乳铁蛋白(LF)的提纯及其放射免疫分析在肺癌诊断中的应用

报道了乳铁蛋白（ＬＦ）的提纯方法，放射免疫分析法的建立及其在肺癌诊断中的应用。用改良的萃取法获得相对分子量为７５０００Ｄ的ＬＦ，其聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫双扩散结果均呈单一色带，１ｍＬ人乳可提取０．５４２ｍｇＬＦ。放射免疫分析批间及批内变异分别为４．７７％和１３．５９％，回收率９７．９９％。对３６例肺癌、２１例肺部感染和４例正常人的支气管冲洗液中乳铁蛋白（ＢＬＦ）进行测定，结果表明肺癌组明显高于肺部感染组和正常对照组，其中肺腺癌的检出率最高。病理分期表明，ＢＬＦ与肺癌的早。

LF抗菌作用和CPPs促钙吸收功能及其影响因素

乳铁蛋白(LF)和酪蛋白磷酸肽(CPPs)均为天然功能性营养成分,具有抑菌、抗氧化、增强免疫力及促进钙、铁、锌等矿物质吸收等多种生物学功能。对乳铁蛋白的抗大肠杆菌性能和酪蛋白磷酸肽延缓磷酸钙沉淀效果及木糖醇、Vc等成分对其功能影响进行研究。结果显示,LF浓度在2.0g/L时抑菌效果较强;CPPs浓度大于0.2g/L时有较好的延缓磷酸钙沉淀效果;Vc浓度0.8g/L,木糖醇浓度20.0g/L时,对乳铁蛋白抑菌效果及CPPs促钙吸收均有促进作用。

乳铁蛋白的国内外研究动态及趋势

乳铁蛋白是一种铁结合性糖蛋白,具有多种生物学功能,近年来成为国内外研究的热点。本文综述了乳铁蛋白的近期研究热点:活性乳铁蛋白的开发应用,高效表达人乳铁蛋白的转基因技术进展,工业化生产途径的最新研究以及乳铁蛋白的开发应用前景。

酶联免疫法测定牛初乳中乳铁蛋白含量

应用酶联免疫法测定牛初乳中乳铁蛋白（LF）的含量。最小检出量为0.5ng／mlLF，浅性范围为0.8ng／ml至100ng／ml。标准曲线线性方程为Y＝－22.72X＋21.38，相关系数γ为0.996。结果较为理想，这种对LF的检测方法在国内未见报道。

乳铁蛋白最新研究进展──结构、特性及生产制备方法(Ⅰ)

乳铁蛋白广泛存在于哺乳动物的分泌物中 ,如人乳或牛乳中 ,具有较多的生理活性功能。文章综述了乳铁蛋白的一些最新研究进展包括分子结构、一些功能特性以及生产制备方法。

牛初乳中主要生物活性物质开发的最新进展

综述了近年来牛初乳资源的开发利用状况 ,重点介绍了几种主要功能性物质如免疫球蛋白 (IgG) ,乳铁蛋白 (Lf)及类胰岛素生长因子 (IGF)的分离纯化技术 。

乳铁蛋白的分离及纯化

乳铁蛋白 (Lactoferrin ,简称Lf)作为一种糖蛋白 ,主要存在于哺乳动物的各种外分泌物中 ,如乳汁、眼泪等 ,乳汁尤其是初乳中Lf的含量很高[1] 。Lf是一种多功能蛋白质 ,不仅具有广谱的抗菌作用 ,而且还能够增强机体的抗病毒、抗感染、抗肿瘤的能力和免疫能力。因此 ,从来源丰富的牛初乳中提取出Lf,把它作为功能性成分应用于食品行业 ,具有广阔的应用和开发前景。本文通过盐析法和层析法从牛初乳中分离出乳铁蛋白 ,并应用酶联免疫法 (ELISA)检测不同分离纯化方法所获得的乳铁蛋白的含量 ,并用电泳分析其纯度。所获得的乳铁蛋白的分子质量为 780 0 0u ,其纯度大约为 92 %。

乳铁蛋白的最新研究进展

乳铁蛋白(Lactoferrin,简称Lf)主要存在于哺乳动物的各种外分泌物中,乳中的含量最高。Lf不仅具有广谱的抗菌性质,而且还能够增强机体的抗病毒、抗癌能力和免疫能力,防治感染性疾病。作为一种新型的具有抗菌性质的蛋白质,Lf有望作为新一代功能性疗效食品的功能组分。本文主要综述了乳铁蛋白的基本性质、功能特性及其一些最新的研究进展,并对牛初乳中乳铁蛋白的开发利用进行了展望。

乳铁蛋白的开发利用及其研究进展

综述了乳铁蛋白的基本性质、功能特性及其一些最新的研究进展,并对牛初乳中乳铁蛋白的开发利用进行展望。

牛初乳中乳铁蛋白的分离及纯化

乳铁蛋白(Lactoferrin,简称Lf)作为一种糖蛋白,主要存在于哺乳动物的各种外分泌物中,如乳汁、眼泪、唾液等,乳汁尤其是初乳中Lf的含量很高犤1犦。本文通过盐析法和有机溶剂沉淀法从牛初乳中分离出乳铁蛋白,并应用酶联免疫法鉴定各步骤中分离的乳铁蛋白,获得的乳铁蛋白的相对分子量为75,000Da。

乳铁蛋白最新研究进展——活性多肽以及生理功能(Ⅱ)

综述了乳铁蛋白 (LF)以及其活性多肽的研究进展 ,活性多肽包括有强抗菌多肽 (Lfcin)、促进细胞增长多肽等 ;相应的生理活性功能有天然抗菌、抗真菌、抗病毒、增强免疫、抗氧化、抗肿瘤、促进铁吸收等。此外 ,也介绍了乳铁蛋白在食品工业中的应用前景。

乳铁蛋白对仔猪肠道屏障功能的影响

乳铁蛋白是长约80 k Da的糖基化蛋白,具有抗菌、抗病毒、免疫调节、促生长等功能。肠道屏障对机体健康有重要影响。文章从乳铁蛋白对仔猪肠道微生物的影响、抵御病原微生物的入侵、肠道结构的改善、肠道免疫的调节等方面介绍其对肠道屏障功能的影响。

乳铁蛋白基因多态性与甘肃汉族及裕固族人群龋病易感性的初步研究

目的:探讨乳铁蛋白(Lactoferrin,LF)基因中rs10865941(C/T)、rs1126477(G/A)和rs9110(C/T)3个单核苷酸位点多态性与甘肃省汉族及裕固族人群龋病易感性的关系。方法:从甘肃裕固族自治县常住人口中分别选取裕固族165人,汉族190人作为研究对象;并根据DMFT将其各分为病例组(DMFT≥3)和对照组(DMFT≤2);分别采其外周血并提取DNA,利用核酸质谱技术(MassArray)直接检测各受试者LF基因3个位点的基因型。结果:所有基因型分布频率均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05);rs10865941位点各基因型频率在汉族病例组和对照组中的分布差异均有统计学意义(P﹤0.05);其中CT基因型频率病例组(36.5%)显著低于对照组(61.9%)(OR=0.394,95%CI=0.187-0.828);LF基因rs10865941、rs1126477和rs9110位点各基因型在裕固族人群病例组和对照组中的分布频率均未见显著性差异(P﹥0.05)。结论:LF基因rs10865941位点多态性可能与汉族人群龋病易感性有关。

人源性及牛源性乳铁蛋白抑制丙型肝炎病毒复制作用的对比研究

目的 :探讨人乳铁蛋白 (HLF)及牛乳铁蛋白 (BLF)在体外HepG2 细胞中对丙型肝炎病毒 (HCV)感染增殖的抑制作用 ,为乳铁蛋白用于临床治疗HCV感染提供理论和实验依据。方法 :以HepG2 细胞作为HCV复制体系 ,以RT nPCR方法 ,测定培养细胞提取物中病毒正、负链 ,并用活性细胞定量鉴定法 (MTT)对两种乳铁蛋白的细胞毒性作用及药物剂量进行研究。结果 :细胞毒实验显示 ,实验中两种乳铁蛋白的浓度小于 1.5mg·mL 1时对HepG2 细胞生存率无显著影响。HCV阳性血清接种HepG2 细胞后 ,HCV正、负链可于第 8,10 ,12天被检测到。当两种乳铁蛋白 (浓度分别为 1.5,1.0 ,0 .5,0 .1mg·mL 1)先与HCV阳性血清作用后再接种细胞时 ,不同时期提取物中均未测定到HCV正、负链。而当乳铁蛋白 (浓度同上 )先与细胞作用后洗去再与HCV阳性血清作用时 ,不同时期细胞提取物中可测定到HCV正、负链。结论 :乳铁蛋白能在非细胞毒性剂量时能防止HCV感染HepG2 细胞 ;乳铁蛋白可能主要是通过与病毒颗粒本身相互作用发挥上述功能 ;两种来源的乳铁蛋白在体外抑制HCV复制的作用差异无显著性。

乳铁蛋白酶免疫分析法的建立及乳品含量检测的初步应用

目的:建立乳铁蛋白(LF)酶免疫分析法,检测LF在血清及乳汁中的水平。方法:用人源的LF多次免疫兔,获得高效价的抗体。纯化后包被成固相酶标板,以识别并结合待测标本中的LF。用生物素标记抗原(Bio-Ag),同辣根酶标记亲和素(HRP-A)可特异结合。向固相酶标板中同时加入Bio-Ag和不同浓度的标准品,37℃反应1.5h。洗涤后以HRP-A为探针,经酶底物显色后可获得良好的ELISA竞争抑制曲线。结果:该法测定范围:(0.36～9.00)μg/ml,最低检出量0.25μg/ml,批内和批间误差分别为<6.3%和7.4%。用该法测正常献血员(40名)血清LF水平为(0.438±0.183)μg/ml;人初乳(5名)水平为(7.82±0.51)mg/ml。血清和初乳中的LF经65℃30min处理后活性不变,经100℃3min处理明显降解。结论:该法稳定、简便、特异适于检测人血清和乳汁中的LF水平。

串联阴阳离子交换色谱分离牛初乳中乳铁蛋白与IgG

脱脂牛初乳用浓度为6 mol/L的盐酸调节其pH至4.0,以5 000 r/m in离心分离20 m in除去酪蛋白制得乳清,缓慢滴加浓度为1 mol/L的氢氧化钠回调pH至6.8;处理后的乳清经截留相对分子质量为50 000的组分并超滤稀释后,再经过阴阳离子交换串联色谱,乳铁蛋白(Lf)吸附于CM Sepharose Fast F low,免疫球蛋白G(Immunoglobu lin G,IgG)吸附于DEAE Sepharose Fast F low;阳离子交换柱用c(NaC l)=0.27 mol/L、0.85 mol/L的水溶液阶跃洗脱,得到色谱纯度为96.6%的Lf产品,阴离子交换柱用c(NaC l)=17 mmol/L、51 mmol/L的水溶液阶跃洗脱,得到色谱纯度为95%的IgG产品。

早产儿应用乳铁蛋白及人促红素临床疗效观察

目的探讨在早产儿出生后早期应用乳清乳铁蛋白(LF)及重组人促红细胞生成素(rHuEPO)治疗,观察早产儿在营养、贫血、免疫、感染及神经系统发育等方面的临床疗效。方法将2014年3月至2018年3月南宁市第一人民医院216例不同胎龄早产儿资料纳入临床研究,根据给药方式将其分为乳清乳铁蛋白联合重组人促红细胞生成素组(n=110)、乳清乳铁蛋白组(n=106)。乳清乳铁蛋白连续服用至矫正月龄3月龄,重组人促红细胞生成素连续给药至矫正胎龄40周。生后第8天、第2周末、第1月龄、第2月龄、第3月龄、第4月龄、第6月龄测定早产儿血红蛋白、红细胞压积、网织红细胞计数、血清铁蛋白、血清铁、IgG,统计患儿体重增长及感染率、输血病人次,矫正胎龄40周时行新生儿行为神经测定(NBNA)检查,6月龄行婴幼儿期智能发育评估,判定临床疗效。结果两组早产儿生后第8天查血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)、网织红细胞计数(Ret)、血清铁蛋白(SF)、血清铁(SI)水平比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。两组Hb、Hct水平都是在生后1个月降至低值;Ret、SF、SI在2周末降至低值,1月龄时较2周末升高。2月龄、3月龄时Hb、Hct、Ret、SF、SI又都逐渐升高,在4月龄、6月龄时两组比较差异均无统计学意义(均P>0.05);两组间Ret、SF在治疗2周末时比较无统计学差异(均P>0.05),LF+rHuEPO组在治疗后1、2、3月龄时血红蛋白、红细胞压积、血清铁水平均高于LF组,差异均有统计学意义(tHb值分别为6.991、2.726、6.766;tHct值分别为3.548、6.414、3.239,tSI值分别为5.91、3.009、9.312,均P<0.05)。两组治疗过程中给予输血治疗早产儿62例,其中LF组37例(34.90%),LF+rHuEPO组共25例(22.70%),两组输血率比较差异有统计学意义(χ2=3.912,P<0.05)。在生后前两周两组早产儿体重增长无差异(均P>0.05),生后1、2、3、4、6月龄LF+rHuEPO组患儿体重较LF组增长较快,比较差异均有统计学意义(t值分别为2.55、2.151、2.001、2.084、2.27,均P<0.05),出生后8天两组早产儿IgG值较大,2月龄时降至最低,后渐渐增长,两组间在2~6月龄LF+rHuEPO组患儿较LF组增长高,比较差异有统计学意义(t值分别为2.652、2.310、3.105、2.241,均P<0.05);在生后第8天、2周末、1月龄时两组患儿IgM比较无意义(均P>0.05),2~6月龄LF+rHuEPO组患儿较LF组增长高,比较差异有统计学意义(t值分别为2.257、2.133、2.422、2.240,均P<0.05);生后8天~3月龄时两组患儿血清IgA变化缓慢且对照变化不大,差异无统计学意义(均P>0.05),4、6月龄时测出患儿血清IgA,LF+rHuEPO组患儿较LF组高,差异有统计学意义(t值分别为2.284、2.045,均P<0.05)。LF+rHuEPO组住院期间17例发生1次以上感染(感染率15.45%),LF组发生29例(感染率27.36%),两组比较有统计学意义(χ2=4.279,P<0.05)。在矫正胎龄满40周时,对两组进行NBNA评分,总分40分。LF+rHuEPO组(38.5±1.5)分,LF组为(36.1±3.8)分,LF+rHuEPO组NBNA评分高于LF组,差异有统计学意义(t=10.32,P<0.001)。生后6个月对两组患儿进行Gesell发育量表评价,6月龄时LF+rHuEPO大运动、适应能力、精细动作及社交能力优于LF组,两组比较差异有统计学意义(t值分别为6.299、6.928、4.108、2.528,均P<0.05)。部分患儿出现粒细胞降低,但未发现1例患儿中性粒细胞<0.1。结论在服用乳清乳铁蛋白的基础上加用重组人促红细胞生成素能更有效得预防或减轻早产儿贫血,促进体重增长,增强免疫力,减少感染几率,促进患儿神经系统发育,临床值得应用推广。

牛乳中乳铁蛋白随着季节变化规律的研究

为了解牛乳中乳铁蛋白(LF)随着季节、饲养环境而变化的规律,利用毛细管电泳法,分别对从牧场、小区、奶户采集的牛乳样中的LF进行检测,取样周期为1年。结果得出,牧场牛乳中的LF含量高于小区牛乳的,奶户牛乳中的LF含量最低。1月份牧场牛乳的LF含量最高,为0.16mg/mL,而奶户牛乳中的LF含量最低,为0.08mg/mL;9月份牧场、小区和奶户牛乳中的LF含量最低,分别为0.03,0.05和0.06mg/mL。结果表明,随着管理水平的提高和气候的变冷,牛乳中LF含量逐渐升高。

牛初乳中乳铁蛋白提取纯化技术方法比较分析

乳铁蛋白是一种铁结合性糖蛋白，在牛初乳中含量高达1g/L，是常乳含量的五倍。乳铁蛋白具有抗菌、抗氧化、抗病毒、抗癌症等多种生物学功能，95％纯度的乳铁蛋白每公斤价值1000$。近些年来，乳铁蛋白的分离纯化技术研究达到了较高水平，主要有离子交换色谱法、盐析和凝胶层析法、超滤和离子交换色谱法结合、混合模式扩张床吸附法等，但是能够直接工业化生产的方法还有待于进一步研究和完善。

乳铁蛋白生物活性及应用进展

乳铁蛋白是一种铁结合型糖蛋白,由哺乳动物体内腺上皮细胞和中性粒细胞产生,为生物活性剂之一。它具有多种生物活性,包括抑菌、抗病毒、抗癌、抗炎、调节免疫和促骨生长等。它已经被用作一些口腔疾病的治疗、婴幼儿配方奶粉的营养强化剂、天然食品保鲜剂、天然化妆品,也可以作为许多棘手疾病辅助和预防治疗的合成原料或载体,被广泛应用在食品、医药、化妆品、畜牧养殖等领域,本文综述了乳铁蛋白的生物活性功能及其与微生物作用机制,并着重从以上五个领域介绍乳铁蛋白的开发与应用,旨在阐明乳铁蛋白的进一步应用前景。