爵床化学成分、药理作用与临床应用的研究进展及其质量标志物预测分析

爵床主要含有木脂素、黄酮、生物碱等类型的化学成分,临床上常用于辅助治疗疟疾、热病、肺热咳嗽、毒蛇咬伤等疾病。现代药理研究表明其具有抗血小板聚集、镇痛、抗肿瘤和抗炎等多种药理作用。本综述对爵床的本草考证进行了更具体的归纳,并结合国内外研究对爵床的化学成分、药理作用以及临床应用进行了总结,基于“五原则”及网络药理学、传统药性对爵床的质量标志物(Q-Marker)进行预测分析。初步预测6′-羟基爵床脂定A、6'-羟基爵床脂定B、6'-羟基爵床脂定C、爵床脂定B、金不换甲醚、山奈酚等成分可作为爵床的Q-Marker,以期为更好地开发和利用爵床属植物资源提供借鉴。

基于HPLC-QAMS法对清热通淋丸中7种成分的质量控制研究

目的建立高效液相一测多评法(HPLC-QAMS)同时测定清热通淋丸中三叶豆紫檀苷、苦参醇I、苦参酮、槐属二氢黄酮G、6′-羟基爵床脂素B、6′-羟基爵床脂素A和爵床脂素B的含量。方法采用高效液相色谱法,以Agilent Zorbax SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃。以苦参酮为内参物,建立其他6个成分的相对校正因子,计算含量。结果三叶豆紫檀苷、苦参醇Ⅰ、苦参酮、槐属二氢黄酮G、6′-羟基爵床脂素B、6′-羟基爵床脂素A和爵床脂素B的质量浓度分别在0.91~22.75μg/ml(r=0.999 5)、1.89~47.25μg/ml (r=0.999 3)、5.67~141.75μg/ml (r=0.999 7)、1.29~32.25μg/ml (r=0.999 5)、1.48~37.00μg/ml (r=0.999 6)、2.56~64.00μg/ml (r=0.999 4)、4.09~102.25μg/ml (r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均加样回收率(RSD)分别为97.99%(1.42%)、98.44%(0.85%)、99.47%(0.92%)、96.98%(1.21%)、99.50%(0.74%)、100.00%(1.04%)和98.39%(1.32%),建立的高效液相一测多评法用于测定清热通淋丸中7种指标性成分的含量,一测多评法所得结果与外标法无明显差异。结论所建立的HPLC-QAMS法结果准确,可用于清热通淋丸的质量控制。

苗药妇肤康喷雾剂的HPLC指纹图谱研究

目的:建立苗药妇肤康喷雾剂的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法:色谱柱为Thermo Hypersil GOLD C18,流动相为乙腈-0.2%冰醋酸(梯度洗脱),检测波长为262 nm,流速为0.6 m L/min,柱温为25℃,进样量为10μL。以6′-羟基-爵床定B为参照,绘制10批样品的HPLC图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004 A版),对10批样品进行相似度评价,确定10批样品的共有峰。采用建立的方法测定10批样品中6′-羟基-爵床定B和爵床定B的含量。结果:10批样品的HPLC指纹图谱有12个共有峰,相似度均大于0.90,其HPLC指纹图谱与对照指纹图谱具有较好的一致性。10批样品中6′-羟基-爵床定B和爵床定B含量分别为1.64~5.84、0.83~2.78 mg/100 m L。结论:建立的方法操作简便,结果准确可靠,可为妇肤康喷雾剂的质量评价提供参考。

爵床药材质量标准研究

目的:建立爵床药材的质量标准。方法:参考2015年版《中国药典》方法,对爵床药材的质量控制方法进行研究,包括水分检查、总灰分和酸不溶性灰分检查、薄层鉴别、显微鉴别和其中有效成分爵床脂定B的含量测定。结果:爵床水分含量为9.04%~10.41%,平均值为9.81%;爵床总灰分含量为15.31%~19.86%,平均值为18.32%;酸不溶性含量为0.15%~0.98%,平均值为0.44%;爵床药材的TLC图谱斑点清晰,分离度良好;显微鉴别特征明显;爵床脂定B在2.048~16.384μg·mL^(-1)浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 5;平均回收率为97.23%(RSD=1.47%,n=6)。结论:该方法操作简单、准确可靠,可用于爵床药材的质量控制。

HPLC同时测定爵床药材中6′-羟基-爵床定B和6′-羟基-爵床定A的含量

目的:建立爵床药材中6′-羟基-爵床定B和6′-羟基-爵床定A2个活性成分的HPLC含量测定方法。方法:采用RAINBOW Micsphere-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-水(40∶60),流速:1.0mL.min-1,检测波长256nm,柱温30℃。结果:6′-羟基-爵床定B和6′-羟基-爵床定A的线性范围分别为2.2～22.0μg·mL-1(r=0.9996)和1.7～17.0μg·mL-1(r=0.9999);平均回收率(n=3)分别为98.1%(RSD=2.5%)和99.4%(RSD=1.8%)。结论:本方法稳定,重现性好,操作简单,可用于爵床药材的质量控制。

RP-HPLC法同时测定爵床药材中6'-羟基-爵床定B、新爵床脂定B和TaiwanE的含量

目的:建立爵床药材中6'-羟基-爵床定B、新爵床脂定B和Taiwan E 3个活性成分的HPLC含量测定方法。方法:采用Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱(0～9 min,40%乙腈;9～10 min,40%→45%乙腈;10～40 min,45%乙腈),流速0.8 mL·min-1,检测波长256 nm,柱温30℃。结果:6'-羟基-爵床定B、新爵床脂定B和Tai-wan E的线性范围分别为0.023～0.454μg(r=0.9999)、0.022～0.446μg(r=0.9999)和0.024～0.478μg(r=0.9998);平均回收率分别为101.7%(RSD=1.6%)、95.7%(RSD=0.30%)和99.4%(RSD=1.7%)。结论:本方法可用于爵床药材的质量控制。

不同生长形态的爵床植株鉴别及其化学成分含量比较

目的:鉴别垂直生长(V类)和横向生长(L类)两类爵床并比较其地上部分及不同器官中化学成分含量的差异。方法:使用试剂盒提取两类爵床叶中的DNA,经聚合酶链式反应(PCR)扩增和双向测序得内部转录间隔区2(ITS2)序列,psb A-trn H序列;采用HPLC,测定两类爵床地上部分及花穗、叶和茎中爵床脂定B和金不换甲醚的含量;通过独立样本T检验和配对样本T检验,比较两类爵床地上部分及其不同器官中的爵床脂定B和金不换甲醚的含量差异。结果:将2个序列经过剪切后比对,V类和L类爵床的DNA序列完全一致;独立样本T检验结果表明,爵床脂定B的含量在两类爵床的地上部分中不存在显著差异,而金不换甲醚的含量为V类爵床显著高于L类(P <0. 05);配对样本T检验结果表明,爵床脂定B和金不换甲醚的含量在同类爵床的花穗、叶和茎中均存在显著性差异(P <0. 05),花穗和叶中的含量远大于茎;且金不换甲醚在V类爵床的花穗和叶中的含量要高于L类。结论:DNA条形码技术鉴别序列一致,表明两类不同生长形态的爵床为同种植物;不同生长形态的爵床植株中金不换甲醚的含量存在差异,V类爵床含量更高;同时,爵床茎中有效成分的含量极少,故在爵床的花穗和叶多的花、果期采收为佳。