豨莶草中奇壬醇的闪式提取工艺研究

优选中药豨莶草中奇壬醇的闪式提取工艺。以奇壬醇的提取率为评价指标,在单因素实验基础上,通过正交实验法优化闪式提取奇壬醇的工艺参数,对比闪式提取、热回流提取、常温浸提三种方法的提取效果。采用HPLC测定奇壬醇含量,流动相为乙腈-0.1%的磷酸水溶液(体积比24∶76),流速1.0 mL/min,检测波长215 nm。最佳闪式提取工艺条件为:乙醇浓度80%、料液比1∶35(g∶mL)、提取时间2.0 min;此时奇壬醇的平均提取率为1.327 mg/g。优选的工艺稳定,提取效率高,能耗少,重复性好的特点,可为豨莶草资源的开发提供重要参考。

奇任醇的抗炎免疫实验研究

目的研究奇任醇的抗炎作用及对免疫系统的影响。方法建立大鼠佐剂性关节炎模型,观察奇任醇对大鼠足肿胀、脾淋巴细胞增殖、T淋巴细胞亚群的影响;观察奇任醇对小鼠耳廓肿胀、大鼠肉芽肿的抗炎作用;通过碳粒廓清、小鼠迟发型变态反应和血清溶血素水平实验,评价奇任醇对小鼠非特异性和特异性免疫功能的影响。结果奇任醇能够抑制佐剂性关节炎大鼠的足肿胀,增强佐剂性关节炎大鼠脾淋巴细胞增殖能力,调节T淋巴细胞亚群比例;抑制小鼠耳廓肿胀和大鼠肉芽肿增生;抑制正常小鼠特异性免疫功能。结论奇任醇可抑制佐剂性关节炎大鼠的原发性与继发性足肿胀,抑制急、慢性炎症反应,调节机体免疫功能。

豨莶醇对佐剂性关节炎大鼠血清细胞因子及滑膜细胞凋亡蛋白的影响

目的探讨豨醇(奇任醇)对佐剂性关节炎(AA)大鼠血清细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及滑膜细胞Bcl-2、Fas-L蛋白表达的影响。方法采用弗氏完全佐剂建立SD大鼠AA模型,分别给予奇任醇、氢化可的松、阿司匹林+环磷酰胺治疗;ILISA法测定实验大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平;踝关节滑膜细胞进行Bcl-2、Fas-L免疫组化染色,运用计算机图像分析系统对染色结果进行分析。结果与正常组相比,模型组大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著升高(P<0.01),滑膜细胞Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05),Fas-L表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,奇任醇组大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著降低(P<0.01、0.05);滑膜细胞Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.05),Fas-L蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论奇任醇可降低AA大鼠血清细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平,下调滑膜细胞Bcl-2蛋白表达、促进Fas-L蛋白表达。

豨莶草的质量标准研究

目的:探讨豨莶草药材的定性、定量检测方法.方法:采用TLC检定豨莶草中的奇壬醇,HPLC测定豨莶草中奇壬醇的含量.结果:以氯仿-甲醇-甲酸(25:5:1)为薄层展开系统,可以清晰地检测奇壬醇;采用Polaris C18色谱柱,以乙腈-水(25:75)为流动相,可使奇壬醇达到基线分离,豨莶草中奇壬醇平均含量为0.14%,奇壬醇在0.186～14.88 μg呈良好线性关系,平均回收率100.0%,RSD 2.4%.结论:本法可作为豨莶草药材的定性、定量检测方法.

豨莶草抗血栓有效组分成分分析

目的:分析豨莶草抗血栓有效组分中化学成分类型及主要成分。方法:采用LC/MS的方法分析有效组分中化学成分类型,采用HPLC法测定有效组分中奇壬醇的含量。结果:有效组分主要化学成分类型为二萜类成分,其中活性成分奇壬醇在组分中的含量大于10%。结论:豨莶草抗血栓有效组分以二萜类成分为主。

豨莶草对人宫颈癌HeLa细胞的体外抑制效应

目的研究中药豨莶草提取物对人宫颈癌细胞HeLa的体外抑制效应。方法培养人宫颈癌HeLa细胞,体外加入不同浓度的豨莶草提取物,MTT法观察其对细胞增殖的影响。结果豨莶草的乙酸乙酯和正丁醇部位对HeLa细胞有较强的体外增殖抑制作用。结论豨莶草对He1a细胞有较强的体外抑制效应。

腺梗豨莶提取物对脂多糖活化巨噬细胞释放一氧化氮的抑制作用

用脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7释放一氧化氮(NO),Griess法测定培养上清中NO释放量并计算抑制率,MTT法测定细胞存活率评价药物的细胞毒性,以检测腺梗豨莶不同溶剂萃取部位对活化巨噬细胞释放炎症介质NO的抑制作用.结果表明,石油醚及乙酸乙酯部位对活化巨噬细胞释放NO的抑制作用明显强于正丁醇部位及水层,即石油醚及乙酸乙酯部位为腺梗豨莶抑制活化巨噬细胞释放NO的主要活性部位,半数抑制浓度(IC50)值分别为6.0和6.5μg.mL-1,其作用强度优于该植物的主要活性成分奇壬醇(IC50为37.5μg.mL-1),推断该活性部位中应含有奇壬醇以外的其他活性化合物.以上结果为进一步阐明腺梗豨莶的抗炎作用物质基础提供了一定的理论基础.

奇任醇通过抑制炎症细胞因子和诱导淋巴细胞凋亡减轻小鼠溃疡性结肠炎（英文）

目的研究奇任醇在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(UC)发生和发展中的作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为UC+双蒸水灌胃组和UC+奇任醇治疗组。所有小鼠连续7 d在饮水中加入DSS建立UC模型,第0天到第7天双蒸水或奇任醇灌胃给药。每日观察小鼠体质量、直肠出血和粪便性状等临床指标并进行疾病活动度指数评分(DAI)。7 d后处死小鼠,观察结肠组织形态和长度,行组织病理学分析。取肠系膜淋巴结制成单细胞悬液并体外用抗CD3和抗CD28刺激活化,分析细胞培养上清中分泌的细胞因子IFN-γ、IL-17A、IL-6和TNF-α的含量,流式细胞术检测肠系膜淋巴结细胞的凋亡百分比。结果奇任醇可以抑制DSS诱导的溃疡性结肠炎的发生发展,减轻结肠损伤,抑制炎症细胞因子的分泌,诱导淋巴细胞的凋亡。结论奇任醇可以缓解DSS诱导的溃疡性结肠炎,这种作用可能与抑制炎症细胞因子分泌和诱导炎性淋巴细胞凋亡有关。

豨莶草的化学成分研究

以河南新县产的莶草 (siegesbeckiaorientalislinn)为原料 ,经乙醇浸泡、提取 ,用硅胶进行柱层析 ,分离得 4个化合物 (A ,B ,C ,D) .根据理化性质及红外光谱、核磁共振波谱、质谱数据分析 ,鉴定化合物A为奇任醇 ,化合物B由于量太少 ,未做结构鉴定 ,化合物C为 β 谷甾醇 。

梯度洗脱联合波长切换HPLC法同时测定豨莶风湿丸中的豨莶苷、奇壬醇、豨莶精醇、防己诺林碱和粉防己碱

目的 建立梯度洗脱联合波长切换HPLC法同时测定豨莶风湿丸中豨莶苷、奇壬醇、豨莶精醇、防己诺林碱和粉防己碱。方法 采用Kromasil C18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）,以流动相A：乙腈-甲醇（2∶1）、流动相B：0.05%冰醋酸溶液进行梯度洗脱;流速为1.0mL/min;进样量为20μL;豨莶苷、奇壬醇和豨莶精醇检测波长为215nm,防己诺林碱和粉防己碱检测波长为280nm。结果 豨莶苷、奇壬醇、豨莶精醇、防己诺林碱和粉防己碱在给定浓度范围内的线性范围分别为6.45-129.00μg/mL（r=0.999 5）、5.61-112.20μg/mL（r=0.999 9）、4.25-85.00μg/mL（r=0.999 3）、9.19-183.80μg/mL（r=0.999 8）和11.05-221.00μg/mL（r=0.999 7）,线性关系良好;平均加样回收率和相对标准偏差（RSD）值分别为98.73%（1.43%）、97.63%（1.28%）、99.44%（1.29%）、98.33%（1.38%）、97.36%（1.37%）。结论 建立的梯度洗脱联合波长切换HPLC法能同时测定豨莶风湿丸中豨莶苷、奇壬醇、豨莶精醇、防己诺林碱和粉防己碱含量,方法简便、准确、重现性好,为豨莶风湿丸质量控制提供了可靠方法。

奇壬醇对牛Ⅱ型胶原特异性淋巴细胞的体内和体外作用(英文)

目的观察奇壬醇对牛II型胶原特异性淋巴细胞体内和体外的免疫调节作用,探讨奇壬醇对抗原特异性淋巴细胞的免疫抑制作用机制。方法将Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、奇壬醇组和泼尼松龙组。除对照组外,均复制胶原诱导关节炎大鼠模型,造模当天开始给药。造模30 d后取脾脏和引流淋巴结,制备单细胞悬液,经体外培养48 h后,ELISA法检测培养上清中干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-10(IL-10)、IL-4、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;在II型胶原诱导下,取正常大鼠淋巴结细胞、脾细胞与不同浓度的奇壬醇共同培养,检测胶原诱导的淋巴细胞增殖及凋亡。结果与模型组相比,奇壬醇组脾细胞培养上清中IFN-γ和TNF-α含量降低(P<0.05,P<0.01),IL-10和IL-4水平升高(P<0.05,P<0.01);淋巴结细胞培养上清中IFN-γ和TNF-α含量降低(P<0.05,P<0.001),IL-10和IL-4水平升高(P<0.05,P<0.001);体外实验中,奇壬醇抑制II型胶原特异性淋巴结细胞增殖,促进II型胶原特异性淋巴结细胞和脾细胞凋亡,均呈剂量依赖关系。结论奇壬醇可通过抑制II型胶原特异性淋巴细胞分泌促炎因子,促进胶原特异性淋巴细胞分泌抗炎因子,抑制胶原特异性淋巴细胞增殖和促进其凋亡,以多条途径发挥免疫抑制作用。

高效液相色谱梯度洗脱法同时测定关节痛丸中β-蜕皮甾酮、豨莶苷、奇壬醇和豨莶精醇的含量

目的建立HPLC梯度洗脱法同时测定关节痛丸中β-蜕皮甾酮、豨莶苷、奇壬醇和豨莶精醇的含量。方法采用Diamonsil C18(4.6 mm×200 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,进行梯度洗脱,流速1.0 m L·min^(-1),柱温30℃,波长切换法检测(0~17 min,250 nm,β-蜕皮甾酮;17~60min,215 nm,豨莶苷、奇壬醇和豨莶精醇),进样量为10μL。结果β-蜕皮甾酮、豨莶苷、奇壬醇和豨莶精醇4个成分的线性范围分别为4.35~87.00μg·m L^(-1)(r=0.9993)、3.78~75.60μg·m L^(-1)(r=0.9999)、8.51~170.20μg·m L^(-1)(r=0.9994)、5.35~107.00μg·m L^(-1)(r=0.9997);平均加样回收率及相应的RSD分别为98.8%(1.4%)、99.3%(1.3%)、97.4%(1.0%)、99.0%(1.2%)。结论本文建立的方法,方法专属性强,测定结果准确,可有效保障关节痛丸临床用药安全。

豨莶液的定性定量测定方法

目的：建立控制豨莶液质量的方法。方法：采用HPLC法定量测定豨莶液中的奇任醇含量。色谱条件：色谱柱为Allsphere ODS（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈-水-醋酸-三乙胺（25∶75∶0.1∶0.2）,流速为1.0mL/min,检测波长为215nm,进样量为10μL,柱温为20℃。定性鉴别采用薄层色谱法。结果：在本色谱条件下,奇任醇在0.4168-1.6672μg范围内呈良好的线性关系。平均回收率为99.78%（RSD=1.51%,n=6）。薄层色谱中豨莶草的色谱斑点清晰、无干扰。结论：本法定性定量结合,准确可靠,重现性好,快速简便,可用于豨莶液的质量控制。

奇壬醇对骨质疏松症的治疗作用及机制研究进展

骨质疏松症是一种多因素导致的骨质流失疾病,大大增加了骨折的风险。目前骨质疏松症主要依靠药物治疗,但长期药物治疗中都存在安全性和耐受性问题。高效低毒天然药物的研发逐渐受到青睐,为骨质疏松症的治疗带来了新的转变。奇壬醇(Kir)作为具有生物活性的二萜类化合物,能够通过抑制多种信号通路来抑制破骨细胞的活性,为骨质疏松症的治疗提供了新的前瞻性思路。现就Kir对骨质疏松症的治疗作用及机制进展进行综述。

RP-HPLC法测定豨桐胶囊中奇壬醇的血药浓度

目的测定中药复方制剂豨桐胶囊灌胃后大鼠血浆中奇壬醇的浓度。方法以连翘苷为内标,经液-液萃取法制备血液样品,采用C18柱,乙腈-水（体积比为28.5∶71.5）为流动相,流速为1.0mL.min-1,检测波长215 nm,柱温35℃。结果奇壬醇血浆中质量浓度在0.04-2.00 mg.L-1（r=0.998 4）内,日内、日间精密度均小于15%。在质量浓度为0.08、0.40、1.60 mg.L-1时,提取回收率分别为（83.4±3.6）%、（82.2±4.9）%和（80.5±2.5）%。主要药物动力学参数为：ke=（0.06±0.01）h-1,t1/2=（11.86±1.66）h,AUC0-24=（4.910±0.699）mg.h.L-1。结论该方法可用于豨桐胶囊中奇壬醇的药物动力学研究。

HPLC法测定伤科敷药中奇壬醇的含量

目的建立以HPLC法测定伤科敷药中奇壬醇含量的方法。方法采用Diamonsil C18色谱柱,流动相为乙腈-水（33∶67）,流速为1.0mL.min-1,检测波长为215nm。结果奇壬醇进样量在0.0412-2.06μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9999）;平均回收率为100.5%,RSD为0.9%。结论本法简便可行、重复性好,可作为伤科敷药的质量控制方法。

HPLC测定豨莶片剂中奇壬醇的含量

目的:建立豨莶片剂中奇壬醇的含量测定方法.方法:采用HPLC,色谱条件为:Phenomenex C18柱,乙腈-0.05 mol/L KH2PO4(125∶75)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长215 nm.结果:奇壬醇在0.133～2.660 μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为99.4%,RSD=2.12%;测定3批豨莶片剂中奇壬醇的含量分别为109.46,105.91,107.41 μg/片.结论:HPLC简便、准确、可控,可作为豨莶片剂的定量检测方法.

治疗类风湿中药奇任醇的核磁共振谱分析

目的确定中药奇任醇的结构。方法应用1H-NMR、13C-NMR谱数据对奇任醇结构进行确证。结果应用gCOSY,gHSQC,gHMBC等二维核磁共振技术首次对奇任醇的1H-NMR及13C-NMR谱信号进行了全归属。结论经核磁共振研究谱分析确证了奇任醇的结构。

豨红通络口服液质量标准的研究

目的:建立豨红通络口服液的质量标准。方法:采用TLC法鉴别处方中的豨莶草和川牛膝;采用HPLC法测定豨莶草中奇壬醇的含量,色谱柱为Luna C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水(24∶76);检测波长215 nm;柱温30℃;流量0.8 mL.min-1。结果:TLC法鉴别色谱特征斑点明显,含量测定方法奇壬醇进样量在0.214 8～2.148 0μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为100.1%,RSD=0.74%(n=6)。结论:所建立的TLC和HPLC方法操作简便,结果准确,重复性好,可作为该制剂的质量控制方法。

HPLC法测定心舒宁片中奇壬醇的含量

目的建立心舒宁片中奇壬醇的含量检测方法。方法采用高效液相色谱法对心舒宁片中奇壬醇的含量进行检测,色谱柱为Kromasil C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为乙腈-水溶液梯度洗脱,流速为1.0 m L·min^-1,检测波长为215nm。结果奇壬醇在0.2008-4.0160μg·m L^-1范围内线性关系良好（r=0.9997）,平均回收率97.36%,R SD=3.03%（n=6）。结论该法操作简便,准确可靠,可作为心舒宁片中奇壬醇的含量测定方法。