棉副产品型发酵全混合日粮对卡拉库尔羊生长性能、营养物质表观消化率及瘤胃发酵参数的影响

本试验旨在探究饲喂棉副产品型发酵全混合日粮对卡拉库尔羊生长性能、营养物质表观消化率及瘤胃发酵参数的影响。选取36只健康、2~3月龄、体重[(26.0±2.2)kg]相近的卡拉库尔羊公羔,随机分为3组,每组12只,每只羊作为1个重复。CK组饲喂100%棉副产品型全混合日粮,FFG组饲喂50%棉副产品型发酵全混合日粮+50%棉副产品型全混合日粮,EFG组饲喂80%棉副产品型发酵全混合日粮+20%棉副产品型全混合日粮。预试期15 d,正试期60 d,测定生长性能、营养物质表观消化率和瘤胃发酵参数。结果显示:1)饲喂50%或80%的棉副产品型发酵全混合日粮均能显著或极显著提高卡拉库尔羊的平均日增重(ADG)和干物质采食量(DMI)(P<0.05或P<0.01),且EFG组的DMI极显著高于FFG组(P<0.01)。2)饲喂80%的棉副产品型发酵全混合日粮能显著或极显著提高粗蛋白质(CP)和中性洗涤纤维(NDF)表观消化率(P<0.05或P<0.01)。3)饲喂80%的棉副产品型发酵全混合日粮能显著降低瘤胃液pH并显著提高乙酸浓度(P<0.05),饲喂50%或80%的棉副产品型发酵全混合日粮均能显著提高瘤胃液氨态氮和丙酸浓度(P<0.05)。综上所述,饲喂80%的棉副产品型发酵全混合日粮可以提高卡拉库尔羊的生长性能、CP和NDF表观消化率,促进瘤胃发酵。

多浪羊和卡拉库尔羊卵巢促卵泡素受体的定位研究

【目的】探讨多浪羊和卡拉库尔羊卵巢组织中FSHR基因表达变化规律。【方法】采用免疫组织化学SP方法对两种绵羊卵巢组织上FSHR进行定位研究。【结果】FSHR阳性细胞主要表达在颗粒细胞上,在卵母细胞和膜细胞上也有少量表达,两地方品种绵羊卵巢上原始卵泡和闭锁卵泡时期表达差异不显著(P>0.05),而在初级卵泡、次级卵泡时期和成熟卵泡上表达差异显著(P<0.05);对同种绵羊分析时又发现原始卵泡与其他卵泡之间FSHR阳性细胞表达差异显著(P<0.05),成熟卵泡时期阳性细胞表达显著(P<0.05)高于初级和次级卵泡。闭锁卵泡是阳性细胞率与其他各级卵泡差异极显著(P<0.01)。【结论】推测出多浪羊对FSH的敏感性高于卡拉库尔羊,表明FSHR含量越高繁殖率越高。FSHR可能也参与其他因子的调控。

新疆4个绵羊品种羊毛微量元素含量测定

利用原子吸收光谱法对羊毛中Fe、Cu、Zn、Co、S等5种微量元素含量进行了测定(国标法),探索微量元素对羊毛品质及绵羊营养状况的影响。分别采集了新疆4个不同地区4个绵羊品种共30只绵羊的体侧部羊毛,包括和田羊(纯平原型、纯山区型、新和田羊3个不同品系)、纯种卡拉库尔羊(卧蚕型、环型、肋型3个不同花型)、多浪羊、中国美利奴细型细毛羊等。结果表明:羊毛中Fe、Cu、S元素含量在不同品种之间差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01),而羊毛Zn、Co元素含量在不同品种之间差异不显著(P>0.05);与羊毛微量元素常值比较,各品种绵羊毛中Fe元素含量均较高,Cu元素含量均较低,Zn、Co、S元素含量在常值范围内;同一品种不同品系的和田羊,尽管生活在不同的县,其羊毛5种微量元素含量差异不显著(P>0.05);同一品种不同花型间卡拉库尔羊羊毛的5种元素含量差异也不显著(P>0.05)。

硬枝碱蓬对卡拉库尔羊生长性能和血液生理生化指标的影响

旨在研究日粮添加硬枝碱蓬对卡拉库尔羊生长性能和血液生理生化指标的影响。选择8只健康卡拉库尔羊,随机分为对照组和试验组,每组4只。对照组饲喂基础饲粮,试验组日粮添加硬枝碱蓬,试验期30d。研究结果显示,日粮添加硬枝碱蓬可显著提高卡拉库尔羊的生长性能;显著提高血液中血红蛋白质量浓度、平均红细胞血红蛋白质量浓度、血小板数、红细胞体积分布密度和总蛋白、球蛋白质量浓度(P<0.05);极显著提高血液白细胞数、乳酸脱氢酶活性和钙、磷浓度(P<0.01);显著降低血液血小板体积分布宽度、白球比和尿素浓度(P<0.05);极显著降低血液平均血小板体积、大血小板比率、嗜碱性粒细胞绝对值、嗜碱性粒细胞百分比、甘油三酯、总胆红素、肌酐、尿酸浓度和碱性磷酸酶活性(P<0.01);虽可增加血液红细胞数、红细胞压积、平均红细胞血红蛋白质量、谷草/谷丙、葡萄糖浓度、钾浓度、钠浓度,可降低血液平均红细胞体积、血小板压积、谷丙转氨酶活性、谷草转氨酶活性、谷氨酰氨转移酶活性、肌酸激酶活性、总胆固醇浓度、氯浓度、镁浓度,但差异均不显著(P>0.05)。由此可见,日粮添加硬枝碱蓬可提高卡拉库尔羊的生长性能及抗病能力,增强卡拉库尔羊的运动能力、环境适应能力、呼吸能力、抗应激能力、营养状况及肉质,降低卡拉库尔羊血脂,有效保护卡拉库尔羊肝脏、肾脏。

甘草提取物对卡拉库尔羊体外瘤胃发酵参数的影响

本试验以3只健康的卡拉库尔羊为瘤胃液供体,采集瘤胃液进行体外发酵培养,试验设计为基础日粮中分别添加不同来源样组:对照组(G0)、10%胀果甘草粗提物组(G1)、10%刺果甘草粗提物组(G2)、10%刚果甘草粗提物(G3)、10%甘草原样(G4);分别添加不同水平甘草提取物组:0%组(Z0)、0.5%组(Z1)、1%组(Z2)、3%组(Z3)、5%组(Z4)、7%组(Z5),研究其对瘤胃发酵参数:pH、挥发性脂肪酸(乙酸、丙酸、丁酸)、产气量、氨态氮浓度(NH3-N)的影响。结果显示,本试验添加的G1、G2、G3、G4组在一定程度上均可以降低瘤胃产气量和乙酸产量;添加不同剂量的甘草粗提取物时,Z3组的添加剂量使瘤胃pH在正常范围,同时对产气量无显著影响,乙酸/丙酸比值为最低。

新疆4种绵羊羊毛氨基酸含量测定

为了研究遗传及环境对羊毛生产性状的影响,利用高效液相色谱法测定了新疆地区和田羊、卡拉库尔羊、多浪羊、中国美利奴羊4个绵羊品种羊毛中的17种氨基酸含量,探索不同品种绵羊间和同一品种不同品系绵羊间羊毛氨基酸含量的差异。结果表明,和田羊羊毛的氨基酸总含量显著高于多浪羊羊毛,差异显著(P<0.05);其他品种间氨基酸总量差异不显著。多浪羊羊毛中的Asp、Ser、Glu、Arg、Thr、Ala、Pro、Val、Lys、Ile、Leu、Phe等氨基酸含量均低于其他品种;卡拉库尔羊羊毛只有Cys含量高于其他品种,Ser、Gly、Thr、Pro、Tyr等氨基酸含量均低于其他品种。各品种羊毛的螺旋比值(促螺旋氨基酸含量/阻螺旋氨基酸含量),中国美利奴为0.90,卡拉库尔羊为0.79,和田羊为0.77,多浪羊为0.75。结果表明,和田羊氨基酸总含量高于其他品种,中国美利奴螺旋比值高于其他品种,卡拉库尔羊Cys含量高于其他品种。

甘草提取物对卡拉库尔绵羊血液抗氧化性能的影响

【目的】研究甘草提取物对卡拉库尔绵羊血液抗氧化性能的影响。【方法】选取健康且体质量相近的6只卡拉库尔绵羊,平均体质量为18.65kg/只,随机分为试验组和对照组,分别饲喂添加甘草提取物的基础日粮(甘草提取物添加量150mg/kg)及基础日粮,在正试期的第15,30和45天时静脉采血,分离血清和血浆,检测血液中总抗氧化能力(T-AOC)、羟自由基(OH.)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)的活性。【结果】试验组卡拉库尔绵羊的T-AOC、GSH-PX、T-SOD活性显著高于对照组(P<0.05),而OH.试验组显著低于对照组(P<0.05),试验组的MDA含量与对照组相比差异不显著(P>0.05)。【结论】甘草提取物可提高卡拉库尔绵羊的抗氧化能力。

新疆卡拉库尔羊Fas基因原核表达载体的构建及表达

根据GenBank的羊Fas细胞凋亡因子序列设计1对特异性引物,将EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点引入到引物两端,同时加上保护性碱基。利用RT-PCR技术,从新疆卡拉库尔羊外周血淋巴细胞总RNA中扩增出特异性基因片段。将分离纯化后的PCR产物与pMD-18T载体进行连接,利用双酶切反应与菌液PCR对阳性重组克隆进行鉴定筛选,然后进行序列测定。使用原核表达载体pET28a来完成Fas的定向克隆,成功构建重组融合表达质粒pET-28a-Fas,然后将质粒转化至E.coli BL21感受态,设置不同IPTG浓度和诱导温度,选择最佳的表达条件,然后初步纯化重组融合蛋白。结果表明,在pET28a表达载体中,Fas基因的插入方向和读码框均正确;同时Fas基因也完成在E.coli BL21融合表达的目的,融合蛋白分子质量为39.7ku。

卡拉库尔羊瘤胃液对几种秸秆饲料体外降解率的研究

在厌氧环境、适宜温度、恒定pH值条件下,模拟卡拉库尔羊瘤胃环境,对3种农作物秸秆(棉花秸秆、稻草、玉米秸秆)进行离体消化试验。采用批次培养法,在培养后4、8、12、24、48h分别测定干物质(DM)、中性洗涤可溶物(NDS)、半纤维素(HC)、纤维素(CEL)体外降解率。结果表明:①“玉米秸秆+4%尿素”组比玉米秸秆组DM、NDS、HC、CEL体外降解率分别降低3.12、6.29、4.74和0.2个百分点,这说明添加尿素能引起瘤胃液对粗饲料体外降解的抑制。②棉叶、棉花秸秆上1/3细茎、棉桃壳组48h干物质降解率(DMD48)分别为65.47%、36.66%和31.32%,这说明棉叶组的体外降解率高于棉桃壳组及棉花秸秆上1/3细茎组的体外降解率。

钼中毒对卡拉库尔羊血清中SOD、CP、XOD和POD活性的影响

将10只体重为(21±3)kg的健康卡拉库尔羊随机分成2组,每组5只,试验组按每天30 mg/kg体重灌服钼酸铵,对照组灌服相同体积的去离子水,每隔15 d检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、铜蓝蛋白(CP)、黄嘌呤氧化酶(XOD)和过氧化物酶(POD)的活性。结果显示,试验组的血清中SOD、CP、XOD、POD活性显著低于对照组(P﹤0.05)。因此,血清中SOD、XOD、CP、POD活性可作为绵羊钼中毒诊断的敏感指标。

精料补饲水平对卡拉库尔羊瘤胃内环境的影响

[目的]研究不同精料补饲水平，对卡拉库尔羊瘤胃内环境参数的影响。[方法]选取24只健康、体重相近的卡拉库尔羊，随机分为A、B、c3组，分别补饲300、400和500g／（只·d）3种不同水平的精料，其他处理完全相同，预试期15d，正试期60d，对瘤胃液pH、NH3-N和VFA进行测定。[结果]3组试羊瘤胃液pH值在6.04-7.49之间，各组试羊瘤胃液pH变化规律表现为先降低后上升；瘤胃液NH3-N浓度在25.84-26.15mg／100ml之间，处于正常范围内，变化趋势为采食后3h浓度达到峰值，之后逐渐下降，到采食后5h，降至最低，随后又略有回升；VFA随精料补饲水平提高而升高，乙酸与丙酸比例随精料水平的提高而降低。[结论]瘤胃内环境参数随着精料添加水平的不同而有所差异。

免疫组化法检测促黄体素受体在多浪羊和卡拉库尔羊卵巢上的分布

为从形态学角度理解内分泌调节过程,揭示促黄体生成素(luteotropic hormone,LH)对雌性哺乳动物卵巢调节作用机制,试验采用免疫组织化学SP方法研究促黄体生成素受体(luteotropic hormone receptors,LHR)在多浪羊和卡拉库尔羊卵巢组织中的分布与表达,分别选取相邻的5张连续切片,光镜观察、图像分析。结果显示,多浪羊与卡拉库尔羊的LHR阳性物质主要见于膜细胞、卵母细胞、颗粒细胞和血管周围间质,尤其在膜细胞和卵泡颗粒细胞的胞质中分布最多。原始卵泡卵母细胞中便有LHR受体阳性物质分布,在各级卵泡中LHR阳性细胞数量和染色强度随卵泡发育呈正向增加趋势。

湖羊与卡拉库尔羊瘤胃菌群结构差异性比较分析

本试验旨在利用高通量测序方法研究饲喂相同饲粮条件下湖羊与卡拉库尔羊瘤胃菌群结构的差异性。选取体重[(35±2)kg]相近的健康卡拉库尔羊和湖羊各6只,饲喂相同饲粮,预试期为30 d,正试期3 d,于正试期的第1~3天通过口腔采集瘤胃液,应用PacBio测序技术对细菌16S rRNA基因进行高通量测序。结果显示:1)卡拉库尔羊瘤胃菌群多样性和丰富度极显著高于湖羊(P<0.01)。2)湖羊与卡拉库尔羊的优势菌门均为厚壁菌门和拟杆菌门。湖羊厚壁菌门的相对丰度显著高于卡拉库尔羊(P<0.05),拟杆菌门的相对丰度极显著低于卡拉库尔羊(P<0.01)。湖羊的优势菌属为奎恩氏菌属、丁酸弧菌属和克里斯滕森菌科_R-7_群,卡拉库尔羊的优势菌属为普雷沃氏菌属_1、克里斯滕森菌科_R-7_群和奎恩氏菌属。湖羊奎恩氏菌属的相对丰度极显著高于卡拉库尔羊(P<0.01),丁酸弧菌属的相对丰度显著高于卡拉库尔羊(P<0.05);而卡拉库尔羊克里斯滕森菌科_R-7_群和普雷沃氏菌属_1的相对丰度极显著高于湖羊(P<0.01)。3)湖羊在传染病(细菌)、免疫疾病、能量代谢以及折叠、分类和降解等生物代谢通路的富集高于卡拉库尔羊;而卡拉库尔羊在核苷酸代谢、复制和修复、氨基酸代谢、碳水化合物代谢、膜运输等生物代谢通路的富集高于湖羊。由此可见,湖羊卡与拉库尔羊的瘤胃菌群结构具有相似性,但在一些特异性菌属的相对丰度及生物代谢通路的富集上存在一定差异,这可能是卡拉库尔羊较湖羊对高粗饲料饲粮有更好适应性的原因之一。

棉花秸秆对绵羊生产性能和血清生化指标的影响

为了探究棉花秸秆对育肥羊生长性能和血清生化指标的影响,为其在反刍动物中利用提供基础研究资料,试验采用单因素随机设计,将体重、年龄相近的卡拉库尔羊羔羊72只随机分为6组,对照组饲喂不含棉源的基础日粮,试验1,2,3,4,5组分别添加3%、12%、18%、27%和39%棉花秸秆,各组能量、蛋白质含量基本不变,测定羊只体重指标、血清生化指标等。结果表明:从试验全期看,试验1,3组(添加3%、18%棉花秸秆)卡拉库尔羊日增重显著高于对照组(P<0.05),试验2,4,5组均低于对照组;日粮中添加≥27%棉花秸秆(试验4,5组)可使血清中丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性、尿素氮和三酰甘油含量增加,总蛋白和白蛋白含量下降,血清中钙含量降低而磷增加,钙磷比例失调,从而影响育肥效果。

补饲矿物元素对卡拉库尔羊血液及瘤胃液矿物元素含量的影响

选用3只装有永久瘘管的卡拉库尔羊,在日粮中添加Ca、Mg、Fe、Mn、Cu、Zn等矿物质元素,在饲喂矿物质元素的0d、5d、9d、12d分别采取瘤胃液和血液,测定瘤胃液及血液相应矿物质元素的含量,研究补饲矿物质对卡拉库尔羊血液及瘤胃液中矿物质含量的影响。试验结果表明:①瘤胃液Ca、Mg的含量在第5d时升为最高,之后有平缓下降趋势;Zn和Cu含量在第5d时有下降趋势,之后迅速恢复原有水平;Fe含量则有下降趋势。②血液中Cu含量变化不大,其余矿物质含量在血液中均有不同程度上升,其中Ca、Fe、Mn、Zn含量上升最为明显。

南疆绵羊FSHR基因第10外显子多态性检测及序列分析

为了研究多浪羊和卡拉库尔羊促卵泡素受体(FSHR)基因第10外显子的多态性及其与多浪羊胎次产羔数相关性,试验采用PCR-SSCP和直接测序的方法进行研究。结果表明:多浪羊和卡拉库尔羊FSHR基因第10外显子存在3个突变位点,分别为Arg 1 328 Lys、Gln 1 334 Pro和Asp 1 342Asn,均属于错义突变。在1 328位点有等位基因A和B,基因型仅为AA和AB;在1 334位点有等位基因C和D,基因型只有CD和DD;在1 342位点有等位基因E和F,基因型为EE、FF和EF。多浪羊与卡拉库尔羊在1 334位点基因型分布存在显著差异(P<0.05),其他两位点差异不显著(P>0.05);FSHR基因多态性与多浪羊胎次产羔数之间差异不显著(P>0.05),表明FSHR基因第10外显子对多浪羊产羔数没有显著影响(P>0.05)。

新疆卡拉库尔羊TNF-α原核表达及多克隆抗体的制备

【目的】克隆卡拉库尔羊TNF-α基因,在大肠杆菌中表达、纯化,并对TNF-α蛋白的抗原性进行分析。【方法】采用PCR技术扩增TNF-α基因核酸片段,并克隆入pET-28b表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)株中表达。用电洗脱法纯化目的蛋白,并用免疫印迹法分析纯化蛋白的抗原特异性。【结果】重组质粒在BL21(DE3)菌株中经IPTG诱导表达一个相对分子质量约为49 KD的融合重组蛋白,原核表达质粒pET-28b-TNF-α表达的目的融合蛋白是以可溶的形式存在。用纯化的pET-28b-TNF-α免疫家兔,在免疫后的第45 d,Western-blotting和琼脂糖扩散试验分析表明,表达的pET-28b-TNF-α能被家兔的阳性血清所识别。【结论】表达蛋白pET-28b-TNF-α具有较好的反应原性和免疫原性。

新疆卡拉库尔羊Fas基因重组蛋白包涵体的纯化及抗原性分析

目的:为了探明Fas基因重组蛋白是否保留天然蛋白的抗原性,为下一步大量制备基础诊断、预防、控制、治疗试剂奠定基础。本实验将Fas基因与原核表达载体pET-28a成功构建了重组融合表达质粒pET-28a-Fas然后转化至E.coliBL21(DE3)感受态当中,找到最佳表达条件,初步纯化了重组融合蛋白,通过对家兔免疫后的血清进行琼扩实验与蛋白质印迹实验分析其抗原性。结果表明,纯化后的包涵体有明显的条带,经测定融合蛋白分子量为39.7 KDa。结论:说明纯化效果好,优化融合蛋白表达量占菌体总蛋白的15.6%,并且证明Fas具有免疫原性和反应原性。

甘草提取物对绵羊瘤胃体外发酵及甲烷产量的影响

本试验旨在研究不同水平的甘草提取物对绵羊瘤胃体外发酵及甲烷产量的影响。选择3只安装有永久性瘤胃瘘管的卡拉库尔羊作为瘤胃液供体,通过体外产气法进行甘草提取物添加水平的筛选试验。以绵羊基础饲粮为底物,其中分别添加0(对照组)、0.5%、1.0%、3.0%、5.0%、7.0%的甘草提取物,分别培养6、9、12、15、18、21、24 h,研究其对瘤胃发酵参数(产气量、培养液pH、挥发性脂肪酸浓度、氨态氮浓度及甲烷产量)的影响,并应用多项指标综合指数进行评定。结果表明:24 h发酵结束时,5.0%组、7.0%组的产气量均显著低于对照组(P<0.05);甘草提取物对培养液pH和氨态氮浓度无显著影响(P>0.05);试验组乙酸、丙酸浓度(除0.5%组21 h)均低于对照组;发酵24 h结束时,7.0%组甲烷产量显著低于对照组(P<0.05);多项指标综合指数1.0%组>0.5%组>7.0%组>3.0%组>5.0%组。结果显示:本试验条件下,添加1.0%甘草提取物最有利于体外发酵。

饲粮非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维对卡拉库尔羊营养物质消化和瘤胃菌群结构的影响

本试验旨在研究饲粮非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维(NFC/NDF)对卡拉库尔羊营养物质消化率和瘤胃菌群结构的影响。试验选取18月龄、体况良好、体重[(35.0±3.3)kg]相近、装有永久性瘤胃瘘管的卡拉库尔羊(去势公羊)12只,随机分为4组,每组3只,分别饲喂4种饲粮,饲粮NFC/NDF分别为0.54(1组)、0.96(2组)、1.37(3组)、1.90(4组)。试验分为4期,Ⅰ期(1~26 d)、Ⅱ期(27~52 d)、Ⅲ期(53~78 d)和Ⅳ期(79~104 d)。试验每期均为预试期15 d,正试期11 d,其中消化试验8 d,瘤胃内容物收取3 d。各期均测定营养物质表观消化率和瘤胃菌群结构。结果表明:1)4期试验中,3组和4组干物质(DM)表观消化率显著高于1组和2组(P<0.05),有机物(OM)表观消化率除Ⅰ期3组和4组显著高于1组和2组(P<0.05)外,其余3期组间差异均不显著(P>0.05),NDF和酸性洗涤纤维(ADF)表观消化率均为3组最高,但组间差异不显著(P>0.05)。2)4期试验中,2组瘤胃菌群结构均与1组、3组和4组差异较大,不同时期同组的菌群结构分布相对集中。纤维降解菌属、半纤维降解菌属和淀粉降解菌属的相对丰度分别在2组、3组和4组达到最高。由此可知,饲粮NFC/NDF为1.37时,可提高营养物质消化率;NFC/NDF为0.96时,菌群结构改变较大,同组饲粮菌群结构未随试验期数发生太大改变;4期试验中,纤维降解菌、半纤维降解菌和淀粉降解菌在属水平上的相对丰度分别在NFC/NDF为0.96、1.37和1.90时达到最高。