卒中相关感染患者外周血皮质醇、IFN-γ、IL-4和IL-10的变化

目的探讨卒中相关感染(SAI)患者血清皮质醇及血浆γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)水平的变化。方法连续收集发病24 h内入院的急性脑梗死或脑出血患者共85例,根据入院7 d内有无感染将患者分为感染组(n=29)和非感染组(n=56)。分别于入院第1天和第7天,采用化学发光法测定血清皮质醇水平,双抗体夹心酶联免疫反应测定血浆IFN-γ、IL-4和IL-10水平。采用多因素非条件逐步Logistic回归分析法分析SAI的易感因素。结果入院第1天和第7天,感染组皮质醇、IL-4和IL-10水平均显著高于非感染组(P<0.05),IFN-γ水平显著低于非感染组(P<0.05)。入院第1天,相关性分析显示,皮质醇与IFN-γ水平呈负相关(r=-0.299,P=0.024),与IL-4、IL-10水平呈正相关(r=0.298,P=0.040;r=0.306,P=0.026)。Logistic回归分析显示,入院第1天皮质醇水平升高是SAI发生的独立危险因素(OR=0.903,95%可信区间为0.816～1.000,P=0.05)。结论皮质醇、IFN-γ、IL-4和IL-10在SAI发生中起重要作用。

rshCD_(40)L、IFN-γ对食管癌Eca109、Eca9706、TE13细胞增殖和凋亡的影响

目的观察可溶性重组人CD40L(rshCD40L)、IFN-γ对食管癌Eca109、Eca 9706、TE13细胞增殖和凋亡的影响。方法取正常培养的食管鳞癌细胞株Eca109、Eca 9706、TE13,分别用PBS、100 U/ml IFN-γ、100 ng/ml rsh-CD40L、100 U/ml IFN-γ+100 ng/ml rshCD40L培养,分别为A、B、C、D组。用MTT法测算各组细胞增殖抑制率,用TUNEL法检测细胞凋亡率。结果 C组Eca109、Eca9706、TE13细胞增殖抑制率分别为40.6%±4.2%、31.5%±5.7%、44.6%±6.7%,明显高于A、B组(P均<0.05);D组分别为56.7%±4.9%、41.2%±6.2%、51.6%±5.2%,均高于C组(P均<0.05)。C组Eca109、Eca9706、TE13细胞凋亡率分别为33.6%±3.7%、30.5%±2.8%和37.6%±4.9%,明显高于A、B组(P均<0.05);D组分别为43.7%±4.7%、34.2%±5.1%、41.5%±5.7%,均高于C组(P均<0.05)。结论 rshCD40L能促进食管癌Eca109、Eca9706、TE13细胞凋亡,并抑制其增殖。IFN-γ可增强这一作用。

IFN-γ、L-Arg及L-NNA对感染旋毛虫的沙鼠血液及腓肠肌NO合成和组织病理变化的影响

目的探讨IFN-γ、L-Arg和L-NNA对感染旋毛虫的沙鼠血液及腓肠肌NO合成和组织病理变化的影响。方法经腹腔给予感染旋毛虫后不同时期的沙鼠不同剂量的IFN-γ、L-Arg和L-NNA,检测沙鼠血清及腓肠肌NO的含量。观察腓肠肌的病理变化。结果IFN-γ和L-Arg组沙鼠血清及腓肠肌NO含量随药物浓度的增加而升高;L-NNA阴性对照组血清NO含量和感染25 d的L-NNA组腓肠肌NO含量升高,L-NNA实验组血清NO含量及阴性对照组、旋毛虫感染7 d组4、0 d组腓肠肌NO含量降低。实验组腓肠肌内囊包数较阳性对照组略有减少。结论IFN-γ和L-Arg能促进感染旋毛虫的沙鼠血液及腓肠肌NO合成,L-NNA则具有增强或抑制NO合成的双重作用。

IFN-γ和L-NNA对感染旋毛虫沙鼠血清和小肠的影响

目的 探讨IFN -γ和L -NNA对感染旋毛虫沙鼠血清和小肠NO水平的影响及其对小肠组织病理变化的影响。方法 (1)给予不同浓度的IFN -γ或L -NNA作用于正常和感染旋毛虫后不同时期的沙鼠 ,测定血清和小肠NO生成量。 (2 )观察小肠组织病理变化。结果 (1)在各期沙鼠血清和小肠中 ,IFN -γ表现为促进NO合成。 (2 )L -NNA表现出不同的影响。它抑制感染鼠血清NO生成 ,却促进正常鼠血清NO合成。在沙鼠小肠 ,L -NNA降低正常鼠及感染后 4 0d组NO水平 ,却促进感染后 7d、2 5d组NO的合成。 (3)小肠病理变化 :在给予IFN -γ或L -NNA组 ,药物低剂量组与未用药组相比无明显改变。高剂量组 ,可见肠组织破坏更严重 ,两种药物之间病变程度无明显差别。结论 (1)IFN -γ能促进血清和小肠NO合成。 (2 )L -NNA对感染后不同时期沙鼠血清和小肠的NO合成有抑制或促进作用。 (3)过高的NO产量能使小肠组织的炎症病变加重。

体外培养中IFN-γ、L-Arg及L-NNA对NO合成的影响及NO抗旋毛虫的作用

目的 探讨体外培养中IFN γ、L Arg及L NNA对NO合成的影响及NO抗旋毛虫的作用。 方法 分离、纯化长爪沙鼠腹腔巨噬细胞 ,置RPMI16 4 0培养液中培养。设IFN γ组、L Arg组、L NNA组和对照组 ,每个实验组又分 5个不同的浓度组。分别向含有巨噬细胞的培养瓶中加入不同浓度的IFN γ、L Arg及L NNA进行体外培养。培养 2 4h后 ,用硝酸还原酶法分别测定培养液中的NO含量。将旋毛虫幼虫分别加入上述培养体系中进行体外培养 ,观察旋毛虫幼虫的活动及损伤。结果 ①体外培养中 ,激活的巨噬细胞能产生NO ,IFN γ和L Arg能促进NO的合成 ,L NNA则能抑制NO的合成 ,这种促进或抑制NO合成的作用均具有剂量依赖性 ,剂量越高作用越明显。②加入旋毛虫幼虫后 ,在IFN γ和L Arg培养体系中 ,随着NO浓度的升高及作用时间的延长 ,对虫体的抑制及杀伤作用越来越明显 ,导致其活动度减弱 ,虫体破裂 ,最终死亡 ;在L NNA培养体系中 ,L NNA浓度越高 ,对虫体的影响越小。结论 ①体外培养中 ,通过激活的巨噬细胞 ,IFN γ和L Arg能促进NO的合成 ,给予L NNA则能抑制NO的合成。

干扰素-L3在抗猪肠道冠状病毒中的应用研究进展

猪肠道冠状病毒包括猪流行性腹泻病毒(PEDV)、传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV),是造成新生仔猪致死性水样腹泻的主要原因,可引起重大的经济和公共卫生负担。因此,研发新的抗猪肠道冠状病毒制剂十分必要。虽然几种已发现的猪肠道冠状病毒细胞受体不同,但均主要感染肠道上皮细胞。Ⅲ型干扰素(IFN-L)可选择性作用于上皮细胞,如呼吸道以及胃肠道等,在上皮细胞抗感染中发挥重要作用。文章综述干扰素-L3(IFN-L3)在猪肠道冠状病毒防治中的优势及其在临床应用中的相关理论和治疗策略,旨在为广谱抗猪肠道冠状病毒治疗剂的应用研究提供参考。

日本血吸虫可溶性虫卵抗原和可溶性雄虫抗原免疫小鼠PD-1-PD-L的表达

目的探讨日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)和可溶性雄虫抗原(SMWA)免疫小鼠PD-1-PD-L的表达,及其与相关细胞因子的关系。方法18只BALB/c雌性小鼠随机分为3组,健康对照组(A组)、SEA免疫组(B组)和SMWA免疫组(C组),B、C两组分别用日本血吸虫SEA和SMWA腹部皮下多点注射免疫,剂量均为50μg/次,免疫4次,每次间隔1周;健康对照组用PBS代替。末次免疫4周后收集脾细胞及其培养上清,刀豆球蛋白A(ConA)刺激后,流式细胞术检测淋巴细胞表面表达的程序性死亡-1(PD-1)、树突状细胞(DCs)表面表达的程序性死亡配体-1(PD-L1)和PD-L2。双抗夹心ELISA测定脾细胞分泌的白细胞介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)的表达水平。结果A组小鼠脾T细胞的PD-1及DC的PD-L1和PD-L2的表达率分别为(1.19±0.15)%、(0.64±0.11)%和(1.12±0.21)%。两种抗原免疫均可使这些分子表达上调(P<0.01)。SEA免疫后,PD-1的表达[(8.24±1.31)%]高于SMWA免疫[(6.08±1.28)%],且主要使PD-L2表达上调[(5.26±1.73)%];而SMWA免疫后,主要表现为PD-L1表达上调[(10.82±2.33)%]。其中PD-L1的表达上调与脾细胞分泌的IFN-γ呈正相关,而PD-L2的表达上调与IL-4的分泌呈正相关。结论日本血吸虫SEA和SMWA抗原免疫可诱导BALB/c雌性小鼠PD-1-PDL的表达上调。

贯叶连翘提取物对流感病毒感染小鼠肺中IFN-γ·TNF-α的影响

[目的]研究贯叶连翘提取物(HPE)对流感病毒感染小鼠肺组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)等细胞因子的影响。[方法]以流感病毒滴鼻感染小鼠,分别灌胃给药(贯叶连翘提取物高剂量组100 mg/kg、低剂量组50 mg/kg和病毒唑组10 mg/kg),0.2ml/次,2次/d,5 d后摘眼球放血处死动物,摘出全肺,低温条件下制成肺匀浆,离心后取上清采用双抗体夹心ELISA法观察小鼠治疗前后肺组织中IFN-γ、TNF-α的变化。[结果]与模型对照组相比,贯叶连翘提取物流感病毒感染小鼠肺组织中TNF-α显著降低(P<0.05),IFN-γ极显著升高(P<0.01)。[结论]贯叶连翘提取物对机体抗感染免疫有一定调节作用。

食管鳞状细胞癌患者外周血PD-1和PD-L1的表达及其临床意义

目的:检测食管鳞癌患者外周血中程序性死亡分子1(programmed cell death 1,PD-1)、程序性死亡分子1配体(programmed cell death ligand 1,PD-L1)及IFN-γ表达情况,并分析其临床意义。方法选取2016年6月至2017年4月河北医科大学第四医院胸外科90例食管鳞状细胞癌患者(其中50例患者行手术治疗)和40例健康对照者为研究对象,收集研究其外周血液标本,采用酶联免疫吸附方法检测血清中可溶性PD-1(sPD-1)、可溶性PD-L1(sPD-L1)及IFN-γ的表达水平。采用SPSS 24.0软件对数据进行检验和相关性分析。结果:食管鳞癌组血清中sPD-1、sPD-L1及IFN-γ水平均明显高于正常对照组(P<0.05);食管鳞癌组手术前血清sPD-L1、IFN-γ水平均明显高于术后(P<0.05),而sPD-1水平两组比较无明显差异(P>0.05)。sPD-1、sPD-L1的表达水平与临床病理特征无明显相关(P>0.05),IFN-γ的表达水平与淋巴结转移情况相关(P<0.05),与T分期、TNM分期、肿瘤体积大小、肿瘤部位、组织分化程度、性别、年龄无明显相关(P>0.05)。血清中sPD-L1表达水平与IFN-γ无明显相关(P>0.05)。结论:食管鳞癌患者血清中sPD-L1较正常人表达升高,且术后表达较术前减少,说明血清中sPD-L1表达水平与病情发展变化有一定相关性。

载α-干扰素的聚-L-乳酸片层粒子的制备研究

采用结晶性聚 - L-乳酸 ( PL L A)以非溶剂沉淀技术制得粒径均匀的片层粒子 (简称片粒 ) ,其粒径为 3～5 μm,呈菱形或阶梯状不规则外形。PL L A片粒在无任何表面活性剂、分散剂的条件下制得 ,表面清洁 ,不含有任何杂质 ,十分有利于以吸附方式携载蛋白 ,从而避开有害的有机溶剂环境及机械搅拌 ,有效地保护蛋白分子。以 α-干扰素 ( IFN- α)为模型蛋白 ,发现当 IFN与 PL L A片粒的质量比小于 1%时 ,IFN的吸附效率可超过 95 %。所携载IFN的释放可延续 10 d以上 ,释放的 IFN完好地保留了原有的生物活性。PL L A片粒具有易被巨噬细胞吞噬的特性 ,该特性对于激活巨噬细胞的免疫功能 。

γ-干扰素对肝纤维化大鼠肝Fas、Fas-L表达的影响

目的:研究Fas、Fas-L蛋白在四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化模型大鼠肝组织中的表达以及γ-干扰素(IFN-γ)对其表达的影响.方法:用CCl4诱导制作大鼠肝纤维化模型,使用IFN-γ(20 mu·kg-1·d-1,肌肉注射)对该模型肝纤维化大鼠治疗12周,设正常对照组和模型对照组,用免疫组织化学法(EnVition法)检测各组大鼠肝组织Fas、Fas-L的表达情况.结果:Fas和Fas-L在正常对照组大鼠肝细胞质表达极低,在模型对照组大鼠肝组织主要表达在纤维间隔、肝窦中,表达的量均明显高于正常对照组(P＜0.01).IFN-γ治疗组大鼠肝组织Fas和Fas-L的表达低于模型对照组(P＜0.05～P＜0.01).结论:肝纤维化时Fas和Fas-L表达加强,IFN-γ对肝纤维化大鼠肝组织Fas和Fas-L表达有明显的抑制作用.

LIGHT/INF-γ基因配比转染HepG2细胞对其凋亡及Fas/FasL系统表达的影响

目的:观察脂质体介导的LIGHT和IFN-γ配比转染HepG2细胞后对其凋亡及Fas和FasL表达的影响。方法:将HepG2细胞分为LIGHT单独转染组、LIGHT和IFN-γ联合转染组和空白对照组,以脂质体为中介转染HepG2细胞;分别于转染后12、24和48h收集HepG2细胞,流式细胞术检测转染后HepG2细胞的凋亡率及Fas和FasL的表达。结果:LIGHT基因转染HepG2细胞能明显促进其凋亡,随时间延长凋亡率增加;Fas和FasL在HepG2细胞高表达,以Fas升高程度显著。结论:LIGHT和IFN-γ联合转染HepG2,其凋亡效果优于LIGHT单独转染,主要是通过上调Fas的表达来促进HepG2细胞凋亡。

硝基精氨酸抑制巨噬细胞内一氧化氮合成的研究

运用体外分离培养方法 ,研究硝基精氨酸 (Nω nitro L arginine ,L NNA)抑制巨噬细胞内诱生性一氧化氮合成 .发现L NNA能抑制一氧化氮的合成 ,而且在一定的范围内 ,其抑制作用随L NNA作用剂量的增大而增强 ;在培养体系中加入L 精氨酸能够逆转这种抑制作用 .说明L NNA可能通过竞争性地与诱生型一氧化氮合成酶 (iNOS)活性位点结合 。

药物对旋毛虫病沙鼠脑及心肌NO合成及组织病理的作用

目的探讨IFN-γ、L-Arg及L-NNA对旋毛虫病沙鼠的脑及心肌NO合成和脑组织病理变化的影响。方法经腹腔给予感染旋毛虫后不同时期的沙鼠不同剂量的IFN-γ、L-Arg及L-NNA,检测沙鼠脑及心肌的NO含量,并观察脑组织的病理变化。结果IFN-γ和L-Arg组沙鼠脑及心肌NO含量明显升高,且随药物浓度的增加而升高。给予L-NNA后,脑和心肌组织阴性对照组、脑7d组及心肌7d组和40d组的NO含量明显降低,且随药物浓度的增加而降低;脑25d组、40d组及心肌25d组的NO量则明显升高,且随药物浓度的增加而升高。大脑组织未见明显病理改变。结论IFN-γ和L-Arg能促进旋毛虫病的沙鼠脑及心肌的NO合成,给予L-NNA后对不同时期及不同组织则表现出不同的增强或抑制NO合成的双重作用。

TNF-α调节多聚免疫球蛋白受体和干扰素调节因子-1的表达

目的研究TNF-α对Caco-2细胞表达多聚免疫球蛋白受体(PIGR)和干扰素调节因子-1(IRF-1)的影响。方法用不同浓度的TNF-α刺激Caco-2细胞后,采用Real-time PCR方法检测Caco-2细胞表达PIGR和IRF-1的变化。结果 TNF-α浓度为50、100、200和400 ng/mL时,PIGR mRNA和IRF-1 mRNA的相对含量分别为(3.14±0.14)、(5.23±0.19)、(6.45±0.23)、(8.44±0.18)和(6.20±0.21)、(9.00±0.19)、(10.90±0.23)、(14.50±0.25),与无TNF-α刺激时比较,Caco-2细胞表达PIGR和IRF-1明显增加(P<0.01)。结论 TNF-α上调Caco-2细胞中PIGR和转录因子IRF-1的表达。

双歧杆菌对过敏性哮喘儿童DC成熟及其分泌细胞因子的影响

目的研究青春型双歧杆菌对过敏性哮喘儿童外周血单个核细胞(PBMC)来源的树突状细胞(DC)表达CD86和HLA-DR及其分泌IL-1βI、L-6I、L-10、IL-12、IL-23和IFN-γ的影响。方法从15名过敏性哮喘儿童和15名非哮喘儿童的外周血单个核细胞诱导生成未成熟DC,分别加入青春型双歧杆菌或脂多糖(LPS)后继续培养DC 2天,①每天于倒置显微镜下观察DC形态;②用流式细胞仪检测各组DC表面CD86和HLA-DR的分子表达;③用ELISA方法检测培养上清中IL-1βI、L-6I、L-10、IL-12I、L-23和IFN-γ的水平。结果①DC经双歧杆菌和LPS分组处理后第2天,于倒置显微镜下观察到双歧杆菌组和LPS组的DC突起均较空白组明显,具有突起的细胞数量较空白组增多,而双歧杆菌组与LPS组比较,LPS组有突起的细胞数量明显增多,提示DC过度生长。②双歧杆菌刺激后,哮喘儿童DC表面CD86表达明显增高,HLA-DR表达无明显变化,非哮喘儿童CD86和HLA-DR表达均无明显变化;LPS刺激可明显增加哮喘儿童和非哮喘儿童CD86和HLA-DR的表达。③双歧杆菌刺激哮喘儿童DC分泌IL-12、IFN-γI、L-1β及IL-6水平增高,刺激非哮喘儿童DC分泌IL-12I、L-10I、L-1β及IL-23水平增高。结论①过敏性哮喘儿童DC表面CD86的表达可能存在缺陷,双歧杆菌能适度上调其表达,在DC的成熟过程中可能起调节作用。②双歧杆菌能刺激过敏性哮喘儿童DC分泌IL-12和IFN-γ,从而改变Th2优势分化,纠正Th1/Th2失衡。③过敏性哮喘儿童DC分泌IL-10可能存在缺陷,从而影响免疫耐受的形成。④双歧杆菌可能通过刺激哮喘儿童DC分泌IL-1β及IL-6增高,达到促进Th17细胞分化的作用。

苏木醇提物对重症肌无力患者干扰素-γ水平的影响

目的观察苏木醇提物治疗重症肌无力(MG)患者的乙酰胆碱受体抗体(AChRab)、干扰素-γ(IFN-γ)水平变化,探讨苏木醇提物治疗MG可能的免疫机制。方法采用ELISA法对苏木治疗组和常规治疗组MG患者治疗前、后及30例正常对照组外周血AChRab、IFN-γ水平进行检测并作分析。结果①苏木治疗组与常规治疗组MG患者血清ACh-Rab水平治疗前后均较正常对照组显著升高(P<0.05),苏木治疗组与常规治疗组MG患者治疗前血清AChRab水平比较差异无显著性意义(P>0.05),而治疗后差异有显著性意义(P<0.05);②苏木治疗组与常规治疗组MG患者血清IFN-γ水平治疗前后均较正常对照组显著升高(P<0.05),苏木治疗组与常规治疗组MG患者治疗前血清IFN-γ水平比较差异无显著性意义(P>0.05),治疗后差异有显著性意义(P<0.05)。结论苏木醇提物可能通过降低IFN-γ水平从而减少血中AChRab的生成,缓解肌无力症状。

旋毛虫病沙鼠腓肠肌组织NO变化的实验研究

目的 探讨感染旋毛虫的沙鼠腓肠肌组织NO的水平及对组织病理变化的影响。方法 用不同剂量的IFN-γ和L-NNA喂饲7d组、25d组及40d组的感染鼠。设阳性及阴性对照组。用硝酸还原酶法测定腓肠肌组织NO量,并观察腓肠肌组织病理变化。结果 IFN-γ促进正常及感染鼠腓肠肌组织NO合成;L-NNA抑制感染后7d、40d组NO合成,却促进感染后25d组NO的合成。NO的升高能减少腓肠肌中旋毛虫幼虫囊包数。结论IFN-γ能促进腓肠肌NO合成;L-NNA在感染后不同时期作用不同;NO能抑制或杀伤旋毛虫幼虫。

参蛤青龙汤治疗支气管哮喘68例临床观察

[目的]观察参蛤青龙汤治疗支气管哮喘疗效。[方法]使用随机平行对照方法,对68例门诊及住院患者予降气平喘、理肺祛痰,参蛤青龙汤(旋覆花、黄芩、炒白果、全瓜蒌、炒杏仁各10g,炙桑白皮、炙麻黄、黄芪、金银花、制僵蚕、全蝎、防风各15g,地龙30g);1剂/d,水煎300mL,早晚分服。热哮,临床滑数、脉弦数、黏稠不利、痰略色黄、喉中痰鸣如吼、口苦喜冷饮、咽干舌燥、苔黄腻,加葶苈子、炙枇杷叶、胆南星各10g,生石膏15g,鱼腥草30g;寒哮,临床脉浮紧或者弦紧、痰稀色白多泡沫、喉中痰鸣有声、呼吸急促、形寒肢冷、胸闷如塞、舌苔白滑、面晦带青,加细辛6g,五味子、干姜、桂枝各10g;脉细数、痰黏稠咯出较难、舌红少津,加麦冬、海浮石各10g,玉竹、沙参、生蛤壳各20g,太子参30g。连续治疗7d为1疗程。观测临床症状、GM-CSF、IFN-γ、IL-4、PEF/(L/S)、FEV1/FVC/%、不良反应。连续治疗2疗程,判定疗效。[结果]临床疗效:显效35例,有效25例,无效8例,总有效率88.24%;中医证候积分疗效:显效30例,有效31例,无效7例,总有效率89.71%。[结论]参蛤青龙汤治疗支气管哮喘效果显著,值得推广。