Kindlin2在卵巢癌中表达及其对化疗耐药、临床预后的影响

目的 探讨Kindlin2在上皮性卵巢癌中的表达及其对卵巢癌化疗耐药、临床预后的影响。方法 将100例上皮性卵巢癌患者分为Ⅰ+Ⅱ期上皮性卵巢癌组37例和Ⅲ+Ⅳ期上皮性卵巢癌组63例;另选取行手术切除的良性卵巢浆液囊肿组织20例为良性卵巢病变组;正常卵巢组织取自因子宫肌瘤或子宫脱垂附件切除的患者20例为正常卵巢组。构建稳定敲低的SKOV3/shKindlin2细胞株(shKindlin2组)和SKOV3/shCon对照细胞株(shCon组)。采用免疫组化法、荧光定量聚合酶链反应(PCR)法及Western印迹检测Kindlin2在上皮性卵巢癌中的表达;通过病例随访分析Kindlin2阳性表达和阴性表达对上皮性卵巢癌患者术后5年存活率和生存时间的影响。构建体外细胞模型检测Kindlin2对卵巢癌细胞化疗耐药性影响。结果 Kindlin2主要表达于细胞质中,上皮性卵巢癌各组Kindlin2表达率及mRNA相对表达量明显高于良性卵巢病变组和正常卵巢组(P<0.05,P<0.01),卵巢癌临床分期越高,其分化程度越低,Kindlin2表达水平越高。与化疗无效和化疗耐药患者相比,化疗有效和化疗敏感患者Kindlin2蛋白表达明显偏低(P<0.05)。Kindlin2阳性表达患者较于阴性患者,化疗耐药患者较于化疗敏感患者,肿瘤最大直径、浸润深度、淋巴结转移、复发性明显偏高,病理学分级明显偏低(P<0.05)。肿瘤最大直径、浸润深度、淋巴结转移、是否复发、Kindlin2阳性表达是患者是否发生化疗耐药的危险因素,病理学分级是保护因素(P<0.05)。Kindlin2阳性表达的卵巢癌患者术后5年存活率及平均生存时间均明显低于阴性表达者(均P<0.05)。不同梯度浓度化疗药物处理的shKindlin2组细胞存活率显著低于shCon组(P<0.05),表明敲低Kindlin2可有效增强卵巢癌细胞化疗敏感性。结论 Kindlin2在上皮性卵巢癌组织中具有高表达,敲低Kindlin2可有效增强卵巢癌细胞化疗敏感性。

胆囊癌组织中Kindlin-1和Myc诱导核抗原53与临床病理特征的关系

目的探究黏着斑蛋白Kindlin-1和Myc诱导核抗原53(Mina53)在胆囊癌与癌旁正常组织中的表达差异,及其与临床病理特征的关系。方法选取2016年10月—2020年4月间于兰州市第二人民医院普通外科行手术切除的胆囊癌患者的标本52例,选取癌旁组织标本32例作为对照组。采用免疫组织化学法检测胆囊癌和癌旁组织中Kindlin-1、Mina53的表达。组间比较采用pearson卡方检验和Fisher确切概率法。采用Kaplan-Meier单因素生存分析Kindlin-1、Mina53阳性和胆囊癌患者生存期的关系。结果Kindlin-1和Mina53在癌组织中的阳性表达率均显著高于癌旁组织(P<0.001、0.05)。Kindlin-1、Mina53的阳性率均与肿瘤的浸润深度、分化程度、TNM分期,以及淋巴结转移、肝脏转移、神经侵犯、脉管侵犯呈正相关(P值均<0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,Kindlin-1、Mina53阳性的患者生存期均分别显著短于阴性患者(P值均<0.05)。结论Kindlin-1、Mina53在胆囊癌组织中呈高表达,且和癌组织分化程度、淋巴结转移呈正相关,其阳性表达可作为胆囊癌在临床上诊断治疗的参考指标。

Kindlin-3及其生物学功能

Kindlin-3属于Kindlin蛋白家族的一员,分布于造血细胞及内皮细胞。Kindlin家族成员高度同源,但具有不同的亚细胞定位及功能。Kindlin-3与踝蛋白(talin)通过其FERM结构域与整合素相互作用参与整合素的活化聚集,虽同含有FERM结构域,但两者作用位点并不相同,对整合素的影响亦有差异。活化的整合素参与多种细胞反应,介导细胞的黏附、伸展及迁移。之前的研究多集中在踝蛋白,但随着对Kindlin-3的深入研究,发现其作用或许并不亚于踝蛋白,但具体机制尚不明确。Kindlin-3缺失表现为严重出血、白细胞黏附缺陷,导致白细胞黏附缺陷综合征III。本文总结了Kindlin-3在血小板功能、炎症及免疫中的关键作用,还列举了其在多种疾病特别是恶性肿瘤中存在异常表达,且在不同肿瘤表达水平不同,并对肿瘤的生长、侵袭及转移产生影响,提示Kindlin-3除了与整合素结合之外,还可以通过其他机制发挥生物学功能。旨在对血栓与止血、炎症、免疫及肿瘤治疗提供新思路。

Kindlin-2介导TGF-β/Smads信号通路在糖尿病肾病模型小鼠肾小管间质纤维化的作用研究

目的探讨Kindlin-2介导转化生长因子-β(TGF-β)/Smads信号通路在糖尿病肾病模型小鼠肾小管间质纤维化中的作用。方法将9周龄雄性db/db糖尿病与db/m小鼠分为糖尿病肾病组与正常对照组,每组10只,12周后记录各组小鼠一般状态、尿液、体质量和血生化指标,行过碘酸雪夫反应(PAS)染色和马松三色(Masson)染色观察肾脏病理病变情况,免疫组织化学技术检测肾小管间质Kindlin-2、TGF-β1、磷酸化Smad3(p-Smad3)、Smad3、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)原位表达,实时荧光定量(RT-qPCR)技术检测肾脏组织Kindlin-2、TGF-β1、p-Smad3、Smad3、α-SMA、E-cadherin mRNA水平。结果与正常对照组比较,糖尿病肾病组小鼠24小时尿蛋白定量[(239.88±44.31)mg/24 h比(20.16±6.03)mg/24 h]、体质量[(46.13±2.49)g比(23.47±2.19)g]、肾脏指数[(40.05±4.82)mg/g比(21.62±1.63)mg/g]、血糖[(49.86±7.51)mmol/L比(8.71±1.57)mmol/L]、血清尿素氮[(9.78±3.45)μmol/L比(6.02±1.65)μmol/L]、血清肌酐[(43.81±6.54)μmol/L比(29.53±3.19)μmol/L]、血清总胆固醇[(4.52±0.85)mmol/L比(2.62±0.38)mmol/L]及血清三酰甘油[(2.20±0.49)mmol/L比(0.91±0.25)mmol/L]水平明显增加(P<0.01),血清白蛋白[(24.30±1.77)g/L比(33.87±3.20)g/L]水平明显降低(P<0.01),Kindlin-2[(1.41±0.17)比(0.91±0.16)]、TGF-β1[(2.66±0.55)比(0.90±0.19)]、p-Smad3[(1.26±0.27)比(0.49±0.12)]、Smad3[(1.60±0.38)比(0.85±0.13)]、α-SMA[(2.12±0.44)比(0.85±0.13)]mRNA水平明显增加(P<0.05或P<0.01),E-cadherin mRNA[(0.47±0.10)比(0.86±0.27)]明显降低(P<0.05)。糖尿病肾病组肾小管间质病变较严重,且kindlin-2、TGF-β1、p-Smad3、Smad3、α-SMA原位阳性表达强度明显增强,E-cadherin原位表达强度显著降低。Kindlin-2 mRNA的水平与TGF-β1 mRNA水平(r=0.823,P<0.001)、Smad3 mRNA水平(r=0.692,P<0.001)呈显著正相关。结论Kindlin-2可能通过介导TGF-β/Smads信号通路加速糖尿病肾小管间质纤维化。

度洛西汀对神经病理性疼痛大鼠kindlin/integrin/RhoA通路及脊髓星形胶质细胞活化的影响

目的探讨度洛西汀对神经病理性疼痛大鼠脊髓星形胶质细胞活化的影响,以及与kindlin/整合素(integrin)/RhoA信号通路的关系。方法将60只SD大鼠随机分成5组:假手术组、模型组、度洛西汀低剂量组、度洛西汀中剂量组和度洛西汀高剂量组。除假手术组外,其余各组均采用慢性缩窄损伤诱导大鼠神经病理性疼痛。各组分别给予药物处理,检测机械撤退阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热撤退潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL);采用免疫组织化学检测脊髓GFAP蛋白表达水平;采用ELISA法检测脊髓炎性因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;采用Western blot法检测大鼠脊髓kindlin、integrin、RhoA蛋白表达水平。结果与假手术组相比,模型组大鼠MWT、TWL显著降低(P<0.05),炎性因子IL-1β和TNF-α水平、GFAP及kindlin-1、integrin、RhoA蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,度洛西汀各剂量组大鼠MWT、TWL显著升高(P<0.05),炎性因子IL-1β和TNF-α水平、GFAP及kindlin-1、integrin、RhoA蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论度洛西汀可抑制星形胶质细胞活化和炎症反应,减轻神经病理性疼痛,其机制可能与kindlin/integrin/RhoA信号通路有关。

整合素β2和Kindlin-2在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨结直肠癌(CRC)组织中整合素β2(ITGB2)和Kindlin-2的表达及其临床意义。方法收集2021年6月至2022年2月徐州医科大学附属医院60例CRC患者手术切除的肿瘤组织标本及对应的癌旁(距肿瘤边缘≥5 cm)正常组织标本。采用免疫组化法检测组织中ITGB2和Kindlin-2的表达情况,并分析CRC组织中ITGB2和Kindlin-2的表达与临床病理特征的关系及两者的相关性。结果CRC组织中ITGB2和Kindlin-2的阳性表达率均高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(均P<0.05)。分化程度差、浸润深度深、TNM分期晚、有淋巴结转移的CRC组织中ITGB2和Kindlin-2的阳性表达率分别高于分化程度好、浸润深度浅、TNM分期早、无淋巴结转移的CRC组织,差异均有统计学意义(均P<0.05)。CRC组织中ITGB2和Kindlin-2蛋白表达呈正相关(rs=0.356,P<0.05)。结论ITGB2和Kindlin-2在CRC组织中高表达,且均与CRC的TNM分期、浸润深度、分化程度、淋巴结转移密切相关,推测其可能与CRC的发病机制密切相关。

整合素相互作用蛋白Kindlin家族的生物学功能研究进展

整合素相互作用蛋白Kindlin是一种新型的黏着斑蛋白,是进化上高度保守的含有FERM结构域的蛋白家族,目前已知有3个家族成员Kindlin-1、Kindlin-2和Kindlin-3。近年来研究表明,Kindlin家族不仅与整合素活化和多种遗传性疾病有关,而且作为重要的信号分子参与了肿瘤的发生发展过程。我们将从Kindlin的结构特征、组织分布及生物学功能的研究进展作一综述。

Kindlin-2在前列腺癌中的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的探究黏着斑蛋白-2(Kindlin-2)表达与前列腺癌(PCa)患者临床病理参数和预后的关系。方法选取本院确诊并治疗的109例前列腺癌患者作为研究对象,同期93例良性前列腺增生(BPH)患者作为对照,对所有前列腺癌患者进行3年随访。采用组织芯片结合免疫组化染色法检测不同前列腺组织Kindlin-2表达水平,分析Kindlin-2表达与PCa患者临床病理参数及预后之间的关系。结果 Kindlin-2在前列腺癌组织中高表达率明显高于BPH组织(P<0.05)。Kindlin-2蛋白表达高低与患者TNM分期、前列腺特异性抗原(PSA)水平、Gleason评分及前列腺癌危险程度有关(P<0.05);前列腺癌患者3年生存率比较,Kindlin-2高表达低于低表达(P<0.05)。Cox分析结果显示,Kindlin-2高表达、PSA水平、Gleason评分、临床分期、淋巴结转移、远处转移、危险因素分级是前列腺癌患者不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 Kindlin-2在前列腺癌组织中高表达,可能参与前列腺癌的发生、发展,并影响患者预后,可作为前列腺癌诊断及预后评估的有效生物标志物。

Kindlin-2在胃癌组织中的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系

目的探讨胃癌组织中Kindlin-2的表达及其与肿瘤侵袭转移和预后的关系。方法连续收集50例胃癌患者手术切除的胃癌及相应癌旁组织标本，应用蛋白印迹进法及定时定量聚合酶链反应检测Kindlin-2在蛋白水平及RNA水平的表达，并分析其与胃癌患者临床病理指标及预后的相关性。结果Kindlin-2在胃癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织[（0．421±0．334）比（0．137±0．016）]，差异有统计学意义（P=0．012）。胃癌组织Kindlin-2／[3-actinmRNA的表达水平明显高于癌旁组织[（1．05±0．20）比（0．77±0．14）]，差异有统计学意义（P=0．034）。Kindlin-2蛋白表达水平与患者年龄、性别和肿瘤分化程度无明显关系。肿瘤侵犯深度为T3-4患者（12例）的Kindlin-2表达明显高于T1-2（38例）患者。N3、N3期患者（分别为14、13例）的Kindlin-2表达水平明显高于N，期患者（23例），差异有统计学意义（P=0．013）。TNM综合分期为Ⅲ-Ⅳ期的患者Kindlin-2表达水平明显高于I～Ⅱ期的患者（12例），差异有统计学意义（P=0．016）。Kindlin-2高表达胃癌患者（27例）平均生存时间明显短于低表达患者（23例）[（23-4-4）个月比（65-4-10）个月]，差异有统计学意义（P=0．017）。Kindlin-2高表达胃癌患者无病生存时间亦短于低表达患者[（12±4）个月比（55±10）个月]，差异有统计学意义（P=0．019）。结论Kindlin-2可能在胃癌发生发展中起重要作用，并且可能成为靶向治疗及评估胃癌患者预后的指标。

乳腺癌与Kindlin基因相关性的研究进展

乳腺癌是女性发病率最高的一种恶性肿瘤,严重危害着广大妇女的身体健康。乳腺癌的转移和复发是患者最常见的死亡原因,它的发生与多种因素有关,其中乳腺癌相关基因的研究是该病研究领域上最为关注的。本文就Kindlin基因与乳腺癌相关性的研究作一综述。

Kindlin-2通过mTOR和Hippo信号通路调节小鼠子宫内膜发育

目的:探讨Kindlin-2对小鼠子宫发育及雌鼠生育能力的影响及其作用机制。方法:利用Cdh16-Cre工具鼠和Kindlin-2^(flox/flox)小鼠构建在子宫内膜中特异性敲除Kindlin-2的小鼠模型,观察敲除Kindlin-2对雌鼠子宫内膜发育和生殖力的影响。在子宫内膜癌细胞系HEC-1和Ish中分别进行高表达和敲低Kindlin-2的实验,检测雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的激活变化,并且提取特异性敲除Kindlin-2的雌鼠(实验组,基因型为Cdh16-Cre;Kindlin-2^(flox/flox))和未特异性敲除Kindlin-2的雌鼠(对照组,基因型为Kindlin-2^(flox/flox))子宫蛋白,每组包含6~8只小鼠,重复3次独立实验,检测mTOR信号通路和Hippo信号通路关键分子的蛋白水平。结果:成功构建了子宫内膜特异性敲除Kindlin-2的小鼠模型,通过鼠尾聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、Western blot、免疫组织化学染色(immunohistochemistry,IHC)等方法鉴定和验证Kindlin-2在小鼠子宫中的敲除效率。子宫内膜特异性敲除Kindlin-2的雌鼠与对照组相比体质量减轻、生殖能力严重受损、出生仔鼠数量减少,但出生仔鼠中雌鼠和雄鼠的比例未发生改变,通过苏木精-伊红染色实验观察表明实验组子宫内膜发育不完整、子宫壁厚度变薄。机制方面,子宫内膜癌细胞系HEC-1和Ish中敲除Kindlin-2能够下调mTOR、磷酸化mTOR、腺嘌呤核糖核苷酸激活蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)、磷酸化的AMPK和磷酸化的核糖体蛋白(ribosomal protein S6,S6)的蛋白水平,在雌鼠子宫中发现特异性敲除Kindlin-2能够上调Mps结合1(Mps one binding 1,MOB1)、磷酸化的Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)的蛋白水平。结论:Kindlin-2通过抑制mTOR信号通路、激活Hippo信号通路抑制子宫内膜的发育,进而抑制雌鼠的生育能力。

Kindlin-2 RNA干扰减轻大鼠颈动脉内膜增生

目的观察Kindlin-2 RNA干扰对球囊损伤的大鼠颈动脉内膜增生的影响。方法构建并制备Kindlin-2 siRNA和阴性对照慢病毒载体并感染球囊损伤的大鼠颈动脉,1周和4周后取损伤的颈动脉,实时定量PCR检测Kindlin-2 mRNA的表达,HE染色评估术后4周颈动脉内膜增生情况,并行免疫荧光或免疫组化检测颈动脉中Kindlin-2、α-actin、PCNA和β1整合素的表达,Masson染色了解颈动脉中胶原纤维合成情况。结果 Kindlin-2RNA干扰能明显降低1周时颈动脉中Kindlin-2 mRNA的表达水平(P<0.05),并显著抑制4周后颈动脉的内膜增生(P<0.05)。与阴性对照组相比,Kindlin-2 siRNA组术后4周颈动脉中Kindlin-2、α-actin、PCNA和β1整合素的表达水平均明显降低,颈动脉内膜和中膜胶原纤维的合成也减少。结论 Kindlin-2 RNA干扰可能通过抑制血管平滑肌细胞增殖、迁移和细胞外基质合成减轻血管内膜增生。

Kindlin-2与整合素在机体中的研究进展

Kindlin-2蛋白是Kindlin家族成员之一,属于黏着斑蛋白,含有一个典型的FERM结构域。Kindlin-2可通过FERM结构域与整合素β亚基胞内段结合,在细胞-细胞间连接、细胞-细胞外基质黏附、细胞迁移、细胞骨架重构等细胞行为以及整合素介导的双向信号转导过程中发挥重要作用,参与胚胎形成、止血、免疫反应、肿瘤转移、器官发育等过程。Kindlin-2基因缺陷将导致胚胎、心脏及血管等组织器官发育异常,且Kindlin-2在很多恶性肿瘤中表达增加,影响肿瘤细胞的侵袭性和转移能力。因此,对Kindlin-2与整合素作用机制研究的深入,不仅有助于深化对Kindlin家族蛋白和整合素的认识,还有助于Kindlin-2相关疾病的诊断和治疗。

Kindlin-2 RNA干扰经Wnt信号通路抑制血管平滑肌细胞增殖

目的:观察Kindlin-2 RNA干扰(RNA interference,RNAi)对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖的影响并探讨相关的作用机制。方法:构建并制备Kindlin-2 siRNA慢病毒载体并感染大鼠VSMC,CCK-8和BrdU技术检测重组Wnt3a蛋白诱导的VSMC增殖情况,实时定量PCR测定VSMC中Kindlin-2、c-Myc和cyclin D1 mRNA的表达水平,免疫共沉淀了解Kindlin-2和β-catenin的关系,Western blot检测VSMC中Kindlin-2、β-catenin、磷酸化β-catenin(Ser675)、GSK-3β和磷酸化GSK-3β(Ser9)蛋白的表达。结果:Kindlin-2 siRNA慢病毒载体能有效感染大鼠VSMC。CCK-8和BrdU结果表明Kindlin-2 RNAi能够显著抑制Wnt3a诱导的VSMC增殖(1.12±0.14 vs. 2.25±0.15,P=0.000;0.162±0.017 vs. 0.288±0.019,P=0.000)。与阴性对照组相比,Kindlin-2 RNAi组和Kindlin-2 RNAi+Wnt3a组中Kindlin-2、c-Myc和cyclin D1 mRNA表达水平均明显下降(0.964±0.014 vs. 0.530±0.029,P=0.000;0.980±0.025 vs. 0.572±0.022,P=0.000;0.979±0.009 vs. 0.590±0.035,P=0.002和0.964±0.014 vs. 0.569±0.027,P=0.000;0.980±0.025 vs. 0.741±0.026,P=0.001;0.979±0.009 vs. 0.769±0.017,P=0.023)。免疫共沉淀证实VSMC中Kindlin-2可以与β-catenin结合,而且Kindlin-2 RNAi+Wnt3a组中Kindlin-2、磷酸化β-catenin(Ser675)和磷酸化GSK-3β(Ser9)蛋白的表达水平较阴性对照+Wnt3a组明显降低(0.468±0.029 vs. 0.725±0.033,P=0.001;1.058±0.109 vs. 1.478±0.045,P=0.001;0.624±0.048 vs. 0.809±0.067,P=0.020)。但各组中总β-catenin和总GSK-3β蛋白水平没有明显变化(F=0.638,P=0.647;F=0.781,P=0.563)。结论:Kindlin-2 RNAi可以通过Wnt信号通路发挥作用并抑制VSMC增殖。

前列腺癌组织中Kindlin-2和Clusterin蛋白表达及与PSA含量的相关性

目的:探讨前列腺特异性抗原(PSA)含量和前列腺癌(PCA)组织中Clusterin、Kindlin-2蛋白阳性表达的相关性,研究前列腺癌的治疗策略。方法:45例前列腺增生和55例前列腺癌组织应用免疫组织化学方法检测凋亡蛋白Kindlin-2、Clusterin的表达并检测对应病例的血浆PSA含量。结果:Clusterin、Kindlin-2蛋白在前列腺癌组织中的阳性表达率分别为50.9%(28/55)、63.6%(35/55),Clusterin和Kindlin-2蛋白在前列腺增生组织中的阳性表达率分别为0(0/45)、51.1%(23/45)。在前列腺癌和前列腺增生组织中Clusterin和Kindlin-2阳性表达率具有统计学差异(P<0.05);Clusterin和Kindlin-2蛋白表达与前列腺癌病理分级、临床分期、转移情况和PSA含量相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:联合检测Kindlin-2、Clusterin蛋白和PSA可为前列腺癌提供一种新的联合检查方法。

整合素相互作用蛋白Kindlin家族与表皮干细胞增殖分化相关研究进展

表皮干细胞（epidermal stem cells,ESCs）是皮肤组织特异性干细胞,具有自我更新和强大的增殖能力,有维持表皮自我更新、保持正常表皮结构以及促进创面修复等作用。其增殖分化受多重因素的调控,一方面是其所处的微环境,即干细胞＂壁龛＂（niche）,由各种调控因子等调控干细胞的活动;另一方面就是其细胞上分布的表面受体的功能状态。

Kindlin家族成员研究进展

Kindlin是一族新发现的黏着斑蛋白,包括Kindlin-1、Kindlin-2和Kindlin-3三个成员.不同Kindlin家族成员在进化上具有高度同源性和保守性,参与了多种重要细胞生理过程,例如细胞迁移、增殖和分化的调控.Kindlin通过与β整合素胞内段的相互作用,在细胞-细胞外基质黏附、细胞-细胞间连接、细胞骨架重构以及整合素介导的双向信号传递中都具有重要作用.Kindlin家族成员的异常与多种遗传性疾病、心血管疾病及肿瘤的发生和发展密切相关.Kindlin与整合素作用机制的深入研究,不但可以丰富对细胞黏附和迁移的理论认识,而且将有助于临床上相关疾病的治疗.

Kindlin-1在肝细胞性肝癌中的表达作用及其临床意义

目的检测黏着斑蛋白(Kindlin-1)在肝细胞性肝癌(简称肝癌)中的表达,探讨其在肝癌转移中的临床意义。方法收集58例肝癌组织和癌旁组织及7例正常肝组织,采用免疫组化染色、Western blot法和实时定量PCR(qRTPCR)法检测Kindlin-1的表达,分析Kindlin-1表达与肝癌临床病理特征之间的关系。结果免疫组化染色显示Kindlin-1主要表达在细胞质中。肝癌组织中Kindlin-1阳性表达率为55%,显著高于癌旁组织的10%和正常肝组织的0%(χ2=26.456、5.560,P<0.05)。Kindlin-1表达水平与肝癌大小和有无转移相关(χ2=7.857、4.076,P<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤有无包膜、Edmondson分级、血清甲胎蛋白(AFP)水平及乙肝表面抗原(HBs Ag)等临床病理特征无明显关系。Western blot法和qRT-PCR检测结果显示肝癌组织中Kindlin-1相对含量显著高于癌旁组织和正常肝组织(P<0.01)。结论 Kindlin-1在肝癌组织中的表达高于癌旁组织及正常肝组织,且与肝癌大小和有无转移相关,提示Kindlin-1可能参与了肝癌的转移,可能作为肝癌转移的预测指标之一。

Kindlin-2介导足细胞损伤在局灶节段肾小球硬化症模型小鼠发病中的作用研究

目的探讨Kindlin-2介导足细胞损伤在局灶节段肾小球硬化症模型小鼠发病中的作用。方法 8周龄雄性BALB/C小鼠分为正常对照组和模型组,各18只。模型组小鼠注射阿霉素(ADR,浓度2mg/m L,剂量10mg/kg鼠重)造模,正常对照组小鼠给予等量的生理盐水,于第4、8、12周每组各处死6只小鼠,检测24h尿蛋白定量、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC),光镜观察肾脏组织病理学改变,免疫组织化学技术检测足细胞数量,RT-q PCR技术检测肾脏组织Kindlin-2、肾病蛋白(Nephrin)及Podocin m RNA表达水平。结果与正常对照组比较,模型组4、8、12周24h尿蛋白定量、血总胆固醇(TC)均增加[24h尿蛋白定量:(5.66±1.06)mg/24h比(1.72±0.62)mg/24h、(4.63±1.16)mg/24h比(1.77±0.63)mg/24h、(4.78±0.87)mg/24h比(1.69±0.49)mg/24h;血TC:(8.84±1.30)mmol/L比(2.01±0.49)mmol/L、(7.45±1.27)mmol/L比(2.06±0.49)mmol/L、(6.79±1.38)mmol/L比(2.10±0.54)mmol/L,P均<0.05];血ALB水平降低[(11.98±1.33)g/L比(22.27±1.41)g/L、(12.78±1.47)g/L比(22.65±1.49)g/L、(12.99±1.38)g/L比(23.31±1.49)g/L,P均<0.05];模型组第4周可见部分肾小球出现局灶、节段硬化,伴有足细胞肿胀;第8周部分肾小球出现球性硬化,伴有明显的足细胞增生和肥大;第12周弥漫性肾小球出现球形硬化。模型组足细胞数量随着时间的进展逐渐减少[(77.40±7.56)个/肾小球比(104.00±10.05)个/肾小球,(63.27±8.51)个/肾小球比(103.80±12.23)个/肾小球,(53.15±8.23)个/肾小球比(98.86±8.89)个/肾小球,P均<0.05]。模型组第4周开始Kindlin-2 m RNA水平明显上调[(1.14±0.06)、(1.13±0.08)、(1.45±0.10)比(0.82±0.07),P均<0.05],Podocin m RNA水平明显下调[(1.79±0.08)、(1.64±0.06)、(1.45±0.07)比(2.05±0.05),P均<0.05],第8周开始Nephrin m RNA水平明显下调[(1.42±0.13)、(1.17±0.11)比(2.06±0.20),P均<0.05]。Kindlin-2 m RNA水平与足细胞数量(r=-0.02,P<0.01)、Nephrin m RNA水平(r=-0.8,P<0.01)、Podocin m RNA水平(r=-0.9,P<0.01)呈显著负相关。结论 Kindlin-2可能通过介导足细胞损伤参与小鼠局灶节段肾小球硬化症的发病过程。

Kindlin-2与VEGF-C蛋白在胃癌组织中的表达及意义

目的:检测胃癌组织中Kindlin-2与VEGF-C蛋白的表达,探讨二者在胃癌发生发展中的作用。方法:选取109例胃癌组织标本为研究对象,采用免疫组织化学染色方法检测Kindlin-2与VEGF-C的表达。结果:Kindlin-2在54.1%的胃癌组织中表达,与肿瘤TNM分期和淋巴结转移密切相关,并发现Kindlin-2表达与VEGF-C表达在胃癌组织中呈正相关(P<0.05)。结论:Kindlin-2和VEGF-C可能在胃癌细胞侵袭过程中协同发挥作用。