电针对硫酸卡那霉素慢性损害后豚鼠听皮层葡萄糖代谢功能的影响

目的观察电针对硫酸卡那霉素慢性损害后豚鼠听皮层葡萄糖代谢的影响并探讨相关机制。方法105只成年豚鼠随机分为对照组、模型组和电针组。对照组每日颈背部皮下注射生理盐水(500 mg·kg^(﹣1)),连续7 d;模型组和电针组注射硫酸卡那霉素(500 mg·kg^(﹣1)),连续7 d,电针组在每次注射结束30 min后予电针翳风及听宫穴;两组根据观察的时间不同,分为第1、第7、第14、第28、第56、第70和第140天7组。应用正电子发射断层显像(positron emission tomography,PET)/X线计算机体层成像(computer tomography,CT)技术观察豚鼠听皮层葡萄糖代谢功能的变化规律,酶化学法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)活性。结果与对照组比较,模型组第140天组豚鼠听皮层与小脑标准摄入值(standard uptake value,SUV)最大值的比值的平均比值增大(P<0.05);与模型组相比较,电针组第28和第56天组豚鼠听皮层与小脑SUV最大值的比值的平均比值增大(P<0.05)。与对照组比较,模型组第1、第14和第28天组豚鼠听皮层LDH活性升高(P<0.05),第7、第56、第70、第140天组豚鼠听皮层LDH活性无明显变化(P>0.05);与模型组比较,电针组第1、第14和第28天组豚鼠听皮层LDH活性降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组豚鼠听皮层SDH活性变化差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,电针组第7、第14、第28、第56天组豚鼠听皮层SDH活性升高(P<0.05)。结论硫酸卡那霉素慢性损害后,豚鼠听皮层葡萄糖代谢功能可发生重塑;电针可能通过减弱LDH活性及增强SDH活性,减少葡萄糖的无氧酵解,增加有氧代谢,提高葡萄糖代谢水平,促进硫酸卡那霉素慢性损害后豚鼠听皮层葡萄糖代谢功能的重塑进程。

分光光度法测定卡那霉素的研究

在ｐＨ６．５～８．８的水溶液中，作为氨基糖甙类广谱抗生素的卡那霉素与Ｃｕ２＋离子迅速反应形成稳定的２∶１带正电荷络合物，其λｍａｘ为２５６ｎｍ，其表观ε为１．８１×１０３Ｌ·ｍｏｌ－１·ｃｍ－１。卡那霉素含量在１．３０～１２０ｍｇ／Ｌ范围内遵从比耳定律，并探讨了络合物的结构。该方法用于注射用硫酸卡那霉素样品中卡那霉素含量的测定，结果与常规的抗生素微生物法相比，具有简便和快速的优点。

硫酸卡那霉素联合呋塞米快速致聋大鼠模型的研究

目的观察硫酸卡那霉素(kanamycin sulfate,KM)与呋塞米(furosemide,Fur)联合用药建立药物性快速致聋大鼠动物模型的效果。方法 32只SD大鼠随机分为A组(KM+Fur后1天组)、B组(KM+Fur后7天组)、C组(KM+Fur后14天组)、D组(对照组),每组8只动物。A、B、C三组分别经一次性腹腔注射KM 500mg/kg,30分钟后再经腹腔注射Fur 0.2ml/kg,空白对照组按体重给予相同剂量生理盐水。各组在相应的时间点完成听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)检测当天,分别行耳蜗基底膜铺片及扫描电镜观察耳蜗毛细胞损伤情况,免疫荧光染色观察螺旋神经节细胞亡情况。结果 A、B、C组各频率ABR阈值较正常对照组明显升高(P<0.05);而A、B、C组各频率ABR反应阈差异无统计学意义(P>0.05)。A、B、C组耳蜗底回外毛细胞明显缺失,纤毛排列紊乱,螺旋神经节细胞的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)的表达量较正常对照组均明显增加(P<0.05)。结论硫酸卡那霉素和呋塞米联合单次腹腔用药24小时后大鼠ABR反应阈明显增高,并可见耳蜗底回毛细胞的明显缺失,KM+Fur联合应用是简单、快速而有效的大鼠耳聋动物模型建模方法。

基于铜纳米粒子/氧化锌/石墨烯修饰电极的电化学方法测定硫酸卡那霉素

在氧化锌/石墨烯(ZnO/GO)修饰ITO电极表面电沉积铜纳米粒子(CuNPs),制备了一种新型的电化学传感器,用于检测硫酸卡那霉素(KANA)。采用扫描电镜对制备的纳米材料以及修饰电极表面进行表征。优化后的测定条件为:在0.15 mol/L PBS缓冲溶液(pH 6.5)中,电沉积扫描圈数为40圈时, KANA在铜纳米粒子/氧化锌/石墨烯(CuNPs/ZnO/GO/ITO)电极上的电化学响应最大。KANA在电极表面的反应机理为单电子转移过程,修饰电极有效表面积为0.482 cm^2,是裸电极的2.42倍。在0.99～30.6μmol/L范围内,响应电流与KANA浓度呈良好的线性关系,线性方程为I_(pc)=-5.183c-4.544×10^(-6),R^2=0.9975,检出限为:0.31μmol/L,加标回收率为97.8%～103.6%。此传感器具有良好的稳定性与重现性,可用于药物中KANA的检测。

紫外分光光度法测定硫酸卡那霉素注射液含量方法的建立

以水为参比液,采用紫外分光光度法在279 nm波长处测定硫酸卡那霉素注射液中卡那霉素的含量。结果表明,卡那霉素在5 U/mL^25 U/mL浓度范围内,其吸光度与浓度呈良好的线性关系,相关系数R=0.999 6,平均回收率为100.3%,RSD为1.8%(n=5)。该方法操作简便、快速,结果准确,可作为生产企业中间产品的质量控制方法。

可见分光光度法测定卡那霉素的含量

基于硫酸卡那霉素与茚三酮作用形成的络合物在563nm处有特征吸收,以茚三酮为显色剂,采用可见分光光度法测定硫酸卡那霉素的含量。通过考察缓冲溶液的酸度及其用量、茚三酮溶液的用量、加热反应时间和加样顺序等条件得到最佳显色反应条件。硫酸卡那霉素的质量浓度在0.074~0.465g·L^(-1)范围内与吸光度呈线性关系,检出限(0.01/k)为0.026g·L^(-1)。加标回收率在95.5%~98.4%之间,测定值的相对标准偏差(n=12)小于3.0%。

偶氮蓝分光光度法测定硫酸卡那霉素

在pH 4.10的B-R缓冲溶液中,偶氮蓝与硫酸卡那霉素相互作用生成离子缔合物导致偶氮蓝色泽减褪,或换言之,当在偶氮蓝溶液中加入硫酸卡那霉素后,在偶氮蓝的吸收峰552 nm波长处吸光度降低,吸光度差值与硫酸卡那霉素浓度成正比。最佳条件下,硫酸卡那霉素的质量浓度在0.1～4.0 mg·L^(-1)范围内遵守比耳定律,表观摩尔吸光率ε=7.3×10~4L·mol^(-1)·cm^(-1),检出限(3σ)为7.6×10^(-2)mg·L^(-1)。将方法应用于硫酸卡那霉素注射液试样中卡那霉素的测定,测定结果的RSD(n=7)值为1.1%,按标准加入法测得的平均回收率为96.5%。

硫酸卡那霉素-固绿体系的共振瑞利散射光谱及其分析应用

提出了共振瑞利散射法(RRS)测定硫酸卡那霉素(KANA)的方法。在p H为4.56~6.09的B-R缓冲溶液中,固绿与KANA结合生成离子缔合物,使溶液共振瑞利散射(RRS)增强,其最大散射峰位于709 nm,另在463 nm、370 nm有两个较弱的散射峰。KANA的浓度在0.08~1.6 mg·L^(-1)范围内,与RRS强度有良好的线性关系,对KANA的检出限(3σ)达0.024 mg·L^(-1)。研究了适宜的反应条件和影响因素,表明该方法灵敏、稳定。用于硫酸卡那霉素注射液的测定,回收率为96.5%~103.0%。

虎红光度法测定硫酸卡那霉素

在pH3.6的Britton-Robinson(B-R)介质中,虎红与硫酸卡那霉素相互作用,使虎红褪色,最大吸收峰在546 nm处,且吸光度差值与硫酸卡那霉素浓度呈线性相关,在最佳条件下,硫酸卡那霉素在0.0～0.8μg/mL范围内遵守比尔定律,表观摩尔吸光系数ε546=8.98×104L.mol-1.cm-1。据此建立了一种测定硫酸卡那霉素含量的新方法。将方法应用于硫酸卡那霉素滴眼液和注射液的测定,结果满意。

荷移分光光度法测定卡那霉素

研究了卡那霉素与茜素红的荷移反应,测定了荷移络合物在不同条件下的吸光度值,确定了最佳条件和络合物的组成。荷移络合物的最大吸收波长是516nm,表观摩尔吸光系数为9.5×103L/(mol.cm),卡那霉素浓度在1.0～20mg/L范围内与其吸光度值呈线性关系,检出限为0.7mg/L。此法用于硫酸卡那霉素的测定,得到满意结果。

江西省结核分枝杆菌耐二线抗结核药的分子学特征

目的初步明确江西省耐二线抗结核药相关基因突变的特征,评价等位基因特异性多重PCR(multiplex allele-specific polymerase chain reaction,MAS-PCR)检测二线抗结核药耐药性的可行性。方法采用DNA测序方法和MAS-PCR技术,对江西省52株耐二线抗结核药的结核分枝杆菌进行耐药相关基因突变位点检测。结果DNA测序分析:39株耐氧氟沙星(Ofx)菌株中,32株存在gyrA基因错义突变,2株发生gyrB基因错义突变。29株耐卡那霉素(Km)或卷曲霉素(Cm)菌株中,22株为rrs1401位点A→G突变。52株耐二线抗结核药的结核分枝杆菌,40株为北京基因型(76.92%,40/52),其中17株北京基因型菌株发生gyrA-GAC94GGC突变(42.50%,17/40),19株北京基因型菌株发生rrs-A1401G突变(47.50%,19/40)。北京基因型与基因突变类型gyrA-GAC94GGC和rrs-A1401G无明显相关性(χ2=1.16、1.92,P值均>0.05)。MAS-PCR检测Ofx耐药株的敏感度为61.54%(24/39),检测Km或Cm耐药株的敏感度为79.31%(23/29)。结论gyrA基因94位密码子突变是江西省结核分枝杆菌Ofx耐药的主要机制;rrs-A1401G突变则是Km或Cm耐药的主要原因。MAS-PCR方法对于快速检测二线抗结核药的耐药性有一定的临床应用价值。

硫酸卡那霉素体外抑制呼吸道合胞病毒作用的研究

目的评价硫酸卡那霉素体外抗呼吸道合胞病毒作用机制。方法采用细胞培养技术观察硫酸卡那霉素对细胞的毒性和抗呼吸道合胞病毒作用。结果用空斑减数实验测得半数有效剂量(EC50)为(1.71±0.23)mg/ml,MTT法测定其半数中毒浓度(CC50)为(12.36±0.85)mg/ml,SI为7.2,SI>4(有意义);在不同时间给药对病毒的抑制实验中,呼吸道合胞病毒感染喉癌上皮细胞(Hep-2)细胞后1、2、4、6、8和10h给药均有抑制作用(P<0.05),穿入和吸附抑制实验表明其对病毒穿入过程有明显地抑制作用(P<0.05),但是对吸附过程没有抑制作用。硫酸卡那霉素对RSV病毒没有直接的灭活作用。结论硫酸卡那霉素在体外实验中对呼吸道合胞病毒穿入细胞及在细胞内复制的过程均有抑制作用。

硫酸卡那霉素注射液及滴眼液的质量评价

目的评价国内不同厂家生产的硫酸卡那霉素注射液及滴眼液的质量现状及存在问题。方法按照国家评价性抽验计划总体要求,采用法定检验方法结合探索性研究进行样品研究,统计分析检验结果。结果按照法定标准检验抽取的112批次样品,不合格率1.8%,不合格项目为装量、渗透压摩尔浓度和可见异物。标准检验发现现行标准不统一,存在限度不合理、安全性项目(有关物质、防腐剂)缺失问题。探索性研究新建了完善的杂质谱分析方法,对主要杂质的来源与结构进行了确证;新建了滴眼液中防腐剂检查方法和氯离子、硫酸根离子及硫代硫酸根离子的含量测定方法。结论目前国产硫酸卡那霉素注射液及滴眼液的产品质量基本能符合现行标准要求,而探索性研究提示现行标准存在缺陷,不能全面反映产品的质量,需进一步完善,以保证药物的安全和有效;建议企业对原料工艺进行优选,以提高产品质量。

镧-甲基蓝光度法测定硫酸卡那霉素及硫酸新霉素

镧（Ⅲ）-甲基蓝（MB）在酸性条件下与硫酸卡那霉素（KANA）及硫酸新霉素（NEO）反应生成蓝色离子缔合物,两者的最大正吸收波长均位于682 nm,表观摩尔吸光系数为1.71×10^4L·mol^-1·cm^-1（KANA）和1.21×10^4L.mol^-1·cm^-1（NEO）;最大负吸收波长位于620 nm（KANA）和616 nm（NEO）,表观摩尔吸光系数为9.57×104L.mol^-1.cm^-1（KANA）和8.68×10^4L.mol^-1.cm^-1（NEO）;用双波长法测定时,摩尔吸光系数可达1.10×105L.mol-1.cm-1（KANA）和1.00×10^5L.mol-1·cm^-1（NEO）。方法用于市售药物中硫酸卡那霉素及硫酸新霉素含量的测定,结果与标示值相符,回收率在99.8%~100.5%之间。

HPLC-电喷雾检测器测定硫酸阿米卡星中卡那霉素和硫酸盐的含量

目的采用HPLC-电喷雾检测器(CAD)新技术测定硫酸阿米卡星中卡那霉素和硫酸盐的含量。方法采用华谱Click XIon(4.6mm×250mm,5μm)柱,流动相为含0.7%甲酸的250mmol/L甲酸铵溶液-乙腈-水(26:35:39),流速为1.0m L/min。采用Conona ultra RS CAD检测器检测,喷雾器温度为25℃。结果卡那霉素、硫酸盐与阿米卡星、中间体、副产物、辅料完全分离。卡那霉素、硫酸盐在一定的浓度范围内呈较好的线性关系,卡那霉素测定的回收率为100.7%(RSD=2.00%,n=9);硫酸盐测定的回收率为100.2%(RSD=1.04%,n=9)。结论方法简便、灵敏、重复性好,可用于本品的质量控制。

共振瑞利散射法测定硫酸卡那霉素

基于在pH值3.78~6.59的B-R缓冲溶液中,四碘荧光素钠(ST)与硫酸卡那霉素(KANA)结合生成离子缔合物使溶液共振瑞利散射(RRS)增强的原理,建立了共振瑞利散射法测定KANA的新方法。在其最大共振散射波长576nm处测定共振瑞利散射强度(IRRS),并研究了表面活性剂和共存物质对KANA测定的影响。结果表明:KANA浓度在0.04~1.60mg·L^(-1)范围内与ΔIRRS(样品与空白溶液的IRRS值之差)呈线性关系,方法的检出限为0.018 mg·L^(-1)。用于KANA注射液的测定,回收率为92.5%~96.5%。

柱前衍生化高效液相色谱法检测硫酸阿米卡星注射液中卡那霉素含量的改进

目的改进柱前衍生化一HPLC方法用于定量测定硫酸阿米卡星注射液中已知杂质卡那霉素。方法采用更低浓度的样品检测溶液，色谱柱：AgilentZORBAXSB—C18柱（4．6mm×150mm，5μm）；流动相：0．27％磷酸二氢钾溶液（用2．2％的氢氧化钾溶液调节pH值至6．5）-甲醇（30：70）；检测波长：340nm；进样量：50μl；流速：1．0ml／min；柱温：30℃。结果卡那霉素在2～80μg／ml（r=0．9998）浓度范围内呈线性关系，平均回收率为（93．08±9．65）％，样品稳定性提高。结论本法专属性强，灵敏度高，准确度好，为硫酸阿米卡星注射液的安全性评价提供了一个新的角度。

刚果红褪色法测定卡那霉素含量

根据硫酸卡那霉素与刚果红作用褪色的特性,建立一种利用可见光分光光度法测定硫酸卡那霉素含量的新方法。结果表明,在pH 5.8的HAc-NaAc缓冲溶液中,卡那霉素与刚果红络合后在480 nm处吸光度下降值与卡那霉素浓度(0.80~4.80 mg/L)线性关系良好,r^2=0.991 3。进一步的方法考察结果表明,该方法容易操作、结果可靠,可满足硫酸卡那霉素注射液的常规含量检测需要。

硫酸卡那霉素处理对香椿种子生理特性的影响

实验以香椿(Toona sinensis)种子为材料,研究硫酸卡那霉素处理对其生理特性的影响,研究的主要因素包括:过氧化物酶的活性、丙二醛的含量和电导率。结果表明:适当浓度的硫酸卡那霉素处理对香椿种子活力有很大的提升,低浓度或过高浓度影响不大。

二阶导数高速脉冲极谱法用于卡那霉素的定量分析

将二阶导数高速脉冲极谱法用于卡那霉素及其制剂的定量分析,先将卡那霉素与茆三酮缩合,产生具有极谱活性的>C=0再行测定,于-0.37V(VSAg/AgCl)处出现良好的导数峰,在0.46～2.30×10^(-3)mol/L范围内,浓度与峰电流呈线性关系。检测限为4.6×10^(-8)mol/L。