基于转录组分析白羽鹌鹑羽色形成机制

为研究白羽朝鲜鹌鹑羽色形成的分子机制,试验采用白羽朝鲜鹌鹑和野生型栗羽朝鲜鹌鹑的翅组织总RNA,通过转录组测序和分析,筛选与白羽形成相关的差异表达基因,并对部分基因进行了荧光定量PCR验证。结果显示:测序共得到77228条基因,在筛选的2512个差异表达基因中,白羽鹌鹑表达量上调的有950个,表达量下调的有1562个,共发现230条代谢通路中有基因的差异表达。差异表达基因DCT、SLC45A2、TYR、PMEL、MLPH、OCA2、TYRP1、ASIP等与皮肤、毛囊色素合成及运输有关,其中TYR和OCA2基因在白羽鹌鹑中显著下调(P<0.05)。研究表明:白羽鹌鹑羽色形成是多基因调控的复杂机制,其中与色素合成及运输相关的基因起到了关键作用。

朝鲜鹌鹑微卫星多态性分析

利用微卫星标记技术对朝鲜鹌鹑群体9个微卫星座位的遗传多样性进行分析,旨在为朝鲜鹌鹑遗传资源的评价、保护和利用提供新的依据。结果表明,9个微卫星座位共检测出44个等位基因,平均每个座位检测到4.89个。平均杂合度为0.7096,平均多态信息含量为0.6639,表明朝鲜鹌鹑是遗传多样性较丰富的群体。χ2检验结果表明,9个微卫星座位的基因分布均处于Hardy-Weinberg不平衡状态。

“916”对鹌鹑实验性动脉粥样硬化的预防作用

实验研究海洋新药“916”对动脉粥样硬化的预防作用。结果表明,“916”能明显降低高脂血症鹌鹑血清总胆固醇(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDL—C),升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL—C)及其亚组分Ⅲ(HDL_2—C),减少过氧化脂质(LPO)代谢产物丙二醛(MDA)生成,降低胆固醇,特别是胆固醇在动脉壁中的沉积,抑制动脉壁LPO生成,从而减少动脉粥样斑块的生成,能延缓和阻止了动脉粥样硬化的发生和发展。。

朝鲜鹌鹑OCA2基因克隆及其多态性与羽色的相关性

【目的】克隆朝鲜鹌鹑(Korean quail)OCA2基因的cDNA序列,检测其在不同羽色(白羽和栗羽)群体胚胎发育不同阶段翅组织中mRNA的表达情况,探讨OCA2基因多态性对朝鲜鹌鹑羽色的影响,筛选可能与羽色相关的多态性位点。【方法】取白羽、栗羽朝鲜鹌鹑孵化6,8,10,12和14 d的胚胎翅组织,提取总RNA,RT-PCR扩增OCA2基因cDNA序列,利用实时荧光定量PCR检测OCA2基因mRNA在朝鲜鹌鹑胚胎发育不同阶段和不同羽色鹌鹑胚胎翅组织中的表达水平;用胚胎发育10 d时的cDNA样品扩增OCA2基因cDNA序列并进行生物信息学分析。以300羽白羽朝鲜鹌鹑和栗羽朝鲜鹌鹑孵化10 d时的胚胎为研究材料,采集翅组织样品,提取基因组DNA,PCR扩增OCA2基因,通过不对称PCR-SSCP方法结合测序确定基因型,分析不同基因型对朝鲜鹌鹑羽色形成的影响。【结果】朝鲜鹌鹑OCA2基因胚胎发育6~8 d时的表达量低于胚胎发育10~14 d时的表达量,且在10 d时达到最高。6~8 d时,OCA2基因的表达水平在2种羽色朝鲜鹌鹑胚胎中差异不显著;10~14 d时,栗羽朝鲜鹌鹑OCA2基因mRNA的表达水平显著高于白羽朝鲜鹌鹑(P<0.05)。OCA2基因CDS区片段大小为2660 bp,含有24个外显子,开放阅读框长2556 bp,编码含851个氨基酸的稳定疏水性蛋白。在朝鲜鹌鹑OCA2基因中检测到3个SNP位点,分别为外显子2上的c.93A>G、外显子9上的c.999A>G、3′UTR上的c.2569C>T;群体遗传学分析显示,3个突变位点均表现为中度多态(0.25<PIC<0.5),χ^2检验表明朝鲜鹌鹑群体在3个SNP位点上均处于Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。在3′UTR上的c.2569C>T位点,栗羽朝鲜鹌鹑3种基因型(CC、CT和TT)的频率分布与白羽朝鲜鹌鹑存在极显著差异(P<0.01),说明该突变位点与鹌鹑羽色之间存在一定的关联性。【结论】白羽朝鲜鹌鹑翅组织中OCA2基因低表达可能与其羽毛白化有一定的关系,OCA2基因3′UTR上的c.2569C>T突变与朝鲜鹌鹑羽色性状之间具有一定的关联性,可以作为研究朝鲜鹌鹑羽色的候选基因。

MC1R基因与朝鲜鹌鹑羽色关系的研究

黑素皮质素受体1(MC1R)又称促黑素细胞激素受体(MSH-R),由毛色扩展位点编码而成,对动物体色的形成起重要作用,本研究分析了MC1R基因突变与朝鲜鹌鹑羽色之间的关系。通过混合样品DNA测序方法寻找MC1R基因的突变位点,采用PCR-SSCP的方法对突变位点在4种羽色鹌鹑(栗羽、黄羽、白羽、黑羽)群体中的分布情况进行了研究,以揭示MC1R基因与鹌鹑羽色性状之间的关系。结果表明,在鹌鹑MC1R基因上存在一个A/G突变位点,导致编码蛋白发生Ile58Val突变,通过PCR-SSCP分析发现,该突变位点在4种羽色鹌鹑群体间没有显著差异(P>0.05)。本研究没有发现与日本鹌鹑报道相同的Glu92Lys突变位点,表明朝鲜鹌鹑的黑羽突变与报道的日本鹌鹑黑羽突变的机制不同,而且朝鲜鹌鹑的黑羽突变可能还与其它基因突变有关。

朝鲜鹌鹑屠宰性能及其与体重的相关性分析

选择7日龄的朝鲜鹌鹑300只(公、母各半),在相同管理条件下饲养至38日龄,每周定期称重,并在38日龄时随机抽取150只(公、母各半)进行屠宰,系统分析公、母鹑的体重及主要屠宰性能指标。结果表明,除10日龄体重外,朝鲜母鹌鹑的体重均极显著地高于公鹌鹑(P<0.01);母鹑的宰前重、放血重、屠体重、半净膛重、全净膛重、半净膛率、胸肌率、腿肌重和胸肌重显著高于公鹑(P<0.05或P<0.01);相关分析显示,公、母鹑不同日龄体重间均呈极显著的正相关(P<0.01);除母鹑的半净膛率、全净膛率、胸肌重、腿肌重及公鹑的屠宰率、半净膛率、胸肌重、腿肌重外,不同日龄体重与其他屠宰性状间多呈显著的正相关(P<0.05或P<0.01)。

朝鲜鹌鹑的生长发育性能研究

选择300只10日龄的朝鲜鹌鹑(公、母各半),在相同的饲养管理条件下饲养4周,系统测定了各周的体重和体斜长、胸骨长、胸宽、胸深、胫长等体尺指标,并拟合了公、母鹑体重的Logistic生长曲线。结果表明,朝鲜鹌鹑公、母鹑38日龄体重为109.38 g和117.92 g,母鹑的生长速度明显高于公鹑,所拟合的公、母鹑体重的生长曲线方程分别为yt=122.5/[1+e-0.1200×(t-20.0921)](R2=0.9914)和yt=134.5/[1+e-0.1154×(t-21.0727)](R2=0.9933),鹑群生长发育均匀整齐。

不同饲养方式对朝鲜鹌鹑屠宰性能和肉品质的影响

目的试验旨在研究不同饲养方式对朝鲜鹌鹑屠宰性能和肉品质的影响。方法试验选择10日龄体重接近,健康无病的朝鲜鹌鹑为试验对象,试验分为2组,即网上平养组(对照组)和散养组(试验组),进行为期28 d的饲喂试验,并在38日龄全部进行屠宰,并进行分析不同饲养方式对朝鲜鹌鹑屠宰性能和肉质性状的影响。结果在屠宰性能方面,平养鹌鹑的屠体重、屠宰率和腿肌率显著高于散养(P <0. 05),平养胸肌重、腿肌重和胸肌率都极显著高于散养(P <0. 01)。在肉质性状方面,散养组朝鲜鹌鹑pH值比平养组极显著高5. 85%(P <0. 01),平养鹌鹑的粗蛋白含量显著(P <0. 05)高于散养鹌鹑,平养水分和粗蛋白含量均高于散养,差异不显著。结论平养不仅有利于改善朝鲜鹌鹑肌肉品质,使风味更加,也有利于生产者节约成本,提高利润。

凝结芽孢杆菌对朝鲜鹌鹑生长性能、蛋品质和血清抗氧化指标的影响

为探究不同水平的凝结芽孢杆菌制剂对朝鲜鹌鹑生长性能、蛋品质和血清抗氧化指标的影响,试验选取300只蛋用朝鲜鹌鹑,随机分为5组,每组设3个重复,每个重复20只。对照组饲喂基础日粮,4个试验组分别在基础日粮中添加0.1%、0.15%、0.2%和0.3%的凝结芽孢杆菌制剂。结果表明:与对照组相比,试验3组的平均日增重显著提高(P<0.05);试验1、2、3和4组的蛋白高度和哈夫单位极显著高于对照组(P<0.01),试验1、2和3组的蛋壳强度极显著高于对照组(P<0.01);与对照组相比,试验3组血清中的过氧化氢酶(CAT)含量显著提高(P<0.05);与对照组相比,试验1、2和3组血清中的总抗氧化能力(T-AOC)极显著提高(P<0.01),试验2组血清中的丙二醛(MDA)含量极显著降低(P<0.01)。以上结果表明,日粮中添加凝结芽孢杆菌制剂可提高朝鲜鹌鹑的生长性能,改善蛋品质,提高血清抗氧化能力,添加量以0.2%较为适宜。

朝鲜鹌鹑GNAS基因表达、克隆及其多态性与羽色的相关性

为了研究朝鲜鹌鹑GNAS基因表达和多态性与羽色的相关性,取栗羽和白羽朝鲜鹌鹑不同发育时期胚胎翅尖组织,采用Trizol法提取总RNA,实时荧光定量PCR检测GNAS基因在朝鲜鹌鹑胚胎发育不同阶段和不同羽色鹌鹑胚胎翅组织中mRNA的表达水平;克隆GNAS基因的CDS全序列并进行生物信息学分析;采集孵化至10 d胚胎翅尖组织提取基因组DNA,PCR扩增GNAS基因的特定序列,通过不对称PCR-SSCP方法结合测序确定基因型,分析不同基因型对朝鲜鹌鹑羽色形成的影响。结果表明,胚胎发育8~14 d时,GNAS基因在栗羽鹌鹑胚胎组织中的表达水平极显著(P<0.01)高于白羽鹌鹑胚胎。GNAS基因CDS区开放阅读框长1140 bp,含有14个外显子,编码含379个氨基酸的稳定性亲水蛋白。在朝鲜鹌鹑GNAS基因中检测到2个SNP位点,分别为外显子12区域的g.119221T>A和3′UTR区域的g.121181A>G。栗羽朝鲜鹌鹑的3种基因型(AA、AB和BB)的频率分布与白羽朝鲜鹌鹑存在极显著差异(P<0.01)。结论表明,朝鲜鹌鹑组织中GNAS基因的表达量高低与其羽色的形成有一定的关系,GNAS基因3′UTR上的g.121181A>G位点突变与朝鲜鹌鹑羽色性状之间具有显著关联性,可作为研究朝鲜鹌鹑羽色的一个候选基因。

鹌鹑线粒体cytb基因和ND2基因的系统发育分析

为了比较朝鲜鹌鹑种内变异及其与其他物种的亲缘关系,试验分别选用黑羽、白羽、栗羽、黄羽4种羽色鹌鹑各8只,对其线粒体cytb基因和ND2基因进行PCR扩增、测序,并与其他不同鸟类的相应基因进行序列比对分析,采用最大似然法(ML)和邻接法(NJ)构建系统发育树,分析朝鲜鹌鹑的种内突变位点及与其他物种的亲缘关系。结果表明:cytb基因在4种羽色鹌鹑之间没有突变位点。ND2基因有2个突变位点,并造成氨基酸突变,即在490 bp处碱基G突变为A,导致164位点处氨基酸由缬氨酸(V)变为异亮氨酸(I),在800 bp处碱基T突变为C,导致第267位点处氨基酸由异亮氨酸(I)变为苏氨酸(T)。与朝鲜鹌鹑亲缘关系最近的是日本鹌鹑,其次是中国鹌鹑。说明线粒体cytb和ND2基因适合用于鸟类亲缘关系分析,朝鲜鹌鹑是由日本鹌鹑改良而来的。

朝鲜鹌鹑MHC class Ⅰ基因第2、3外显子多态性与NDV抗性的关联分析

【目的】研究朝鲜鹌鹑MHC classⅠ基因第1,2和3外显子的多态性,并与新城疫病毒抗性进行关联分析。【方法】采用胸肌注射的方法对14日龄朝鲜鹌鹑进行新城疫La Sota弱毒株攻毒,每周注射1次,连续攻毒3周后,心脏采血,采用β-微量法测定血清中新城疫抗体水平。PCR扩增朝鲜鹌鹑MHC classⅠ基因,测序后采用DNA Star、SPSS等分析软件研究朝鲜鹌鹑MHC classⅠ基因第1,2,3外显子的多态性,并分析不同基因型新城疫抗体水平的差异。【结果】朝鲜鹌鹑的新城疫抗体效价为26～210。PCR扩增获得了1 290bp的MHC classⅠ基因,其编码区序列为780bp,编码259个氨基酸。通过与已知序列日本鹌鹑RNA(AB005528)比对,得到长度分别为76,272和274bp的第1,2和3外显子。在第1外显子上未检测到突变为点,在第2和3外显子上共检测到11个突变位点(第2外显子上4个突变位点:257bp(A/C)、267bp(A/T)、366bp(A/G)和500bp(T/G);第3外显子上7个突变位点:795bp(T/C)、798bp(T/C)、810bp(T/G)、830bp(A/G)、873bp(A/T)、927bp(A/G)和932bp(C/G)),均为中度多态基因座,11个突变位点中,267bp(A/T)、830bp(A/G)、873bp(A/T)、932bp(C/G)突变导致编码氨基酸改变,500bp(T/G)、873bp(A/T)、932bp(C/G)突变位点基因型之间新城疫抗体水平存在显著差异(P<0.05)。【结论】朝鲜鹌鹑MHC classⅠ基因第2、3外显子具有丰富的多态性,并且与新城疫病毒抗性相关。

朝鲜鹌鹑生长性能和屠宰性能研究

为了揭示朝鲜鹌鹑生长发育的性能特征,笔者选择10日龄、体质量接近、健康无病的朝鲜鹌鹑为试验对象,在相同的饲养管理条件下进行为期28 d的饲喂试验,在38日龄全部进行屠宰,并系统分析公、母鹑的主要生长性能和屠宰性能指标。结果表明,母鹑体斜长比公鹑极显著长8.17%(P<0.01);母鹑胸深比公鹑极显著深5.15%(P<0.01);与公鹑相比,母鹑胫长极显著长7.72%(P<0.01);母鹑胸宽较公鹑显著宽1.58%(P<0.05)。母鹑的体质量极显著高于公鹑(P<0.01),不同日龄体质量间均呈极显著的正相关关系(P<0.01),且不同日龄体质量与其他屠宰性状间多呈显著的正相关关系(P<0.05或P<0.01)。朝鲜鹌鹑平均屠宰率,半净膛率,全净膛率,腿肌率,胸肌率分别为87.50%、78.83%、62.18%、31.27%和19.00%;母鹑的活体质量、屠体质量、半净膛质量、全净膛质量、胸肌质量和腿肌率极显著高于公鹑(P<0.01),腿肌质量、半净膛率和胸肌率显著高于公鹌鹑(P<0.05);而母鹑的屠宰率和全净膛率高于公鹑,差异不显著(P>0.05),并且屠宰性能各指标之间存在高度相关性。