二陈汤对高脂饮食小鼠糖脂代谢和生殖激素分泌的调节作用研究:基于Kisspeptin/GPR54通路

目的:基于Kisspeptin/GPR54(吻素/吻素受体)通路研究二陈汤对高脂饮食小鼠生殖激素分泌的影响。方法:将30只C57BL/6J雌性小鼠随机分为正常组、模型组、二陈汤组,每组10只。模型组、二陈汤组小鼠给予高脂饲料喂养12周,第9周开始二陈汤组给予二陈汤灌胃,正常组和模型组小鼠予生理盐水灌胃,干预4周。记录小鼠基础数据,行葡萄糖耐量实验,检测血脂四项;实施HE染色观察卵巢形态,应用ELISA检测小鼠促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(T)和雌二醇(E2)的水平;应用q-PCR与Western Blot检测小鼠下丘脑瘦素(Leptin)、Kisspeptin、GPR54、促性腺激素释放激素(GnRH)的表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠体质量和腹围有较大幅度增长(P<0.05,P<0.01),血糖血脂水平升高(P<0.05,P<0.01),卵巢颗粒细胞排列松散,脂滴空泡明显增多,血清T、FSH和LH水平升高(P<0.05,P<0.01),下丘脑组织Leptin、Kisspeptin、GnRH的mRNA和蛋白的表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,二陈汤组小鼠的体质量、腹围下降(P<0.05,P<0.01),血糖血脂水平下降(P<0.05,P<0.01),卵巢形态有所恢复,血清T、LH水平下降(P<0.05,P<0.01),下丘脑组织Leptin、Kisspeptin的mRNA表达水平显著降低(P<0.01),Kisspeptin的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:二陈汤可能通过Kisspeptin/GPR54通路改善高脂饮食小鼠的血糖血脂水平,调节生殖激素分泌水平,改善小鼠卵巢组织解剖学与形态学特征。

Kisspeptin/GPR54信号通路对下丘脑-脑垂体-性腺轴的调节机制

作为耦联体的kisspeptin/GPR54在动物体的下丘脑具有较高表达,kiss I mRNA的表达不仅受光照周期的影响,而且受雌激素的调节,然而雌激素对下丘脑Arc和AVPV区域kisspeptin神经细胞的调节却截然相反。kisspeptin/GPR54通过G蛋白耦联机制激活GnRH细胞的脉冲分泌,从而对下丘脑-脑垂体-性腺轴进行调节。

Kisspeptin/GPR54信号通路促使性早熟形成的作用观察

目的:以达那唑诱导的雌性性早熟模型大鼠为研究对象,探讨下丘脑kisspeptin/GPR54信号通路在性早熟发病机制中的作用。方法:3日龄SD雌性大鼠,随机分为正常组、对照组和模型组。于大鼠5日龄时,模型组皮下注射溶有达那唑的乙醇与乙二醇的混合液进行造模,分别于大鼠15、25、30、35和40日龄时处死,留取标本。观察性器官发育情况;采用ELISA法检测外周血中E2、FSH和LH水平;采用real-time PCR法检测下丘脑Kiss-1、GPR54和GnRH的mRNA表达;应用免疫荧光法观察下丘脑kisspeptin的表达情况。结果:模型大鼠青春期启动和性成熟时间较正常组和对照组显著提前(P<0.05);在25和30日龄时,模型大鼠外周血清性激素水平和子宫系数均显著高于正常组和对照组(P<0.05);在25和30日龄时,模型大鼠卵巢形态学发育也明显早于正常组;在25日龄时,模型组大鼠下丘脑Kiss-1和GnRH的mRNA及下丘脑弓状核kisspeptin表达显著高于正常组和对照组(P<0.05);在30日龄时,模型组大鼠下丘脑弓状核kisspeptin表达低于正常组和对照组(P<0.05);在35日龄时,模型组大鼠Kiss-1和GnRH的mRNA表达较正常组和对照组降低(P<0.05);在所观察日龄内,各组大鼠GPR54mRNA的表达均无显著差异。结论:性早熟模型大鼠在青春期启动时下丘脑Kiss-1 mRNA和kisspeptin的表达显著上调,提示kisspeptin可能是性早熟形成的启动因子,kisspeptin/GPR54信号通路在性早熟的发病中可能起着重要作用。

Kisspeptins/GPR54系统及其在动物性发育中的作用

促性腺释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)脉冲式释放的激活是动物性发育的关键。研究结果发现,kisspeptins/GPR54系统对GnRH脉冲式释放的激活起到了重要作用,是性发育启动的调节器。在kisspeptins/GPR54胞内信号通路方面的研究也已经证实,kisspeptins能通过GPR54受体激活多种信号,以发挥其它功能。另外,光周期、机体能量储备等也是影响动物性发育的重要因素。

Kisspeptin/GPR54系统在生殖启动中的作用

青春期的启动始于下丘脑脉冲性GnRH分泌的提高。Kisspeptin/GPR54系统是新发现的能够调节下丘脑GnRH释放的重要信号通路,此系统的发现敲开了生殖启动机理研究的新大门。本文就Kisspeptin/GPR54系统的发现、生物学特性与对生殖启动的调节作用等方面作一综述。

基于卵巢Kisspeptin/GPR54系统的补肾助孕方干预黄体功能不全大鼠生殖功能的机制研究

黄体功能不全(LPD)是引起不孕症的内分泌因素之一,大量研究显示有5%.10%的不孕症由LPD引起[1]。Kisspeptin是调控女性生殖内分泌功能的一种多肽类激素,可通过介导雌二醇的正负反馈作用而调节促性腺激素释放激素(GnRH)的分泌,继而参与调节生殖系统的生长发育、生殖激素的分泌,以及维持下丘脑-垂体-卵巢(HP0)轴的稳定[2]。

PCB118对GT1-7细胞GnRH分泌及Kisspeptin/GPR54信号通路蛋白表达的影响

为研究多氯联苯118(polychlorinated biphenyl 118,PCB118)对GT1-7细胞的毒性作用,探讨其对促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)分泌的影响及相关机制,在PCB118作用GT1-7细胞后,分析了细胞存活率、GnRH分泌水平以及Kisspeptin/GPR54信号通路中关键蛋白的表达水平。结果表明,PCB118(0.05~50000nmol·L^-1)分别作用GT1-7细胞6、12、24和48h后,细胞存活率随PCB118浓度的增加和作用时间的延长而显著降低。但只有在高浓度(50000nmol·L^-1)条件下,PCB118才能显著促进GT1-7细胞释放乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)。PCB118作用GT1-7细胞6h后,5、500和50000nmol·L^-1组能显著抑制GnRH的分泌,并降低Kisspeptin/GPR54信号通路中GnRH、G蛋白偶联受体54(G-protein-coupled receptor 54,GPR54)、磷脂酶C(phospholipase C,PLC)和蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)等关键蛋白的表达水平;作用24h,500和50000nmol·L^-1PCB118能显著抑制GnRH的分泌,并降低GnRH、GPR54、PLC和PKC等关键蛋白的表达水平。研究表明:PCB118对GT1-7细胞具有细胞增殖毒性作用,呈现一定的剂量和时间效应;PCB118能在一定程度上抑制GT1-7细胞GnRH的合成与分泌,并下调Kisspeptin/GPR54信号通路中GnRH、GPR54、PLC和PKC等关键蛋白的表达水平,推测Kisspeptin/GPR54信号通路可能参与介导了PCB118对GT1-7细胞GnRH分泌的抑制作用。

Kisspeptin/GPR54与肿瘤转移及神经内分泌系统疾病

Kisspeptin为Kiss-1基因表达产物,起初被发现其与受体GPR54结合后具有抑制人类黑色素瘤转移能力的作用,随后引起广泛研究。大量研究表明,Kisspeptin/GPR54不仅与乳腺癌、胰腺癌、胃癌、肾细胞癌、胆囊癌、肝癌等多种肿瘤的转移密切相关,并且与下丘脑-垂体-性腺轴激素分泌降低以及青春期发育不全有密切关系。本文就Kisspeptin/GPR54与抑制肿瘤转移及神经内分泌系统疾病关系的研究新进展做一综述。