柱切换HPLC测定血浆中消旋卡多曲的活性代谢物thiophine

目的 建立柱切换RP—HPLC测定消旋卡多曲的活性代谢物（thiophine，TP）浓度的方法。方法 采用Kromasil C18预柱（25mm×4．6mm，5μm）和分析柱（100mm×4．6mm,5μm），流动相均为0．02mol·L^-1磷酸二氢钾-乙腈（80：20）；取已加抗氧剂的血浆0．5ml，加入pH2．0的磷酸盐缓冲液酸化，经C18 SPE柱萃取后进样，在210nm处检测，按外标法定量。结果标准曲线在25．0～3．2×10^3g·L^-1范围内有良好的线性，最低定量限为25μg·L^-1，TP的保留时间为4．7min，日内RSD〈8％，日间RSD〈9．5％，方法回收率95％-115％。结论 所建方法快速简便，灵敏准确，适用于TP血药浓度的测定及卡多曲的药物动力学、生物利用度的研究。

HPLC-MS/MS法测定人血浆丙戊酸浓度的不确定度评定

目的对HPLC-MS/MS法测定人血浆中丙戊酸浓度的不确定度进行评定与分析。方法测定人血浆中丙戊酸浓度,用A类评定评价重复性测量引入的不确定度,用B类评定对对照品称量、对照品纯度、溶液配制、含药血浆配制、提取回收率、基质效应、标准曲线拟合和仪器测定引入的不确定度进行评定,并计算合成和扩展不确定度。结果当P=95%置信概率(k=2)时,人血浆中低(1200 ng/mL)、中(12000 ng/mL)、高(75000 ng/mL)质量浓度丙戊酸的扩展不确定度分别为345.09、589.73、2789.74 ng/mL。结论方法准确度高,适用于丙戊酸的药动学研究和血药浓度监测。不确定度主要来源于标准曲线拟合、基质效应和提取回收率,低浓度时标准曲线拟合引入的不确定度值较中、高浓度的高。设定合理的线性范围、优化提取方式和色谱条件等可提高测定结果准确性。

HPLC-MS法测定人血浆中替米沙坦及药代动力学研究

目的建立人血浆中替米沙坦浓度的HPLCMS分析方法,用以测定健康受试者口服替米沙坦制剂后的血药浓度,估算受试制剂和参比制剂的药代动力学参数,评价两种制剂的生物等效性和相对生物利用度。方法血浆中加入内标地西泮后,乙酸乙酯提取,HPLCMS分离、分析。色谱系统ShimadzuODS柱(150mm×46mm),流动相甲醇001mol/L醋酸铵溶液(70∶30,v/v),流速10ml/min,柱温30℃。质谱检测方式SIM。结果替米沙坦的线性范围为05～400ng/ml(r=09998),最低检测浓度达01ng/ml,提取回收率大于80%。受试制剂及参比制剂的生物半衰期分别为(197±30)h和(202±36)h,达峰时间分别为(14±04)h和(16±06)h,峰浓度分别为(1739±304)ng/ml和(1782±355)ng/ml。受试制剂的相对生物利用度为(1012±130)%。结论本法适用于替米沙坦的含量测定,统计学结果表明两种制剂具有生物等效性。

HPLC测定人血浆中的酮洛芬

目的 建立人血浆中酮洛芬的HPLC测定法。方法 内标为布洛芬 ,用甲醇直接沉淀人血浆中蛋白质 ,上清液在HypersilBDSC18色谱柱上 ,以甲醇 -水 (6 0∶4 0 ,冰醋酸调pH 4 .0 )为流动相进行分离 ,流速 1ml·min-1,在UV2 5 7nm处检测。结果 酮洛芬和内标分离完全且无其他干扰 ,保留时间分别为 7.4 13、9.4 0 7min。线性范围为 0 .15～ 2 0 μg·ml-1,r =0 .9999,日内RSD为 1.0 8%～ 6 .0 1% ,日间RSD 1.11%～ 3.0 3% ,回收率为 97.4 %～ 10 5 .0 % ,血浆中酮洛芬的最低检测浓度为 0 .0 5 μg·ml-1。结论 所用方法简便、准确、重复性好 ,可用于口服酮洛芬缓释片后的血药浓度检测。

HPLC-UV法测定人血浆中青霉胺浓度

目的建立人血浆中青霉胺浓度的HPLC测定方法,并用于人体药动学试验中青霉胺血药浓度测定。方法取血浆样品加入衍生化试剂DTNB,室温反应5 min,10%的高氯酸溶液沉淀蛋白,上清液进样分析。色谱柱:岛津VP-ODS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05 mol.L-1醋酸钠缓冲溶液(12:88),流速1.0 ml.min-1,检测波长320 nm,柱温25℃,进样量20μl。结果血浆中青霉胺在0.1～10.0 mg.L-1浓度范围内线性关系良好,定量下限为0.1 mg.L-1(S/N>10,n=5;RSD=6.4%,准确度为94.2%),在低、中、高浓度血浆样品日内、日间RSD均小于6%,准确度在92%～96%范围内,提取回收率>60%,且稳定(RSD<10%),符合生物样品分析要求。结论所建立的HPLC法样品前处理简便、操作简便、能满足青霉胺在人体内的药代动力学研究。

RP-HPLC法测定肾移植病人血浆中霉酚酸浓度及其应用

目的:建立反相高效液相色谱法测定血浆中霉酚酸浓度的方法。方法:采用美国Waters高效液相色谱仪,Symmetry C18(150mm×3.9mm,5μm)色谱柱,乙腈-0,05%磷酸(34:66)为流动相,流速1.0 mL·min-1,萘普生作内标。样品在酸性条件下用氯仿漩涡混合萃取浓集后手动进样,在254 nm波长下检测,按内标法定量。结果:标准曲线在0.1-40 mg·L-1范围内有良好线性,最低检测浓度为0.1 mg·L-1,方法回收率为98.3%-100.4%,萃取回收率为88.1%-92.4%,日内测定RSD为0.98%-1.5%,日间测定RSD为1.0%-4.4%。结论:本方法可用于肾移植患者霉酚酸的血药浓度测定和药动学研究。

RP-HPLC测定人血浆中洛伐他汀浓度及药动学研究

用ＲＰ－ＨＰＬＣ测定人血浆中洛伐他汀浓度。以甲醇－水（８３∶１７，Ｖ／Ｖ）为流动相，色谱柱采用ＨＹＰＥＲＳＩＬＢＤＳ－Ｃ１８（５μｍ）不锈钢柱，紫外２３７ｎｍ波长检测。血浆样品经环己烷－异丙醇（９５∶５）萃取浓缩后进样测定。洛伐他汀浓度在２．５～８０ｎｇ／ｍｌ范围内线性良好，ｒ＝０．９９６８。测定含洛伐他汀２０．０ｎｇ／ｍｌ的血浆样品，其日内（ｎ＝７）及日间（ｎ＝７）的ＲＳＤ分别为９．８％和８．５％。回收率平均为（１０１．３±５．５）％。测定了１０名健康志愿者单次ｐｏ洛伐他汀片剂８０ｍｇ后不同时间的血药浓度，计算了相应的药动学参数。

HPLC测定静脉给药后大鼠血清中5-氟尿嘧啶的含量

目的 建立HPLC用于测定微量 (5 0 μL)血清样品中 5 氟尿嘧啶 (5 Fu)的含量。方法 采用 2 5 0mm× 4.6mm (5 μm)C18色谱柱 ,流动相 5 %甲醇 ,流速 0 .7mL·min-1,紫外检测波长 2 70nm ,内标为对氨基苯甲酸。结果 本方法最低检测浓度为 2 0ng·mL-1,线性范围是 0 .1～ 5 0 μg·mL-1,日内和日间RSD分别是 2 .2 2 %～ 3.81% (n =4)和 2 .42 %～ 3.19% (n =4) ,萃取率为 90 .2 1%～ 95 .6 9%。用本方法成功地测定了大鼠在静脉给药后 5 Fu的时量曲线 ,并计算了药动学参数。结论 本方法简便、快速、灵敏度高、重现性好 ,可适用于 5 氟尿嘧啶的血药浓度测定和药动学的研究。

盐酸氨溴索血药浓度的RP-HPLC测定及其药物动力学研究

建立人血浆中盐酸氨溴索 (1)定量分析的 RP- HPL C新方法 ,研究 1缓释胶囊在健康人体内的药物动力学。血浆样品预处理采用碱化血浆、乙醚正提和稀盐酸反提两步操作 ,色谱柱为 YWG- ODS柱 ,流动相为甲醇 - 0 .0 1m ol/L p H7.0磷酸盐缓冲液 -四氢呋喃 (70∶ 30∶ 2 .5 ) ,检测波长 2 45 nm。 12名男性健康志愿者单次口服 1缓释胶囊 75mg后的体内过程呈一级吸收的二室开放模型 ,主要药物动力学参数分别为 :Cmax176 .46± 38.94ng/ ml、tmax3 .8±0 .6 h、MRT16 .17± 2 .77h、t1 /2 11.35± 2 .6 8h、AUC0→∞ 196 9.2 0± 40 6 .97ng· h/

人血浆中盐酸氟桂利嗪的HPLC测定及药代动力学研究

目的 :建立血浆中盐酸氟桂利嗪浓度的反相HPLC测定法 ,并用此方法研究盐酸氟桂利嗪在人体内的药代动力学。方法 :内标安定为内标 ,血浆经戊烷 -异丙醇、盐酸溶液、二氯甲烷等多步提取后 ,采用C18分析柱 ,以甲醇 -水 (含 0 0 2mol·L-1四丁基溴化铵 ) (74∶2 6 )为流动相 ,流速为 0 8mL·min-1;在紫外 2 5 4nm处检测。所得数据用 3p87药代动力学程序处理 ,求出有关的参数。结果 :盐酸氟桂利嗪在 2 34～ 15 0ng·mL-1范围内线性关系良好 (r =0 9985 ) ,最低检测浓度 2ng·mL-1;平均回收率 99 94%。应用本法对单剂量口服盐酸氟桂利嗪后的药代动力学进行了初步探讨。结果表明药时曲线符合一室药动学模型 ,药动学的主要参数t1/2 (Ka) =1 6 1h、t1/2 (Ke) =4 0 9h、tp=2 82h、Cmax=5 9 5 4ng·mL-1。结论 :本方法以安定为内标 ,灵敏、可靠 ,回收率高 ,结果准确 ,适用于临床血药浓度监测及药代动力学研究。

HPLC法测定大鼠血浆中色胺酮的浓度及药代动力学参数

目的建立测定血浆中色胺酮含量的HPLC法,并用于色胺酮在大鼠体内的药代动力学研究。方法采用ODSC18色谱柱(4.6 mm×250 mm),流动相为乙腈∶水(47∶53),流速为1.0 ml.min-1,检测波长为251 nm,柱温30℃,进样量20μl,内标物为桂皮醛。按56 mg.kg-1剂量给大鼠灌胃后,用HPLC法测定给药后不同时刻大鼠血浆中色胺酮的浓度。采用DAS 2.1.1软件分析,计算药动学参数。结果色胺酮在0.0183～1.1712 mg.L-1范围内线性关系良好(r2=0.999),最低定量限为0.02 mg.L-1。回收率大于95.0%,其日内、日间RSD均小于8%。大鼠灌胃色胺酮56mg.kg-1后,♀和♂T12分别为4.314和5.597 h,Tmax分别为5.2和4.6 h,Cmax分别为1.887和2.620 mg.L-1,AUC0→t分别为12.1和14.70 mg.h.L-1。结论本方法操作简便,准确,灵敏度高、重复性好,可用于色胺酮血药浓度检测及药代动力学研究。

HPLC测定人血浆中茴三硫浓度

目的:建立人血浆中茴三硫的 HPLC 测定方法。方法:用乙腈直接沉淀人血浆中的蛋白质,上清液在 Diamonsil ODS-C_(18)色谱柱(200mm×4.6mm,5μm)上,以甲醇-水(90:10)为流动相进行分离,流速1.0 mL·min^(-1),在346 nm波长处检测。结果:茴三硫与人血浆中的内源性物质完全分离且无其他干扰,保留时间约为3.7 min。线性范围为84～840 ng·mL^(-1),r=0.9999,高、中、低3种浓度血浆样品的日内 RSD 在2.3%～4.2%之间,日间 RSD 在2.6%～5.0%之间,回收率±SD(n=5)分别为95%±3.98%,95.74%±2.21%,98.78%±2.65%,血浆中茴三硫的最低定量浓度为84 ng·mL^(-1)。结论:所用方法简便、准确,重复性好,可用于茴三硫血浆样品的检测及药动学研究。

HPLC法测定白血病患者血浆中阿糖胞苷及其代谢物浓度

目的：建立测定阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）及其代谢产物阿糖尿苷（Ａｒａ－Ｕ）血药浓度的方法，并用于５例急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）患者血药浓度监测。方法：采用反相离子对高效液相色谱法，色谱柱： Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｃ１８柱（５ｍ，２５０ｍｍ × ４．６ｍｍ）；流动相：乙腈－甲醇－０．０１ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸盐缓冲液（ｐＨ４．０，含０．０１ ｍｏｌ·Ｌ－１戊烷磺酸钠）（４．５：１．５：９４，ｖ／ｖ／ｖ）；流速：１．0ｍｌ·ｍｉｎ－１；检测波长：２８０ｎｍ．结果：以峰面积外标法定量，线性范围：阿糖胞苷为０．２５-２５ｍｇ·Ｌ－１，阿糖尿苷为１－１００ｍｇ·Ｌ－１。最低检测浓度阿糖胞苷为０．１ｍｇ·Ｌ－１，阿糖尿苷为０．２ｍｇ·Ｌ－１。日内、日间差阿糖胞苷小于９％和１１％，阿糖尿苷小于１％和３％。绝对回收率为９９-１０５％。结论：该方法简便，快速，灵敏度和准确度较高。

液-液萃取RP-HPLC法测定人血浆中佐米曲普坦的浓度

目的:建立RP-HPLC法测定人血浆中佐米曲普坦浓度。方法:以替硝唑为内标,血浆样品经液-液萃取前处理后,选用Hypersil C_(18)色谱柱(5μm,200mm×5.0mm),乙腈-磷酸盐缓冲液(0.05mol·L^(-1)磷酸二氢钠,用磷酸调pH至5.0)(15∶85)为流动相,室温下在223nm处进行测定。结果:测定佐米曲普坦血药浓度线性范围为1.92-66.14ng·mL^(-1),最低定量浓度1.92ng·mL^(-1);方法回收率为90.62%-105.7%,萃取回收率为71.70%-114.75%。结论:本法分离效果良好,灵敏度高,回收率高,日内、日间误差小,能满足于人体药代动力学及生物利用度研究。

大鼠血浆中的新藤黄酸HPLC测定及其药代动力学研究

目的建立测定大鼠血浆中新藤黄酸浓度的HPLC方法,并用于新藤黄酸在大鼠体内的药代动力学研究。方法以藤黄酸为内标,建立大鼠血浆中新藤黄酸的HPLC测定方法。采用该方法测定大鼠单剂量静脉注射1、2、4 mg.kg-1新藤黄酸后不同时间点大鼠血浆中的新藤黄酸的浓度,对其血药浓度-时间采用BABP 3.0软件拟合,计算药动学参数。结果血浆中新藤黄酸在0.07～18.0 mg.L-1浓度范围,其线性关系良好(r=0.999),定量下限为0.07 mg.L-1,提取回收率分别为大于70%,其日内、日间RSD均小于10%。新藤黄酸以1、2和4 mg.kg-1静脉给药后,在大鼠体内的T12分别为(43.61±0.61)、(46.07±2.11)和(46.73±1.14)min,AUC0-t分别为(158.52±6.27)、(211.13±9.33)和(361.37±14.97)min.mg.L-1。结论所建立的HPLC法样品前处理简便、操作简便、能满足新藤黄酸在大鼠体内的药代动力学研究。

HPLC测定大鼠血浆中1,8-二川芎嗪基大黄酸及其药代动力学研究

目的建立测定大鼠血浆中1,8-二川芎嗪基大黄酸浓度的HPLC方法,并对大鼠尾静脉注射给药1,8-二川芎嗪基大黄酸后,研究其在大鼠体内的药代动力学。方法采用大黄素为内标,血浆样品用甲醇沉淀蛋白后进行HPLC分析,流动相为甲醇-0.1%甲酸水(78∶22,V/V),流速为1.0m L·min-1,检测波长为275 nm。大鼠单剂量静脉注射2、4、8 mg·kg-11,8-二川芎嗪基大黄酸后,测定给药后不同时间点大鼠血浆中1,8-二川芎嗪基大黄酸的浓度,并对其血药浓度-时间曲线采用DAS 2.1软件拟合,计算药动学参数。结果 1,8-二川芎嗪基大黄酸在0.05-10.00 mg·L-1血浆浓度范围内线性关系良好(r=0.996 2),定量下限为0.05mg·L-1,提取回收率均大于88%,日内和日间差异RSD均小于6%,方法学考察均符合要求。1,8-二川芎嗪基大黄酸按2、4和8 mg·kg-1静脉注射给药后,在大鼠体内的T1/2分别为(68.35±1.36)、(69.32±2.21)、(69.32±2.03)min,AUC0-t分别为(101.03±24.9),(144.79±3.29),(231.92±19.30)min·mg·L-1。结论本实验所建立的HPLC方法操作简便、快速、专属性强,可用于1,8-二川芎嗪基大黄酸血药浓度分析及其药代动力学研究。

HPLC-MS/MS法测定人血浆中甲氧氯普胺的浓度

目的建立测定人血浆中甲氧氯普胺浓度的LC-MS／MS方法。方法采用Alltech Alltima C18色谱柱（2．1mm×50mm，3μm），以5mmol·L^-1乙酸铵-乙腈-甲醇（体积比为50：40：10）为流动相，流速为0．2mL·min^-1，血浆样品在碱性条件下液-液萃取，通过电喷雾离子化四极杆串联质谱，以多离子反应监测（MRM）方式进行检测。用于定量分析的离子对分别为m／z 300．20→m／z227．00（甲氧氯普胺）和m/z152．20→m／z 134．00（内标，苯丙醇胺）。结果甲氧氯普胺线性范围为0．5～200．0μg·L^-1，最低定量限为0．5μg·L^-1，平均回收率为（71．38±6．35）％，日内和日间精密度均小于15％。结论该法适用于临床药物浓度监测和药物动力学的研究。

HPLC-MS法测定血浆中氨氯地平的浓度及其药动学研究

目的：建立测定血浆中氨氯地平血药浓度的HPLC—MS法，为临床用药提供参考。方法：血浆中样品用乙酸乙酯提取，HypersilODS柱（4．6mm×150mm，5μm）为分析柱，甲醇-（10mM）醋酸铵水溶液（84：16，v／v）为流动相，氨氯地平的检测离子为[M＋Na]^＋，m／z431．4；内标哌罗匹隆检测离子为[M＋H]^＋，m／z427．5。结果：血浆中氨氯地平的线性范围为0．18～18．2μg·L^-1，批内、批间误差RSD均小于10％，绝对回收率在89．5％-95．2％。结论：本法测定血浆中氨氯地平血药浓度准确、简便，适用于氨氯地平药代动力学的研究。

替米沙坦片血药浓度的HPLC测定方法及其在健康人体的药动学研究

目的:建立高效液相色谱法测定人血浆中替米沙坦的药物浓度,并研究其在健康人体内的药动学.方法:采用高效液相色谱-荧光检测法,色谱柱为Hypersil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(45:55,pH5.8);流速为1.0ml·min-1;激发波长和发射波长分别为305nm和365 nm;进样量20μl;内标物为α-萘酚.结果:替米沙坦在2～1 024μg·L-1范围内线性良好(r=0.9999),回收率,日间、日内差均符合生物样品分析要求.10名健康受试者口服替米沙坦片80mg后的药动学结果表明,其体内过程符合二房室开放模型,主要药动学参数如下:Cmax为0.98±0.44mg·L-1;Tmax为0.83±0.45 h;T1/2α为1.67±1.26 h;T1/2β为26.00±14.43 h;T1/2kα为0.53±0.86h;AUC0-t为3.66±2.10 mg·h-1·L-1;AUC0～∞为3.98±2.40mg·h-1·L-1.结论:此方法便捷,准确,灵敏,适于替米沙坦血药浓度测定和药动学研究,本试验所得药动学参数可为临床合理用药提供理论依据.