重组Lac-Z、反义c-myc腺病毒载体的增殖及鉴定

目的:建立重组反义c-myc腺病毒载体(Ad-AS-c-myc)、LacZ腺病毒(AD-Lac-Z)的增殖的方法。方法:对培养的293细胞转染重组反义c-myc、Lac-Z腺病毒载体,使重组反义c-myc、Lac-Z腺病毒载体在293细胞内大量复制,及时收集病变细胞,反复冻融以释放293细胞中的病毒载体,过滤除细胞碎片,利用倍比稀释法测定病毒载体滴度。PCR技术对扩增重组反义c-myc、Lac-Z腺病毒载体进行鉴定。结果:利用293细胞扩增重组腺病毒载体,获得的Ad-AS-c-myc滴度为:2.3×109pfu/ml;Ad-LacZ滴度为:1.2×1010pfu/ml。在Ad-LacZ可见在800bp出现一特异性PCR扩增条带,为腺病毒特异扩增带。Ad-AS-c-myc在800及608bp处出现两条特异扩增条带,分别为腺病毒及反义c-myc特异扩增条带。结论:对转染的293细胞冻融后收集重组腺病毒载体具有高效、可靠、简便、相对经济实用的优点,有推广价值。

小鼠T淋巴细胞性白血病克隆细胞株(LAC-1)的生物学特性

作者对新建立的一株小鼠T淋巴细胞性白血病克隆细胞株(LAC-1)生物学特性进行研究。结果表明:LAC-1细胞为Thy 1.1^+、Thy 1.2^-的分化早期T淋巴细胞性瘤细胞克隆,具有典型的淋巴细胞性白血病细胞形态学特征;它具有41超二倍染色体组型,电镜下可见胞浆内含小鼠白血病病毒颗粒,X-C检测为阳性;LAC-1细胞在体外培养中呈明显的白细胞介素2依赖性,体内致瘤作用严格受宿主的组织相容性限制,与母系L783白血病细胞相比,其致瘤活性明显减弱。LAO-1克隆细胞株的建立为我国T-S-Z小鼠白血病/淋巴瘤系统提供了一个新的体外研究模型。

橡胶粉复合改性沥青在LAC-16沥青混凝土中的应用

随着我国公路基础设施的迅速发展,沥青路面被广泛采用,沥青路面早期损坏现象普遍存在。为了改善路面使用性能,2014年在灯塔至辽中高速公路新建工程中,铺筑了11.48km橡胶粉复合改性沥青表面层,对其配合比设计、施工工艺及经济、社会效益进行了探讨。

抚南高速公路LAC-25型热拌沥青混合料配合比设计

以抚顺旺清门(吉辽界)至南杂木高速公路下面层LAC-25型沥青混凝土为例,详细说明LAC-25型热拌沥青混合料目标配合比的设计。

高效液相色谱法同时测定还脑益聪方中5种川芎成分含量

目的 建立还脑益聪方中阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯A、藁苯内酯和欧当归内酯A 5种成分含量测定方法,探究其物质基础。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱AgilentExtend-C_(18)(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相:甲醇(A),0.3%磷酸溶液(B),乙腈(C);流速:1m L/min;柱温:30℃;检测波长:280nm。结果 还脑益聪方中川芎的5种化学成分均被检测到,建立的方法无阴性干扰,5种成分均达到良好的分离效果,标准曲线线性范围良好。结论 该方法简便稳定,重复性好,可用于还脑益聪方中川芎成分的定量检测,为还脑益聪方治疗AD的物质基础提供依据。

枯草芽孢杆菌漆酶与阴离子型聚丙烯酰胺微观作用机理

阴离子型聚丙烯酰胺(HPAM)常用于煤泥水的澄清处理,产生大量的含聚污水将对选煤厂周边环境造成不利影响.为探究漆酶降解HPAM的微观作用机理,采用对接模拟了HPAM及其脱氨产物聚丙烯酸(PAA)结构模型与枯草芽孢杆菌漆酶(Lac)的结合,根据-CDOCKER_Energyscore打分最高原则筛选出Lac的最适底物,然后对该最适复合物分别进行基于亲和力虚拟突变和不同温度下的分子动力学(MD)模拟.结合模式分析表明,Lac对HPAM-3享有最高亲和力,且其结合最好,因此HPAM-3是该酶的最适底物;HPAM比PAA易被Lac降解;Lac可容纳一定碳链长度的HPAM和PAA.相互作用分析表明,Lac-HPAM-3亲和力最大主要原因是盐桥;TYR133通过形成氢键以稳定Lac-HPAM-2、Lac-HPAM-3和Lac-HPAM-4,而ARG487通过形成疏水以稳定所有的酶-底物复合物.基于亲和力虚拟突变分析表明,TYR118、TYR133、ARG487和LYS135是Lac降解HPAM-3的关键残基;LYS135和ARG487分别通过形成盐桥和疏水来最大限度地影响酶同底物的亲和力.MD分析表明,Lac-HPAM-3在298 K时总相互作用能、酶骨架RMSD及所有残基RMSF皆最低,因此该复合物在298 K时结合稳定性最佳;308 K时由于酶骨架RMSD最大,导致底物偏离最初对接位置,因此Lac-HPAM-3在308 K时结合稳定性最差.这些数据为揭示HPAM酶降解过程奠定基础,为将来突变试验来改造酶提供位点支持.

紫胶树脂玻璃化转变温度的测定及其对贮存稳定性的影响

作为聚合物的紫胶树脂应该具有玻璃化转变温度(T g),但始终未能明确,确切的T g将能够解释紫胶树脂的贮存不稳定性问题并指导其贮存温度条件。为验证其玻璃化转变温度,通过聚合物的玻璃化转变研究方法及理论,应用X射线衍射法(X-ray Diffraction,XRD)、差示扫描量热法(Differential Scanning Calorimetry,DSC)和动态热机械分析法(Dynamic Thermomechanical Analysis,DMA)对紫胶树脂的玻璃化转变T g值进行了验证实验。由XRD图及2.93%的结晶度计算结果证实紫胶树脂属非晶态聚合物,其5次DSC二次升温扫描曲线中表现出0.071 J/(g·K)的平均比热容差,结合其DMA曲线中的储能模量在36.0℃处的拐点、耗能模量在19.5℃处、损耗因子在36.9℃处的峰值温度,共同证实了紫胶树脂存在玻璃化转变及T g,其T g值在DSC和DMA测试条件下分别为27.3℃和36.0℃;根据紫胶树脂的玻璃化转变及T g温度,对其贮存不稳定性问题的解释为:当贮存温度低于其T g时,由于物理老化作用会导致其性质变异,但仍可相对较长时间贮存,当温度高于其T g时,由于接有活性端基的链段可以运动使得紫胶树脂更易发生活性端基间反应,致使紫胶树脂的贮存时间缩短,利用此点可指导紫胶及紫胶树脂的贮存温度条件,即应低于其T g温度。

电子束辐照对玛保松汤散的灭菌效果及其有效成分含量的影响

目的:研究电子束辐照对藏族药玛保松汤散的灭菌效果及其主要有效成分含量的影响。方法:分别采用0、2、4、6、8、10 kGy辐照剂量的电子束辐照处理玛保松汤散,比较辐照前后样品的性状,薄层色谱图,显微特征,紫胶红色素、乙酰紫草素和大叶茜草素的含量,指纹图谱相似度及微生物水平。结果:与辐照前相比,辐照后的样品气味无明显变化,总色差值<0.5,显微镜下可见大量多细胞非腺毛、导管、木栓细胞、色素块,薄层色谱图中与藏紫草、藏茜草、紫草茸对照药材在相同位置显相同颜色的斑点,主要有效成分紫胶红色素、乙酰紫草素、大叶茜草素的含量无明显变化,高效液相色谱法指纹图谱相似度≥0.998,细菌、霉菌和酵母菌含量显著降低(P<0.01);当电子束辐照剂量为4 kGy时,微生物水平符合《中华人民共和国药典》2020年版(四部)规定。结论:电子束辐照对玛保松汤散的性状、显微特征、薄层色谱、主要有效成分含量及化学成分无明显影响,电子束辐照剂量为4 kGy时达到良好的灭菌效果,可为电子束辐照技术在玛保松汤散灭菌中的应用提供参考。

一种可推广的梯度科普实验设计:基于天然紫胶红色素酸碱变色原理

为了设计一种绿色、安全且可推广的梯度科普实验,本文以天然紫胶红色素为研究对象,首先利用实验室常用试剂和家庭常用物品分别从中药材紫草茸中提取了紫胶红色素,对应命名为实验法和家庭法;其次对2种方法提取的紫胶红色素变色原理进行了验证;最后尝试面向不同年龄段的公众进行科普。实验法通过盐析法从紫胶中有效提取紫胶红色素,并初步验证了变色是基于紫胶红色素的酸碱电离平衡,可作为一种酸碱指示剂,具有强染色着色能力;其溶液在不同酸碱度下变色现象明显,酸碱度由低到高增加时,溶液颜色变化为黄色、橙黄色、橙色、橙红色、浅紫色到紫色。家庭法以实验法为基础,利用生活中具有类似物理化学性质的常见物品替代相应试剂,从中药材紫草茸中提取紫胶红色素,并验证变色反应。科普实验结果表明,利用天然紫胶红色素酸碱变色原理和染色剂,可以实现不同层次受众群的梯度科普实验。

蒿叶猪毛菜SaLACS1基因克隆及干旱胁迫下的表达分析

长链脂酰辅酶A合成酶(long-chain acyl-coenzyme A synthetase,LACS)是酰基激活酶(acyl-activating enzyme,AAE)超家族的重要成员,在植物应答生物和非生物胁迫时发挥重要作用。蒿叶猪毛菜具有较强的抗旱性。为探究LACS基因在蒿叶猪毛菜抗旱性中的生物学功能,本研究以蒿叶猪毛菜幼苗为材料,利用qRT-PCR技术对蒿叶猪毛菜中的SaLACS1基因进行克隆,并通过生物信息学方法分析基因表达模式,再对干旱胁迫下SaLACS1基因进行转录组表达分析及qRT-PCR验证。结果表明:(1)克隆到的SaLACS1基因,编码区长度大小为1641 bp,可编码546个氨基酸。(2)生物信息学分析表明,该蛋白定位于过氧化物酶体且为稳定蛋白,主要由α螺旋和无规则卷曲组成。(3)系统发育树分析表明,SaLACS1蛋白与甜菜、菠菜同源蛋白具有更近的亲缘关系。(4)SaLACS1启动子预测分析发现,该启动子区存在多种与植物生长发育、胁迫响应相关的顺式作用元件。(5)qRT-PCR结果表明,在干旱胁迫下,SaLACS1基因上调,表达量显著增加。综上所述,SaLACS1基因在蒿叶猪毛菜抗旱过程中可能参与了与干旱胁迫响应相关的调控机制,为后续探究蒿叶猪毛菜SaLACS1基因功能提供理论依据。

用于铜离子检测的静电纺纤维膜制备及其性能

针对铜离子检测费用高、难以现场检测及检测探针的污染问题,以天然染料紫胶红为铜离子识别单元,聚丙烯腈(PAN)及聚乙烯吡咯烷酮(PVP)为载体,通过静电纺丝法制备紫胶红/PAN/PVP纤维膜。借助旋转黏度计、扫描电子显微镜、接触角测量仪、X射线衍射仪、傅里叶变换红外光谱仪研究了纺丝液中PAN/PVP质量分数及PAN与PVP质量比对纤维膜结构和性能的影响,并考察了纤维膜对铜离子的检测能力。结果表明:当PAN/PVP质量分数为10%时,纺丝液黏度为300.0 mPa·s,紫胶红与PAN/PVP基纤维膜复合效果较好,纤维形貌良好,平均直径为(171.6±1.9) nm;当PAN与PVP质量比为7∶3时,纤维平均直径为(149.7±0.7) nm,紫胶红/PAN/PVP纤维膜的水接触角为64.1°;紫胶红/PAN/PVP纤维膜在干扰离子溶液中的色相值与颜色无明显变化,而在铜离子溶液中色相变化明显,且产生由红到黄的颜色响应,具有良好的抗干扰性;纤维膜在0.03 mmol/L铜离子溶液中能产生由红到黄的颜色响应,随铜离子浓度递增,纤维膜颜色响应增强,满足复杂水体环境中铜离子的可视化现场检测。

不同聚合度魔芋葡甘低聚糖的酶解制备及其体外益生功能

以魔芋葡甘聚糖(konjac glucomannan,KGM)为原料,研究β-甘露聚糖酶酶解后魔芋葡甘低聚糖(konjac oligoglucomannan,KOGM)的制备流程对聚合度(polymerization degree,DP)的影响,探讨不同聚合度KOGM与原料KGM在理化性质、微观结构上的差异以及对5种乳酸菌的增殖、产酸、总糖利用及短链脂肪酸的影响。结果表明,采用酵母发酵去除单糖以及随后的离心和灭菌工艺对KOGM聚合度无明显影响。制备得到的3种KOGM的聚合度分别为16.74、12.74和11.13。3种KOGM与原料KGM具有相似的主链结构,其中2种低聚合度KOGM(low polymerization konjac oligoglucomannan,KOGM-L)(KOGM-L_(1)的DP为12.74,KOGM-L_(2)的DP为11.13)有更低的黏度特征,且存在相似的微观形态,呈现更加明显的碎片化和孔洞结构。与KGM和中聚合度KOGM(medium polymerization konjac oligoglucomannan,KOGM-M)(DP为16.74)相比,低聚合度KOGM-L更有利于促进乳酸菌增殖、产酸及总糖分解,但2种低聚合度KOGM-L之间没有显著差异(P>0.05)。低聚合度KOGM-L_(2)与长双歧杆菌培养时总菌数最高(OD_(600)=2.13),但是低聚合度KOGM-L_(1)与鼠李糖乳杆菌培养时增殖倍数最高(4~5倍)。短链脂肪酸总产量及各组分含量显示低聚合度KOGM-L要显著高于中聚合度KOGM-M、原料KGM和菊糖(P<0.05)。综上所述,不同聚合度的KOGM益生功能差异明显,低聚合度KOGM效果最佳。聚合度相近的KOGM益生功能相似,聚合度11~13对长双歧杆菌和鼠李糖乳杆菌有更好的益生效果。

肺部超声评分联合Lac、NLR对重症肺部感染患者治疗效果及预后的评估价值

目的分析肺部超声评分(LUS)联合外周血乳酸(Lac)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)对重症肺部感染患者治疗效果及预后的评估价值。方法选择2021年6月至2023年6月在邵阳学院附属第二医院重症医学科接受诊断与治疗的重症肺部感染患者143例,其中男性79例,女性64例;年龄60~76岁,平均年龄64.26岁;细菌性肺部感染98例,病毒性肺部感染42例。将所有患者按照治疗效果分为研究组(有效)97例与对照组(无效)46例。分析两组患者在治疗前与治疗后3 d、7 d时LUS、Lac、NLR变化情况;对上述临床指标同肺部感染评分间的数据关联,通过Pearson相关性分析进行探索;通过Logistic回归方程分析对治疗效果产生影响的相关因素;通过受试者工作特性(ROC)曲线和曲线下面积(AUC)对上述3项单个指标、3项联合对治疗效果的预测情况进行分析。结果研究组治疗后3 d、7 d的LUS、Lac、NLR评分均显著低于对照组[LUS:(12.15±0.16)分vs(14.33±0.25)分、(9.35±0.13)分vs(15.15±0.27)分;Lac:(3.75±1.01)mg/L vs(4.60±1.20)mg/L、(2.15±0.93)mg/L vs(5.62±1.36)mg/L;NLR:(3.20±0.17)%vs(5.03±0.25)%、(2.09±0.16)%vs(6.33±0.32)%。P<0.05];治疗3 d、7 d,LUS单项指标同肺部感染评分相关性最强(r=0.235、0.425),Lac相关性相较最弱(r=0.173、0.306);LUS、Lac、NLR均与患者治疗效果相关(P<0.05);上述3项单个指标和联合指标在治疗后3 d时AUC小于7 d时AUC;在治疗7 d后,AUC从大到小依次为联合指标、LUS、NLR、Lac,其中3项联合的AUC数值最大,为0.910。结论LUS联合Lac与NLR指标对重症肺部感染患者治疗效果与预后的评估结果更加准确,值得推广。

碘解磷定联合长托宁治疗对有机磷农药中毒患者外周血NLR、LAC、CHE水平的影响

目的探讨分析碘解磷定联合长托宁治疗对有机磷农药中毒(AOPP)患者外周血中性粒细胞-淋巴细胞比值(NLR)、血乳酸(LAC)、CHE(胆碱酯酶)水平的影响。方法选取2019年1月至2023年1月六安世立医院重症医学科收治的有机磷农药中毒患者合计100例,随机分为对照组及联合组各50例,两组均给予常规急诊治疗和长托宁进行治疗,联合组在前者基础上联合碘解磷定进行治疗。比较两组临床疗效、CHE拐点时间、中毒症状消失时间、机械通气时间和平均住院时间;比较两组治疗前后外周血NLR、LAC、CHE表达情况及心肌酶谱[乳酸脱氢酶(LD)、肌酸激酶(CK)]及肝功能[谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)]水平。结果治疗后,联合组临床疗效高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=4.396,P<0.05);联合组CHE拐点时间、中毒症状消失时间、机械通气时间、平均住院时间较对照组均有缩短,差异有统计学意义(t=3.882,4.629,2.065,4.339,P<0.05);治疗后,两组外周血CHE水平较治疗前均明显升高且联合组升高更明显,NLR、LAC则明显降低且联合组下降更明显,差异有统计学意义(t=7.949,5.091,4.647,P<0.05);治疗后,两组LD、CK及TBIL、ALT、AST较治疗前均明显下降且联合组下降更明显,差异有统计学意义(t=3.568,4.469,4.894,3.447,5.896,P<0.05)。结论碘解磷定联合长托宁可有效改善AOPP患者外周血LAC、CHE、NLR表达,临床疗效确切。

骨肿瘤患者丙泊酚麻醉术后血清IL-1、Lac的表达与肺部感染的关系

目的 探讨骨肿瘤患者丙泊酚麻醉术后血清白介素1(IL-1)、乳酸(Lac)的表达与肺部感染的关系。方法回顾性分析接受手术治疗并行丙泊酚麻醉的80例骨肿瘤患者的临床资料,根据术后肺部感染情况将患者分为感染组(26例)和未感染组(54例)。术后对2组患者血清IL-1、Lac表达水平进行检测,并分析IL-1、Lac表达水平与肺部感染的关系。结果 与未感染组比较,感染组血清IL-1、Lac表达水平明显更高(P<0.05)。与轻度、中度感染组比较,重度感染组血清IL-1、Lac表达水平明显更高;与轻度感染组比较,中度感染组血清IL-1、Lac表达水平明显更高(P<0.05)。血清IL-1、Lac表达水平与轻度、中度、重度肺部感染呈正相关性(P<0.05)。血清IL-1联合Lac检测的灵敏度、特异度明显高于血清IL-1与血清Lac单独检测(P<0.05)。结论 血清IL-1、Lac表达水平与骨肿瘤丙泊酚麻醉术后肺部感染的发生存在一定关联,可根据其表达水平变化情况判断患者的肺部感染严重程度。

基于LAC理论的城市自然公园游憩承载力研究与应用

研究以城市自然公园游憩资源过量使用问题与新发展理念下公园建设、管理、运营为出发点,选取福州市鹤林生态公园为样地,基于LAC理论九步骤,借助对描述性、评价性两个类型承载力影响因子的可度量的集合与标度来反应公园游憩承载力现状,提出包括客容量评估、游憩管理及景观优化等方面的公园承载力研究新思路,并总结出一套城市自然公园游憩使用管理框架,以期成为解决容量过载、环境破坏、游憩满意度低等问题的新视角。研究结果表明:(1)鹤林生态公园瞬时游憩承载力为6460人次,日游憩承载力为25850人次;(2)公园设施、景观、自然三类ROS分区的游憩承载力有效率为0.644、0.545、0.580,设施型空间整体处于弱载状态,景观型、自然型空间处于适载状态,鹤林生态公园整体承载量适中,可持续发展态势良好,尚有进一步游憩开发潜力。

超双曲型Kac-Moody Lie代数的结构与奇异性

给出了超双曲型 (以下简称SH -型 )Kac -MoodyLie代数的结构定理及部分Dykin结构图 ,同时也证明了所有SH -型广义Cartan矩阵A =(aij) l×l是非奇异的 ,且有惯性指数 (l- 1,1)

紫胶可食性内包装膜成膜特性及应用研究

本文研究了淀粉加紫胶醇溶液改性后,制作可食性内包装膜的成膜特性及应用研究。经过云南省科学技术情报研究所查新表明,该研究国内无文献报道。该膜的成膜特性受其浓度、干燥温度、丙三醇、环氧氯丙烷含量的影响。该膜具有较好的防水,阻潮性;较高的机械强度;无毒无害、可被人体吸收、可自然降解。对面包进行涂膜处理可以有效地防止霉变,延长保质期,使其在贮藏过程中酸度、重量损失度明显低于其它对照组。该膜的应用前景十分广阔。

可食性紫胶包装膜成膜特性及应用研究

研究了淀粉加紫胶碱溶液改性后制作可食性包装膜的成膜特性及应用。结果表明,中国紫胶和4号紫胶掺合比例不同对膜的耐折度、溶胀倍数、水蒸气透过系数、拉伸强度、伸长率影响不大;随着紫胶用量的增加,膜的溶胀倍数、水蒸气透过系数先降低后变化不大,而拉伸强度上升;随着丙三醇用量的增加,膜的溶胀倍数、拉伸强度下降而伸长率上升;环氧氯丙烷用量对膜性质有一定的影响;干燥温度为65℃膜的性能最好:该膜与未改性的淀粉膜相比,膜的强度和抗水性显著提高;对芒果进行涂膜处理可以有效地防止褐变、降低呼吸作用,使涂膜的芒果在贮藏过程中VC、总酸、质量损失速度明显低于其它对照组。

漂白胶对芒果贮藏保鲜效果的研究

用不同浓度的漂白胶溶液,在常温(25～28℃)下对芒果进行涂膜保鲜试验,分别对各保鲜样品的失重率、转色指数、发病指数等指标进行了测定。结果表明,不同浓度的漂白胶溶液对芒果的保鲜效果均比对照好,而漂白胶浓度以10%最为适宜。