个核细胞(PBMC),分别加入(1.0、5.0、10.0、15.0)μg/mL IPP或(2.0、5.0、8.0、12.0)μg/mL PAM及(100.0、200.0、500.0)IU/mL IL-2,置于100 mL/L小牛血清的RPMI1640培养体系培养,观察并收集细胞,采用流式细胞仪检测刺激后CD3+TCRδ2+的γδT细胞数量以及比例,并计算其扩增效率。结果经过14 d扩增培养后,IPP组的γδT细胞数量在淋巴细胞中比例可上升为81.3%,PAM组的γδT细胞数量在淋巴细胞中比例上升为78.5%,表明IPP和PAM均能有效刺激扩增γδT细胞,2组的扩增效率无统计学差异(P>0.05)。结论 PAM具有与IPP相似的体外扩增γδT细胞的能力,PAM扩增法可能成为扩增γδT细胞更为经济实用的选择。 展开更多
关键词 ΓΔT细胞 异戊烯焦磷酸 帕米磷酸钠 体外扩增
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转基因抗早衰棉的获得 被引量:10
13
作者 李静 沈法富 +1 位作者 于东海 韩秀兰 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第8期1419-1423,共5页
利用花粉管通道技术将含有抑制衰老嵌合基因PCSAG12-ipt的pBG121质粒转入早衰型陆地棉品种中棉所10号中,通过对T1代植株进行卡那霉素田间筛选、PCR检测及GUS组织化学染色,获得了12株转基因棉花.在棉花发育进入衰老时期,对转基因植株进... 利用花粉管通道技术将含有抑制衰老嵌合基因PCSAG12-ipt的pBG121质粒转入早衰型陆地棉品种中棉所10号中,通过对T1代植株进行卡那霉素田间筛选、PCR检测及GUS组织化学染色,获得了12株转基因棉花.在棉花发育进入衰老时期,对转基因植株进行叶绿素和细胞分裂素含量的测定及形态观察,结果表明转基因植株的衰老得到延迟. 展开更多
关键词 棉花 花粉管通道法 异戊烯基转移酶 抗早衰
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茶树CsIDI1和CsIDI2基因的克隆及其表达分析 被引量:6
14
作者 陈丹 王鹏杰 +5 位作者 陈笛 王赞 岳川 孙云 陈桂信 叶乃兴 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期800-807,共8页
该研究在茶树转录组测序基础上,以铁观音品种茶树为材料,采用RT-PCR技术,克隆了茶树异戊烯基焦磷酸异构酶(IDI)的2个编码基因(CsIDI1和CsIDI2)的cDNA全长序列。CsIDI1的全长为1 378bp,其开放阅读框(ORF)长度894bp,编码297个氨基酸,亚细... 该研究在茶树转录组测序基础上,以铁观音品种茶树为材料,采用RT-PCR技术,克隆了茶树异戊烯基焦磷酸异构酶(IDI)的2个编码基因(CsIDI1和CsIDI2)的cDNA全长序列。CsIDI1的全长为1 378bp,其开放阅读框(ORF)长度894bp,编码297个氨基酸,亚细胞定位预测位于叶绿体上,其氨基酸序列与葡萄IDI的相似性达95%;CsIDI2的全长为1 216bp,其ORF长度为717bp,编码238个氨基酸,亚细胞定位预测位于细胞质上,其氨基酸序列与芝麻IDI相似性达96%。CsIDI1和CsIDI2均含有典型的NUDIX水解酶域。荧光定量PCR结果表明,CsIDI1和CsIDI2基因在茶树地上部不同组织都有表达,但CsIDI2的表达量相对较高;品种间表达量分析显示,它们在父本黄旦品种及杂交后代高香型乌龙茶品种中的表达量显著高于母本铁观音品种,表现出香气上的杂种优势;在乌龙茶做青过程中,随着摇青的进行,CsIDI2的表达被显著诱导,表明CsIDIs在茶叶萜类香气物质形成中发挥重要功能。 展开更多
关键词 茶树 异戊烯基焦磷酸异构酶 茶叶香气 表达分析 乌龙茶
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NdCl_3对油菜离体子叶生长和iPA水平的影响 被引量:11
15
作者 陈靠山 张举仁 +1 位作者 彭正华 周燮 《中国稀土学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期379-381,共3页
140μmol/LNdCl3可明显促进油菜黄化子叶在光照培养期间鲜重,叶绿素和蛋白质含量的增加,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定异戊烯基类(iPA)细胞分裂素的含量表明,经NdCl3处理后,子叶中iPA在12h后开... 140μmol/LNdCl3可明显促进油菜黄化子叶在光照培养期间鲜重,叶绿素和蛋白质含量的增加,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定异戊烯基类(iPA)细胞分裂素的含量表明,经NdCl3处理后,子叶中iPA在12h后开始增加,24h时后已达14776pmol/g·FW,是对照的2倍,iPA的含量在48h后才显著下降。 展开更多
关键词 氯化钕 油菜 异戊烯基嘌呤 植物生长调节剂
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磷甘霉素和洛伐它汀处理对中国红豆杉悬浮培养细胞生物合成紫杉醇的影响 被引量:10
16
作者 刘智 余龙江 +1 位作者 李春艳 赵春芳 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期199-204,共6页
采用非甲羟戊酸途径抑制剂磷甘霉素和甲羟戊酸途径抑制剂洛伐它汀对中国红豆杉悬浮细胞培养物进行处理。在添加和未添加茉莉酸甲酯诱导的情况下,前者使紫杉醇产量减少了2/5和1/5,后者使紫杉醇产量减少了1/6和1/10,表明两种途径对紫杉醇... 采用非甲羟戊酸途径抑制剂磷甘霉素和甲羟戊酸途径抑制剂洛伐它汀对中国红豆杉悬浮细胞培养物进行处理。在添加和未添加茉莉酸甲酯诱导的情况下,前者使紫杉醇产量减少了2/5和1/5,后者使紫杉醇产量减少了1/6和1/10,表明两种途径对紫杉醇的生物合成都具有贡献,其中非甲羟戊酸途径贡献较大;通过定量PCR技术分别检测两条途径的关键酶5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(DXR)和3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)mRNA水平的变化,发现两种抑制剂都能够激活hmgr和dxr的转录,表明两种代谢途径之间存在协同作用,共同为紫杉醇的生物合成提供前体。 展开更多
关键词 中国红豆杉(Taxus chinensis) 甲羟戊酸途径 非甲羟戊酸途径 异戊烯焦磷酸(IPP) 紫杉醇 定量PCR
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大肠杆菌组合生物合成紫杉烯的研究 被引量:6
17
作者 王伟 孔建强 +2 位作者 孟超 朱平 程克棣 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第18期1428-1431,共4页
目的在大肠杆菌中建立一个能够生物合成紫杉烯(紫杉醇生物合成的第一个重要中间体)的代谢途径。方法利用PCR方法克隆编码大肠杆菌1-脱氧-5-磷酸木酮糖(D-1-deoxyxylulose 5-phosphate,DXP)合酶和异戊烯二磷酸异构酶(isopentenyl diphosp... 目的在大肠杆菌中建立一个能够生物合成紫杉烯(紫杉醇生物合成的第一个重要中间体)的代谢途径。方法利用PCR方法克隆编码大肠杆菌1-脱氧-5-磷酸木酮糖(D-1-deoxyxylulose 5-phosphate,DXP)合酶和异戊烯二磷酸异构酶(isopentenyl diphosphate isomerase,IDI)的基因,以及编码辣椒(Capsicum annuum)牻牛儿基牻牛儿基二磷酸(geranylgeranyl diphosphate,GGDP) 合酶的基因。分别构建含DXP合酶基因的表达载体pSLB208/DXP和含GGDP合酶与IDI异构酶基因的融合表达载体pAIG。将含紫杉烯合酶的表达载体pETB3和本研究构建的这2个表达栽体共转化大肠杆菌,诱导4个基因在大肠杆菌中共表达;并通过GC-MS分析大肠杆菌工程菌的代谢产物。结果在大肠杆菌中构建了一个合成紫杉烯的途径,通过GC-MS分析检测到紫杉烯的合成。结论利用代谢途径工程合成紫杉醇中间体是可行的,可为其他萜类化合物中间体代谢工程研究提供坚实的物质基础。 展开更多
关键词 DXP合酶 IDI异构酶 GGDP合酶 紫杉烯合酶 紫杉烯
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根癌农杆菌对感染植原体的泡桐组培苗症状的影响 被引量:6
18
作者 田国忠 朱水芳 +2 位作者 罗飞 李怀方 裘维蕃 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2001年第3期258-264,共7页
采用含有激素合成相关基因的根癌农杆菌 ,伤口接种已感染植原体的泡桐丛枝组培苗和健康组培苗 ,结果发现对丛枝苗的致瘤能力明显低于健康对照苗 ,且被接种病苗的丛枝症状缓解。从健苗获得的 T- DNA转化泡桐瘤组织细胞能在无激素培养基... 采用含有激素合成相关基因的根癌农杆菌 ,伤口接种已感染植原体的泡桐丛枝组培苗和健康组培苗 ,结果发现对丛枝苗的致瘤能力明显低于健康对照苗 ,且被接种病苗的丛枝症状缓解。从健苗获得的 T- DNA转化泡桐瘤组织细胞能在无激素培养基上稳定生长和连续继代培养 2年以上 ,说明瘤组织细胞自身已获得了细胞分裂素和生长素合成能力。根据已报道的根癌农杆菌株系p Til5955T- DNA的异戊烯基转移酶基因 ( ipt)的保守序列 ,设计了一对引物 ( CYT和 CYT′) ,用多聚酶链式反应 ( PCR)扩增了我国杨树致瘤农杆菌 ipt基因部分序列 ( 4 2 7bp片段 ) ,也从遗传转化的两个泡桐无性系瘤组织 At- ZH和 At- T35扩增出此特异片段 ,从而进一步肯定了 T- DNA已被整合到泡桐的染色体上 ,表明泡桐易于通过 Ti质粒载体途径进行基因转移操作 ,但用此引物未能从泡桐、甘薯健株和感染植原体的组培病苗扩增出相应的 4 2 7bp特异片段。当用此遗传转化瘤组织嫁接病苗时 ,可减轻丛枝症状的严重度 ,延长病苗的存活时间和诱导病株生根 。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 泡桐丛枝病植原体 病害症状 异戊烯基转移酶基因 组培苗 PCR
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大豆异戊烯焦磷酸异构酶基因的电子克隆及生物信息学分析 被引量:6
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作者 魏琦超 畅丽萍 +1 位作者 薛晓锋 周岩 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期96-100,共5页
利用电子克隆方法获得大豆异戊烯焦磷酸异构酶基因(IPI)的cDNA序列,并采用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的一般理化性质、疏水性、信号肽、二级结构和亚细胞定位等方面进行了预测和分析。结果表明,大豆异戊烯焦磷酸异构酶基因的c... 利用电子克隆方法获得大豆异戊烯焦磷酸异构酶基因(IPI)的cDNA序列,并采用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的一般理化性质、疏水性、信号肽、二级结构和亚细胞定位等方面进行了预测和分析。结果表明,大豆异戊烯焦磷酸异构酶基因的cDNA序列全长1384bp,包含一个906bp的ORF,编码301个氨基酸。大豆IPI酶为一亲水性的非分泌蛋白,α-螺旋和无规则卷曲是其主要的二级结构,该酶定位于叶绿体。 展开更多
关键词 大豆 异戊烯焦磷酸异构酶 电子克隆 生物信息学分析
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金花茶异戊烯焦磷酸异构酶基因全长cDNA的克隆与生物信息学分析 被引量:4
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作者 王辉 叶晓霞 +2 位作者 朱宇林 项文化 周兴文 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期75-79,共5页
为深入研究金花茶花瓣类胡萝卜素合成的分子机理,在成功提取金花茶花瓣总RNA的基础上,利用同源克隆和RACE技术克隆得到了异戊烯焦磷酸异构酶基因的cDNA序列全长,命名为CnIPI。碱基序列分析表明:CnIPI基因全长916bp,包含有一个长度为747b... 为深入研究金花茶花瓣类胡萝卜素合成的分子机理,在成功提取金花茶花瓣总RNA的基础上,利用同源克隆和RACE技术克隆得到了异戊烯焦磷酸异构酶基因的cDNA序列全长,命名为CnIPI。碱基序列分析表明:CnIPI基因全长916bp,包含有一个长度为747bp编码248个氨基酸的开发阅读框。生物信息学分析表明:该基因编码的CnIPI蛋白质分子量为27.97kD,为稳定亲水性蛋白,无信号肽;CnIPI蛋白的二级结构以无规则卷曲为主,β-折叠所占比例最少;CnIPI蛋白含有一个典型的异戊烯焦磷酸异构酶结构域。氨基酸序列同源性分析结果表明:CnIPI蛋白与茶、月季、杜鹃等植物IPI蛋白的同源性高于86%。CnIPI基因的克隆使全面理解金花茶花瓣类胡萝卜素合成的分子途径取得了新的突破,为进一步深入研究CnIPI基因的功能及金花茶花瓣类胡萝卜素合成的分子机理奠定了良好的理论基础。 展开更多
关键词 金花茶 异戊烯焦磷酸异构酶 基因克隆 序列分析
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