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基于生物信息学分析筛选脊髓损伤后缺血缺氧关键基因和免疫浸润模式分析
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作者 朱利娟 李鑫 +3 位作者 马悦章 朱婧 朱智博 赵瑞 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第5期120-124,151,共6页
目的通过生物信息学方法筛选脊髓损伤(spina cord injury,SCI)后缺血缺氧相关基因(ischemic andhypoxia related genes,IAHRGs),并分析其免疫浸润模式。方法从Gene Expression Omnibus(GEO)下载脊髓损伤相关GSE5296,GSE47681和GSE21779... 目的通过生物信息学方法筛选脊髓损伤(spina cord injury,SCI)后缺血缺氧相关基因(ischemic andhypoxia related genes,IAHRGs),并分析其免疫浸润模式。方法从Gene Expression Omnibus(GEO)下载脊髓损伤相关GSE5296,GSE47681和GSE217797的基因表达谱,其中GSE5296,GSE47681样本作为测试集,GSE217797样本作为验证集,获取脊髓损伤与健康样本之间的差异表达基因(differentialy expressed genes DEGs)。在GeneCards数据库和MSigDB数据库筛选(IAHRGs)。DEGs和IAHRGs两部分取交集得到缺血缺氧相关的差异表达基因(ischemic andhypoxia related differentially expressed genes,IAHRDEGs)。基于IAHRDEGs通过LASSO模型和SVM分析共同筛选得到的关键基因。将关键基因进行Logistics回归分析并构建诊断模型。通过Nomogram分析诊断模型的诊断能力并绘制Logistic预测值的列线图。使用受试者工作特征(ROC)曲线评估诊断模型和关键基因对脊髓损伤的诊断价值。利用CIBERSORT工具分析疾病的免疫细胞浸润模式。结果共筛选IAHRGs 388个,脊髓损伤与健康样本间差异表达基因313个,其中表达上调312个,下调1个。取两者交集得到27个上调的IAHRDEGs。基于IAHRDEGs经LASSO模型及SVM分析共筛选5个脊髓损伤后缺血缺氧相关关键基因(Abca1,Casp1,Lpl,Procr,Tnfrsf1a)。Nomogram分析明确Logistics诊断模型效果良好。ROC曲线分析显示Casp1,Lpl,Tnfrsf1a的诊断效果较高(AUC>0.9),Abca1,Procr诊断效果次之(AUC:0.7~0.9),而Logistics Linear Predictors的诊断效果最佳(AUC=0.964)。CIBERSORT分析显示5个关键基因与8种免疫细胞(中性粒细胞、B淋巴细胞、浆细胞、M0巨噬细胞、CD4 T细胞、CD4滤泡细胞、Th17细胞、静止NK细胞)浸润相关。结论Abca1,Casp1,Lpl,Procr和Tnfrsf1a 5个关键基因可能与脊髓损伤后缺血缺氧发病密切相关,可以作为脊髓损伤后诊断、治疗的候选分子标志物。 展开更多
关键词 脊髓损伤 缺血缺氧关键基因 免疫浸润 生物信息学分析
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The regulatory effect of memantine on expression and synthesis of heat shock protein 70 gene in neonatal rat models with cerebral hypoxic ischemia 被引量:18
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作者 陈惠金 刘志伟 +3 位作者 周泽汉 蒋明华 钱龙华 吴圣楣 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2003年第4期558-564,共7页
To evaluate the neuroprotective effect of memantine, a non-competitive antagonist at the N-methyl-D-aspartate receptor, against hypoxic ischemia (HI) by exploring its regulation on the expression and synthesis of heat... To evaluate the neuroprotective effect of memantine, a non-competitive antagonist at the N-methyl-D-aspartate receptor, against hypoxic ischemia (HI) by exploring its regulation on the expression and synthesis of heat shock protein 70 (HSP70) gene in neonatal rat models with cerebral HI Methods Memantine was intraperitoneally injected at a dose of 20 mg/kg in neonatal rat models either before (PRE group) or after (POST group) induction of HI The expression and synthesis of the HSP70 gene and its corresponding product were determined by rapid competitive PCR and immunohistochemistry, respectively Results There was an increase in the expression of HSP70 mRNA two hours after induction of HI, which reached its peak at 48 hours, then decreased gradually The same expression occurred at relatively low levels in the control group Also, HSP70 synthesis was detected as early as 2h after HI, reached its peak between 48 and 72 hours, then declined over time After memantine administration, the expression of the gene and its synthesis of the corresponding product decreased significantly during the time intervals 24-72 h for the gene and 48-72 h for the product compared to the HI group Conclusion It was shown that HI is very sensitive to the expression of the HSP70 gene and synthesis of its corresponding product, which could be regulated by memantine The latter may have the ability to reduce brain damage; thus decreased HSP70 mRNA expression could be a marker for HI It is suggested that memantine can be a promising agent for neuroprotection against HI, although an overall and abstract assessment of memantine is required to see if it can be used on neonates clinically later on 展开更多
关键词 MEMANTINE heat shock protein 70 gene brain hypoxia-ischemia neonatal rat
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丹参对新生期大鼠缺氧缺血性脑损伤神经肽Y_(1-36)和降钙素基因相关肽的影响 被引量:22
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作者 洪新如 吴爱群 +1 位作者 由振东 陈新民 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期607-609,共3页
目的 :观察丹参对新生期大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBI)后不同时间血浆、桥延脑神经肽Y1 36 和降钙素基因相关肽免疫活性物质 (ir NPY、ir CGRP)含量的影响。方法 :7日龄大鼠随机分为HIBI组(A组 )、HIBI加丹参治疗组 (B组 )和假手术组 (C... 目的 :观察丹参对新生期大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBI)后不同时间血浆、桥延脑神经肽Y1 36 和降钙素基因相关肽免疫活性物质 (ir NPY、ir CGRP)含量的影响。方法 :7日龄大鼠随机分为HIBI组(A组 )、HIBI加丹参治疗组 (B组 )和假手术组 (C组 ) ,每组按不同时间各分成 4个小组。在新生期大鼠HI BI后即刻及其后每 12h向腹腔注射丹参注射液 ,每次 0 5ml。采用放射免疫分析法观察HIBI后即刻、12、2 4、4 8h血浆和桥延脑ir NPY、ir CGRP含量的变化。结果 :HIBI后不同时间血浆ir NPY、ir CGRP含量均显著升高 ;桥延脑ir CGRP、ir NPY含量不同程度升高或降低。应用丹参注射液后血浆、桥延脑ir NPY水平的上升被部分逆转。结论 :中枢及外周神经肽Y1 36 和降钙素基因相关肽参与HIBI的病理生理过程 ;丹参部分逆转新生大鼠HIBI后ir NPY水平的异常升高 ,可能是丹参促进损伤后脑功能恢复的作用途径之一。 展开更多
关键词 丹参 新生期大鼠 缺氧缺血性脑损伤 神经肽Y1-36 降钙素基因相关肽
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Bid基因在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的动态变化 被引量:4
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作者 王爱珍 李述庭 郭锡熔 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期121-122,共2页
目的 探讨Bid基因在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)中的动态变化。方法 通过建立新生大鼠HIBD动物模型 ,采用RT PCR技术检测缺氧缺血后不同时间点缺血侧脑组织中Bid基因表达的变化。结果 正常组中无Bid基因表达 ,缺氧缺血组Bid基... 目的 探讨Bid基因在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)中的动态变化。方法 通过建立新生大鼠HIBD动物模型 ,采用RT PCR技术检测缺氧缺血后不同时间点缺血侧脑组织中Bid基因表达的变化。结果 正常组中无Bid基因表达 ,缺氧缺血组Bid基因表达明显上调 ,且随着缺氧缺血后时间的延长 ,Bid基因表达呈动态变化缺氧缺血后 6h其表达开始增加 ,2 4h达高峰 ,48~ 72h有所回落。结论 脑缺氧缺血引起的神经细胞凋亡可能与Bid基因表达上调有关。 展开更多
关键词 脑缺氧 脑缺血 Bid基因 细胞凋亡
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缺血缺氧性脑性瘫痪鼠脑白质和脑皮层炎症细胞因子基因表达谱的特征 被引量:5
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作者 丁建伟 邰先桃 +5 位作者 熊磊 杨晓娇 贾杰 廖映烨 吴金峰 彭正羽 《成都医学院学报》 CAS 2012年第4期508-511,共4页
目的探讨脑性瘫痪(cerebral palsy,CP)发生的炎症细胞因子网络调控机制。方法 30只出生7日龄清洁级健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为2组:CP模型组和对照组,每组15只。应用一侧颈总动脉结扎结合缺氧的方法构建CP大鼠模型,即幼鼠结扎右... 目的探讨脑性瘫痪(cerebral palsy,CP)发生的炎症细胞因子网络调控机制。方法 30只出生7日龄清洁级健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为2组:CP模型组和对照组,每组15只。应用一侧颈总动脉结扎结合缺氧的方法构建CP大鼠模型,即幼鼠结扎右颈总动脉结合体积分数为0.08的O2与体积分数为0.92的N2缺氧环境的方法制作幼鼠CP模型。对照组仅切开幼鼠颈部皮肤后缝合皮肤伤口,未置于缺氧环境。幼鼠CP模型构建术后3w,采用足印步态重复间距试验、平衡木试验检测鼠的运动功能,进行行为学评价;取鼠脑组织行苏木精-伊红染色观察脑组织病理变化,以行为学评价和病理检测结果鉴定CP模型是否构建成功。分别取成功构建的CP模型组和对照组大鼠脑白质和脑皮层组织,应用炎症细胞因子与受体基因芯片进行基因表达检测,绘制基因表达谱,筛选有表达差异的基因。结果应用一侧颈总动脉结扎结合缺氧的方法成功建立了大鼠CP模型;与对照组相比,CP模型组脑白质和脑皮层组织中表达上调的促炎性反应细胞因子与受体基因分别有10个和8个(P<0.05),表达下调的抗炎细胞因子与受体基因分别有3个和2个(P<0.05)。结论 CP大鼠脑白质和脑皮层存在促炎症细胞因子基因表达上调,抗炎症细胞因子基因表达下调,从而导致促-抗炎性细胞因子网络和促-抗炎性反应体系平衡失调,这可能是CP发生中出现高促炎性反应状态的原因和新机制。 展开更多
关键词 脑性瘫痪 大鼠 缺氧缺血模型 基因芯片 炎症细胞因子与受体 脑白质 脑皮层
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地塞米松对脑缺氧缺血大鼠bid基因表达及细胞凋亡的影响 被引量:2
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作者 王爱珍 张振宇 +2 位作者 张元明 郭锡熔 李述庭 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期865-866,868,共3页
目的探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后bid基因表达及细胞凋亡的变化,地塞米松(DEX)对其的调控作用,从而阐明DEX预处理对缺氧缺血新生动物神经保护作用的可能机制。方法7 d龄SD大鼠24只。随机分成DEX组、9 g/L盐水组(NS组)、HIBD组... 目的探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后bid基因表达及细胞凋亡的变化,地塞米松(DEX)对其的调控作用,从而阐明DEX预处理对缺氧缺血新生动物神经保护作用的可能机制。方法7 d龄SD大鼠24只。随机分成DEX组、9 g/L盐水组(NS组)、HIBD组、健康对照组。DEX和NS组在缺血缺氧前12 h腹腔内分别注射DEX、等量NS。通过建立新生大鼠HIBD动物模型,取实验侧大脑半球,采用RT-PCR技术检测脑bid基因表达,采用Tunel法检测凋亡细胞。结果正常组无bid基因表达,HIBD组bid基因表达明显上调,凋亡细胞数明显增加(P<0.01);与HIBD组比较,DEX组bid基因表达明显下调,而凋亡细胞数明显减少(P<0.01)。结论脑缺氧缺血引起神经细胞凋亡可能与bid基因表达明显上调有关。DEX能通过下调bid基因表达,从而抑制细胞凋亡,起到神经保护作用。 展开更多
关键词 缺氧缺血 bid基因 细胞凋亡
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p-p38 MAPK在A_(2A)R敲除新生小鼠缺氧缺血脑区的表达及意义 被引量:3
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作者 任素伟 崔志慧 +4 位作者 黄托夫 范海玲 陈江帆 王小同 陈翔 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期36-42,共7页
目的:探讨p-p38 MAPK在腺苷A2A受体敲除(A2AR-/-)新生小鼠缺氧缺血脑区的表达及意义。方法:采用改良Rice法建立新生小鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型。A2AR-/-(KO)及同期野生型(A2AR+/+,WT)C57/BL6新生小鼠(7日龄)分别按照完全随机分组... 目的:探讨p-p38 MAPK在腺苷A2A受体敲除(A2AR-/-)新生小鼠缺氧缺血脑区的表达及意义。方法:采用改良Rice法建立新生小鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型。A2AR-/-(KO)及同期野生型(A2AR+/+,WT)C57/BL6新生小鼠(7日龄)分别按照完全随机分组方法分成假手术组及模型组,模型组按HIBD后取标本时间不同又分为造模后1 d组、3 d组和7 d组,共8个实验动物组,每组取小鼠8只,共64只。采用TUNEL结合尼氏染色检测神经细胞凋亡,采用免疫组织化学法检测活化caspase-3及p-p38 MAPK表达。同时,KO及同期WT小鼠分别取假手术组(SKO和SWT,n=10)及模型组(MKO和MWT,n=30)于HIBD后1 d同时进行新生鼠短期神经行为学评定。结果:(1)缺氧缺血后皮层及海马CA1区神经细胞凋亡、活化caspase-3及p-p38 MAPK表达均增加,造模后1 d为高峰;(2)A2AR敲除导致神经细胞凋亡及活化caspase-3表达增加,与同一时点的WT小鼠相比均有显著差异(P<0.01);p-p38 MAPK表达增加,其中,1 d及3 d后2种基因型小鼠间均有显著差异(P<0.01);(3)Pea-son相关分析显示,活化caspase-3表达与p-p38 MAPK表达呈显著正相关(皮层:r=0.957,P<0.01;海马CA1区:r=0.939,P<0.01)。结论:p-p38 MAPK可能参与了A2AR敲除增加新生小鼠脑缺氧缺血后神经细胞凋亡、加重脑损害的过程。 展开更多
关键词 受体 腺苷A2A 基因敲除 缺氧缺血 新生小鼠 细胞凋亡 天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶3 p38 MAPK
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腺病毒介导的人低氧诱导因子–1α治疗兔后肢缺血的安全性研究 被引量:2
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作者 陈建威 李明琰 +3 位作者 陈冬冬 裴静娴 王月刚 吴平生 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第6期947-949,共3页
目的:对腺病毒介导的人低氧诱导因子-1α(Ad-HIF-1α)治疗兔急性后肢缺血的安全性进行探讨。方法:(1)Ad-HIF-1α及腺病毒空载体(Ad-Blank)扩增、滴度测定。(2)建立兔急性后肢缺血模型,随机分为3组,每组6只,分别以Ad-HIF-1α(2.0×10... 目的:对腺病毒介导的人低氧诱导因子-1α(Ad-HIF-1α)治疗兔急性后肢缺血的安全性进行探讨。方法:(1)Ad-HIF-1α及腺病毒空载体(Ad-Blank)扩增、滴度测定。(2)建立兔急性后肢缺血模型,随机分为3组,每组6只,分别以Ad-HIF-1α(2.0×1010PFU)、Ad-Blank(2.0×1010PFU)和NS(0.5mL)肌注离断股动脉肌群,观察兔一般反应,术前及术后7、28d检查心电图和血常规、肝肾功能,术后28d处死动物行病理学检查。结果:(1)Ad-HIF-1α及Ad-Blank滴度分别达2.0×1013、1.5×1013Pfu/mL。(2)受试期兔一般情况好;3组兔血常规、肝肾功能指标在正常值范围,组间对比无显著差异(P>0.05);心电图正常;病理学检查未见癌细胞。结论:兔急性后肢缺血模型局部一次性转染2.0×1010PFU的Ad-HIF-1α,未见明显毒副反应;Ad-HIF-1α应用于兔是相对安全的。 展开更多
关键词 缺血 安全性 基因治疗 腺病毒载体 低氧诱导因子-1Α
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缺血缺氧与线粒体DNA编码细胞色素氧化酶基因损伤 被引量:11
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作者 柏干荣 陆松敏 《创伤外科杂志》 2004年第3期230-232,共3页
细胞色素氧化酶是线粒体呼吸链氧化磷酸化过程中的关键酶 ,缺血缺氧与线粒体DNA编码细胞色素氧化酶基因损伤关系密切。
关键词 缺血 缺氧 细胞色素氧化酶 DNA 线粒体 基因损伤
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大鼠脑缺血再灌注损伤后c-myc蛋白和mRNA表达及细胞凋亡的研究 被引量:4
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作者 高亮 杨涌杰 郑广顺 《山西医药杂志》 CAS 2005年第3期191-193,i001,共4页
目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后即早基因c- myc蛋白和c-mycmRNA表达及细胞凋亡的变化。方法 采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。应用免疫组织化学法、原位杂交法检测c -myc蛋白和mRNA表达 ,利用原位杂交法和转移酶介导d... 目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后即早基因c- myc蛋白和c-mycmRNA表达及细胞凋亡的变化。方法 采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。应用免疫组织化学法、原位杂交法检测c -myc蛋白和mRNA表达 ,利用原位杂交法和转移酶介导dUTP缺口末端标记法 (TUNEL)研究凋亡细胞的变化。结果 脑缺血再灌注后c -myc蛋白和c- mycmRNA表达较正常对照组及假手术组表达明显增强 ;凋亡细胞显著增多(P <0 . 0 1)。结论 局灶性脑缺血再灌注能够引起c- myc蛋白和mRNA表达增加 ,从而参与脑缺血再灌注损伤的发病机制 ,引发神经细胞凋亡。 展开更多
关键词 MRNA表达 C-MYC蛋白 大鼠 脑缺血再灌注损伤 局灶性脑缺血再灌注 细胞凋亡 原位杂交法 凋亡细胞 转移酶 即早基因
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降钙素基因相关肽对正常及模拟缺血缺氧心肌钙通道的作用及心肌细胞数学模型的仿真研究 被引量:7
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作者 商立军 臧益民 +3 位作者 董秀珍 王四旺 周士胜 谢安 《心脏杂志》 CAS 2001年第4期315-316,325,共2页
作者运用细胞培养、膜片钳和激光共聚焦技术 ,观察了降钙素基因相关肽 (CGRP)对正常及模拟缺血、缺氧心肌细胞钙通道的作用及其电生理离子机制 ,并利用计算机重建技术在心肌细胞通道动力学及电流重建等方面进行了探索性研究 ,得到了如... 作者运用细胞培养、膜片钳和激光共聚焦技术 ,观察了降钙素基因相关肽 (CGRP)对正常及模拟缺血、缺氧心肌细胞钙通道的作用及其电生理离子机制 ,并利用计算机重建技术在心肌细胞通道动力学及电流重建等方面进行了探索性研究 ,得到了如下提示性结论 :1CGRP对心肌的保护作用有赖于适当剂量和浓度 ;2本课题建立的急性心肌细胞分离方法 ,能够得到具有正常电生理特性的耐钙心肌细胞 ,是膜片钳实验和激光扫描共聚焦技术测定胞内钙的基础 ;3CGRP对急性缺血、缺氧心肌细胞具有保护作用 ,在急性缺血、缺氧时 ,急性分离的心肌细胞胞内钙离子浓度降低 ,CGRP可引起胞内钙浓度稍微升高 ,且 CGRP可改善因急性缺血、缺氧引起的胞内钙浓度的降低 ,其机制有待于进一步探讨 ;4CGRP能促使正常及模拟缺血缺氧状态下豚鼠心室肌细胞 ICa内流的增加 ,是 CGRP正性作用的主要离子机制 ;CGRP对钙通道的作用机制还有待进一步研究 ;5本课题建立的对几种离子电流的计算机重建方法 ,提示可以被用来讨论离子电流机制 。 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽 缺血 缺氧 急性分离 心肌细胞 钙通道 离子电流 数学模型
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脑缺氧缺血致新生大鼠脑皮质、海马组织中c-fos基因的表达 被引量:1
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作者 丁艳洁 汤云珍 +1 位作者 蒋犁 李海浪 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期66-68,共3页
目的 研究缺氧缺血后新生大鼠脑皮质、海马组织中c fos基因的表达。方法 利用新生大鼠脑缺氧缺血模型 ,采用RT PCR技术与免疫组化方法 ,观察缺氧缺血后皮质、海马组织中即早基因c fosmRNA及c fos蛋白的表达。结果 与对照组比较 ,实... 目的 研究缺氧缺血后新生大鼠脑皮质、海马组织中c fos基因的表达。方法 利用新生大鼠脑缺氧缺血模型 ,采用RT PCR技术与免疫组化方法 ,观察缺氧缺血后皮质、海马组织中即早基因c fosmRNA及c fos蛋白的表达。结果 与对照组比较 ,实验组缺氧缺血后 0~ 1h ,结扎侧皮质与海马c fos基因的mRNA表达增加 ,2h后逐渐回至对照水平。缺氧缺血后 2~ 4h结扎侧皮质与海马的阳性细胞率明显升高 ,与对照组相比有显著性差异 (P <0 .0 5 )。与c fosmRNA的表达高峰相比 ,c fos蛋白的表达延迟 1~ 2h。结论 c fos基因表达上调可能参与诱发缺氧缺血后皮质、海马脑损伤。 展开更多
关键词 脑缺氧 脑缺血 新生大鼠 FOS基因 脑皮质 海马组织
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Relationship between c-fos gene expression and delayed neuronal death in rat neonatal hippocampus following hypoxic-ischemic insult 被引量:1
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作者 蒋犁 丁艳洁 汤云珍 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2001年第5期72-75,109,共5页
Objective To explore the mechanism of perinatal hypoxia-ischemia encephalopathy, we studied the expression of the c-fos gene and its relationship with delayed neuronal death in a rat model.Methods Cerebral hypoxia-isc... Objective To explore the mechanism of perinatal hypoxia-ischemia encephalopathy, we studied the expression of the c-fos gene and its relationship with delayed neuronal death in a rat model.Methods Cerebral hypoxia-ischemia was produced in 7-day-old SD rats using the Rice model, Reverse transcription PCR (RT-PCR), immunohistochemistry and terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) were used to detect the expression of c-fos gene and cell apoptosis in the hippocampus.Results The selective expression of c-fos and delayed cell apoptosis were observed in the hypoxiaischemia hippocampus. Expression of the c-fos gene was seen in the CA4 and cingulate sulcus neurons, and apoptosis was observed in the CA1 neurons.Conclusion Transient expression of the c-fos gene may induce cerebral cell apoptosis, and may have complex relations with delayed cell death. 展开更多
关键词 cerebral hypoxia · cerebral ischemia · c fos gene
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丹参酮Ⅱ_A治疗肾缺血-再灌注损伤及对缺氧诱导因子-1α表达的影响 被引量:2
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作者 陈宗平 梁国标 +3 位作者 曹瑞 杨垒 杨亦彬 谢智慧 《贵州医药》 CAS 2010年第4期302-307,共6页
目的探讨丹参酮ⅡA治疗肾缺血-再灌注损伤及其对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法选用Wistar大鼠66只,随机分为正常组、缺血组、缺血-再灌注组(1h、3h、5h)、丹参酮ⅡA组(1h、3h、5h)及假手术组(1h、3h、5h)。每组6只。各组... 目的探讨丹参酮ⅡA治疗肾缺血-再灌注损伤及其对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法选用Wistar大鼠66只,随机分为正常组、缺血组、缺血-再灌注组(1h、3h、5h)、丹参酮ⅡA组(1h、3h、5h)及假手术组(1h、3h、5h)。每组6只。各组均先切除右肾,取左肾研究。取左肾部分皮髓质用4%的多聚甲醛固定,进行切片HE染色及免疫组化检测各组肾HIF-1α蛋白的表达水平,另一部分采用荧光定量PCR检测各组肾HIF-1α mRNA的表达水平。取左肾后立即通过下腔静脉采血,检测MDA、TNF-α、Urea及Scr。结果 (1)Urea、HIF-1α蛋白及HIF-1α mRNA分别在假手术组1h、3h、5h增高,与正常组比较,差异有显著意义(P<0.05)。(2)Urea、Scr、MDA、TNF-α分别在正常组、缺血组、缺血-再灌注组(1h、3h、5h)增高(P<0.05)。HIF-1α mRNA在缺血组呈高表达,缺血-再灌注组(1h、3h、5h)呈低表达。HIF-1α蛋白在缺血组和缺血-再灌注组(1h、3h、5h)均呈高表达。(3)Urea、Scr、MDA、TNF-α、HIF-1α蛋白表达水平在丹参酮ⅡA组(1h、3h、5h)均较缺血-再灌注组降低(P<0.05),而HIF-1α mRNA表达水平在丹参酮ⅡA组(1h、3h、5h)增高(P<0.05)。(4)HE染色:与正常组比较,假手术组、缺血组变化不明显,其余各组均有不同程度肾小球、肾间质充血,肾小管上皮细胞水肿、细胞内玻璃样变及脂肪变性。缺血-再灌注组肾小管腔内蛋白管型明显。丹参酮ⅡA组仅个别标本存在蛋白管型,水肿减轻。结论丹参酮ⅡA可减轻肾缺血-再灌注损伤,可增强HIF-1α mRNA的表达和降低HIF-1α蛋白的表达。 展开更多
关键词 缺血-再灌注损伤 缺氧诱导因子-1Α 丹参酮ⅡA 肾基因表达
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沉默caspase-3基因影响骨髓间充质干细胞的增殖和凋亡 被引量:4
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作者 刘家良 华平 +4 位作者 杨淞然 陶俊 江慧琦 王萌 杨艳旗 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第14期2480-2487,共8页
背景:缺血缺氧的心肌微环境导致植入的细胞存活率低。目的:观察沉默caspase-3基因对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和体外缺血缺氧环境下凋亡的影响。方法:构建靶向caspase-3的shRNA重组慢病毒并转染骨髓间充质干细胞为转基因组,以正常细胞... 背景:缺血缺氧的心肌微环境导致植入的细胞存活率低。目的:观察沉默caspase-3基因对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和体外缺血缺氧环境下凋亡的影响。方法:构建靶向caspase-3的shRNA重组慢病毒并转染骨髓间充质干细胞为转基因组,以正常细胞组和空载体组做对照,采用MTS法检测各组细胞增殖情况。建立缺血缺氧模型,real-time PCR和免疫组织化学分别检测缺血缺氧环境各组细胞的caspase-3mRNA和蛋白表达水平,应用流式细胞术检测不同缺血缺氧时间点(0,6,12,24,48h)各组细胞的凋亡率。结果与结论:重组慢病毒成功转染骨髓间充质干细胞,且细胞增殖活性升高(P<0.05)。缺血缺氧环境下,转基因组细胞caspase-3在mRNA和蛋白表达水平相比对照组下降(P<0.05)。沉默caspase-3能显著降低骨髓间充质干细胞的凋亡率(P<0.05),且随着缺血缺氧时间的延长凋亡率缓慢升高。结果提示,沉默caspase-3能加快骨髓间充质干细胞的生长速度和提高在体外缺血缺氧环境下的抗凋亡能力。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 骨髓间充质干细胞 基因沉默 CASPASE-3 基因 细胞增殖 凋亡 慢病毒 缺血缺氧 shRNA 省级基金 干细胞图片文章
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缺氧缺血性脑病新生儿外周血淋巴细胞钟基因表达的变化 被引量:2
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作者 李永富 冯星 《中国医学创新》 CAS 2015年第10期11-14,共4页
目的:通过比较足月缺氧缺血性脑病患儿与正常足月新生儿外周静脉血中淋巴细胞(Peripheral blood lymphocytes cell,PBLC)中钟基因Clock m RNA、Bmal1 m RNA含量水平的变化,研究探讨HIE所致的昼夜节律紊乱中对钟基因的影响。方法:采用半... 目的:通过比较足月缺氧缺血性脑病患儿与正常足月新生儿外周静脉血中淋巴细胞(Peripheral blood lymphocytes cell,PBLC)中钟基因Clock m RNA、Bmal1 m RNA含量水平的变化,研究探讨HIE所致的昼夜节律紊乱中对钟基因的影响。方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应(Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)测定32例缺氧缺血性脑病患儿(HIE组)与24例正常足月新生儿(对照组)外周血淋巴细胞中Clock m RNA、Bmal1 m RNA的含量,并比较各组之间的差异。结果:HIE组外周血淋巴细胞中Clock m RNA和Bmal1 m RNA的水平均低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),HIE组外周血淋巴细胞中Clock m RNA、Bmal1 m RNA含量的变化趋势基本一致。结论:HIE患儿PBLC中Clock m RNA、Bmal1 m RNA表达存在异常,两者可能在缺氧缺血后昼夜节律紊乱的发生起着一定的作用。 展开更多
关键词 脑缺氧 脑缺血 新生儿 外周血淋巴细胞 钟基因
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低氧诱导VEGF基因表达载体治疗家兔肢体缺血性疾病的实验研究 被引量:1
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作者 殷爱红 武文琦 +2 位作者 崔世军 滕旭 郑少鹏 《首都医科大学学报》 CAS 2012年第3期356-360,共5页
目的探讨低氧诱导血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因表达载体对家兔肢体缺血性模型的基因治疗效果。方法通过切除髂外动脉远端和股动脉分支制作家兔左后肢缺血模型,术后立即将含VEGF基因的低氧诱导表... 目的探讨低氧诱导血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因表达载体对家兔肢体缺血性模型的基因治疗效果。方法通过切除髂外动脉远端和股动脉分支制作家兔左后肢缺血模型,术后立即将含VEGF基因的低氧诱导表达载体6HRE-pcDNA-VEGF165多点注射至患侧肌肉内,并于不同时间点进行后肢胫动脉血压测量和动脉血管造影。结果与对照组相比,应用低氧诱导VEGF基因表达载体的基因治疗组胫动脉血压恢复快;动脉血管造影显示基因治疗组动脉充盈早于对照组,新生血管多于对照组,早于对照组建立侧支循环。结论低氧诱导VEGF基因表达载体可促进家兔肢体缺血模型新生血管的形成,改善缺血肢体的血液循环。 展开更多
关键词 低氧诱导表达载体 血管内皮细胞生长因子 肢体缺血 基因治疗
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下调PTEN基因对全脑缺血再灌注大鼠神经元损伤的保护作用研究
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作者 申崇标 陈力学 +3 位作者 刘宝松 周冀英 曾照芳 邵阳 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期826-828,共3页
目的探讨下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)对全脑缺血再灌注大鼠神经元损伤的保护作用。方法 60只SD大鼠随机分为正常对照组(转染脂质体)、pshGFP组(转染pshGFP质粒)、pshRNApten治疗组(转染pshRNApten质粒),每组20... 目的探讨下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)对全脑缺血再灌注大鼠神经元损伤的保护作用。方法 60只SD大鼠随机分为正常对照组(转染脂质体)、pshGFP组(转染pshGFP质粒)、pshRNApten治疗组(转染pshRNApten质粒),每组20只,各组分别于再灌注后3d(6只)、7d(7只)、14d(7只)三个时间点进行观察。正常对照组与pshGFP组分别注射脂质体与pshGFP质粒,pshRNApten治疗组于海马局部注射pshRNApten质粒。注射2d后,采用四动脉结扎法建立大鼠全脑缺血再灌注模型。利用RT-PCR和免疫组化法检测海马神经元PTEN基因的表达;采用HE和Nissl染色检测神经元损伤情况;采用TUNEL法检测神经元凋亡情况。结果 pshRNApten治疗组海马神经元PTEN基因的mRNA和蛋白表达量均较正常对照组明显下降(P<0.05)。pshRNApten治疗组海马神经元损伤和变性程度均明显轻于pshGFP组大鼠,海马TUNEL染色阳性细胞数也明显少于psh-GFP组大鼠(P<0.05)。结论下调PTEN能有效缓解由缺血再灌注所致的神经元损伤。 展开更多
关键词 基因 PTEN 缺氧缺血 再灌注 神经元
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围产期缺血缺氧对新生大鼠肺表面活性蛋白A、B基因表达的影响
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作者 蔡栩栩 杜悦 +1 位作者 高红 韩玉昆 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期98-100,共3页
目的 :研究围产期缺血缺氧对新生大鼠肺表面活性蛋白A、B(SP A ,SP B)基因表达的影响 ,探讨围产期缺血缺氧新生大鼠肺损伤机制。方法 :通过结扎孕鼠一侧子宫角血管 (其另一侧宫内胎鼠作为对照 ) ,建立围产期缺血缺氧动物模型。采用RT PC... 目的 :研究围产期缺血缺氧对新生大鼠肺表面活性蛋白A、B(SP A ,SP B)基因表达的影响 ,探讨围产期缺血缺氧新生大鼠肺损伤机制。方法 :通过结扎孕鼠一侧子宫角血管 (其另一侧宫内胎鼠作为对照 ) ,建立围产期缺血缺氧动物模型。采用RT PCR半定量分析法观察不同程度缺血缺氧新生大鼠肺组织SP A、SP BmRNA的表达。结果 :正常 2 1d胎鼠肺组织SP A、SP BmRNA已有明显的表达 ,宫内缺血缺氧 2 0min时 ,新生大鼠肺组织SP A、SP BmRNA表达减弱 ,并随缺血缺氧时间的延长而逐渐加重。结论 :围产期缺血缺氧致新生大鼠SP A、SP 展开更多
关键词 缺血 缺氧 肺损伤 肺表面活性蛋白A、B 基因 围产期 新生大鼠
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缺氧缺血后海马组织c-Fos基因表达与细胞凋亡
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作者 丁艳洁 汤云珍 +1 位作者 李海浪 蒋犁 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2001年第8期581-582,共2页
目的 研究缺氧缺血后海马组织中c Fos基因的表达及效应。方法 利用新生儿缺氧缺血模型 ,采用RT PCR技术与DNA电泳方法 ,观察缺氧缺血后海马组织中即刻早基因c FosmRNA的表达 ,及后期的细胞凋亡。结果 对照组海马c Fos的mRNA低水平表... 目的 研究缺氧缺血后海马组织中c Fos基因的表达及效应。方法 利用新生儿缺氧缺血模型 ,采用RT PCR技术与DNA电泳方法 ,观察缺氧缺血后海马组织中即刻早基因c FosmRNA的表达 ,及后期的细胞凋亡。结果 对照组海马c Fos的mRNA低水平表达 ,亦未能检测到细胞凋亡 ;实验组缺氧缺血后 0小时 ,1小时可见c FosmRNA明显升高 (P <0 0 5 ) ,2小时后逐渐回至基础水平。于损伤 5天后DNA电泳出现Ladder ,提示大量细胞发生凋亡。结论 缺氧缺血导致海马细胞内c Fos一过性表达上调 ,可能是导致后期海马细胞凋亡的机制之一。 展开更多
关键词 脑缺氧 脑缺血 新生儿 海马组织 C-FOS基因表达 实验研究 细胞凋亡
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