枯草芽孢杆菌S44抑菌化合物合成关键基因ituD的功能分析

【目的】通过对突变体及相关基因表达分析来研究ituD基因在菌株S44中的功能。【方法】采用qRT-PCR分析ituD的表达量,通过盆栽实验分析菌株对棉苗生长、病害防治、发病率的影响;测定土壤中菌含量,采用HPLC对土壤中的iturin A进行检测。【结果】qRT-PCR结果表明,S1株的ituD基因几乎没有表达,其抑菌活性丧失。在盆栽实验中,S44-A菌株能在土壤中定殖,14 d后在土壤中检测到iturin A;与S44-A相比S1存活量较少,并且在14 d后未检测到iturin A。【结论】ituD基因是S44菌株抑菌活性、植物根际定殖与调控的关键因子。

枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因敲除突变株的构建

利用同源重组基因敲除方法构建了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S44 ituD基因同源突变株。菌落PCR、RT-PCR、SDS-PAGE结果均显示ituD基因缺失突变株构建成功。野生株与突变株的菌落形态、生长速率以及抑菌活性均有显著差异。抑菌活性试验结果显示,突变株抑菌活性显著减弱,成功构建的ituD基因突变株为进一步研究ituD基因的生物学功能奠定了基础。