光动力疗法对大鼠龋齿模型的防龋效果及机制

目的观察光动力疗法(PDT)对大鼠龋齿模型的防龋效果,并探讨其防龋机制。方法将以变异链球菌为致龋菌建立大鼠龋齿模型成功的40只21 d鼠龄、断奶的无特定病原体级Wistar雄性大鼠随机分为生理盐水组、血卟啉单甲醚(HMME)-PDT组、单纯激光组、单纯光敏剂组和氟化钠组,每组8只。生理盐水组大鼠用浸有150μL生理盐水的小棉球反复涂搽磨牙各面5 min;HMME-PDT组大鼠用浸有150μL 40 mg·L-1HMME的小棉球放于磨牙各牙面上,避光孵育5 min后,用532 nm的半导体激光垂直照射磨牙各面,功率密度为140 m W·cm^(-2),照射时间为90 s,能量密度为12.6 J·cm^(-2);单纯激光组大鼠不进行光敏剂HMME处理,仅用532 nm的半导体激光垂直照射磨牙各面,照射时间、功率密度、能量密度均同HMME-PDT组;单纯光敏剂组大鼠仅用浸有150μL 40 mg·L^(-1)HMME的小棉球放于磨牙各牙面上,避光孵育5 min,不进行激光照射;氟化钠组大鼠用浸有150μL 2 g·L-1氟化钠溶液的小棉球反复涂搽磨牙各面5 min;各组大鼠每周处理1次,连续4周,每次处理后及时采集大鼠口腔变异链球菌进行培养,平板菌落计数记录细菌抑制情况,连续4周后处死大鼠,记录龋齿Keyes计分,扫描电镜观察牙齿表面形态。结果时间因素对大鼠口腔变异链球菌的生长无影响(F=0.11,P>0.05),处理因素对大鼠口腔变异链球菌的生长有影响(F=230.89,P<0.05),且处理和时间因素存在交互效应(F=6.36,P<0.05)。第1、2、3、4周处理后,HMME-PDT组和氟化钠组大鼠牙齿变异链球菌菌落数均少于生理盐水组、单纯光敏剂组和单纯激光组(P<0.05);第1、2、3周处理后,HMME-PDT组大鼠牙齿变异链球菌菌落数均少于氟化钠组(P<0.05)。各组大鼠平滑面龋齿均未检出Dx级龋损;HMME-PDT组和氟化钠组大鼠平滑面龋齿均未检出Dm级龋损。HMME-PDT组、氟化钠组大鼠平滑面龋齿E、Ds级龋损的Keyes计分均显著低于生理盐水组、单纯光敏剂组和单纯激光组(P<0.05),但HMME-PDT组与氟化钠组大鼠平滑面龋齿E、Ds级龋损的Keyes计分比较差异无统计学意义(P>0.05)。各组大鼠窝沟龋齿中,仅生理盐水组检出Dx级龋损。HMME-PDT组、氟化钠组大鼠窝沟龋齿E、Ds、Dm级龋损Keyes计分均显著低于生理盐水组、单纯光敏剂组和单纯激光组(P<0.05),但HMME-PDT组与氟化钠组大鼠之间窝沟龋齿E、Ds、Dm级龋损的Keyes计分比较差异无统计学意义(P>0.05)。扫描电镜显示,生理盐水组和单纯光敏剂组大鼠牙釉质表面粗糙,凸凹不平,有大量凹坑状脱矿区和划痕;单纯激光组大鼠牙釉质表面相对光滑,有少量圆形凹坑并可见凹坑内熔融状结构;氟化钠组大鼠牙釉质表面相对光滑,脱矿区较少,并可见到脱矿区的再矿化;HMME-PDT组大鼠牙釉质表面较平整,点状凹陷减少,深脱矿区少,且脱矿区域大多表浅。结论 HMME-PDT可通过减少致龋菌数量、改善牙齿表面结构等途径对大鼠致龋模型起到明显的预防作用。

厚朴汤剂对变形链球菌影响的实验研究

目的探讨厚朴汤剂对变形链球菌的影响,为厚朴作为防龋药物的临床应用提供实验依据。方法选取120只SD大鼠,采用随机数字表法分为A、B、C、D组,每组各30只。SD大鼠在出生21~23 d给予含广谱抗生素的致龋饲料,其他时间的饲料中不添加抗生素。24~27 d连续4 d给予大鼠口腔内接种变形链球菌。出生后28 d A、B、C、D组分别使用厚朴汤剂(0.3 mL)、氟化钠溶液(0.3 mL)、0.2%酸性氟磷酸钠(0.3 mL)、蒸馏水(0.3 mL)处理,1次/d,连续处理60 d。比较各组变形链球菌菌落计数,并采用keyes龋齿记分法观察各组处理方式对SD大鼠磨牙龋龋齿损害情况。结果A组变形链球菌菌落计数低于B组、C组、D组,B、C组变形链球菌菌落计数低于D组,差异有统计学意义(P<0.05);B、C变形链球菌菌落计数比较,差异无统计学意义(P>0.05);A组E级、Ds级、Dm级、Dx级评分低于B组、C组、D组,B、C组E级、Ds级、Dm级、Dx级评分低于D组,差异有统计学意义(P<0.05);B、C组E级、Ds级、Dm级、Dx级评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论厚朴汤剂能减轻大鼠龋病形成,减轻龋损破坏程度,对大鼠人工龋病发生有一定的防治作用。

口腔微生物与免疫学

牙菌斑中幽门螺杆菌与胃病的关系；变形链球菌表面蛋白和葡糖基转移酶基因疫苗防龋动物实验：Keyes龋齿计分研究；人骨髓间充质干细胞分离培养的细胞周期及表面抗原研究；伴放线放线杆菌刺激淋巴细胞分化效应T细胞的研究；野生型及点变异型牙龈卟啉单胞菌FtsZs体外聚合的特性。