硼对菜心镉吸收及抗氧化酶和AsA-GSH循环关键酶活性的调控效应

针对华南地区旱地土壤低硼高镉和蔬菜重金属镉污染日益严重的现状,以广东特色蔬菜菜心(Brassica parachinensis L)为研究对象,通过水培实验研究了外源硼添加对菜心生长特性和镉吸收的调控效应,并从抗氧化酶和AsA-GSH循环关键酶活性的角度探讨硼调控蔬菜镉胁迫的生理机制。研究结果显示,在5μmol/L的镉处理下,20和50μmol/L的外源硼添加显著提高菜心株高和根长达50%以上,同时,50μmol/L的外源硼添加较0.25μmol/L硼添加时的地上部和地下部生物量都明显增加114.19%和187.59%,说明适当施加硼元素供应能有效缓解重金属镉对蔬菜的胁迫作用。另外,10、20、50μmol/L 3种浓度的外源硼添加都不同程度地减少了菜心地上部和地下部的镉吸收,下降量达24.0%。从硼影响菜心的抗氧化酶活性和AsA-GSH循环关键酶活性的结果来看,镉胁迫下添加不同浓度外源硼处理后,不同菜心抗氧化酶和AsA-GSH循环关键酶活性变化规律存在一定差异。本文研究结论为,适宜浓度的硼添加可有效提高镉胁迫下的菜心地上部分和地下部分的SOD、POD、CAT、APX、DHAR、GR活性,增强菜心的抗氧化能力,促进其AsA-GSH循环,从而降低镉对菜心植株的胁迫作用并调控菜心对镉的吸收。这意味着有可能通过筛选适合的硼肥类别和施用量,进一步实现控制蔬菜可食部分镉含量在安全限量范围内,研究结论可为合理施用硼肥保障中轻度镉污染土壤上的蔬菜安全种植提供科学的参考依据。

Cd胁迫下龙葵原生质体、液泡提取及单细胞分析

该研究旨在探究液泡在超积累植物龙葵中的重金属耐受机制。研究使用不同浓度(0、10、25、50、75、100 mg/kg)的Cd作为胁迫,通过对原生质体和液泡的单因素实验,选出了最佳的酶解条件。单细胞荧光分析结果表明,在Cd胁迫下,细胞受损严重,谷胱甘肽(GSH)含量迅速降低,而液泡中GSH含量稳定。Cd胁迫下,液泡中Cd含量占原生质体的比例逐渐增加,说明液泡在重金属超积累过程中发挥了重要作用。该研究为超积累植物进行基因改良以加强污染土壤修复效果提供了新思路。

激动素对肾蕨切叶活性氧代谢及抗氧化系统的影响

以肾蕨为试材,采用瓶插的方式,研究了激动素(KT)溶液[5、7.5、10μmol·L^(-1)(KT5、KT7.5、KT10)]作为瓶插液对肾蕨切叶活性氧代谢及抗氧化系统的影响,以期阐明激动素延缓肾蕨切叶衰老的机理。结果表明:瓶插12 d后,与对照(去离子水瓶插)相比,KT10处理的切叶过氧化氢、超氧阴离子和丙二醛含量以及电导率均降低,分别降低了92.06%、20.72%、410.34%、104.40%,其次为KT7.5(-46.46%、-18.09%、-173.39%、-59.93%)和KT5(-23.69%、-13.40%、-63.58%、-37.39%),说明KT可以抑制活性氧的产生,维持细胞膜的完整性及稳定性。KT10瓶插提高了超氧化物歧化酶(SOD)(19.32%)和过氧化氢酶(CAT)(86.36%)活性,其次为KT7.5,增加了13.37%和42.42%,KT5瓶插仅增加了7.76%和31.82%。同时,KT10处理还通过维持抗坏血酸过氧化物酶(APX)(225%)、谷胱甘肽还原酶(GR)(366.67%)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)(566.67%)活性来维持AsA-GSH循环的平衡,降低了总抗坏血酸(-442.12%)和总谷胱甘肽(-27.90%)含量,缓解了氧化损伤。KT7.5和KT5也在一定程度上维持AsA-GSH循环的平衡。总之,激动素能通过抑制活性氧含量、维持膜稳定性、激活抗氧化防御机制以及平衡AsA-GSH循环,有效延缓切叶的衰老,而抗衰老的效果为KT10>KT7.5>KT5。

几种抗氧化剂对羟自由基的体外清除作用

以Fenton反应系统作为羟自由基 (·OH)源 ,以二甲亚矾为探针 ,用分光光度计法测定并比较了四种抗氧化剂———维生素C(Vc)、dl-α -生育酚、l-还原型谷胱甘肽 (l -GSH)、l-半胱氨酸 (l -Cys)

龙牙楤木总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的:观察龙牙楤木总皂苷对缺血再灌注损伤心肌粘附分子sVCAM-1表达及MDA、GSH-PX的影响。方法:可逆性冠脉左前降支结扎缺血45min再灌注6h复制MI/R模型,Wistar雄性大鼠30只,随机分成模型组、龙牙楤木组、波立维组,每组10只。HE染色观察心肌病理学变化,检测血清LDH含量,测定心肌MDA、GSH-PX活性,ELISA法测定血清sVCAM-1的表达。结果:与模型组比较,龙牙楤木总皂苷、波立维均能显著降低缺血再灌注大鼠血清LDH含量,显著升高GSH-PX的活性,升高MDA含量,缺血45min再灌注6h血清sVCAM-1有明显表达,各组之间无统计学差异。结论:龙牙楤木总皂苷对MIRI有保护作用,可能是通过减少MDA含量、升高GSH-PX活力,对抗氧自由基对心肌细胞的毒害作用,减轻心肌细胞的损伤而实现的。

分光光度法结合抗干扰补偿检测谷胱甘肽

分光光度法应用于酶法合成谷胱甘肽（GSH）的跟踪检测时,前体半胱氨酸（Cys）中的巯基对GSH的分析结果会产生显著干扰。该文通过多组干扰实验,统计建立了干扰模型和补偿算法,实现了不分离干扰物质即可定量检测GSH。通过干扰分析,引入干扰系数和补偿系数,利用干扰系数、干扰倍数、补偿系数之间的关系建立抗干扰机制。检测样品320 nm处的吸光度和导数,代入标准流程,即可判断干扰倍数和补偿系数,从而计算GSH及Cys含量。结果显示：四氧嘧啶补偿法的GSH浓度-吸光度标准方程为y=3.062 9x＋0.000 1,r2=0.999 9。当Cys浓度为GSH浓度的4倍以下时,GSH的回收率为95%～100%,Cys的回收率为78%～120%。相比四氧嘧啶法,四氧嘧啶补偿法显著增强了分析检测的抗干扰特性,达到快速跟踪检测GSH含量并依据干扰倍数半定量检测Cys的目的。

外源H2O2对盐胁迫下黄瓜幼苗氧化胁迫及抗氧化系统的影响

为阐明外源H2O2缓解盐胁迫的生理机制,以水培法培养的黄瓜‘春夏秋王’幼苗为试材,采用0、1、5、10μmol·L^-1H2O2处理200mmol·L^-1NaCl胁迫的黄瓜幼苗。通过测定黄瓜幼苗的叶面积、株高、根长、叶鲜质量、根鲜质量及根干质量等指标,结果显示外源H2O2缓解了NaCl胁迫对植株生长的抑制,其中5μmol·L^-1H2O2对盐胁迫下黄瓜幼苗的缓解效应最有效。H2O2不仅降低盐胁迫下黄瓜幼苗叶片和根系O2^-·、H2O2和丙二醛质量摩尔浓度及相对电导率,也提高了还原型谷胱甘肽质量分数、抗坏血酸质量摩尔浓度和过氧化物酶、谷胱甘肽还原酶活性。此外,不同浓度H2O2处理引起盐胁迫下黄瓜叶片甲基转移酶PMT5和铁氧还原蛋白的谷氨酸合成酶上调-下调-上调的变化模式,而在根中网格蛋白重链1表现出逐渐下调和热休克蛋白70样蛋白15逐渐上调的模式。以上结果表明,外源H2O2通过增强黄瓜的抗氧化系统来降低盐胁迫引起的氧化胁迫,同时调控相关蛋白质的表达,从而缓解NaCl胁迫造成的伤害。

S-腺苷蛋氨酸预处理对丙烯腈染毒小鼠急性毒性的影响

目的:探讨S-腺苷蛋氨酸(SAM)对丙烯腈(AN)染毒小鼠急性毒性的影响及可能机制。方法:雄性小鼠80只,随机分成8组,分别为空白对照(生理盐水)、单纯SAM对照、20 mg/kg丙烯腈、40 mg/kg丙烯腈、60 mg/kg丙烯腈、SAM+20 mg/kg丙烯腈、SAM+40 mg/kg丙烯腈、SAM+60 mg/kg丙烯腈。SAM剂量为50 mg/kg,每隔12 h腹腔注射1次,连续3天,最后一次注射12 h后给予不同剂量的丙烯腈,对照组则腹腔注射生理盐水。观察丙烯腈染毒后3 h内动物的行为变化和死亡情况,并测定细胞色素P450 2E1(CYP2E1)活性,氰氢根离子(CN-)含量、细胞色素C氧化酶(CcOx)活性以及还原性谷胱甘肽(GSH)水平。结果:丙烯腈染毒3 h内,同等剂量丙烯腈染毒组与SAM预处理组相比较,翻正反射消失动物数、翻正反射消失时间、死亡数和死亡时间等观察指标未见明显差异;各组间CYP 2E1活性亦无显著差异;随着染毒剂量的增加,肝脑组织中CN-含量有着不同程度的升高,与同等剂量的丙烯腈组相比较,SAM预处理组脑组织中CN-含量未见明显降低,但中、高剂量组肝组织CN-含量则有显著性下降;肝脑组织中CcOx活性与染毒剂量间显示出明显的剂量-效应关系,SAM预处理后脑组织CcOX活性略高于同等剂量的染毒组;SAM预处理可升高GSH水平,其中SAM+20 mg/kg丙烯腈组肝组织GSH水平较单纯20 mg/kg丙烯腈明显上升,脑组织中、高剂量预处理组与同等剂量丙烯腈比较有显著差异。结论:SAM预处理可增加组织GSH水平,但并未显著抑制CYP2E1活性,对丙烯腈的急性毒性也未见保护作用,SAM的应用价值有待进一步探讨。

黄药子对小鼠肝脏毒性的表达及其机理研究

目的 :探讨黄药子肝毒作用的指标和肝脏毒性产生的机理。方法 :黄药子 2g kg·d、10g kg·d、5 0g kg·d给予小鼠 ,连续给药 2 1d ,观察其生化指标变化 ,药物代谢酶及抗氧化酶活性及病理变化。结果 :黄药子可引起小鼠GPT、GOT、ALP、TBIL值增高 ,GST、GSH PX、SOD活力降低 ,且呈一定剂量、时间相关性。病理变化可见肝细胞疏松、肿胀、胞核溶解、融合、坏死、汇管区炎细胞浸润 ,小胆管水肿、增生等。其毒性产生与抑制GST、GSH PX、SOD等酶的活性有关。结论 :黄药子的肝毒作用客观化指标为GPT、GOT、ATP、TBIL及组织学变化。其毒性产生的机理与抑制肝微粒体中抗氧化酶和药物代谢酶活性有关。

长期给予左甲状腺素对大鼠心室肌细胞L-型钙通道的影响

目的:观察长期给予左甲状腺素对大鼠血流动力学及心肌细胞膜L-型钙通道的影响。方法:大鼠口服左甲状腺素(levo-thyroxine,L-thy)40d:第1～10天给予L-thy2mg/kg;第11～40天剂量降至1mg/kg。运用生物实验系统观察大鼠血流动力学的改变,测定血清中T4水平以及心肌中谷胱苷肽GSH含量和乳酸脱氢酶LDH活力,全细胞膜片钳技术观察心室肌细胞L-型钙通道的变化。结果:与正常组相比,模型组T4升高33.5%(P<0.05),LVEDP显著升高,+dp/dtmax明显下降,T值显著延长。提示L-thy给药40d后,大鼠心脏收缩和舒张功能均降低。心肌GSH下降23.6%,LDH活力增加28%;全细胞膜片钳实验表明,L-thy给予40d后,大鼠心室肌细胞钙电流峰值降低47%(P<0.01),半激活电压从(-18.9±0.6)mV右移到(-14.8±0.7)mV(P<0.01),半失活电压从(-25.1±0.9)mV右移到(-21.7±0.9)mV(P<0.01),失活恢复常数从(102.2±2.1)ms延长到(136.9±2.5)ms(P<0.01)。结论:左甲状腺素给药40d可致大鼠心收缩,舒张功能降低,心肌细胞钙离子通功能下降。

蛤蚧对大鼠小肠自由基代谢的影响

本文观察了蛤阶乙醇提取液对18月龄大鼠小肠匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)和过氧化脂质(LPO)含量的影响.结果显示蛤蚧对大鼠小肠的自由基代谢有着积极的意义,使SOD、GSH—Px和CAT活性明显增强,GSH水平增高,而LPO含量明显下降.同时表明,蛤蚧尾部的作用大于体部;

^(99)Tc^(m)-HMPAO构效差异的研究──GSH水溶液中^(99)Tc^(m)-HMPAO水解动力学分析

从化学动力学角度对ｄｌ－型和ｍｅｓｏ－型￣（９９）Ｔｃ￣ｍ－ＨＭＰＡＯ构效差异的原因进行了研究。通过测定￣（９９）Ｔｃ￣ｍ－ＨＭＰＡＯ两种异构体在ＧＳＨ和Ｌ－半胱氨酸水溶液中的解离反应的一级速率常数，比较了Ｌ－半胱氨酸和ＧＳＨ对￣（９９）Ｔｃ￣ｍ－ＨＭＰＡＯ作用，解释了ｄｌ－型和ｍｅｓｏ－型￣（９９）Ｔｃ￣ｍ－ＨＭＰＡＯ药效的差异，探讨了￣（９９）Ｔｃ￣ｍ－ｄｌ－ＨＭＰＡＯ在人脑中的贮留机理。

药理效应法测定蓬子菜总黄酮在大鼠体内的药动学参数

目的:采用药理效应法测定蓬子菜总黄酮在大鼠体内的药动学参数。方法:以谷胱甘肽过氧化物酶活力升高率作为药理效应评价指标,测定蓬子菜总黄酮在大鼠体内的药物动力学参数。结果:低、中、高不同剂量蓬子菜总黄酮大鼠口服给药后t_(1/2α)分别为1.23,0.93,0.97 h;t_(1/2β)分别为11.84,12.06,16.51 h;AUC_(0-t)分别为143.43,206.25,275.92 mg·L^(-1)·h^(-1);AUC_(0-∞)分别为181.02,231.74,295.06 mg·L^(-1)·h^(-1);达峰T_(max)为2 h。结论:蓬子菜总黄酮口服给药后,在大鼠体内的药物动力学过程符合二室模型,且在给药剂量范围内呈线性动力学特征。

烟草叶片发育过程中抗坏血酸-谷胱甘肽循环清除H_2O_2的研究

[目的]研究烟草叶片发育过程中H2O2积累以及抗坏血酸-谷胱甘肽(AsA-GSH)循环清除H2O2能力的变化。[方法]以烟草(Nicotiana tabacumL.cvNC89&JYH)为材料,研究了叶片发育过程中H2O2积累与AsA-GSH循环的关联。[结果]结果表明,抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性,AsA、GSH含量在叶片幼嫩及成熟时期维持较高水平,衰老时下降较快,与H2O2含量存在相关性,且AsA-GSH循环系统在运行过程中保持平衡。[结论]AsA-GSH循环系统的运行与H2O2代谢存在相关性。

谷氨酰胺肠外营养减轻腹腔内大剂量化疗大鼠肝肠损害的机理

腹腔内大剂量化疗大鼠分别接受常规肠外营养和含谷氨酰胺二肽的肠外营养 ,然后对其肝功能、肝肠组织还原性谷胱甘肽 ( GSH)含量和超氧化物岐化酶 ( SOD)含量以及组织学变化进行研究。结果证实 ,谷氨酰胺可以减轻腹腔内大剂量化疗大鼠的肝肠损害。谷氨酰胺的这一作用 。

紫萍提取物对过氧化氢诱导内皮细胞氧化损伤的保护作用研究

目的研究紫萍提取物是否具有保护内皮细胞免受过氧化氢损伤的作用。方法采用MTT比色法筛选紫萍提取物作用于内皮细胞的安全剂量,建立H2O2对内皮细胞的氧化损伤模型,并研究紫萍提取物的保护作用。最后采用检测试剂盒方法分析紫萍提取物作用后内皮细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性变化。结果紫萍提取物的浓度<100μg/ml,作用时间为24 h时,无明显细胞毒性。以1 mmol/L的H2O2作用于ECV-304细胞1 h造氧化损伤模型,10,25,50μg/ml的紫萍提取物具有预防氧化损伤作用,可使细胞的存活率由21.98%分别上升至37.49%,51.71%和64.74%,其机理可能是紫萍提取物能够剂量依赖性的增强SOD,CAT和GSH-Px等酶的活性。但是紫萍提取物无治疗氧化损伤的作用。结论紫萍提取物可以有效保护内皮细胞免受氧化损伤。

百草枯中毒大鼠的肝损伤及抗氧化药物对其保护作用

目的研究百草枯(PQ)对肝脏的损伤作用及其机制,并用抗氧化药物N-乙酰半胱氨酸(NAC)和谷胱甘肽(GSH)干预,观察药物对PQ中毒大鼠的肝脏保护作用并探讨药物作用机制。方法33只清洁级SD大鼠随机分为4组:PQ单纯染毒组、NAC防治组、GSH防治组和正常对照组。单纯染毒组一次性灌胃给予PQ100mg/kg染毒;防治组分别于染毒前半小时、染毒后半小时及持续7d内同一时间分别腹腔注射NAC150mg/kg、GSH100mg/kg。各组在染毒后第1、3、7天采血取样,检测血浆及肝组织匀浆中的ALT、AST水平及SOD活力、GSH-Px活力和MDA含量。结果PQ染毒后第1天各组大鼠血浆及肝组织匀浆中的ALT、AST水平及MDA含量较正常对照组明显升高(P<0.05),而防治组明显低于单纯染毒组(P<0.05);各组大鼠血浆及肝匀浆SOD及GSH-Px活力均较正常对照组下降(P<0.05),但防治组明显高于单纯染毒组(P<0.05)。实验结束时防治组血浆及肝匀浆中ALT、AST水平和MDA含量明显低于单纯染毒组(P<0.05),SOD活力、GSH-Px活力防治组明显高于单纯染毒组(P<0.05),部分指标NAC组优于GSH组(P<0.05)。结论氧应激在PQ致大鼠肝损伤中发挥重要作用,NAC和GSH对改善PQ中毒患者肝细胞抗氧化能力有积极作用。

万寿菊提取物改善老龄大鼠抗氧化功能的研究

目的研究万寿菊提取物(叶黄素)对D-半乳糖致衰老大鼠抗氧化能力的影响。方法用D-半乳糖注射Wistar雄性大鼠5个月,建立衰老模型。对衰老模型组、叶黄素组血清丙二醛(MDA)含量、肝脏匀浆MDA含量和血液超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性进行测定及比较。结果叶黄素组血清MDA含量和肝脏匀浆MDA含量均比衰老模型组有所降低,而血液SOD、GSH-Px酶活性有所升高(P<0.01)。结论摄入适量万寿菊提取物可以有效地增强大鼠机体抗氧化能力,从而延缓D-半乳糖诱发的大鼠衰老。

气管滴注大肠杆菌对肉仔鸡肝脏抗氧化能力的影响

为研究呼吸道大肠杆菌对肉仔鸡肝脏抗氧化能力的影响,选取24只初始体质量相近、健康状况良好的固始肉仔鸡,随机分为2组,对照组肉仔鸡气管滴注1 m L无菌培养液,大肠杆菌组肉仔鸡气管滴注1 m L大肠杆菌培养液(1×10~9cfu/m L)。滴注后2 h采集血液和肝脏组织,测定血清中细菌脂多糖(LPS)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)含量,以及肝脏组织中丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果表明,气管滴注大肠杆菌后2 h,大肠杆菌组肉仔鸡血清中LPS含量为33.86 U/mg,较对照组升高了26.15%;AST和ALT含量较对照组分别增加了50.89%(P<0.05)和298.77%(P<0.01);大肠杆菌组肉仔鸡肝脏组织中SOD活性和GSH-PX活性分别为186.60 U/mg和13.20 U/mg,较对照组分别降低了43.83%(P<0.01)和31.18%(P>0.05);MDA含量增加了51.72%(P<0.05)。综上,气管滴注大肠杆菌后2 h,大肠杆菌大量繁殖,释放出的LPS通过血液循环进入肝脏,肝脏中抗氧化酶活性降低,引起脂质过氧化物堆积,破坏肝脏细胞,导致血清中转氨酶水平升高。

烟草叶片发育过程中光合功能衰退与H_2O_2积累的关系

以烟草(NicotianatabacumL.cvNC89)为材料,研究了叶片发育过程中H2O2积累与叶绿体光合功能衰退、抗坏血酸-谷胱甘肽(AsA-GSH)循环的关联。结果表明,光合功能衰退过程中,各光合参数均表现为先缓慢后快速的下降趋势,核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶(RuBPCase)活性下降较电子传递活性下降迅速,H2O2含量与叶绿素含量、光合速率、RuBPCase活性、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性显著负相关。H2O2的定位染色也证实光合功能衰退与H2O2积累密切相关。APX和GR在光合功能可逆衰退阶段维持较高水平,不可逆衰退阶段下降稍快。烟草叶片光合功能衰退快于AsA-GSH循环运转的下调。