西北盐碱地养虾塘接种微藻后藻类种群结构及水质变化

【目的】掌握西北盐碱地凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖池塘微藻群落的变化规律,探究接种湖生卵囊藻(Oocystis Lacustris)和普通小球藻(Chlorella vulgaris)对池塘藻相和水质的影响。【方法】选取3口凡纳滨对虾养殖池塘,对照组不接种藻类,处理A、B组根据池塘水体体积按2 mg/L的质量浓度分别接种湖生卵囊藻和普通小球藻。3口池塘除接种藻外其他管理均一致,每5 d每口池塘取3个水样做微藻定量、多性样分析、群落结构分析以及水质理化因子与微藻群落结构相关性分析等。【结果】在养殖周期内,对照组蓝藻暴发,蓝藻生物量最高值达到58.77 mg/L,而处理A、B蓝藻生物量均在11.13 mg/L以下,并在后期形成了稳定的绿藻藻相。对照组和处理A、B的Shannon Wiener多样性指数均值依次为:3.89、4.66和4.02,Pielou均匀度指数均值依次为:0.69、0.83和0.72。结合变化趋势分析:处理组微藻多样性优于对照组,且处理A优于处理B。群落结构的多元统计分析和一致性分析表明,处理组微藻群落的稳定性优于对照组,且处理B与对照组之间群落结构差异显著(P<0.05)。BIOENV (Biota-Environment)分析结果显示,单因子中,解释微藻群落结构变化最好的环境因子为透明度(r_(m)=0.893);多因子组合中NH_(4)^(+)-N、NO_(2)^(-)-N和透明度组合最佳解释了微藻群落结构的变化(r_(m)=0.893)。养殖末期产量分析显示,对照组蓝藻暴发后,对虾成活率和产量明显下降,蓝藻对养殖造成了不可逆的严重损失。【结论】在西北盐碱地凡纳滨对虾养殖池塘中,接种湖生卵囊藻和普通小球藻后避免了蓝藻暴发,降低了养殖风险。相对于湖生卵囊藻,普通小球藻体现出更好地抑制蓝藻的作用且接种后对藻相影响大于接种湖生卵囊藻,而接种湖生卵囊藻后藻相多样性较好。

湖泊红球藻等离子诱变及其高产虾青素藻株培养条件的优化

为进一步提高湖泊红球藻(Haematococcus lacustris)的工业利用价值,本研究使用常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变仪对湖泊红球藻进行等离子诱变。以藻细胞致死率为指标确定等离子诱变的适宜输入功率和诱变时间。诱变之后通过固体平板培养初筛和液体培养复筛获得高产虾青素的突变藻株。再以藻细胞密度为指标采用单因素实验及正交试验对高产藻株的营养生长阶段的培养条件进行优化,并筛选虾青素诱导阶段适宜虾青素积累的高光照条件。在优化的培养条件下多次继代后观察高产突变藻株的遗传稳定性。结果表明,湖泊红球藻等离子诱变的适宜条件是功率240 W、诱变时间150 s或功率400 W、诱变时间120 s。通过初筛和复筛获得生长快、虾青素产量高的突变藻株有11株,其中编号为HP3的突变藻株生长最快、虾青素产量最高,培养后藻细胞密度和虾青素产量较出发株分别提高了25.5%和61.6%。经过两阶段培养条件的优化,HP3的藻细胞密度和虾青素产量较优化前分别提高了14.3%和19.3%,达7.2×10^(5)cell/mL和31.264 mg/L。湖泊红球藻高产突变藻株HP3多次继代后藻细胞生长良好,遗传稳定,培养后藻细胞密度和虾青素产量均与初代培养相近。研究结果对湖泊红球藻产虾青素工业藻株的选育具有实际意义。

基于COI基因和D-loop区部分序列比较雷州半岛东、西岸湖栖鳍虾虎鱼群体的遗传多样性

为比较分析雷州半岛东、西两岸湖栖鳍虾虎鱼(Gobiopterus lacustris)遗传差异,以COI基因和D-loop区部分序列为分子标记,获取雷州半岛湖栖鳍虾虎鱼群体COI序列44条(九龙山群体21条,高桥群体23条)、D-loop序列53条(九龙山群体25条,高桥群体28条)。基于COI基因部分序列分析结果显示:619 bp的44条序列中,统计的变异位点29个;T、C、A、G碱基组成分别为:27.8%、31.0%、23.7%、17.5%,且A+T(51.5%)高于C+G(48.5%);单倍型多样性比较,九龙山群体(0.695)>高桥群体(0.324);遗传分化分析表明东、西群体分化显著(Snn=0.0.591,0.01<P<0.05),基因流(Nm)为5.37,遗传分化系数(Gst)为0.147,固定指数(Fst)为0.042(0.001<P<0.01),核苷酸差异数(Kxy)为2.547,核苷酸歧义度(Dxy)为0.004。而基于D-loop区部分序列分析结果表明:563 bp的53条序列中,变异位点133个;T、C、A、G碱基组成分别为:32.3%、14.8%、35.5%、17.4%,A+T(67.8%)明显高于C+G(32.2%);单倍型多样性与COI分析结果类似,九龙山群体(0.797)>高桥群体(0.661);遗传分化分析表明东、西群体分化极显著(Snn=0.970,P<0.001),Fst为0.315(P<0.001),Nm值为0.55,Gst、Kxy、Dxy分别为:0.157、3.506、0.006;AMOVA分析揭示群体内变异程度高于群体间;聚类分析表明,基于COI基因与D-loop区部分序列构建的邻位链接法聚类树(NJ树)均存在按照采样点聚类的现象,但D-loop更为明显。综上,雷州半岛东、西两岸湖栖鳍虾虎鱼群体出现较为明显的分化现象。

东北鳈繁殖力的研究

2018年6—7月,在乌苏里江抚远江段采集了284尾东北鳈Sarcocheilichthys lacustris,研究其生物学体征、种群年龄组成及繁殖力。结果表明:284尾东北鳈中有雌鱼226尾、雄鱼58尾,雌雄比例为3.9∶1;年龄范围1~5龄,3~4龄年龄组个体为优势年龄组,占总样本量的68%;性腺成熟系数(GSI)为(11.27±5.62)%,绝对繁殖力(F)为(5924.69±2177.01)粒,相对繁殖力(F1)为(60.81±15.25)粒/g,体长相对繁殖力(FL)为(33.02±10.66)粒/mm,体质量相对繁殖力(FW)为(49.41±11.61)粒/g;个体绝对繁殖力与体长(L)、体质量(W)及GSI的关系分别为:F=1170.8L-2.6L2-119577,F=320.65W-0.9W2-18919,F=143.89GSI1.452。

氨氮质量浓度和温度对雨生红球藻生长特性的影响

研究了不同氨氮（氯化铵）浓度（0.05～0.8 g/L）和生长温度（22、25、28℃）对雨生红球藻生长特性的影响,以及不同胁迫温度（30、35、38℃）对虾青素积累的影响。测定了不同培养条件下雨生红球藻的OD值、干重、叶绿素以及虾青素含量。研究结果表明：以氯化铵为氮源的条件下,雨生红球藻更适宜在低氨氮浓度下生长,适宜的氨氮质量浓度是0.1 g/L,最适生长温度为22℃,以高温胁迫时,最佳胁迫温度为35℃。

额尔齐斯河湖拟鲤寄生指环虫的种群动态研究

2009年4月至2012年7月，对额尔齐斯河（中国段）湖拟鲤（Rutilus rutilus lacustris Pallas）鳃部寄生的指环虫（Dactylogyrus）进行了取样调查，以期了解湖拟鲤寄生指环虫的种群生态学特点。结果表明，湖拟鲤共感染了2种指环虫，分别为维氏指环虫（Dactylogyrus vistulae Prost）和双髻指环虫（Dactylogyrus sphyra Linstow ），总感染率为22．22％，平均感染强度为4．5（1～24）；平均感染强度在16＜L≤19范围内达到最大，而19＜L的体长组感染率及感染强度同时达到最低，在不同体长组宿主中指环虫种群的分布类型除19＜ L为均匀分布外其余均为聚集分布，各体长组宿主的感染强度中19＜L与10＜L≤13、3＜L≤16和16＜L≤19三个体长组之间差异显著（P＜0．05），其余体长组之间的感染强度差异均不显著（P＞0．05）。

额尔齐斯河湖拟鲤寄生虫季节动态及其优势虫种的寄生情况调查研究

按照鱼类寄生虫的常规调查及研究方法,对额尔齐斯河(中国段)湖拟鲤(Rutilus rutilus lacustris Pallas)寄生虫的种类、感染情况、季节动态及优势寄生虫种的寄生情况进行调查。结果共发现6种寄生虫,分别为维氏指环虫(Dactylogyrus vistulae Prost)、西伯利亚副双身虫(Paradiplozoon homoion homoion Bychowsky et Nagibina)、双穴吸虫幼虫(Diplostomum sp.)、绦虫幼虫(Cestode sp.larva)、对盲囊线虫(Contracaecum sp.)和椭圆尾鲺(Ar-gulus ellipticaudatus Wang),隶属于3门,5纲,6目,6科,6属。春、夏、秋三季,均发现双穴吸虫幼虫,夏季及秋季的感染率高于春季;维氏指环虫春季的感染率高于夏季,而秋季没有检出;西伯利亚副双身虫、对盲囊线虫、绦虫幼虫和椭圆尾鲺仅在夏季发现,且感染率及感染强度均不高。

硝氮质量浓度和温度在不同培养模式下对雨生红球藻生长的影响

探究了自养和异养条件下,硝氮质量浓度和生长温度对雨生红球藻生长的影响,以及自养胁迫阶段不同胁迫温度(30,35,38℃)对虾青素积累的影响。研究结果表明:雨生红球藻在异养条件下的最高生物量(3.319 g/L)远高于自养条件下最高生物量(0.687 g/L),生物量提高了84%。自养条件下虾青素最高质量分数为2.264%,异养条件下虾青素最高质量分数为3.199%,比自养条件下虾青素最高质量分数提高41.29%。异养生长具有明显的生长优势,此条件下最适碳源为乙酸钠质量浓度1.5 g/L,最适硝氮质量浓度浓度为0.5 g/L,最适生长温度为22℃,最佳胁迫温度为30℃。

湖拟鲤繁殖生物学研究

本文分析研究了赛里木湖湖拟鲤卵巢各期发育特征,成熟系数变化,生殖力与体长、体重的关系:F=10829.8+92.99(?);F=72.2264L^(2.6654)繁殖群体组成和繁殖习性,繁殖季节5月下旬至6月,产卵水温9°～13℃。

淡水壳菜对鄱阳湖区双壳类的感染状况调查

2001-11～2002-05的鄱阳湖候鸟保护区淡水壳菜对双壳类的感染情况调查显示,淡水壳菜对双壳类的感染具有普遍性,扭蚌、背瘤丽蚌、洞穴丽蚌、猪耳丽蚌等种类的感染率较高,所有个体的平均感染率为35.3%;不同的个体间,感染强度的变化比较大,所有被感染个体的平均感染强度为6.6;感染强度≥10的个体仅占被感染个体的18.4%;淡水壳菜主要寄生在双壳类的壳顶和进、出水管附近.

中国鳍虾虎鱼属(鲈形目:虾虎鱼科)一新纪录种

【目的】描述分布在广东省雷州半岛鳍虾虎鱼属的一中国新纪录种湖栖鳍虾虎鱼(Gobiopterus lacustris)。【方法】用体视显微镜对样品进行拍照,用cell Sens Standard软件测量样本各形态学测量指标;依据线粒体Cytb基因以邻接法构建鳍虾虎鱼属系统发育树。【结果】该虾虎鱼半透明、无色或淡黄色等体色特征与大鳞鳍虾虎鱼(G.macrolepis)最为相似,与后者明显区别的特征为:从第2背鳍和臀鳍起点处的鳞片向前凸出,呈"<"状(vs.第1排纵列鳞排列整齐,呈"\");雄鱼上颌具犬齿9对,下颌后半部有小犬齿8对(vs.雄鱼上颌具犬齿11对,下颌后半部有小犬齿9对);纵列鳞19~21(vs.17~19),横列鳞5(vs.5~6);胸鳍条13(vs.14),尾鳍主鳍条13(vs.14);鳍上有斑点(vs各鳍均无斑纹)。鳍虾虎鱼属4个物种间的系统发育树表明,新纪录种与湄公河鳍虾虎鱼(G.chuno)亲缘关系最近,与半饰鳍虾虎鱼(G.semivestita)亲缘关系最远。【结论】雷州半岛分布的鳍虾虎鱼的形态参数及Cytb分子结果均显示其为中国新纪录种。

额尔齐斯河一指环虫科新纪录种的鉴定

记述了采自额尔齐斯河(中国段)湖拟鲤(Rutilus rutilus lacustris)鳃上的一种单殖吸虫,通过形态学鉴定和扩增18S-ITS1-5.8S基因序列进行系统发育研究鉴定为指环虫科(Dactylogyridae)、指环虫属(Dactylogyrus)的相似指环虫(Dactylogyrus similis)。经文献检索和基因序列比对确定为我国一指环虫科新纪录种。

添加甘蔗糖蜜对湖泊红球藻及其虾青素合成的影响

虾青素(Astaxanthin)是类胡萝卜素的含氧衍生物,具有较强的抗氧化、清除自由基等功能;湖泊红球藻(Haematococcus lacustris)是天然虾青素的最好来源之一。为了明确用甘蔗糖蜜或葡萄糖为培养基碳源对湖泊红球藻生长及其合成虾青素的影响,在BG11培养基中分别添加浓度为0.5、1、1.5 g/L的糖蜜或葡萄糖,在正常光照强度40μmol/(m^(2)·s)添加0.5 g/L糖蜜或葡萄糖的试验组的藻细胞在培养至45 d时,藻细胞生长达到最大,分别是对照组的1.21倍或1.29倍。在高光照150μmol/(m^(2)·s)培养第30 d时,总糖0.5 g/L的糖蜜培养基培养下藻细胞的虾青素含量显著高于对照组和相同总糖浓度的葡萄糖组,分别是对照组的1.86倍、葡萄糖组的1.33倍;藻细胞干重也显著高于对照组和相同浓度的葡萄糖组,分别是对照组的1.81倍、葡萄糖组的1.80倍。结果表明,添加低浓度糖蜜或葡萄糖均可以提高湖泊红球藻的生物量及虾青素含量,低浓度葡萄糖有利于保持藻细胞在高光胁迫下的活力,而低浓度糖蜜培养基能显著促进藻细胞虾青素的积累。

Na^(+)、K^(+)、pH及3种单糖对湖拟鲤精子活力的综合调控

【目的】明确Na^(+)、K^(+)、pH及3种单糖对湖拟鲤精子活力的单独调控和综合调控,筛选出湖拟鲤精子的适宜激活配方,为其人工繁殖及种质资源保护提供技术参考。【方法】以快速运动时间(FT)和寿命时间(LT)为指标,采用单因素试验和正交试验研究不同渗透压条件下Na^(+)、K^(+)、pH及3种单糖(葡萄糖、果糖和半乳糖)对湖拟鲤精子活力的单独和综合调控作用,筛选湖拟鲤精子的适宜激活液配方。【结果】Na^(+)溶液渗透压为282.36 kPa时湖拟鲤精子的FT和LT达最大值(40.00和285.33 s),K^(+)溶液渗透压为211.77 kPa时湖拟鲤精子的FT和LT达最大值(36.00和130.33 s),葡萄糖溶液渗透压为352.95 kPa时湖拟鲤精子的FT和LT达最大值(43.67和355.33 s),果糖溶液渗透压为352.95 kPa时湖拟鲤精子的FT和LT达最大值(45.00和372.67 s),半乳糖溶液渗透压为235.30 kPa时湖拟鲤精子的FT和LT达最大值(40.00和357.00 s),pH为8.0时湖拟鲤精子的FT和LT达最大值(30.00和100.33 s)。正交试验结果表明,湖拟鲤精子活力综合调控的最优配方为果糖溶液渗透压117.65 kPa、pH 8.0、Na^(+)溶液渗透压188.24 kPa,对应的FT和LT分别是58.33和370.00 s;果糖、pH和Na^(+)对湖拟鲤精子活力的调控力度为果糖>Na^(+)>pH,且表现为果糖和Na^(+)对湖拟鲤精子的FT和LT调控效果有显著影响(P<0.05),而pH的影响不显著(P>0.05)。【结论】适宜浓度的Na^(+)、K^(+)、葡萄糖、果糖及半乳糖对湖拟鲤精子活力均具有较好的促进作用,主要是通过改变渗透压来调控湖拟鲤精子活力;适宜的pH为7.5~8.5。通过正交试验筛选出的湖拟鲤精子最优激活配方为果糖溶液渗透压117.65 kPa、pH 8.0、Na^(+)溶液渗透压188.24 kPa,其调控效果优于单因素最优渗透压,调控力度为果糖>Na^(+)>pH。

广州蓄能水电厂淡水壳菜生境调查及防治初探

针对广州蓄能水电厂抽水水道内淡水壳菜爆发的状况,通过水生态调查的方法对其淡水壳菜的生境进行了调查研究。主要从该电厂的浮游植物、水质状况、附着环境以及水体调度方式等对淡水壳菜生长的影响方面进行了生境分析,调查分析为寻求消除其不利影响的后续研究工作奠定了科学基础。

额尔齐斯河流域湖拟鲤寄生指环虫——中国分布新记录种十字花指环虫

2021年7月在额尔齐斯河哈巴河河段于湖拟鲤(Rutilus rutilus lacustris)鳃部发现有指环虫寄生。进行形态比较,发现其形态与国内记载寄生于湖拟鲤的指环虫差异明显:本研究采集虫体的交接管基部膨大呈“8”字形,随后管径均匀,延伸呈弯曲状,形似“6”形;中央大钩内突长超过外突长,背连接片呈“一”字型且中部弯曲,腹联结片呈蝶形。与已报道指环虫形态数据比较,本研究采集的虫体偏小,其后吸器与Dactylogyruscaballeroi的形态最为接近,但交接器不同;与其余指环虫相比,十字花指环虫(D.crucifer)的腹联结片呈蝶形,而极小指环虫(D.rarissimus)呈倒“T”字型,湖拟鲤指环虫(D.rutili)呈“十”字型,双髻指环虫(D.sphyrna)和维氏指环虫(D.vistulae)没有腹联结片。在背联结片形态中,十字花指环虫(D.crucifer)呈现“一”字型,而维氏指环虫呈“V”字型。本研究所采集的虫体结构特征明显不同于国内已记载寄生在湖拟鲤上的双髻指环虫、维氏指环虫和湖拟鲤指环虫,而与俄罗斯记载的寄生于湖拟鲤鳃部的十字花指环虫形态高度相似。28S rDNA基因比对结果与形态鉴定结果基本一致。综合鉴定结果,最终鉴定该虫为指环虫属十字花指环虫。经查阅文献后,确定该虫为中国分布新记录种。

软腐白菜根系土壤中湖生代夫特菌的分离和鉴定

目的筛选并鉴定软腐白菜根系土壤中分离出的细菌。方法从河南省大白菜田成熟白菜病株根系土壤采集样品,利用模拟原环境的培养基成分和条件,对样品中的细菌进行分离和培养。对菌株进行形态学观察、生理生化特征鉴定以及16S r RNA基因序列测定、比对分析和系统发育树构建,对菌株进行初步分类鉴定。结果分离到的一株编号为Q2S2-18A2的菌株16Sr DNA与代夫特菌属内的Delftia lacustris 332 T(EU888303)具有最高的相似性,相似值为98.60%。结论模拟原环境培养基,结合经典分类学方法和16S r RNA基因序列比对分析、构建系统发育树,可分离并鉴定软腐白菜根系土壤中的机会致病菌湖生代夫特菌。

湖栖鳍虾虎鱼微卫星DNA标记的开发与群体遗传多样性分析

为研究雷州半岛湖栖鳍虾虎鱼(Gobiopterus lacustris)遗传多样性,对湖栖鳍虾虎鱼雌雄性腺进行转录组测序,采用MISA软件进行微卫星分析,共获得25 452个微卫星标记,其中包含14 708个单碱基重复类型,6 175个2碱基重复类型,3、4、5和6碱基重复类型数目分别为4 223、327、15和4。随机选取50个微卫星位点设计引物,能够扩增出清晰稳定条带的有39对,其中,11个位点表现出不同程度的多态,28个位点呈现单态。利用11个具有多态性的微卫星位点分析湖栖鳍虾虎鱼在廉江市高桥镇红树林保护区、湛江东海岛、雷州市附城镇和雷州市九龙山红树林国家湿地公园4个野生群体中的遗传多样性及遗传结构,11个微卫星位点呈现出不同程度的多态性,等位基因数(Na)2~15,平均等位基因为(6?3.9)个,有效等位基因数(Ne)、平均观测杂合度(Ho)和期望杂合度(He)分别在1.919~2.485、0.343~0.465和0.381~0.483之间,平均多态信息含量(PIC)为0.348~0.465。Hardy-Weinber平衡分析显示,4个群体的大部分位点未偏离平衡。在每个群体中进行连锁不平衡分析,有18对位点间显著(P <0.05)或者极显著(P <0.01)偏离连锁平衡。遗传分化系数在0.107~0.216之间,表明4个群体的遗传分化达到了中等水平以上。分子方差分析(AMOVA)显示,湖栖鳍虾虎鱼大部分的差异来自于群体内而非群体间。