鼠棒状杆菌层析免疫检测方法的建立及应用

本研究对制备出的单克隆抗体进行鉴定,并以此为基础构建鼠棒状杆菌免疫层析检测方法,制备检测试纸。试验结果表明:试验获取的单克隆抗体效价高(1.6×10^(3)~1.28×10^(4)),特异性和灵敏度好。免疫层析胶体金试纸最低检出限为10^(-6)CFU/mL,与大肠杆菌、沙门氏菌等无交叉反应,具有一定的临床意义。

一株肉牛源干燥棒状杆菌的分离鉴定

为了确定河北省昌黎县某肉牛场肉牛发病原因,本研究从呼吸道症状明显的病牛鼻粘液中分离纯化到1株优势菌,采用细菌培养、革兰氏染色、细菌生化鉴定、rpoB基因检测、16S rRNA序列分析方法鉴定,经K-B试纸法检测该分离菌对泰乐菌素、头孢拉定等18种抗生素的药物敏感性。结果显示,分离菌革兰氏染色呈阳性短杆状球菌,在血琼脂培养基上可生长为干燥且粗糙的淡黄色菌落,在LB液体培养基中呈沉淀生长,菌液上层轻微浑浊,下层有颗粒状、片状沉淀;rpoB基因PCR扩增检测结果为阳性;该分离菌具有脂酶、赖氨酸脱羧酶、β-葡萄糖苷酶、α-葡萄糖苷酶活性,能够发酵海藻糖、麦芽糖、蔗糖,结果符合干燥棒状杆菌生化特性;16S rRNA序列比对分析表明,该分离菌与干燥棒状杆菌同源性为99%,一致性为91.6%;对泰乐菌素、头孢拉定等7种药物耐药,对环丙沙星、恩诺沙星等9种药物敏感。试验结果表明该分离菌为干燥棒状杆菌。

香柠檬精油抗伪结核棒状杆菌作用及机制研究

伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis,Cp)感染可影响家畜尤其是反刍动物羊的生产性能,本文旨在筛选对Cp有抑杀活性的植物精油并研究其作用机制,为Cp感染防控提供参考。通过纸片扩散法从4种植物精油中筛选出能高效抑杀Cp的香柠檬精油(bergamot essential oil, BEO),采用刃天青指示剂微量肉汤稀释法测定BEO对Cp不同菌株的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)。通过体外试验评价BEO对Cp感染J774A.1巨噬细胞的影响。通过测定脏器载菌量、脾抗菌肽基因表达量和存活率综合评价BEO对Cp感染昆明系小鼠的保护作用。采用扫描电镜观察BEO作用后Cp菌体形态变化,并检测BEO作用后Cp的DNA泄漏以及毒力基因表达情况,初步研究BEO抗Cp机制。结果显示:BEO具有较强的抗Cp作用,其MIC为0.78~1.56μL·mL^(-1)。BEO可降低Cp感染小鼠肾、肝和腹水的细菌负荷(P<0.01),上调Cp感染小鼠脾中抗菌肽Cramp、Bpifal 1、mBD2、mBD3和mBD4的mRNA表达水平(P<0.01)。BEO处理可降低Cp对J774A.1巨噬细胞的感染率,提高被Cp感染小鼠的存活率(P<0.05)。BEO处理使Cp细胞膜凹陷,菌体内DNA外渗增加(P<0.05),以及下调毒力基因磷脂酶D(phospholipase D,pld)的表达(P<0.01)。BEO能抑杀Cp,改善Cp对小鼠的感染程度,其机制可能与BEO损伤Cp细胞膜造成DNA泄漏并降低毒力基因pld的mRNA表达,以及促进Cp感染小鼠抗菌肽Cramp、Bpifal 1、mBD2、mBD3和mBD4的表达有关。

羊伪结核棒状杆菌的分离鉴定及部分生物学特性分析

为明确重庆和贵州部分羊场发生体表淋巴结脓肿病料中伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis,Cp)感染情况及其生物学特征,对山羊体表脓肿样本进行Cp分离鉴定、致病性试验、药敏试验、毒力/耐药基因检测及系统进化分析。结果:从40份样本中分离到23株Cp,分离率达57.5%。毒力基因检测显示,所有Cp分离菌均携带pld、FagA、FagB、OppB、OppD、OppF、SodC、SpaC、pknG、NanH、sigE和cp40基因。药敏试验显示,所分离Cp对头孢拉定、丁胺卡那和多西环素敏感率最高,达95.65%(22/23),其次为青霉素、氨苄西林、四环素、万古霉素和环丙沙星,敏感率为91.30%(21/23),但对呋喃唑酮100%耐药,对新霉素和卡那霉素耐药率为82.61%(19/23)。Cp分离菌中氨基糖苷类耐药基因aph(3′)-IIa和广谱A类β内酰胺酶耐药基因bla TEM-116的检出率分别为0和4.35%。对所有Cp的fusA进行测序并获得GenBank登录号ON969140-ON969162,系统进化分析显示所分离的Cp均聚类到羊生物型(biotype ovis)。本研究证实Cp是引起重庆和贵州部分羊场发生体表淋巴结脓肿的主要病原,并明确其部分生物学特性,为防控该病原提供了参考资料。

山羊伪结核棒状杆菌噬菌体的分离鉴定

为获得有效抗山羊伪结核棒状杆菌感染的生物制剂,根据NCBI登录的伪结核棒状杆菌菌株及棒状杆菌属噬菌体序列信息分别对其时间和地理分布进行统计,并以山羊伪结核棒状杆菌为宿主菌,从陕西有山羊伪结核患病史羊场的环境污水中分离噬菌体,采用双层平板法对该噬菌体进行分离和表征鉴定。结果显示,山羊伪结核棒状杆菌病的发生呈全球性分布,其中以美国与巴西最为严重,美国也是棒状杆菌属噬菌体分离株的主要来源地;分离出的1株噬菌体命名为M2;噬菌体M2呈典型的20面体结构,最佳感染复数为0.1,潜伏期为20 min,裂解周期为60 min,平均裂解量约为690 PFU/cell,表明获得了1株对伪结核棒状杆菌具有裂解作用的噬菌体。研究结果可为山羊伪结核棒状杆菌感染防控提供流行病学数据参考,并可为山羊伪结核棒状杆菌感染的临床治疗提供潜在新方法。

COVID-19合并纹带棒状杆菌肺部及血流感染:病例及文献回顾

本文通过报道一例COVID-19感染,并结合近10年相关文献进行回顾,更多的案例警示纹带棒状杆菌可引起危及生命的感染。临床需加以更多关注。在COVID-19流行期间,纹带棒状杆菌感染被更多地观察到。早期识别、早期给予敏感抗生素以及并发症治疗等综合治疗将对纹带棒状杆菌相关感染患者有益。

糖尿病足伤口分泌物中同时检出2种不同形态纹带棒状杆菌病例报道

纹带棒状杆菌(Corynebacterium striatum)是一种无芽孢的革兰阳性棒状杆菌,通常认为是寄生在人鼻咽部、皮肤或黏膜表面的正常菌群^([1])。近年来,临床发现纹带棒状杆菌可能引起感染者免疫功能下降,尤其是接受过介入性手术(气管插管、使用呼吸机、静脉导管、尿导管等)的患者,易引发其各类感染,如肺炎、菌血症、心内膜炎、骨髓炎^([2])。常见的纹带棒状杆菌临床分离株为光滑型,粗糙型较罕见,特别是在1份临床样本中同时分离出光滑型和粗糙型纹带棒状杆菌,尚未见报道。

MALDI-TOF-MS技术在肉芽肿性乳腺炎脓液棒状杆菌检测中的应用研究

目的:研究拟通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术在脓液克氏棒状杆菌(CK)鉴定过程中的应用探索,为临床微生物实验室对CK的准确鉴定提供帮助。方法:无菌条件下分别采集2019年1月-2021年7月镇江市妇幼保健院乳腺科门诊及病房30例经病理确诊为肉芽肿性乳腺炎(GM)患者手术中获取的新鲜脓肿穿刺液标本,用于细菌、真菌、结核菌涂片检查及需氧菌、厌氧菌培养。结果:采用梅里埃VITEK2compact全自动细菌鉴定仪进行生化鉴定,结果表明,23株菌鉴定为CK,其余7株菌均鉴定失败或错误。布鲁克MALDIBiotyper质谱仪鉴定结果27株为CK,仅3株菌鉴定失败,该结果与16SrRNA测序结果一致性较高,但是27份标本中鉴定为CK的质量分数相对较低。结论:MALDI-TOF-MS技术在棒状杆菌属细菌鉴定方面的应用可以为临床诊治GM方面提供病原学理论依据。

山羊伪结核棒状杆菌病防治体会

伪结核棒状杆菌病是一种人畜共患接触性传染病。某养殖户饲养的山羊中有1只出现干酪样淋巴结炎、脓肿等特征病变,结合显微镜检查初步诊断为伪结核棒状杆菌病。笔者通过局部涂抹红霉素软膏、肌肉注射头孢噻呋钠等治疗,并采取相关措施预防同群山羊接触感染,取得了满意效果。

纹带棒状杆菌的特征分析及耐药基因检测

目的 为临床治疗纹带棒状杆菌合理用药和防止其医院内传播提供参考。方法 收集福建省某医院临床分离的49株纹带棒状杆菌,对其临床资料进行分析,检测12种药物的药敏试验结果和7种耐药基因携带情况。结果 49株纹带棒状杆菌的标本来源以痰最多(63.27%),其次为尿(16.33%);患者主要分布于重症医学科(36.73%)、干部特诊科(26.53%)和神经科(16.33%)。该菌对头孢曲松、红霉素、环丙沙星的耐药率均为100%,对青霉素、克林霉素、美罗培南的耐药率分别为95.92%、95.92%、93.88%;对庆大霉素、利福平的耐药率较低,分别为12.24%、8.16%,未检出对利奈唑胺、万古霉素耐药的菌株。ermX基因、tetL基因的阳性率均为100%,tetW基因的阳性率为69.39%,aph(3’’)-Ib基因、aac(6’)-Ib基因的阳性率分别为18.37%、6.12%,未检出aadA基因和blaIMP基因。结论 纹带棒状杆菌主要引起免疫力低下人群和老年患者的呼吸道、泌尿道感染。该菌耐药严重,但对庆大霉素、利福平、利奈唑胺、万古霉素耐药率较低,可用于该菌所致感染的治疗。

结核硬脂酸棒状杆菌肺部感染1例

结核硬脂酸棒状杆菌(Corynebacterium tuberculosis,C.t.)是一种不产生芽孢且革兰染色阳性的亲脂性棒状杆菌,常为人类皮肤和黏膜表面的正常菌群,但在侵入性操作后可侵入深层组织并引起感染。C.t.感染在临床中较少见,为提高临床医生对本病的认识,通过1例培养诊断为结核硬脂酸棒状杆菌肺部感染的死亡病例报道,并结合国内外相关文献分析其临床特征及治疗方法等。

肉芽肿性乳腺炎样本中检出克罗彭施特棒状杆菌1例报道

棒状杆菌属有81个菌种和亚种,除白喉棒状杆菌外,多为人类皮肤的正常菌群。肉芽肿性乳腺炎是一种少见的乳腺良性肉芽肿性病变,常发现于经产育龄期女性[1]。有研究结果显示,棒状杆菌感染可能与肉芽肿性乳腺炎的发病机制密切相关[2]。本研究报道1例由克罗彭施特棒状杆菌引起的肉芽肿性乳腺炎病例,以提高临床和微生物实验室对棒状杆菌引起的此类感染的认识。

纹带棒状杆菌感染研究进展

纹带棒状杆菌是一种机会致病菌,近年来该菌引起的临床感染病例逐年增加,且呈现多重耐药趋势,感染后如不及时治疗可导致死亡。本文根据最新研究进展对其病原学特点、致病机制、流行病学特征、实验室检测、耐药现状及耐药机制、感染的治疗与预防进行综述。

纹带棒状杆菌机会性感染及耐药性与基因关系研究进展

纹带棒状杆菌(Corynebacterium striatum)是一种革兰阳性杆菌,可定植于皮肤、呼吸道以及环境中,过去常常被认为是非致病菌而被忽视[1]。近年来,随着医学进步,有创性诊疗措施应用于危重症及慢性病患者、细菌检验技术进步及抗生素广泛使用,越来越多研究发现其可致多部位机会性感染,严重者可致死亡[2-3]。因其常作为定植菌未被重视,而其多重耐药特点给临床诊治加大难度。本文就纹带棒状杆菌病原学、机会性感染特点及耐药研究进展做一综述。

89株纹带棒状杆菌耐药性及其耐药基因特征分析

目的通过分析河北省华北理工大学附属医院临床分离的纹带棒状杆菌的耐药性和基因组特征,为临床鉴别、治疗和防控提供参考。方法收集并鉴定临床分离非重复纹带棒状杆菌89株。经VITEK2-Compact全自动细菌仪联合16S rRNA鉴定为纹带棒状杆菌,采用微量肉汤稀释法进行体外药敏试验,使用全基因组测序技术进行测序。结果药敏结果显示所有菌株对利奈唑胺及万古霉素都表现为敏感,对环丙沙星(89,100.0%)全部耐药;全基因组测序共检出identity在90%以上耐药基因16种,大环内酯类和氨基糖苷类耐药基因和耐药表型匹配度较高;在基因组水平上,纹带棒状杆菌的传播具有优势克隆群。结论该院分离的纹带棒状杆菌同时携带多种抗菌药物的耐药基因,其某些耐药表型和耐药基因型具有一致性。该院纹带棒状杆菌院内传播由于优势克隆群的存在,菌株在进化过程中能通过耐药基因的获得及累积而产生不同的克隆群。

4例感染纹带棒状杆菌的病例报道

纹带棒状杆菌是革兰染色阳性菌,属于非白喉棒状杆菌,常呈栅栏状或V字状等,排列不规则,无芽孢。首次由GARCIA等[1]报道,定植在人体皮肤和呼吸道中,是一种条件致病菌,通常从创面分泌物、呼吸道标本、尿液、腹腔引流液和血培养中分离出来[2]。多重耐药是指对三类或三类以上结构不同(作用机制不同)的抗菌药物同时耐药。近年来,纹带棒状杆菌被认为是多重耐药细菌,在免疫力低下的患者中感染率较高[1],如长期使用抗菌药物、规律血液透析、器官移植、置管等介入性操作[2]或患有糖尿病、恶性肿瘤等基础疾病的患者,越来越引起临床的重视。现将本院发现的4例纹带棒状杆菌引起的相关性感染病例报道如下。

谷氨酸棒状杆菌合成L-高丝氨酸的代谢改造与发酵条件探究

目的:本研究以谷氨酸棒状杆菌ATCC 13032为底盘细胞,构建1株L-高丝氨酸合成菌株并分析溶氧环境对其产物合成的影响。方法:首先通过外源添加0~40 g/L的L-高丝氨酸分析谷氨酸棒状杆菌的产物耐受性;随后,通过基因thrB敲除阻断L-高丝氨酸的降解途径,获得谷氨酸棒状杆菌重组菌H1;在此基础上利用挡板摇瓶进行细胞培养以增强发酵过程中氧气供给能力。结果:与大肠杆菌相比,谷氨酸棒状杆菌对L-高丝氨酸具有更强耐受性。研究中通过敲除基因thrB构建了L-苏氨酸缺陷型谷氨酸棒状杆菌重组菌H1,发现基础培养基中加入0.5 g/L的L-苏氨酸后,该重组菌生长恢复正常水平。挡板摇瓶条件下重组菌H1的L-高丝氨酸产量增加至836.7 mg/L,较普通摇瓶产量44.6 mg/L提高了17.76倍。结论:通过阻断L-苏氨酸的合成,成功构建L-高丝氨酸合成菌株谷氨酸棒状杆菌H1,并且发现利用挡板摇瓶增强发酵过程中供氧能力是促进谷氨酸棒状杆菌高效合成L-高丝氨酸的有效手段,为后续提高L-高丝氨酸发酵产量提供了参考。

棒状杆菌引起感染性心内膜炎1例

棒状杆菌(Corynebacteriu)广泛存在于水、土壤中,是人类口腔、鼻腔、外阴和皮肤的常居菌。从临床送检标本中分离出的棒状杆菌,通常被认为是污染。但现在越来越多文献报道其可引起严重的感染,如感染性心内膜炎(IE)、导管相关感染、假体关节感染等。棒状杆菌是IE的重要病原体,但目前由棒状杆菌引起的IE报告很少,治疗经验相对不足,且棒状杆菌的抗生素耐药性正在增加,使治疗更具有挑战性,需要更多的经验来进一步学习。本文描述1例以急性脑梗死为首发症状的老年男性患者,两次血培养结果经基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定为棒状杆菌,最终确诊为IE。

克氏棒状杆菌与囊性中性粒细胞性肉芽肿性乳腺炎相关性的研究进展

囊性中性粒细胞性肉芽肿性乳腺炎(CNGM)是肉芽肿性乳腺炎(GM)中的一种特殊亚型,具有高度独特的组织学类型。该疾病的病理特征表现为化脓性脂肪肉芽肿,由中性粒细胞和上皮样组织细胞包绕形成中心脂质空泡,其中含有稀疏的革兰阳性细菌容易被遗漏或忽略。该文就克氏棒状杆菌与CNGM相关性的研究进展作一综述。

羊伪结核棒状杆菌毒力基因、耐药基因及耐药性检测

羊伪结核棒状杆菌病是由伪结核棒状杆菌所引起的一种顽固性人兽共患病,为探究从云南省宜良县某羊场分离到的1株羊伪结核棒状杆菌的致病性和耐药性,利用PCR技术对FagA、FagB、FagC、FagD、磷脂酶D(phospholipaseD,PLD)毒力基因进行检测,并检测blaTEM、blaCMY-2、blaSHV、blaOXA、blaCTX-M、rpoB耐药基因,利用K-B纸片法进行药敏试验。结果显示:该菌株携带5种毒力基因,且携带介导β-内酰胺类药物的blaOXA耐药基因;对青霉素G、红霉素、四环素和氧氟沙星等多种抗生素敏感,对庆大霉素、链霉素和新霉素中度敏感。本研究结果可为羊伪结核棒状杆菌病的治疗提供依据。