PCOS发病机制及其与KIT/KITL相关性的研究进展

对卵泡膜细胞、颗粒细胞、卵丘细胞、卵母细胞相关因子与多囊卵巢综合征(PCOS)分子生物学发病机制的相关研究进行了综述,并对KIT/KITL的最新研究进展以及KIT/KITL与PCOS发病机制的相关研究思路及中医药的应用进行了总结和展望。

kitl非编码区突变导致RNA剪切异常的小鼠

本文主要采用RT-RCR技术从kitl1-bao纯合子和正常C57BL/6(B6)小鼠总RNA中扩增出kitl基因片段,测序后与GenBank(登录号:NM.013598)序列比对,找到mRNA上突变部位。PCR扩增kitl基因组DNA上对应部位进一步测序验证。结果发现kitl1-bao突变纯合子kitl基因mRNA缺少第8号外显子。在基因组DNA上kitl基因第8号内含子第2个碱基由T转换为C。

Kit和KitL在卵泡发育过程中的作用

在卵泡内,卵母细胞及其周围的颗粒细胞之间的旁分泌作用对哺乳动物的卵子发生和卵泡发育是非常重要的。研究表明颗粒细胞衍生的KitL(Kitligand,stem cell factor,SCF)与卵母细胞和膜细胞产生的Kit的相互作用在PGCs迁移和增殖、卵泡发育过程中有重要的作用。本文重点阐述了由KitL通过Kit激活的PI3K(phosphatidylinositol 3-kinase,磷脂酰肌醇-3-激酶)通路,它对卵母细胞生长、凋亡和卵泡早期发育起重要的调节作用。

烫伤对大鼠结肠Kit、Kitl及Gja1基因表达与胃肠动力的影响

目的:观察烫伤大鼠结肠Kit、Kitl及Gja1基因表达与肠道推进速率的改变,初步探讨严重烫伤后胃肠动力障碍的发生机制及临床意义。方法:56只Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组(8只),烫伤组(6个时相点各8只,麻醉后背部剃毛造成10cm×7cm的Ⅲ度创面)。烫伤组经乳酸钠林格液复苏后,于伤后3h、6h、9h、16h、24h、48h处死;对照组除烫伤外处理同实验组;处死前30min行碳素墨水灌胃(1ml/只),测量墨水最远端与幽门距离,示为肠道推进速率;另取起始段结肠,提取总RNA后进行实时定量RT-PCR。肠道推进速率及基因2-ΔΔCt值采用方差分析进行统计学处理。结果:伤后各时段大鼠肠道推进速率及Gja1、Kitl mRNA表达显著减弱(P<0.05或0.01);Kit mRNA表达除伤后3h外明显降低(P<0.05或0.01)。结论:烫伤后各时相大鼠肠道运动明显受抑;上述基因表达除3h时Kit外均显著减弱;至48h,各基因表达及肠道推进速率有所回升但仍明显低于正常水平。推测肠组织中Kit、Kitl与Gja1基因表达下调及其后续转录、翻译异常,可能参与了烫伤后胃肠运动障碍的发生过程。

两种白斑小鼠突变基因的染色体定位

以本中心ENU诱变获得的两种白斑突变小鼠W-4Bao与Kitl-1Bao为研究对象[均为C57BL/6J(B6)背景],遗传试验表明它们都为单基因显性遗传,W-4Bao及Kitl-1Bao突变基因纯合子小鼠的表型分别为全白色及“黑头白”;将白斑杂合子小鼠与DBA/2(D2)交配获得具有白斑表型的F1小鼠,F1小鼠再回交D2繁殖[(B6×D2)F1×D2]F2小鼠,利用微卫星标记对F2代小鼠进行连锁分析。结果发现W-4Bao与微卫星D5Mit356、D5Mit308之间的LOD值分别为56.82、51.50,从而把该突变基因定位于第5号染色体D5Mit356与D5Mit308之间;Kitl-1Bao与微卫星D10Mit70、D10Mit68之间的LOD值分别为27.37、21.20,从而把该突变基因定位于第10号染色体上D10Mit70与D10Mit68之间。经过检索小鼠基因组数据库确认它们的候选基因分别为kit及kitl。

始基卵泡活化的分子机制研究进展

始基卵泡是哺乳动物整个生殖期限中各级卵泡及卵子发育的源头。始基卵泡的激活既需要卵母细胞内如PI3K-PTEN-AKT-FOXO3、mTORC1及p27Kip1-CDK体系等信号通路的正常激活,也需要一些卵母细胞特异性的分子如Nobox和Sohlh1等的参与,除此之外,始基卵泡周围的前颗粒细胞也发挥巨大作用,其首先在m TORC1等信号通路的调节下分化为立方形颗粒细胞,改变自身形态,启动始基卵泡活化,其次可通过分泌KITL与卵细胞表面KIT结合后激活调节卵细胞生长的关键通路——PI3K信号通路,最终导致卵母细胞生长及始基卵泡的正常激活。了解始基卵泡活化过程有助于阐明卵子发生的分子机制,为女性不孕提供新的治疗靶点。