沉默SOCS1共表达HMGB1及肿瘤相关抗原质粒构建

目的:构建沉默细胞因子信号抑制因子1(SOCS1)并共表达高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及肿瘤相关抗原的质粒。方法:首先PCR扩增带有胰岛素信号肽序列的IRES片段和带有胰岛素信号肽序列的HMGB1片段,PCR拼接后取代IRES及EGFP片段装入pIRES-EGFP载体中构建pIRES/sig-HMGB1质粒。然后PCR扩增带有NY-ESO-1编码序列及MAGE3(表位)编码序列亚克隆入pIRES/sig-HMGB1中后以此为模板扩增CMV+NY-ESO-1-MAGE3(表位)-IRES+胰岛素信号肽-HMGB1片段。最后合成针对SOCS1的shRNA序列并连接入pENTR/U6载体,扩增U6-shSOCS1片段与CMV+NY-ESO-1-MAGE3(表位)-IRES+胰岛素信号肽-HMGB1片段连接后装入pIRES-EGFP中,完成p/shS1-NY-IRES-sig-HMGB1质粒的构建并测序,酶切和PCR验证质粒。结果:经测序证实所构建质粒序列与预期序列一致,酶切和PCR验证质粒结构正确。结论:成功构建可用于修饰DC疫苗的p/shS1-NY-IRES-sig-HMGB1质粒,为构建新型DC疫苗奠定了基础。

水芹的本草考证

目的 通过对水芹的本草学研究 ,考证其基源及药用品种。方法 查阅有关历代文献 ,实地考察和应用现代科学技术对水芹的化学成分和药理作用等进行研究。结果 表明历代本草文献中所记载水芹的生长特征及其功能主治与现代研究结果基本一致。结论 水芹基源仅伞形科水芹属植物水芹 Oenanthe javanica (B1.) DC.

野生水芹黄酮类物质的提取工艺

采用水浴回流提取法,研究了不同提取剂、提取剂浓度、固液比、提取时间和提取温度对新鲜野生水芹(Oenanthejavanica(Bl.)DC.)中黄酮类物质提取率的影响规律。经正交试验,得到野生水芹黄酮类物质提取工艺的最佳参数为:用90%乙醇于80℃水浴回流提取6h,其中野生水芹叶片料液比为1g∶10mL,叶柄料液比为1g∶5mL。叶片提取率可达2.643mg/g,叶柄提取率可达0.586mg/g。

水芹花芽分化的形态解剖学研究

采用实体解剖和石蜡连续切片的方法对水芹花芽分化过程进行了形态学观察研究。研究结果表明,水芹花芽分化从3月中旬开始,至7月初结束,依次分为苞叶及花穗总轴原基分化期、总苞与花穗轴原基分化形成期、小总苞及花梗原基分化形成期、花被原基分化形成期、雄雌蕊原基分化形成期、花粉和胚珠形成期6个阶段。

两面针中的两个新生物碱

目的研究两面针Zanthoxylumnitidum的化学成分。方法采用正反相硅胶柱色谱法进行分离纯化,利用MS、UV、IR、NMR等波谱数据及理化性质鉴定化合物的结构。结果分离得到2个新苯并啡啶类生物碱,分别鉴定为1,3-二(8-双氢两面针碱)丙酮[1,3-bis(8-dihydronitidinyl)-acetone,1]和8-丙酮基双氢崖椒定碱(8-aceto-nyldihydrofagaridine,2)。结论化合物1和2均为未见报道的新化合物,分别命名为两面针酮A(nitidumtone A,1)和两面针酮B(nitidumtone B,2)。

HBeAg对健康人单核细胞来源树突状细胞表面TLR2和PD-L1表达水平的影响

目的:观察乙型肝炎e抗原(HBeAg)对健康人单核细胞来源的树突状细胞(Dendritic cells,DCs)表面Toll样受体2(TLR 2)和程序性死亡配体-1(PD-L1)表达的影响,进一步探讨乙肝病毒感染慢性化过程中HBeAg的作用机制。方法:利用Ficoll分离法分离健康人外周血单个核细胞,经重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素4(rhIL-4)诱导培养树突状细胞,将第7天的细胞分成三组,分别为HBeAg刺激组、OVA无关蛋白对照组和未刺激组,经流式细胞仪检测CD11c+细胞表面TLR 2以及PD-L1的表达水平。结果:健康人单核细胞来源的树突状细胞经过HBeAg刺激9 h后,CD11c+细胞表面TLR 2的表达水平较未刺激组以及OVA无关蛋白对照组明显下降(P<0.01),同时可见CD11c+细胞表面PD-L1表达水平显著增加(P<0.01)。结论:HBeAg可以下调DCs表面TLR 2受体的表达,并上调其表面负性调节因子PD-L1的表达。HBV可通过HBeAg作用于抗原递呈细胞相关表面受体,从而影响了其正常功能,并最终影响免疫系统对病毒的清除作用,导致乙肝病毒感染的慢性化。

滇桂艾纳香超临界萃取物成分分析及在卷烟中的应用

对滇桂艾纳香进行超临界CO2萃取,并对萃取物进行GC/MS分析和卷烟加香试验。结果表明:艾纳香超临界萃取物中共鉴定出52种成分,主要有芳樟醇、L-龙脑、3,9-杜松二烯、香树素-2-氧化物、δ-古芸烯、丁子香酚、α-石竹烯、香橙烯、愈创木醇、香芹酮、桉叶油醇、十六酸等;滇桂艾纳香超临界萃取物具有突显云南卷烟清香特征和细腻柔和烟气之功效。

大叶铁线莲乙醇提取物正丁醇部位的化学成分研究

目的研究大叶铁线莲Clematis heracleifolia全草的化学成分。方法利用硅胶、Sephadex LH-20凝胶、ODS反相柱色谱和半制备高效液相色谱等分离方法进行分离纯化,结合核磁共振、质谱等波谱学技术鉴定其化学结构。结果从大叶铁线莲全草75%乙醇提取物的正丁醇萃取部位分离鉴定了10个化合物,包括三萜皂苷6个、黄酮苷1个、木栓烷型三萜2个和植物甾醇1个,分别为3,23-二羟基-齐墩果-18-烯-28-酸-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、刺楸皂苷B(2)、粗齿铁线莲皂苷B(3)、刺五加苷A1(4)、皂苷PJ3(5)、异株五加苷B(6)、金丝桃苷(7)、木栓酮(8)、表木栓醇(9)和β-谷甾醇(10)。结论化合物1是新化合物,命名为大叶铁线莲皂苷D;化合物2~9均为首次从大叶铁线莲中分离得到。