低氧预处理对大鼠海马神经元缺氧耐受性和Jun基因表达的影响

目的 :观察低氧预处理对缺氧 复氧后大鼠海马神经元Jun表达的影响。方法 :取培养 12d的两组 (对照组和低氧预处理组 )神经元 ,同时置于缺氧环境 (0 .90L LN2 +0 .10L LCO2 )中培养 4h后取出 ,置含 0 .10L LCO2 和空气的培养箱内复氧培养 2 4h和 72h ,于不同时间取出 ,观察神经元存活数 ,并用抗Jun抗血清进行免疫组织化学染色 ,观察Jun表达阳性和阴性神经元数目 ,计算Jun表达神经元所占百分率。结果 :经低氧预处理的海马神经元缺氧 复氧后Jun表达阳性神经元百分率较对照组明显减少 ,神经元存活数明显高于对照组。结论 :低氧预处理可使海马培养神经元对缺氧产生耐受 ,减少缺氧 复氧后神经元Jun的表达。

血瘀证患者白细胞中c-fos、c-jun基因的表达

目的 :进一步探索血瘀证的微观机制 ,从基因水平探讨血瘀证微观实质。方法 :以病证结合方式 ,选取16 0例高血压病和 2型糖尿病血瘀证和非血瘀证患者 ,用血液生化指标和相关实验技术 ,进行c fos基因、c jun基因表达的观察、对比、分析 ,并以健康人为对照 ,从基因水平探索血瘀证形成的微观机制和演变规律。结果 :通过对与血瘀证密切相关的微观指标进行观察和分析 ,发现血瘀证患者存在c fos、c jun基因的异常表达 ,其指标异常与基因表达水平的高低与血瘀证各型之间存在密切关系。结论 :认为基因组学是血瘀证实质研究的最佳切入点 ,血瘀证现代研究应积极引进微观辨证学和基因科学的最新成果 。

c-Jun基因RNA干扰对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的以RNA干扰抑制血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)的c-Jun基因表达,探讨其表达抑制后VSMCs增殖的变化。方法设对照组(VSMCs不作处理)、阴性si RNA组(VSMCs转染无关序列的si RNA)及c-Jun si RNA组(VSMCs转染c-Jun si RNA)。应用RT-PCR半定量法检测VSMCs中c-Jun的mRNA水平,Western blot法检测VSMCs中c-Jun的蛋白水平,应用MTT比色法及3H-TdR掺入法检测VSMCs的增殖情况,流式细胞仪检测VSMCs的细胞周期变化。结果c-Jun si RNA组的c-Jun mRNA及蛋白表达水平均较对照组明显降低(P<0.05,P<0.01),而阴性si RNA组与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。c-Jun si RNA组VSMCs的增殖活性较对照组明显降低(P<0.05),细胞周期出现明显的G0/G1期阻滞;而阴性si RNA组与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论RNA干扰介导的c-Jun基因沉默可显著抑制VSMCs的体外增殖。

肿瘤坏死因子引起的内皮细胞损伤与C－jun基因表达的变化

肿瘤坏死因子引起的内皮细胞损伤与Ｃ－ｊｕｎ基因表达的变化ＤａｍａｇｅｏｆＥｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＣｅｌｌｓＩｎｄｕｃｅｄｂｙＴＮＦａｎｄＣｈａｎｇｅｏｆｃ－ｊｕｎＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎ￥／／文／金惠铭，沙志一微血管壁通透性升高是创伤、感染、休克等...

面神经切断对神经元存活和c-jun基因表达的影响

目的 研究面神经损伤后 c- jun基因表达的动态及其与神经元存活率的关系。 方法 选用 84只雄性 SD大鼠 ,分别行面神经高位切断和低位切断 ,于损伤后不同时间观察面神经运动神经元存活率及 c- jun的表达情况。 结果 低位切断组术后 12 h有较多面神经元 c- jun表达 ,并在术后 6 0 d内一直维持高水平。高位切断组 1d后有较多神经元 c- jun表达 ,且无论是表达数量或高表达维持时间均显著低于同时段低位切断组。高位切断组术后 3d面神经元存活率明显降低。以神经元存活率为指标进行比较 ,各观察时段面神经低位切断组的神经元存活率也显著高于面神经高位切断组。 结论 面神经损伤部位离胞体越远 ,神经元 c- jun表达越强 。

颈7神经根切断后大鼠不同颈脊髓节段内c-fos和c-jun基因的表达

神经根型颈椎病是骨科和麻醉除痛门诊常见的疾患，通过临床资料发现神经根型颈椎病所导致的感觉运动障碍不局限于病变的神经根支配区，为手术及除痛治疗定位带来困难。我们切断大鼠颈7神经根，于不同时间点观察不同节段颈脊髓内c-fos和c-jun基因表达，推断颈脊髓之间可能存在着神经通路联系。

铅对大鼠脑细胞凋亡的诱发作用及对fos、jun、p53基因和一氧化氮合酶表达的影响

背景与目的通过对醋酸铅诱导大鼠脑细胞凋亡及对fos、jun、P53基因和一氧化氮合酶表达的影响,进一步揭示铅的神经毒作用机制。材料与方法成年SD大鼠经腹腔注射醋酸铅染毒,分别用原位末端标记法观测细胞凋亡,用SP法测定脑组织中fos、jun、P53及nNOS和iNOS的蛋白表达情况。结果25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg剂量染铅组大鼠海马、皮层组织凋亡细胞数量明显增加,并和染铅剂量有良好的剂量效应关系;大鼠脑组织海马、皮层fos、jun、P53、iNOS表达阳性细胞数显著增加,表达强度有升高趋势;各剂量染铅组海马组织中nNOS表达明显升高,而皮层组织nNOS表达无明显变化;相关分析表明,铅诱导的神经细胞凋亡与fos、jun、P53及iNOS的表达呈正相关。结论在铅诱导神经细胞凋亡的过程中,高表达的NOS使得NO生成过多进而引起DNA损伤,激活P53,同时使fos、jun表达增加也可激活P53,启动凋亡过程,诱导细胞发生凋亡。

预处理对缺血再灌注心肌细胞即刻早期基因c-fos、c-jun表达的调控

为探讨即刻早期基因在预处理中的作用机制 ,将培养心肌细胞分别经短暂缺血及佛波酯、去甲肾上腺素、腺苷预处理 ,行模拟缺血再灌注 ,采用Northern杂交技术对心肌细胞c fos、c junmRNA含量进行检测。结果发现 ,缺血预处理组c fos、c junmRNA明显上升 ,其他药物预处理组c fos、c jun基因均有不同程度的表达增强 ,H7能明显抑制预处理对c fos、c junmRNA的诱导。表明预处理可能通过激活PKC ,进而诱导c fos、c jun基因的转录表达增强 。

增生性瘢痕形成和成熟过程中c-fos、c-jun和碱性成纤维细胞生长因子基因表达的变化

目的 :探讨c -fos,c -jun和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)及其受体 (bFGFR2 )在不同形成时期的增生性瘢痕中的基因表达变化规律。方法 :提取 16例不同发生时期的增生性瘢痕和 8例正常皮肤的总RNA后 ,分离mRNA ,用RT -PCR方法检测这 4种基因在不同组织中的表达。结果 :在正常皮肤中 ,c -fos,c -jun ,bFGF和bFGFR基因表达较低 ,而在生长活跃的增殖期的瘢痕中 ,这 4种基因表达水平与正常皮肤相比显著升高 (P <0 .0 5 ) ;在成熟期的瘢痕组织中 ,虽然bFGF基因仍保持高水平表达 ,但c -fos ,c -jun和bFGFR2基因的表达量都明显低于增殖期的瘢痕。结论 :c-fos,c -jun和bFGF及其受体基因表达增强可能是增生性瘢痕形成的机制之一 ,而bFGFR及其下游信使分子基因表达降低 。

艾灸对偏头痛大鼠血清5-HT、ET-1与脑干c-fos、c-jun蛋白表达的影响

目的观察艾灸风池穴对偏头痛大鼠血清5-羟色胺(5-HT)、内皮素-1(ET-1)水平及脑干组织中癌基因fos(c-fos)、癌基因jun(c-jun)表达的影响,探讨艾灸治疗偏头痛的可能机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸治疗组和艾灸预防+治疗组,每组10只。除空白组外,其余组大鼠均采用颈背部皮下注射硝酸甘油方法制备偏头痛模型。艾灸预防+治疗组于造模前7 d(连续7 d)及造模后30 min艾灸双侧风池穴,每日1次,每次30 min;艾灸治疗组于造模后30 min艾灸双侧风池穴1次,持续30 min。记录大鼠造模前及造模后0~30 min、60~90 min、90~120 min的挠头次数;测量造模前、造模结束后、造模后60 min大鼠头面部机械痛阈值;造模结束4 h后,采用酶联免疫吸附法测定血清5-HT和ET-1水平,Western blot法检测脑干组织中c-fos和c-jun蛋白表达情况。结果模型组大鼠造模后0~30 min、60~90 min、90~120 min的挠头次数均明显高于空白组(P均<0.05),艾灸治疗组、艾灸预防+治疗组大鼠造模后60~90 min、90~120 min的挠头次数均明显少于模型组(P均<0.05)。造模结束后,模型组、艾灸治疗组、艾灸预防+治疗组大鼠头面部机械痛阈值均明显低于空白组(P均<0.05);造模后60 min,艾灸治疗组、艾灸预防+治疗组大鼠头面部机械痛阈值均明显高于模型组(P均<0.05),艾灸治疗组与艾灸预防+治疗组比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠血清5-HT水平明显低于空白组(P<0.05),血清ET-1水平及脑干组织中c-fos、c-jun蛋白相对表达量均明显高于空白组(P均<0.05);艾灸治疗组、艾灸预防+治疗组大鼠血清5-HT水平均明显高于模型组(P均<0.05),血清ET-1水平及脑干组织中c-fos、c-jun蛋白相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05);艾灸预防+治疗组大鼠血清ET-1水平及脑干组织中c-fos、c-jun蛋白相对表达量均明显低于艾灸治疗组(P均<0.05)。结论艾灸风池穴可明显缓解大鼠偏头痛,且早期介入效果更显著,其机制可能与调节血管舒缩相关的血管活性物质表达和下调c-fos、c-jun蛋白表达而抑制三叉神经血管系统激活有关。

曲马多对坐骨神经痛大鼠脊髓c-jun、c-fos表达及星形胶质细胞活化的影响

目的 探究曲马多对坐骨神经痛大鼠脊髓组织中Jun原癌基因蛋白(c-jun)、fos原癌基因蛋白(c-fos)表达及对星形胶质细胞活化的影响。方法 采用腰椎间孔外口植入髓核法建立SD大鼠坐骨神经痛模型,随机分为模型组、曲马多低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)、高(30 mg/kg)剂量组、阳性对照组(吲哚美辛,7.5 mg/kg),每组10只,另设置假手术组10只(自体髓核不植入神经部位),于造模后3 d开始给药,1次/d。给药14 d后,观察大鼠一般行为活动;检测机械缩足痛敏阈值(PWT)及热辐射刺激缩爪反应潜伏期(PWL);酶联免疫吸附法(ELISA)检测疼痛标志物前列腺素(PG)E2、P物质(SP)水平;苏木素-伊红(HE)染色检测脊髓病理形态变化;免疫组化法检测脊髓星形胶质细胞活化标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达;Western印迹法检测脊髓c-fos、c-jun、活化蛋白(AP)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、一氧化氮合酶(iNOS)和环氧化酶(COX)-2表达。结果 与假手术组相比,模型组大鼠活动量降低并出现易激惹行为,神经纤维紊乱及坏死严重,PWT、PWL显著降低(P<0.05),血清PGE2、SP水平、脊髓GFAP、TNF-α、IL-1β、c-fos、c-jun、AP-1、iNOS、COX-2表达水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,曲马多各剂量组大鼠易激惹行为减少,神经纤维病理损伤减轻,PWT、PWL显著升高(P<0.05),血清PGE2、SP水平、脊髓组织GFAP、TNF-α、IL-1β、c-fos、c-jun、AP-1、iNOS、COX-2表达水平均显著降低(P<0.05);阳性对照组与曲马多高剂量组的上述各项指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 曲马多可通过抑制c-jun/c-fos通路激活,抑制星形胶质细胞活化,缓解坐骨神经痛模型大鼠神经炎症损伤及疼痛症状。

铅对大鼠脑细胞凋亡及癌基因表达的影响

目的 通过对醋酸铅诱导大鼠脑细胞凋亡及对fos、jun癌基因表达影响的研究 ,为进一步揭示铅的神经毒作用机制 ,预防和治疗铅中毒提供科学依据。方法 取成年SD大鼠 ,每组 6只 ,醋酸铅染毒剂量分别为 2 5,50 ,10 0mg/kg体重 ,连续染毒 5d ,经升主动脉灌注 4%多聚甲醛内固定后分别取海马、皮层部位脑组织 ,制备石蜡切片 ,用原位末端标记法观测细胞凋亡 ,用免疫组化方法分别测定海马、皮层组织中fos、jun的蛋白含量以检测其表达情况。 结果 (1)醋酸铅染毒后各剂量组大鼠海马、皮层组织凋亡细胞数量明显增加 ,显著高于对照组 ,并和染铅剂量有较好的剂量反应关系。 (2 )大鼠脑组织海马、皮层fos、jun阳性细胞数显著增加 ,表达强度并升高趋势。 (3 )相关分析表明 ,铅诱导的神经细胞凋亡与fos、jun的表达呈正相关。结论 (1)醋酸铅可以诱发大鼠皮层、海马细胞的凋亡 ,且和染铅剂量呈正相关。 (2 )醋酸铅可以促进大鼠海马、皮层细胞中fos、jun基因的表达 ,并有良好的剂量反应关系 ,提示fos。

绞股蓝总皂苷对光老化HaCaT细胞中p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达的抑制作用

目的:观察绞股蓝总皂苷含药血清对光老化HaCaT细胞p38促分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)蛋白和Jun基因(c-Jun)mRNA表达的影响,探讨绞股蓝总皂苷含药血清抗皮肤光老化的作用机制。方法:采用中波紫外线(UVB)照射建立光老化HaCaT细胞模型,加低、中、高剂量绞股蓝总皂苷含药血清于光老化HaCaT细胞模型培养液中培养,并设空白对照组、空白血清组和UVB模型组。采用Western blotting和RT-PCR方法检测各组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA的表达水平。结果:与空白对照组比较,UVB模型组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达显著上调,差异有统计学意义(P<0.01);与UVB模型组比较,低、中和高剂量含药血清组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达显著下调,差异有统计学意义(P<0.01);与空白血清组比较,低、中和高剂量含药血清组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达下降(P<0.01)。结论:绞股蓝总皂苷含药血清可能通过抑制p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达抑制皮肤光老化。

反义c-jun表达质粒对血管平滑肌细胞表型转化标志的影响

为研究c jun反义RNA对血管平滑肌细胞表型转化的影响 ,本文应用可表达c jun反义RNA的真核细胞表达载体转染大鼠血管平滑肌细胞 ,采用Northern印迹、Western印迹和氚标胸腺嘧啶核苷掺入实验 ,观察反义c jun对血管平滑肌细胞表型标志基因平滑肌α 肌动蛋白、平滑肌胚胎型肌球蛋白重链和骨桥蛋白表达和DNA合成的影响。结果发现 ,在血管平滑肌细胞中表达的c jun反义RNA可使血管平滑肌细胞去分化标志基因平滑肌胚胎型肌球蛋白重链和骨桥蛋白mRNA表达较对照分别下降 5 0 %和 95 % ,骨桥蛋白水平较对照下降 75 % ,同时血管平滑肌细胞的DNA合成受到显著抑制 ,实验组氚标胸腺嘧啶核苷掺入值较对照降低 37%。c jun反义RNA对血管平滑肌细胞分化标志基因平滑肌α 肌动蛋白的表达无明显影响。提示c jun基因表达产物在维持血管平滑肌细胞于去分化状态中起重要作用。

c-junmRNA在胃癌中表达的研究

目的 检测c-junmRNA在胃癌组织中的表达,探讨c-junmRNA在胃癌发展中的作用。方法 利用核酸原位杂交技术对于36例胃癌组织及11例正常胃黏膜组织进行检测。结果 c-junmRNA在正常胃黏膜组织无阳性表达,而c-junmRNA在胃癌组织表达的阳性率为52. 78% ( 19 /36 ),且二者差异有显著性,但与性别、年龄、浸润深度及淋巴结有无转移无关(P<0. 05)。结论 c-junmRNA在胃癌组织有较高的表达,检测c-junmRNA可作为诊断胃癌的分子标志。

小鼠皮肤切创愈合过程中c-jun的表达

目的探讨小鼠皮肤切创愈合过程中损伤区c-jun的表达及不同损伤时间c-jun的变化规律。方法应用免疫组织化学染色和Western印迹技术检测小鼠皮肤切创后各个时间段c-jun的表达变化情况。结果正常组织中有少量c-jun表达。伤后3～12h损伤区c-jun主要表达在中性粒细胞中,1～5dc-jun阳性细胞主要以单个核细胞和成纤维细胞为主,7～14dc-jun主要在成纤维细胞中表达。阳性细胞率3～12h逐渐增高,12h达高峰,1～5d有所下降,7d阳性细胞率达第二峰值,10～14d逐渐降低。Western印迹法检测显示各个时间段均有c-jun阳性条带,其中12h和7d为c-jun含量的2个高峰。结论小鼠皮肤切创愈合过程中c-jun在损伤区对诱导中性粒细胞、单个核细胞及成纤维细胞的凋亡可能起着重要作用,同时c-jun表达的规律性变化可用于损伤时间的推断。

c-jun在金黄地鼠颊囊黏膜癌前病变和鳞癌组织中的表达

目的:研究c-jun在地鼠颊囊黏膜癌前病变和鳞癌中的表达。方法:采用60只金黄地鼠DMBA诱导颊囊黏膜癌前病变、鳞癌动物模型,取材,HE染色,选择正常组23例,上皮单纯增生组22例,上皮异常增生组22例,鳞癌组29例,经免疫组化SABC法检测各组c-jun的表达。结果:c-jun蛋白阳性表达主要在细胞核。在正常黏膜、上皮单纯增生及上皮异常增生中阳性表达以基底细胞及棘细胞为主,阳性表达位于细胞核。在口腔鳞癌中c-jun阳性表达多数位于癌巢中各层细胞,少数仅位于癌巢中的棘细胞,阳性表达多数定位于细胞核和细胞浆,呈弥漫性分布,细胞膜也可见阳性表达。c-jun免疫组织化学各组染色等级分布差异具有显著性(Z=16.84,P<0.01)。各组阳性表达率比较差异具有显著性(χ2=13.71,P<0.01),上皮异常增生组(77.27%)、鳞癌组阳性表达率(55.17%)高于正常组(26.09%)(P<0.05),上皮单纯增生组(36.36%)与正常组比较差异无显著性(P>0.05),上皮异常增生组高于上皮单纯增生组(P<0.05)。染色程度变化趋势:上皮异常增生组最强,鳞癌组次之,正常组最弱。结论:c-jun参与了金黄地鼠颊囊癌前病变和鳞癌的发生与发展。

胃管状腺癌组织中Fos和Jun蛋白表达及临床意义

目的:检测Fos和Jun在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌的发生、发展及生物学行为的关系。方法:应用免疫组织化学SABC法检测54例胃癌及癌旁组织中Fos和Jun基因蛋白的表达。数据采用SPSS统计软件包及x2检验分析。结果: c-Fos和c-Jun在胃癌及癌旁组织中的阳性表达率分别为68．5％、27．8％和63．0％、24．1％;c-Fos和c-Jun的表达在胃癌不同组织学分级间差异有统计学意义(x2分别为8．101和6．742;P分别为0．018和0．032),在淋巴结转移和TNM分期间差异无统计学意义(x2分别为1．534、1．342和0．055、0．499;P分别为0．219、0．266和0．832、0．492);胃癌及癌旁组织中c-Fos与c-Jun之间的表达呈正相关。结论:c-Fos和c-Jun基因蛋白表达变化发生在肿瘤细胞形态变化之前,可作为胃癌早期诊断的分子病理学指标。

双膦酸盐对NFATc1及相关因子p-NF-κB、p-c-Jun在破骨细胞分化过程中的影响

目的研究双膦酸盐(ALN)对破骨细胞(OC)分化过程中关键因子NFATc1及其信号分子p-NF-κB、p-c-Jun的影响。方法采用小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导培养OC,细胞培养于培养皿,分A组(对照组)、B组(ALN组)。培养第2d采用Western blotting检测NFATc1、p-NF-κB、p-c-Jun基因表达变化情况,培养第4d采用免疫荧光方法检测NFATc1表达,培养第7d检测各组OC生成及数目。采用牙本质磨片接种RAW264.7细胞,分组及处理方法同上述培养皿培养过程,第9d检测骨吸收功能。结果两组细胞均有TRAP阳性多核OC生成,并在牙本质磨片上形成吸收陷窝;但A组TRAP阳性多核细胞数目、吸收陷窝数目及陷窝面积均大于B组。免疫荧光检测NFATc1表达A组高于B组;Western blotting检测NFATc1、p-NF-κB、p-c-Jun表达B组较A组低,两组有显著性差异(P<0.01)。结论双膦酸盐通过下调p-NF-κB、p-c-Jun的表达,最终抑制NFATc1的表达,从而抑制OC生成和骨吸收功能。