血清kallistatin、Netrin-4与早发型子痫前期患者外周血HMGB1-RAGE信号通路的关系及对妊娠结局的影响

目的探讨血清人激肽释放酶抑制剂(kallistatin)、轴突导向因子4(Netrin-4)水平与早发型子痫前期(EOPE)患者外周血高迁移率族蛋白1(HMGB1)-晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路的关系及对妊娠结局的影响。方法选取2019年9月至2021年8月该院产科收治的EOPE患者(EOPE组,182例)及健康孕妇(对照组,91例)。比较两组血清kallistatin、Netrin-4、HMGB1、RAGE、核因子-κB p65(NF-κB p65)水平并进行相关性分析。根据EOPE患者的妊娠结局分为不良组(52例)和良好组(130例),并对不良妊娠结局的危险因素进行Logistic回归分析法。结果EOPE组患者血清kallistatin、Netrin-4水平低于对照组,HMGB1、RAGE、NF-κB p65水平高于对照组(P<0.05);血清HMGB1、RAGE、NF-κB p65水平与kallistatin、Netrin-4水平呈负相关(P<0.05)。EOPE组不良妊娠结局发生率为28.57%,单因素及多因素Logistic回归分析法结果显示,孕前高体质量指数(BMI)、24 h尿蛋白定量高水平、血肌酐高水平、D-二聚体高水平、血清kallistatin低水平、Netrin-4低水平均是EOPE患者发生不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.05)。结论EOPE患者血清kallistatin、Netrin-4与HMGB1-RAGE信号通路蛋白表达呈负相关,孕前高BMI、24 h尿蛋白定量高水平、血肌酐高水平、D-二聚体高水平、血清kallistatin低水平、Netrin-4低水平是导致EOPE患者发生不良妊娠结局的独立危险因素。

宫颈癌组织KLK4、STAG2的表达及其临床意义

目的:分析激肽释放酶4(KLK4)、基质抗原2(STAG2)在宫颈癌中的表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法:选取2015年2月至2017年3月本院收治的397例宫颈癌患者为研究对象,在手术过程中收集癌组织及癌旁正常组织。检测组织KLK4 mRNA、STAG2 mRNA水平及KLK4、STAG2蛋白表达;采用Pearson相关系数检验KLK4 mRNA水平与STAG2 mRNA水平的相关性;采用Kaplan-Meier法绘制宫颈癌患者生存曲线;分析宫颈癌患者预后的影响因素。结果:与癌旁正常组织相比,宫颈癌组织KLK4 mRNA、STAG2 mRNA水平升高(P<0.05),且两者mRNA水平呈正相关(r=0.461,P<0.05)。宫颈癌组织KLK4蛋白阳性率、STAG2蛋白阳性率较癌旁正常组织高(P<0.05)。肿瘤直径>5.0 cm、FIGO分期为Ⅲ+Ⅳ期、肌层浸润深度>1/2的宫颈癌患者KLK4阳性表达比例、STAG2阳性表达比例均高于肿瘤直径≤5.0 cm、FIGO分期为Ⅰ+Ⅱ期、肌层浸润深度≤1/2的患者(P<0.05)。KLK4阴性组生存率高于KLK4阳性组(P=0.002),STAG2阴性组生存率高于STAG2阳性组(P<0.001)。KLK4阳性表达、STAG2阳性表达、FIGO分期(Ⅲ~Ⅳ)、肌层浸润深度(>1/2)是影响宫颈癌患者不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论:宫颈癌组织KLK4、STAG2的mRNA水平及蛋白阳性表达率均显著高于癌旁组织,两者与肿瘤直径、FIGO分期、肌层浸润深度及预后密切相关。

激肽释放酶4与釉质发生不全

激肽释放酶4(KLK4)在釉质发生的转换期和成熟早期大量表达,水解基质蛋白,降低牙釉蛋白与羟磷灰石的结合,促进釉质晶体的生长和矿化。如果其基因突变或缺失,将导致釉质发生不全。本文就KLK4的结构、KLK4的表达与生物学功能、KLK4的调控因子、KLK4与釉质发生不全等研究进展作一综述。

人组织激肽释放酶4在子宫内膜癌中的表达和预后的关系

目的 探讨人组织激肽释放酶4（ KLK4）在子宫内膜癌中的表达和对预后的影响，为改善子宫内膜癌的预后提供新的思路。方法 免疫组化法检测81例子宫内膜癌、30例不典型增生的子宫内膜和30例正常子宫内膜中KLK4的表达情况，收集患者临床病理资料，结合随访资料做生存分析，并分析KLK4的表达和子宫内膜癌预后的关系。结果 KLK4在正常内膜、不典型增生内膜和子宫内膜癌中的高表达率分别为30％、53％、67％，差异有统计学意义（χ^212．059，P＝0．002）；KLK4的高表达和子宫内膜癌的分化程度及深肌层浸润相关（χ^2=7．985，P＝0．021；χ^2=4．629，P＝0．031），与年龄、临床分期、淋巴结转移无关（χ^2分别为0．266、1．761、0．277，均P＞0．05）；KLK4高表达组的5年无进展生存率较低表达组更低，差异有统计学意义（P＝0．032）。结论 KLK4的高表达可能与子宫内膜癌细胞的分化和局部侵袭有关，其高表达提示早期复发，KLK4有可能作为预测子宫内膜癌早期复发的标志物。

lncRNA HOTTIP通过miR-637/KLK4轴促进肺癌SPC-A-1细胞的恶性生物学行为

目的:探讨lncRNA HOTTIP对肺癌细胞增殖、凋亡及EMT的影响及其作用机制。方法:利用qPCR检测lncRNA HOTTIP、miR-637和KLK4在肺癌SPC-A-1、正常肺上皮BEAS-2B细胞中的表达量;siRNA干扰SPC-A-1细胞中lncRNA HOTTIP的表达后,分别通过CCK-8、Transwell、流式细胞术和WB法检测SPC-A-1细胞增殖、侵袭、凋亡和EMT能力的变化。miRanda软件和双荧光素酶报告基因实验分析lncRNA HOTTIP和miR-637之间的靶向关系,RNA pull-down实验检测lncRNA HOTTIP和miR-637的吸附作用,检测lncRNA HOTTIP通过miR-637对SPC-A-1细胞增殖、侵袭、凋亡和EMT的调控。利用TargetScan软件分析miR-637与KLK4的相关性,双荧光素酶报告基因实验检测miR-637与KLK4 mRNA之间的相互作用;检测miR-637通过KLK4 mRNA对SPC-A-1细胞增殖、侵袭、凋亡和EMT的调控。下调lncRNA HOTTIP和miR-637表达后,利用qPCR和WB检测KLK4 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:与BEAS-2B细胞比,在SPC-A-1细胞中lncRNA HOTTIP呈高表达(P<0.01),miR-637呈低表达(P<0.01),KLK4呈高表达(P<0.01)。下调lncRNA HOTTIP后,SPC-A-1细胞增殖、侵袭与EMT能力显著减弱,细胞凋亡率显著上升(P<0.01);lncRNA HOTTIP与miR-637具有靶向关系;下调miR-637表达后,SPC-A-1细胞增殖、侵袭与EMT能力显著上升,细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。miR-637与KLK43’UTR特异性结合。miR-637通过KLK4显著促进了SPC-A-1细胞增殖、侵袭与EMT,细胞凋亡率显著上升(P<0.01)。下调lncRNA HOTTIP使KLK4表达显著降低,而下调miR-637可促进KLK4表达(P<0.05)。结论:上调lncRNA HOTTIP可通过miR-637/KLK4轴促进肺癌SPC-A-1细胞的增殖、侵袭与EMT而抑制癌细胞凋亡。

人类激肽释放酶基因4、5在卵巢癌中的表达

目的研究人类激肽释放酶基因4(KLK4)与激肽释放酶基因5(KLK5)在卵巢癌组织中的表达水平,探讨其在恶性肿瘤中的作用机制。方法50例卵巢肿瘤组织标本分为恶性肿瘤组(n=23)、交界性肿瘤组(n=6)和正常或良性肿瘤组(对照组,n=21)。采用荧光定量RT-PCR技术对各组卵巢肿瘤组织标本进行检测,获得KLK4与KLK5的表达水平。结果KLK4在卵巢癌中的表达水平显著高于对照组(P<0.05);KLK5在卵巢癌和交界性卵巢肿瘤中的表达水平也显著高于对照组(P<0.001);KLK5在浆液性囊腺癌中的表达水平显著高于其他组织学类型的恶性肿瘤(P<0.05)和对照组(P<0.001),且低分化浆液性囊腺癌的表达水平高于中分化浆液性囊腺癌的表达(P<0.05)。KLK5的表达水平与血清CA125水平呈正相关。结论KLK5在卵巢癌,尤其是浆液性囊腺癌的发生与发展过程中可能具有潜在促进作用。

超声参数联合血清标志物在卵巢肿瘤良恶性鉴别中的价值

目的探讨超声参数联合血清人附睾蛋白4(HE4)、人激肽释放酶10(hk10)、DJ-1用于卵巢肿瘤良恶性鉴别的价值。方法选取2020年1月-2023年1月我院收治的100例卵巢肿瘤患者,根据病理结果分为卵巢良性肿瘤组80例和卵巢恶性肿瘤组20例。患者术前均行超声检查及血清HE4、hk10、DJ-1检查,并比较2组各项指标差异,通过ROC分析超声参数、HE4、hk10、DJ-1诊断卵巢恶性肿瘤的效果。结果卵巢良性肿瘤组患者阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、S/D以及HE4、hk10、DJ-1水平低于卵巢恶性肿瘤组(P<0.05);ROC曲线结果显示RI、PI、S/D、HE4、hk10、DJ-1诊断卵巢恶性肿瘤的敏感度为0.698、0.721、0.744、0.721、0.814、0.814,联合诊断敏感度为0.953,特异性为0.719、0.789、0.491、0.737、0.684、0.877,联合诊断特异性为0.912;Ⅰ~Ⅱ期卵巢恶性肿瘤患者RI、PI、S/D、HE4、hk10、DJ-1低于Ⅲ~Ⅳ期卵巢恶性肿瘤患者(P<0.05)。结论超声参数、HE4、hk10、DJ-1均可作为鉴别卵巢肿瘤良恶性的指标。

氟对大鼠成釉细胞中MMP-20、KLK4表达的影响

目的观察用含不同浓度氟饮水喂养的SD大鼠所产的子鼠成釉细胞中基质金属蛋白酶-20(MMP-20)、激肽释放酶(KLK4)的表达变化,探讨氟牙症的发病机制。方法给母体SD大鼠分别饮用氟质量浓度为0、50、100mg/L的饮水,待母鼠自然分娩后,取其子鼠下颌骨制作切片并提取牙胚组织,分别用免疫组化和实时定量PCR方法检测不同染氟组大鼠成釉细胞中MMP-20及KLK4的蛋白及基因表达,应用Image-Pro Plus 6.0和GraphPad Prism 5软件对免疫组化和PCR数据结果进行分析。结果①随着饮水氟质量浓度的增加,成釉细胞中MMP-20蛋白及其mRNA的表达量逐渐减少;②KLK4蛋白和KLK4mRNA的表达量在两实验组呈现了类似的变化,但高氟组与低氟组间的差别不明显。结论氟可使成釉细胞减少对MMP-20及KLK4的分泌。这可能是釉基质蛋白降解延迟、釉质矿化异常,最终导致氟牙症产生的机制之一。

BMP2和BMP4对牙釉质基质蛋白酶表达的调控

目的研究BMP2和BMP4对小鼠ALC(ameloblast-lineage cell)内牙釉质基质蛋白酶中基质金属蛋白酶20(matrix metalloproteinase 20,MMP20)和激肽释放酶4(kallikrein 4,KLK4)表达的调控作用。方法在ALC细胞系中加入BMP2和BMP4重组蛋白,利用免疫印迹实验和荧光定量PCR检测BMP通路信号分子和牙釉质基质蛋白酶的表达变化。同期,在另一组ALC细胞系中加入BMP通路抑制剂(Dorsomorphin),检测牙釉质基质蛋白酶的表达情况。结果在BMP2和BMP4蛋白的作用下,ALC细胞中BMP通路的经典通路(Smad1/5/8)和非经典通路(p38)的表达显著增强,同时MMP20和KLK4的基因表达也有明显上调。同期添加Dorsomorphin的ALC细胞中BMP通路的经典通路的表达明显下降,而非经典通路的表达变化不大,同时MMP20和KLK4的基因表达也有明显的下调趋势。在另一组实验中添加BMP抑制剂的处理组则表现出MMP20和KLK4蛋白表达的下调,而使用BMP2和BMP4对抑制剂组进行处理的挽救组则表现出MMP20和KLK4蛋白水平的明显恢复。结论BMP2和BMP4可以通过影响BMP信号经典通路调节牙釉质形成过程中牙釉质基质蛋白酶的表达。

卵巢癌患者血清HK10、CA125、HE4的表达水平及意义

目的分析卵巢癌患者血清人激肽释放酶10(HK10)、糖类抗原125(CA125)及人附睾蛋白4(HE4)的表达水平及意义。方法选取86例卵巢癌患者、72例卵巢良性肿瘤患者、50例健康体检者作为研究对象,检测各组对象血清HK10、CA125、HE4水平。结果卵巢癌组血清HK10、CA125、HE4水平明显高于卵巢良性肿瘤组、健康体检组(P<0.01),而卵巢良性肿瘤组与健康体检组之间血清HK10、CA125、HE4水平比较无明显差异(P>0.05)。卵巢癌患者血清HK10、CA125、HE4水平与细胞分化程度、淋巴结转移、肌层浸润深度、临床分期等指标有显著相关性(P<0.01),与患者年龄、肿瘤直径等指标无显著相关性(P>0.05)。三项指标联合检测诊断卵巢癌的AUC显著高于血清HK10、CA125、HE4单项检测,差异有统计学意义(P<0.01)。结论卵巢癌患者血清HK10、CA125、HE4水平明显升高,并与患者多项临床病理特征指标密切相关,联合检测这3项指标诊断卵巢癌具有较好的临床实用价值。

人激肽释放酶10、DJ-1、糖类抗原125、人附睾蛋白4在卵巢癌患者血清中的表达及其临床意义

目的探讨人激肽释放酶10(HK10)、DJ-1、糖类抗原125(CA125)及人附睾蛋白4(HE4)在卵巢癌患者血清中的表达及其临床意义。方法选取86例卵巢癌患者和50例卵巢良性病变患者,检测并比较卵巢癌和卵巢良性病变患者的血清HK10、DJ-1、CA125、HE4水平。比较不同临床特征卵巢癌患者的血清HK10、DJ-1、CA125、HE4水平,采用Pearson相关分析法分析卵巢癌患者血清HK10、DJ-1、CA125、HE4水平的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清HK10、DJ-1、CA125、HE4单独及联合检测对卵巢癌的诊断价值。结果卵巢癌患者的血清HK10、DJ-1、CA125、HE4水平均明显高于卵巢良性病变患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。国际妇产科联盟分期(FIGO)为Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌患者的血清HK10、DJ-1、CA125、HE4水平均明显高于FIGO分期为Ⅰ~Ⅱ期的卵巢癌患者(P﹤0.01),低分化卵巢癌患者的血清HK10、DJ-1水平均明显高于中高分化卵巢癌患者(P<0.01)。卵巢癌患者的血清HK10和DJ-1水平呈正相关(r=0.648,P<0.05)。血清HK10、DJ-1、CA125、HE4单独及联合检测诊断卵巢癌的ROC曲线下面积分别为0.857、0.873、0.852、0.794、0.930,灵敏度分别为74.00%、76.00%、74.50%、71.20%、79.50%,特异度分别为70.00%、74.00%、69.50%、65.50%、76.00%。结论卵巢癌患者的血清HK10、DJ-1、CA125、HE4水平均较高,且与患者的临床特征有关。

HK10、HE4、DJ-1、CA125在上皮性卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义

目的:探讨人激肽释放酶10(HK10)、人附睾蛋白4(HE4)、DJ-1、糖类抗原125(CA125)蛋白在上皮性卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义。方法:选取经手术治疗的118例卵巢肿瘤患者的外周血标本,经病理诊断51例为上皮性卵巢癌,67例为卵巢良性肿瘤,另选取同期40例健康体检者的外周血标本作为健康对照组,检测并比较3组受试者血清HK10、HE4、DJ-1、CA125表达水平,并分析其与上皮性卵巢癌病理特征与预后的关系,并采用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)评估血清HK10、HE4、DJ-1、CA125对卵巢癌的诊断价值。结果:上皮性卵巢癌组和卵巢良性肿瘤组患者血清中的HK10、HE4、DJ-1、CA125水平高于健康对照组(P<0.05),且上皮性卵巢癌组高于卵巢良性肿瘤组(P<0.05);不同国际妇产科协会(FIGO)肿瘤分期、分化程度以及淋巴结是否转移患者血清HK10、HE4、DJ-1、CA125水平差异有统计学意义(P<0.05),不同年龄、肿瘤直径、病理类型患者血清HK10、HE4、DJ-1、CA125水平差异无统计学意义(P>0.05);ROC曲线显示4个指标联合检测的AUC为0.963(P<0.05),灵敏度为91.04%,特异度为95.00%。结论:HK10、HE4、DJ-1、CA125在上皮性卵巢癌患者外周血中水平较高,对早期上皮性卵巢癌的筛查和初步诊断具有预测价值。

血清KLK1、RBP4及SYNTAX-11评分预测血运重建后STEMI患者预后的临床价值

目的探讨血清激肽释放酶(KLK1)、视黄醇结合蛋白4(RBP4)及冠状动脉病变SYNTAX-11评分体系预测血运重建后ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者预后的临床价值。方法选取2016年3月—2019年6月收入万宁市人民医院的STEMI患者108例为研究对象。记录患者术前及术后1 d血清KLK1和RBP4水平及SYNTAX-11评分,并随访患者半年,观察不良心血管事件(MACE)发生情况。结果随着患者病变支数增多,KLK1逐渐降低,RBP4水平及SYNTAX-11评分逐渐升高(P<0.05)。单支病变组病变中血清KLK1及RBP4水平与SYNTAX-11评分均无相关性(P>0.05);而双支及三支病变组中,血清KLK1及RBP4水平与SYNTAX-11评分显著相关(P<0.05)。MACE组SYNTAX-11评分、RBP4水平、Hcy及cTnI等指标高于非MACE组(P<0.05),KLK1水平低于非MACE组(P<0.05)。经Logistic回归分析,得到SYNTAX-11评分、血清KLK1和RBP4水平是STEMI患者发生MACE的独立危险因素(P<0.05)。经ROC曲线分析,得到SYN⁃TAX-11评分、血清KLK1和RBP4水平均可作为预测MACE的风险因子(P<0.05)。结论血清KLK1、RBP4及SYNTAX-11评分能有效评估STEMI患者血运重建后不良心血管事件。

激肽缓释酶4的研究进展

激肽缓释酶4（KLK4）是糖基化、糜蛋白酶类丝氨酸蛋白酶，它最早由日本科学家从发育中的釉质中分离出来的，后来陆续发现在许多正常组织和癌变组织中均有表达。其主要功能在蛋白水解过程中发挥作用，从而导致组织的正常发育或者异常病变。笔者对KLK4的结构、表达、功能与相关疾病等多个方面作一综述。

血清人激肽释放酶10和人附睾蛋白4及DJ-1在卵巢癌组织中的表达及意义

目的探讨血清人激肽释放酶10(HK10)、人附睾蛋白4(HE4)、DJ-1在卵巢癌患者中的表达水平及意义。方法选取2019年3月至2021年1月间咸阳市中心医院收治的83例卵巢癌患者为A组,同期选取79例良性卵巢肿瘤患者为B组,同期在我院体检健康者80例为C组,比较三组受试者和A组患者各分期血清HK10、HE4和DJ-1水平。结果A组患者血清HK10、HE4和DJ-1水平均高于B组和C组(P<0.05),B组患者血清HK10、HE4和DJ-1水平高于C组受试者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。三组患者血清HK10、HE4和DJ-1水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ~Ⅱ期组患者血清HK10、HE4和DJ-1水平均低于Ⅲ期和Ⅳ期组(P<0.05);Ⅲ期组患者血清HK10、HE4和DJ-1水平均低于Ⅳ期组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关性分析显示,卵巢癌患者肿瘤分期与血清HK10、HE4和DJ-1水平呈明显正相关(r=0.37、0.53、0.44,P<0.05)。结论卵巢癌患者血清HK10、HE4和DJ-1水平较良性病变及正常人群较高,且水平高低与肿瘤分期有关,可辅助应用于卵巢癌早期诊断。