碳源和Mn(Ⅱ)对白腐菌Panus conchatus产木素降解酶的影响

研究了碳源及二价锰离子Mn（Ⅱ）对白腐菌Panusconchatus产木素降解酶的影响。结果表明碳源的种类对标过氧化物酶（MnP）和漆酶（laccase）产生的影响有明显的差异。Mn(Ⅱ）对P．conchatusMnP和laccase的产生有明显调节作用。不加Mn(Ⅱ)条件下，P.cochatrus几乎不分泌MnP，而laccase在木素降解醇中占据了主导地位。加入并提高Mn（Ⅱ）浓度，MnP活力随之提高，而laccase活力却相应降低。

白腐菌Panus conchatus产漆酶的诱导、纯化及酶学特性研究

铜离子对贝壳状革耳菌(Panus conchatus)胞外漆酶有明显的诱导作用,其最适诱导浓度为3mmol/L。在培养基中添加铜离子,发酵14 d后漆酶活性提高11倍,达196 IU/mL。发酵液经硫酸铵盐析,离子交换色谱和凝胶过滤色谱等分离纯化后,漆酶的比活力为912IU/mg,纯化倍数为6.77,酶活得率为74%;SDS-PAGE和Native-PAGE显示出单条蛋白条带,其分子量约是65kDa;以ABTS为底物时Km为0.0057mmol/L;反应最适温度和pH分别为60℃和2.5;漆酶在4℃和pH 8.0时具有较高的稳定性;K+,Na+,Cu2+,Mg2+等金属离子和乙醇,乙腈对酶活影响较小;而SDS、半胱氨酸和NaN3等对酶活影响较大,几乎完全抑制漆酶活性。

白腐真菌对染料脱色的培养条件研究

对贝壳状革耳菌高产漆酶条件及其对染料脱色条件进行了研究。结果得到高产漆酶的最佳条件为:葡萄糖10 g/L,酒石酸铵0.5 g/L,pH 3.0,转速120 r/m in;脱色效果最佳的培养条件是:葡萄糖10 g/L,酒石酸铵0.5 g/L,pH 3.0,温度30℃。由此可知漆酶在染料脱色中起重要作用;实验也表明:随着培养基中碳源、氮源量的增加,菌体生物量逐渐增加,但体系中高碳氮比对菌体对染料的脱色是不利的;菌体生物量与对染料的脱色作用不呈正相关。

贝壳状革耳菌在固体及液体培养过程漆酶同工酶的产生研究

着重研究了白腐菌Pantusconchatus在固体和液体培养过程中跑外漆酶及其同工酶产生规律及其差异。研究结果表明：固体和液体培养产漆酶的最高峰在培养15d以后，固体和液体培养过程漆酶同工酶的差异比较大。液体培养过程中漆酶同工酶产生情况稍有差异，同工酶的数量远比固体培养少，而且分布在高分子量区域。固体培养过程中，漆酶同工酶的产生远比液体培养复杂。培养初期漆酶同工酶带主要分布在低分子置区域。随着培养时间延庆同工酶带增加，最多达七条同工酶带，其中部分同工酶带落在高分子量区域。随着培养时间再延长，低分子量区域的同工酶带相对减弱，而高分子旦区域的同工酶带增加和集中。到培养后期低分了量区域的同工酶带又重新出现。

贝壳状革耳菌漆酶酶活测定方法分析

酶活测定方法中所用的反应底物、反应条件以及酶活单位定义对漆酶酶活的测定结果有很大的影响。在对贝壳状革耳菌 (Panusconchatus)漆酶酶活测定方法的研究中发现 ,该酶与 2 ,2’ -连氮 -双 ( 3-乙基并噻- 6 -磺酸 ) (ABTS)反应的最适pH值为 3.0 ,而与紫丁香醛连氮、2 ,6-二甲氧基苯酚和邻甲联苯胺反应的最适pH值均为 4.0。上述底物与Panusconchatus漆酶反应的Km (米氏常数 )分别为 0 .0 1 1 6(mmol·L) - 1 ,1 4.1 0 95 (mmol·L) - 1 ,0 .1 0 1 1 (mmol·L) - 1 ,0 .1 41 5 (mmol·L) - 1 。该酶与ABTS、2 ,6-二甲氧基苯酚和邻甲联苯胺反应均表现为零级反应 ,而与紫丁香醛连氮反应时只在一定范围的酶浓度以及反应时间内才表现为零级反应。