猪带绦虫10ku蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其初步应用

将猪带绦虫六钩蚴10 ku蛋白(TSO10)和囊尾蚴10 ku蛋白(CE10)的基因克隆到表达载体中,构建重组表达载体pGEX-4T-TSO10和pGEX-4T-CE10,经测序证明基因序列完全正确。重组表达载体转化大肠杆菌后诱导表达,用SDS-PAGE、Western-blot和薄层扫描检测表达产物。表达的目的蛋白纯化后用于血清样品ELISA检测。SDS-PAGE、Western-blot和薄层扫描检测结果表明,六钩蚴和囊尾蚴10 ku蛋白基因均能在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白的相对分子质量约为35 ku,并能被囊虫病人阳性血清所识别,具有反应原性,表达量分别占菌体蛋白总量的25%和30%。ELISA检测结果显示,10 ku蛋白可用于囊虫病的诊断。

鼻咽癌变过程基因组稳定与修复基因表达

[目的]研究鼻咽癌变过程中基因组稳定与修复基因的表达情况。[方法]在鼻咽癌高发区,选择鼻咽炎、鼻咽癌前病变及鼻咽癌患者的鼻咽组织作为研究对象,TRIZOL试剂抽提RNA,cRNA标记与合成、基因组稳定和DNA修复基因芯片(Oligo Genome Stability & DNARepair Microarray,美国SuperArray公司,CatalogNo.OHS-042)杂交,化学发光检查及图像采集和数据分析。[结果]在基因组稳定和DNA修复基因芯片128个基因中,对比于鼻咽炎患者,上调3倍以上的基因鼻咽癌前病变者有14个基因,鼻咽癌有8个基因,无下调1倍以上的基因;对比于鼻咽癌前病变者,上调3倍以上的基因鼻咽癌有14个,无下调1倍以上的基因。乳腺癌易感基因2、Ku70结合蛋白3基因在鼻咽癌变过程中呈现高表达。[结论]在鼻咽癌变过程中,基因组稳定与修复基因多表现为上调表达,下调表达很少。

导入玉米10ku醇溶蛋白基因提高马铃薯块茎中含硫氨基酸的含量

通过 ＰＣＲ技术扩增玉米 １０ ｋｕ醇溶蛋白基因编码序列和马铃薯 Ｐａｔａｔｉｎ ｃｌａｓｓⅠ启动子，构建了 Ｐａｔａｔｉｎ ｃｌａｓｓⅠ启动子驱动此醇溶蛋白基因的表达载体，经农杆菌介导的叶盘法转化马铃薯．ＰＣＲ和ＮＰＴⅡ活性分析证明， １０ ｋｕ醇溶蛋白基因已整合到马铃薯基因组中． ＲＴ－ＰＣＲ分析表明，１０ ｋｕ醇溶蛋白基因在转基因马铃薯块茎中得到表达．气生块茎和大田块茎的氨基酸分析发现，转基因马铃薯块茎中含硫氨基酸含量有明显提高．