阿朴吗啡对颈动脉体球细胞帕金森病大鼠纹状体移植区C-FOS和JUN-B表达的影响

目的 :探讨帕金森病 (PD)大鼠颈动脉体球细胞移植治疗后多巴胺细胞的功能状况。方法 :采用 6 -羟多巴胺损毁制备 PD大鼠模型 ,腹腔注射阿朴吗啡 2 h后诱导移植后 12周纹状体组织内 c- fos和 Jun- B的表达 ,分析其分布和阳性细胞数目。结果 :移植后 12周 ,移植物内和与宿主接触面 c- fos表达增高 ,而 Jun- B的表达没有变化。结论 :移植物内和与宿主接触面 c-

C-Jun和Jun-B与银屑病

Jun-B和c-Jun作为AP-1(activator protein-1)的重要组成成员,主要参与调控细胞的增殖、分化、转化和凋亡过程,二者在细胞增殖、分化以及AP-1依赖性靶基因表达上的作用相反。Jun-B和c-Jun之间的平衡决定细胞进入细胞周期或走向凋亡,这种平衡在表皮中表现尤为突出。打破平衡将导致表皮细胞异常增殖和分化,从而促使银屑病、扁平苔藓、湿疹等皮肤病的发生。通过对AP-1亚基调控角质形成细胞(keratinocyte,KC)生长及其在银屑病小鼠模型中的研究进展,探讨Jun-B和c-Jun与银屑病的关系。

绞股蓝总皂苷对光老化HaCaT细胞中p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达的抑制作用

目的:观察绞股蓝总皂苷含药血清对光老化HaCaT细胞p38促分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)蛋白和Jun基因(c-Jun)mRNA表达的影响,探讨绞股蓝总皂苷含药血清抗皮肤光老化的作用机制。方法:采用中波紫外线(UVB)照射建立光老化HaCaT细胞模型,加低、中、高剂量绞股蓝总皂苷含药血清于光老化HaCaT细胞模型培养液中培养,并设空白对照组、空白血清组和UVB模型组。采用Western blotting和RT-PCR方法检测各组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA的表达水平。结果:与空白对照组比较,UVB模型组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达显著上调,差异有统计学意义(P<0.01);与UVB模型组比较,低、中和高剂量含药血清组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达显著下调,差异有统计学意义(P<0.01);与空白血清组比较,低、中和高剂量含药血清组细胞p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达下降(P<0.01)。结论:绞股蓝总皂苷含药血清可能通过抑制p38MAPK蛋白和c-Jun mRNA表达抑制皮肤光老化。

补阳还五汤对大鼠脑缺血后蛋白激酶B1和c—Jun氨基末端激酶1／2表达的影响

目的探讨补阳还五汤对脑缺血后大鼠蛋白激酶B1（AKT1）和c-Jun氨基末端激酶1/2（JNK1/2）的影响。方法将48只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、模型组、补阳还五汤组，每组12只。采用大脑中动脉闭塞法（MCAO）建立右侧局灶性脑缺血大鼠模型。补阳还五汤组大鼠于术后2h起灌服补阳还五汤（主要由生黄芪120g、当归6g、赤芍4.5g、川芎3g、西红花3g、桃仁3g、广地龙3g组成）14.2 g/kg，每日1次，连续7 d。其他各组动物均给予等体积生理盐水。于第7日处死大鼠，取脑组织，采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定AKT1 mRNA表达，采用免疫组化法检测JNK1/2蛋白表达。结果与正常对照组和假手术组比较，模型组AKT1 mRNA表达量〔吸光度（A）值〕明显降低（0.48±0.08比0.63±0.11、0.61±0.09，均P＜0.05），JNK1/2阳性细胞数（个/mm2）明显增多（34.13±4.57比16.15±1.09、16.23±2.05，均P＜0.05）；与模型组比较，补阳还五汤组脑组织中AKT1 mRNA表达（0.93±0.11）和JNK1/2阳性细胞数（45.04±5.68）明显增加，差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。结论补阳还五汤可上调缺血脑组织AKT1 mRNA和JNK1/2阳性细胞数表达，是其脑保护作用机制之一。

清热化痰解毒方对卒中相关性肺炎大鼠 Akt/JNK3/Caspase-3和NF-κB信号通路的影响

目的探究清热化痰解毒方对卒中相关性肺炎大鼠肺组织的影响,以及与Akt/c-Jun氨基末端激酶3(JNK3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和核因子κB(NF-κB)信号通路的关系。方法将SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组(脑缺血再灌注-肺损伤大鼠)、热化痰解毒方低(7 mg/kg)、中(14 mg/kg)、高剂量(28 mg/kg)组,尼莫地平组(200 mg/kg),每组24只,苏木精-伊红染色法(HE)观察大鼠肺部组织病理学变化,测定大鼠肺组织湿干重、动脉血氧分压;酶联免疫法测定肺组织炎症因子、氧化指标水平,免疫印迹法(Western blot)、免疫组化检测Akt、p-Akt、JNK3、p-JNK3、Caspase-3、p65、p50表达。结果与假手术组相比,模型组干湿重比值(Dry weight/wet weight,W/D)、中性粒细胞(Polymorphonuclear neutrophil leukocyte,PMN)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、肺组织分级、肺组织病理评分、肺组织p-JNK3、Caspase-3、p65、p50蛋白及p-JNK3、p65、p50蛋白阳性表达率均升高,动脉血氧分压(Partial pressure of oxygen,PaO_2)、氧合指数(oxygenation index,OI)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、肺组织p-Akt蛋白以及蛋白阳性表达率均降低;与模型组相比,阳性组、清热化痰解毒方组W/D、PMN、MDA、TNF-α、IL-1β、肺组织分级、肺组织病理评分、肺组织p-JNK3、Caspase-3、p65、p50蛋白及p-JNK3、p65、p50蛋白阳性表达率降低,PaO2、OI、SOD、p-Akt蛋白以及蛋白阳性表达率均升高,具有剂量依赖性(P<0.05)。结论清热化痰解毒方能够缓解卒中相关性肺炎大鼠肺炎症损伤,其机制可能与抑制JNK3/Caspase-3和NF-κB信号通路,激活Akt表达有关。

系膜增殖性肾炎分子病理机制探讨

采用原位杂交技术与真彩色图象分析系统，观察了１２例系膜增殖性肾炎患者肾穿刺组织中肾小球１Ｌ６、ＧＰ１３０、ＪｕｎＢｍＲＮＡ表达，结果表明：肾小球中１Ｌ６、ＧＰ１３０、ＪｕｎＢｍＲＮＡ表达较对照组增强（Ｐ＜０．０１），１Ｌ６表达与肾小球系膜扩张呈正相关（Ｐ＜０．０５），与ＧＰ１３０．ＪｕｎＢｍＲＮＡ表达呈正相关（Ｐ＜０．００５）。提示１Ｌ６异常表达参与了系膜增殖性肾炎的病理过程，其分子机制与ＧＰ１３０．

辛伐他汀对糖尿病大鼠神经病理性疼痛和全身性炎症的影响及其分子机制

目的探讨辛伐他汀对糖尿病大鼠神经病理性疼痛及全身性炎症的影响及其机制。方法采用随机数表法将24只SD大鼠随机分为正常+介质(NV)组、糖尿病+介质(DV)组和糖尿病+辛伐他汀(DS)组3组,每组8只,通过腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型;建模后第7、14、21、28天记录各组大鼠的血糖、体质量、机械性刺激缩足阈值(PWMT)和热刺激缩足反射潜伏期(PWTL);建模后第28天取大鼠腰段脊髓背角和血清,Western blot法检测各组大鼠脊髓背角中晚期糖基化终末产物受体(RAGE)的表达,蛋白激酶B(AKT)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、p38和 c-Jun 氨基末端激酶(JNK)的磷酸化水平,ELISA法检测各组大鼠血清中氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)和白细胞介素1β(IL- 1β)浓度。结果建模后第14、21、28天,DV组的PWMT值分别为(8.6 ± 0.8)、(7.1 ± 1.6)、(7.8 ± 0.8)g,明显低于NV组的(12.0 ± 0.9)( q =8.482, P =0.000)、(11.6 ± 1.5)( q =11.309, P =0.000)、(11.7 ± 1.5)g ( q = 9.801, P =0.000);建模后第21、28天,DS组的PWMT值分别为(9.4 ± 1.4)( q =5.780, P =0.000)、(9.7 ± 0.9)g( q =4.775, P =0.003),明显高于DV组。建模后第7、14、21、28天,各组间的PWTL值差异均无统计学意义( P 均>0.05)。 DV组大鼠脊髓背角中RAGE的表达量明显高于NV组( q =6.299, P =0.000)和DS组( q =2.891, P =0.025);DV组大鼠脊髓背角中AKT磷酸化水平明显高于NV组( q =8.915, P =0.000)和DS组( q =4.103, P =0.003)。 DV组大鼠脊髓背角中ERK( q =8.313, P =0.000)、p38蛋白( q =2.965, P =0.022)和JNK( q =7.459, P =0.000)的磷酸化水平明显高于NV组;DS组脊髓背角中JNK的磷酸化水平明显低于DV组( q =3.866, P =0.004),ERK( q =1.987, P =0.122)和p38蛋白的磷酸化水平( q =1.260, P =0.375)与DV组差异无统计学意义。 DV组大鼠的血清ox-LDL和IL- 1β水平分别为(41.86 ± 13.40)ng/ml和(108.16 ± 25.88)pg/ml,均明显高于NV组的(24.66 ± 7.87)ng/ml( q =3.606, P =0.003)和(49.32 ± 28.35)pg/ml( q =5.079, P =0.000);也明显高于DS组的(18.81 ± 5.62)ng/ml( q =4.833, P =0.000)和(32.73 ± 11.73)pg/ml( q =6.510, P =0.000)。结论辛伐他汀可在一定程度上提高糖尿病大鼠的机械痛阈,其机制可能与抑制糖尿病大鼠脊髓背角中RAGE/AKT的激活和JNK的磷酸化有关。辛伐他汀还可以显著降低糖尿病大鼠血清中ox-LDL和IL- 1β的含量,减轻全身性炎症反应。

丹参素对IL-1β刺激的大鼠肝星状细胞JNK、NF-κB信号通道的影响

目的观察丹参素对活化的大鼠肝星状细胞(HSC)氨基末端蛋白激酶(JNK)以及NF-κBP65表达的影响,探讨其抗肝纤维化作用的机制。方法分离大鼠原代HSC,MTT法检测丹参素对细胞的生长抑制,免疫细胞化学法观察Ⅲ型胶原合成,ELISA法观察Ⅲ型胶原分泌。AO/EB荧光染色观察HSC凋亡形态学变化,Annexin-V-FITC/PI联合流式细胞仪检测HSC的凋亡率,Western blotting观察丹参素对IL-1β刺激的HSCs内P-IκBα、NF-κBP65和JNK蛋白的表达。结果和结论丹参素可抑制活化的HSC增殖,降低胶原合成和分泌,促进HSC凋亡,并抑制IL-1β刺激的HSC中JNK的磷酸化及NF-κBp65的表达。

糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经p-JNK和Bcl-2表达的影响

目的 观察糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)表达的影响。方法 雄性SD大鼠70只,选取10只为正常组,其余60只予高脂饲料与小剂量链脲佐菌素(STZ)联合诱发糖尿病大鼠模型,将造模成功的糖尿病大鼠分为4组:模型组、α-硫辛酸(ALA)组[0.0268 g/(kg·d)]、糖痹康高剂量组[2.5 g/(kg·d)]、糖痹康低剂量组[1.25 g/(kg·d)]。治疗16周后行坐骨神经HE染色,Western blot检测大鼠坐骨神经中p-JNK和Bcl-2蛋白的表达;RT-PCR检测大鼠坐骨神经中Bcl-2 mRNA的表达。结果 干预16周后,与模型组相比,光镜下显示ALA组、糖痹康高剂量组、糖痹康低剂量组坐骨神经纤维结构较规整,神经纤维的变性和断裂较少,形态改变较小;ALA组、糖痹康高剂量组、糖痹康低剂量组p-JNK蛋白表达明显低于模型组(P<0.05,P<0.01);糖痹康高剂量组大鼠坐骨神经Bcl-2蛋白表达与模型组比较升高(P<0.05),ALA组、糖痹康低剂量组大鼠坐骨神经Bcl-2蛋白表达与模型组比较有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);ALA组、糖痹康高剂量组、糖痹康低剂量组Bcl-2 mRAN表达明显高于模型组(P<0.01)。结论 中药复方糖痹康能够下调糖尿病大鼠坐骨神p-JNK蛋白表达,上调Bcl-2蛋白和mRAN表达,可能是糖痹康保护糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经的作用靶点之一。

紫草酸镁B抑制缺血/再灌注心肌细胞c-Jun N-末端激酶3 mRNA的表达

目的 探讨c JunN 末端激酶 3(c JunN terminalkinase 3,JNK3)在缺血 /再灌注心肌细胞损伤中的作用 ,及紫草酸镁B对缺血 /再灌注心脏具有保护作用的机制。方法 复制大鼠Langendorff心肌缺血 再灌注损伤模型 ,用原位杂交技术检测心肌细胞JNK3mRNA的表达 ,并观察紫草酸镁B对JNK3表达的影响。结果 图像分析显示 ,心肌缺血 30min 再灌注 30min时 ,JNK3表达明显高于非灌注组和对照组。 0 1,1和 10 μmol·L- 1 紫草酸镁B可以抑制缺血 /再灌注时JNK3mRNA的表达。结论 紫草酸镁B可通过抑制JNK3的表达以降低JNK的功能 ,从而减少心肌细胞凋亡的发生 ,对缺血 /再灌注心脏产生保护作用。

基于网络药理学探究兰艾双香方治疗细菌感染的机制研究

目的旨在通过网络药理学的研究方法寻找兰艾双香方在治疗细菌感染方面存在的潜在的分子机制及相关分子通路,为进一步研究兰艾双香方提供理论依据。方法通过中药数据分析平台(TCMSP)筛选兰艾双香方的活性成分及对应靶点,对兰艾双香方进行复方成分分析,利用Cytoscape软件构建兰艾双香方治疗细菌感染的“单味药-活性成分-作用靶点”网络,再通过Gene Cards,OMIM和DigSee 3个数据库整合细菌感染的相关靶点,将靶点数据导入jvenn平台做出韦恩图,导入String平台得到PPI,导入Metascape中对兰艾双香方治疗细菌感染的作用靶点进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,根据KEGG富集得到的通路绘制相关气泡图,将KEGG分析得到的通路导入Cytoscape软件构建“靶点通路”网络。结果①筛选得到兰艾双香方共110个药效成分和1788个作用靶点,关键靶点包括过氧化物酶体增殖物激活受体、血管内皮生长因子A、肿瘤坏死因子和表皮生长因子受体等;②细菌感染相关靶点1442个;③蛋白互作核心网络共97个蛋白,分析得到4个蛋白模块;④获得2401个GO生物过程,KEGG通路富集筛选得到324条相关信号通路,通路类型包括癌症的路径、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、乙型肝炎、肿瘤坏死因子信号通路、小细胞肺癌、利什曼病、HIF-1信号通路、军团杆菌病等,这些通路均与细菌感染的发生发展相关;⑤结果证实,兰艾双香方可能通过调节细胞代谢、增殖与凋亡、脂代谢等多种途径达到治疗细菌感染的目的,该目的是多成分、多靶点和多通路相互作用的结果。结论兰艾双香方在癌症、糖尿病和乙型肝炎疾病进展过程中并发细菌感染的治疗可能有更好的疗效。

瑞香素抑制c-Jun氨基末端激酶/核因子κB(JNK/NF-κB)通路减轻大鼠心肌缺血损伤

目的研究瑞香素(DAP)对于心肌缺血损伤大鼠的保护作用及其作用机制。方法将75只SD大鼠随机分为空白组、模型组、(30、60、90)mg/kg DAP处理组。模型的建立则是采用皮下注射85 mg/kg异丙基肾上腺素(ISO)连续2 d建立大鼠心肌缺血模型,持续灌胃给予相应剂量DAP处理7 d,观察DAP对心肌损伤的保护作用。采用大鼠心电图测量装置测定各组实验大鼠的心电图变化,采用分光光度法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)酶活性和丙二醛(MDA)含量,ELISA检测血清肌肉B型肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CPK)水平以及心肌组织匀浆白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的变化;采用HE染色以及Masson染色观察心肌细胞的损伤及纤维化情况,实时定量PCR检测心肌组织c-Jun氨基末端激酶(JNK)和核因子κB(NF-κB)的mRNA水平,Western blot法检测JNK、NF-κB的磷酸化情况。结果DAP能增加心肌组织SOD、CAT、GSH-Px酶活性,降低MDA,并能降低血清组织中CK-MB、LDH、CPK、TNF-α和IL-1β水平,减少心肌细胞纤维化,抑制JNK和NF-κBp65的表达和磷酸化。结论DAP通过抑制JNK/NF-κB信号通路活化,抑制心肌缺血诱发的心肌细胞凋亡和纤维化。

不同频率的振动训练对大鼠早期膝骨关节炎关节软骨的修复作用及其JNK/NF-κB、SOX9机制

目的:探讨不同频率的振动训练对大鼠早期膝骨关节炎关节软骨的修复作用及其JNK/NF-κB、SOX9的机制。方法:成年雄性SD大鼠48只,随机分为6组(n=8):模型对照组(MC组),高频振动1组(GP_(1)组,频率60 Hz),高频振动2组(GP_(2)组,频率40 Hz)、中频振动组(ZP组,频率20 Hz)和低频振动组(DP组,频率10 Hz),正常对照组(NC组)。除正常组外,各组大鼠经第1、4、7日双后腿膝关节腔注射2%木瓜蛋白酶溶液和L-半胱氨酸混合液6周后建立早期膝骨关节炎模型后,对振动组大鼠双膝进行4周,每天40 min,振幅2~5 mm,每周振动5 d的训练。4周后,检测双膝关节股骨外侧髁关节软骨HE染色、番红O染色和Mankin评分形态学观察,股骨内侧髁关节软骨RT-qPCR检测JNK、NF-κB p65、SOX9 mRNA,Western blot检测JNK、NF-κB p65、SOX9蛋白表达。结果:与NC比较,其余各组Mankin评分均显著增高(P<0.01),与MC相比,各振动组Mankin评分均显著降低(P<0.05),其JNK、NF-κB p65mRNA和蛋白质表达显著降低(P<0.01),SOX9mRNA和蛋白质表达显著升高(P<0.01);与高频组相比,低频组的Mankin评分,JNK、NF-κB p65mRNA和蛋白质表达均显著降低(P<0.05,P<0.01),而SOX9mRNA和蛋白质表达则显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:不同频率的振动训练对早期膝骨关节炎关节软骨可表现出不同程度的修复效应,低频振动训练软骨修复优于高频振动。可能通过下调关节软骨JNK/NF-κB表达,提高SOX9活性来调控胶原合成。

丹参酚酸B和山楂黄酮合用对游离脂肪酸诱导的大鼠肝细胞脂质沉积和凋亡的作用

目的研究丹参酚酸B和山楂黄酮对游离脂肪酸诱导大鼠肝细胞脂质沉积和凋亡的作用及其机制。方法采用肝脏原位胶原酶灌注法分离大鼠原代肝细胞,油酸:棕榈酸=2:1造模。原代肝细胞和HepG2均分为正常对照组、模型组、模型+丹参酚酸B组、模型+山楂黄酮组、模型+丹参酚酸B+山楂黄酮组、模型+SP600125组、丹参酚酸B组、山楂黄酮组、丹参酚酸B+山楂黄酮组、SP600125组、DMSO对照组。游离脂肪酸刺激原代肝细胞的浓度为250μmol/L、刺激HepG2的浓度为500μmol/L;丹参酚酸B的浓度为1μmol/L;山楂黄酮的浓度为5μg/mL;SP600125的浓度为10μmol/L。观察1油红O染色:丹参酚酸B和山楂黄酮对游离脂肪酸刺激的肝细胞内脂滴变化的影响;2ELISA法:丹参酚酸B和山楂黄酮对游离脂肪酸诱导的肝细胞凋亡的影响;3高内涵筛选Hoechst33258染色:丹参酚酸B和山楂黄酮对游离脂肪酸诱导的肝细胞凋亡的影响;4Western blot:丹参酚酸B和山楂黄酮对游离脂肪酸刺激的肝细胞内p-JNK表达的影响。结果 1油红O染色显示:与正常对照组比较,游离脂肪酸作用于原代肝细胞、HepG2细胞24 h后,细胞内脂滴含量显著增加(P均<0.01)。丹参酚酸和山楂黄酮可显著减少游离脂肪酸诱导的原代肝细胞、HepG2细胞内脂滴的含量(P<0.01,P<0.05)。2ELISA检测结果:与正常对照组相比游离脂肪酸组原代肝细胞及HepG2细胞吸光值[Absorbance(A405 nm-A490nm)]显著增高,细胞凋亡明显(P均<0.01);丹参酚酸B和山楂黄酮显著抑制游离脂肪酸诱导的原代肝细胞、HepG2细胞凋亡(P均<0.01)。3高内涵筛选Hoechst33258染色:与正常对照组比较,游离脂肪酸组细胞核平均荧光强度值及凋亡率明显增高(P均<0.01)。丹参酚酸B和山楂黄酮显著降低游离脂肪酸刺激的原代肝细胞细胞核平均荧光强度值及凋亡率(P均<0.01)。HepG2细胞检测结果与原代肝细胞趋势一致。4Western blot结果:与正常对照组比较,游离脂肪酸刺激原代肝细胞24 h时可显著促进p-JNK的表达(P均<0.01)。丹参酚酸B和山楂黄酮对游离脂肪酸刺激原代肝细胞24 h时p-JNK的表达有显著抑制作用(P均<0.01)。HepG2细胞p-JNK结果与原代肝细胞趋势一致。结论 1丹参酚酸B和山楂黄酮合用能够抑制游离脂肪酸诱导的肝细胞内脂滴增加及肝细胞凋亡。2丹参酚酸B和山楂黄酮合用能够抑制游离脂肪酸诱导的肝细胞内JNK的活化。二者是丹参酚酸B和山楂黄酮合用防治非酒精性脂肪性肝炎的重要机制。

细胞周期调控基因及Bcl-2、c-Jun基因在人肝细胞脂肪变性过程中的表达变化

目的观察细胞周期调控基因及Bcl-2、c-Jun基因在人肝细胞L02脂肪变性过程中的表达变化。方法以油酸和软脂酸(2∶1)混合液处理L02细胞0、5、10、20 h,建立人肝细胞脂肪变性模型。用油红O染色检测L02细胞内脂质含量;用荧光定量PCR技术检测L02细胞脂肪变性过程中CDK2、CDK4、Cyclin D1、Bcl-2、c-Jun mRNA表达。结果随造模时间延长,L02细胞内橘红色脂滴聚集越来越多,至造模20 h,肝细胞染成橘红色。L02细胞内CDK2 mRNA相对表达量逐渐升高,造模5 h达最高(P均<0.05),随后逐渐下降;CDK4 mRNA相对表达量逐渐升高,造模10 h达最高(P均>0.05),随后逐渐下降,造模20 h最低(P均>0.05);不同时间点Cyclin D1 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P均>0.05);Bcl-2 mRNA相对表达量随造模时间延长而升高,造模10 h达最高(P<0.05),随后降低;造模5、10、20 h的c-Jun mRNA相对表达量均较造模0 h高(P均<0.05),但无变化规律。结论人肝细胞L02脂肪变性过程中癌症相关基因CDK2、CDK4、Bcl-2、c-Jun表达先升高后降低,Cyclin D1表达变化不明显。

雷公藤红素下调p-p38、p-JNK、NF-κB减轻脑梗死后的炎症反应

目的探讨脑缺血后磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、核因子-κB(NF-κB)的表达变化,观察雷公藤红素的脑保护作用及机制。方法用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉永久性脑梗死(pMCAO)模型。实验分为3组:溶剂对照组,假手术组和雷公藤红素组(3mg·kg^(-1)腹腔注射)。采用RT-qPCR和Western blot观察p-p38、p-JNK、NF-κB基因和蛋白表达变化,比较各组的患侧脑水肿、脑梗死体积和神经功能评分。结果与溶剂对照组相比,雷公藤红素组脑水肿明显低于溶剂对照组(P<0.05);梗死体积明显小于溶剂对照组(P<0.05);神经功能评分明显小于溶剂对照组(P<0.05);p-p38、p-JNK、NF-κB的表达明显低于溶剂对照组(P<0.05)。结论雷公藤红素对脑梗死大鼠具有脑保护作用,雷公藤红素通过调节p-p38,p-JNK和NF-κB的表达可能是其脑保护作用机制之一。

活性氧/c-Jun氨基末端激酶/核因子-κB信号分子通过调控凋亡参与牙周炎诱导肝损伤

目的牙周炎和非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发生发展与活性氧(ROS)的大量积累密切相关。ROS参与调控c-Jun氨基末端激酶(JNK)/核因子-κB(NF-κB)信号分子的激活,当该信号分子被ROS过度激活后可引发机体内环境紊乱。因此,本研究旨在探究ROS/JNK/NF-κB信号分子在牙周炎诱导肝损伤中的作用机制。方法将12只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为对照组和牙周炎组,在牙周炎组大鼠双侧上颌第一磨牙颈部进行钢丝结扎构建牙周炎模型,8周后检查大鼠牙周临床指标并处死,Micro-CT重建牙槽骨三维结构并分析牙槽骨吸收情况,组织病理学分析牙周及肝组织的病理改变,MitoSOXred试剂检测肝组织中ROS含量,生化试剂盒检测肝功指标和氧化应激生物标志物,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肝组织中NF-κB、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、BCL2-AssociatedX的蛋白质(Bax)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)mRNA表达水平,蛋白免疫印迹(Westernblot)法检测肝组织中磷酸化c-Jun氨基末端激酶(P-JNK)、JNK、NF-κB、Bax、Bcl-2和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达水平,末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色法检测肝细胞凋亡。结果Micro-CT结果显示,牙周炎组大鼠牙槽骨骨质吸收明显,且釉牙骨质界到牙槽嵴顶的距离明显大于对照组。组织病理学结果显示,牙周炎组大鼠牙周组织内可见大量炎症细胞浸润和牙槽骨明显吸收;肝组织结构破坏,可见大量气球样变和红色脂滴形成。MitoSOXred染色结果显示牙周炎组肝组织中ROS含量明显升高。生化检测结果显示,牙周炎组血清中谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)含量升高;肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)含量降低,丙二醛(MDA)含量升高。qRT-PCR和Westernblot结果显示,牙周炎组肝组织中IL-6、TNF-α、Bax和NF-κB mRNA及P-JNK/JNK、NF-κB、Caspase-3和Bax蛋白表达水平较对照组显著上升,而Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平下降。TUNEL染色结果显示牙周炎组肝组织中凋亡细胞数量明显增多。结论ROS/JNK/NF-κB信号分子通过调控细胞凋亡参与牙周炎诱导肝损伤。

c-Jun和Bcl-2在海洛因所致大鼠小脑颗粒细胞凋亡中的作用

目的探究海洛因致小脑颗粒细胞凋亡中c-Jun氨基端激酶(c-Jun)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白质的表达情况,分析c-Jun和Bcl-2与海洛因影响小脑颗粒细胞凋亡的关系。方法取8只出生7d的SD大鼠小脑颗粒细胞进行体外培养,随机分为实验组(以80 mg/L海洛因干预)、抑制剂组(以80 mg/L海洛因和10μmol/L CEP1347干预)、正常组(正常培养的小脑颗粒细胞)。采用Hoechst 33258荧光染色技术检测细胞凋亡率,采用免疫荧光、Western blot检测c-Jun和Bcl-2蛋白的表达情况。结果实验组细胞凋亡率较抑制剂组及正常组高(P<0.05);实验组与正常组比较,c-Jun蛋白含量明显升高(P<0.05),Bcl-2蛋白含量下调(P<0.05);抑制剂组中c-Jun蛋白含量较实验组明显下降(P<0.05)。结论 c-Jun和Bcl-2参与海洛因致小脑颗粒神经元细胞凋亡过程,并且可能是c-Jun氨基末端激酶信号通路中的重要候选促凋亡因子。

过氧化物酶体增殖物激活受体γ调控机体炎症信号通路的研究进展

过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome Proliferators-activated Receptorγ,PPARγ)是调控炎症反应的关键物质之一,其通过减弱核因子Kappa B(Nuclear Factor-kappa B,NF-κB)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal Kinase,JNK)活性,降低炎症因子含量从而缓解炎症反应,另一方面PPARγ与腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated Protein Kinase,AMPK)互相抑制,共同维持动物正常机能。本文综述了PPARγ对动物炎症通路的调控作用,为其进一步研究和应用提供参考。

Ketamine inhibits c-Jun protein expression in mouse hippocampus following cerebral ischemia/reperfusion injury

A model of cerebral ischemia and reperfusion was established in mice.Mice were treated with ketamine via intraperitoneal injection immediately following ischemia or ischemia/reperfusion.Ketamine did not remarkably change infarct volume in mice immediately following ischemia,but injection immediately following ischemia/reperfusion significantly decreased infarct volume.Ketamine injection immediately after ischemia or ischemia/reperfusion inhibited c-Jun protein expression in mouse hippocampus,but nuclear factor kappa B expression was unaltered.In addition,the Longa scale score for neural impairment was not reduced in mice following cerebral ischemia/reperfusion.These results indicate that ketamine can protect mice against cerebral ischemia and reperfusion injury by modulating c-Jun protein expression in mouse hippocampus.